慢性乙型肝炎前C区G1896A基因变异对HBV复制及疾病严重程度的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异对乙型肝炎病毒复制及疾病严重程度的影响。方法选取43例慢性乙型肝炎及49例乙型肝炎肝硬化患者为研究对象。采用PCR技术检测HBV前C区G1896A位点变异及乙型肝炎基因分型。同时检测HBeAg、HBV DNA定量、肝功能血清生化指标。结果(1)发生HBV前C区G1896A变异患者的年龄大于野生株感染者(P0.01),发生肝硬化的可能性更大(P0.01)。(2)随着变异株感染率的增加,HBeAg阴性率较野生株组增加(P0.01),基因C型较野生株组增加(P0.05),HBV DNA水平降低差异意义(P0.05)。结论 HBV前C区G1896A变异与HBeAg的状态,HBV DNA的复制及疾病严重程度相关。     

T1762A1764变异对乙型肝炎病毒C启动子活性影响

目的 乙型肝炎病毒Ｃ基因调节序列存在较多变异,为探讨在诸多变异中,Ｔ１７６２Ａ１７６４变异对Ｃ区启动子活性空间起何作用。方法 用克隆及ＰＣＲ产物直接测序,检测Ｔ１７６２Ａ１７６４变异;并将含调节序列的ＰＣＲ产物插入到氯霉素乙酰转移酶表达质粒中,转染ＨｅｐＧ２细胞并瞬时表达。结果 通过比较野生株及变异株在ＣＰ区序列及ＣＡＴ表达水平显示,Ｔ１７６２Ａ１７６４变异在使ＣＡＴ表达下调中起主要作用。结论Ｔ１     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株定量检测结果分析

目的探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株定量检测的临床意义。方法通过单标记探针联合选择性阻断实时荧光定量PCR法精确定量检测97例HBV DNA阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株,并进行统计学分析。结果 97例HBeAg阳性患者变异株的含量会随着HBV DNA水平的升高而降低(P0.01)。变异株含量同时与HBeAg水平呈显著相关,随着HBeAg水平的升高,变异株含量降低(P0.01)。结论对HBV感染者的BCP区A1762T/G1764A变异株进行定量检测,可对患者病情的可能发展进行预测,从而可以采取有效的防治措施。     

HBV前C/C基因启动子区变异与HBeAg阳性慢性乙型肝炎肝纤维化程度的关系

目的探讨HBV前C/C基因启动子区变异与HBe Ag阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织病理变化的关系。方法将2012年4月-2013年12月在广州市第八人民医院住院诊治,且伴有肝活组织检查与相应冻存血清标本的HBe Ag阳性CHB患者148例纳入本研究,提取血清DNA后通过巢式PCR扩增HBV前C/C基因启动子区并测序分析。计量资料方差不齐时2组间比较采用非参数Mann-Whitney U检验,计数资料2组间比较采用χ2检验,logistic回归分析与显著肝纤维化相关的参数。结果共116例(78.4%)患者肝活组织检查提示存在显著肝纤维化(≥S2)。ALT≤正常值上限患者组中,10例(58.8%)伴有显著肝纤维化,并发生T1753V(11.8%)、A1762T/G1764A(35.3%)和G1896A变异(5.9%)。单因素logistic回归分析显示,HBV基因A1762T/G1764A变异和G1896A变异与显著肝纤维化相关并具有统计学意义(P值均0.05),而年龄、性别、基因型和其他变异位点与显著肝纤维不存在相关性。进一步多因素logistic回归分析显示,HBV基因的A1762T/G1764A变异(比值比7.098,P0.001)和G1896A变异(比值比16.816,P=0.007)均与显著肝纤维化独立相关。结论 HBV前C/C基因启动子区变异可作为评估HBe Ag阳性CHB患者显著肝纤维化发生的危险因素。     

HBV基因型及A1762T/G1764A双位点变异在肝癌患者中的临床意义

目的:研究肝细胞癌(HCC)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型与基本核心启动子(BCP)基因区A1762T/G1764A双位点变异(BCP区双突变)之间的关系,探讨HCC的发病机制。方法:选择40例HCC患者作为研究组,40例慢性乙型肝炎(CHB)患者作为对照组,采用多对型特异性引物PCR扩增法进行基因分型及HBV基因多态性芯片检测BCP区A1762T/G1764A双位点变异。结果:40例HCC患者中有30例HBV DNA定量阳性,平均对数值为(6·53±1·31)copy/ml,将30例HBV DNA定量阳性的HCC及40例CHB患者的血清进行HBV基因分型及基因变异检测,结果显示30例HCC中HBV B基因型5例(16·7%),C基因型25例(83·3%);BCP区双突变共有20例(67·7%),其中B基因型1例,C基因型19例,BCP双突变率在B基因型和C基因型中分别为20%(1/5)和76%(19/25);40例CHB患者中B基因型32例(80%),C基因型8例(20%);BCP区双突变共有13例,其中B基因型8例,C基因型5例,BCP双突率在B基因型和C基因型中分别是25%(8/32)和62·5%(5/8)。结论:肝细胞癌的发生与BCP区A1762T/G1764A双位点变异有关,多发生在HBV C基因型的患者。     

HBV BCP区1762/1764位点变异对肝脏疾病进展及预后的影响

目的:探讨乙型肝炎病毒BCP区A1762T/G1764A变异与肝脏疾病进展的关系。方法:收集78例慢性乙型肝炎患者(CHB)和125例慢性重型乙型肝炎患者(CSHB)的血清及临床资料,并对所有入组患者进行随访,采用聚合酶链反应扩增HBV BCP区基因片段,产物纯化后直接测序,检测BCP区T1762/A1764位点变异。结果:CSHB组患者A1762T、G1764A及A1762T+G1764A的变异频率分别为64.0%(80/125)、60.0%(75/125)、60.0%(75/125),CHB患者3种变异的变异频率分别为30.8%(24/78)、28.2%(22/78)、25.6%(20/78),CSHB组3种变异的变异频率均明显高于CHB组,差异有统计学意义(P0.001)。125例CSHB患者随访48周,死亡组A1762T/G1764A位点变异频率明显高于存活组,差异有统计学意义(x~2=12.42,P0.001);A1762T/G1764A位点变异组的患者累积存活率明显低于未变异组(x~2=9.742,P0.01)。结论:HBV BCP区1762/1764位点变异可能会加重HBV感染后肝脏疾病病情,并且对慢性重型乙型肝炎的发病及预后可能起重要的作用。     

HBV A1762T/G1764A双核苷酸替换与肝脏疾病的关系

HBV A1762T/G1764A双核苷酸替换(又称TA突变)在肝脏疾病中比较常见。肝细胞核因子(HNF4)是肝脏富集转录因子之一,TA突变刚好位于HNF4与HBV相结合的区域,在HBV基因的转录和复制中发挥重要的调节作用。有研究认为TA突变可能会加重HBV感染后肝脏疾病病情,增加慢性肝衰竭及肝癌风险,但如何加重HBV感染后疾病病情尚不明确,值得进一步研究。就HBV A1762T/G1764A双核苷酸替换与肝病的关系进行了综述。     

慢性乙型肝炎患者HBV C基因启动子变异的临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎中C基因启动子(BCP)变异的临床意义。方法:采用错配PCR与限制性长度片段多态性分析(RFLP)相结合,检测35例慢性乙型肝炎患者BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764G→A联合突变及前C区nt1896G→A终止变异。结果:在35例慢性乙型肝炎中检出BCP区T1762A1764变异8例(23％),其中6例血清HBeAg( ),2例抗HBe( ),而7例前C区A1896变异中HBeAg( )2例,抗HBe( )5例,未见T1762A1764变异和A1896变异同时出现者。结论:提示HBV毒株BCP区T1762A1764变异可能与前C区A1896变异不同,它的出现不足以导致HBeAg(—)型的慢性肝炎。     

5例HBV前C区1896位点和/或BCP1762、1764位点变异对聚乙二醇干扰素α2a早期应答的影响

目的探讨HBV前C区1896位点和/或BCP1762、1764位点变异对聚乙二醇干扰素α2a早期应答的影响。方法选择5例HBV PC1896和/或BCP1762、1764位点发生变异的慢性乙型肝炎患者,使用聚乙二醇干扰素α2a和/或核苷酸类似物抗病毒治疗,观察患者治疗12周、24周、48周时HBs Ag、HBe Ag、HBV DNA、ALT的变化。结果 5例患者使用聚乙二醇干扰素α2a和/或核苷酸类似物抗病毒治疗后12周、24周均发生了应答。结论 HBV PC1896和/或BCP1762、1764位点发生变异作为亚洲人群聚乙二醇干扰素α2a治疗取得早期应答的预测因素。     

HBeAg阴性乙型肝炎患者前C区G1896A变异及其与前S1抗原的关系

HBV感染初期表现为血清HBV DNA水平升高,随之出现HBeAg;当患者体内出现抗-HBe时,血清HBeAg转阴,HBV DNA水平则会降低.然而,有部分HBeAg转阴的患者仍表现为慢性乙型肝炎(乙肝).有研究表明,前C区或核心启动子变异是导致HBeAg阴性慢性乙肝的原因之一,血清前S1抗原能敏感地反映体内的HBV复制情况[1-2].本研究使用分子信标技术来分析HBeAg阴性乙肝患者前C区变异率及其与前S1抗原的相关性.     

慢性乙型肝炎病毒感染者病毒前C区和基本核心启动子区变异检测及意义

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C区和基本核心启动子（BCP）区变异与基因型及疾病进展间的关系。方法 收集HBV携带者（ASC）、慢性乙型肝炎（CHB）、肝炎肝硬化（LC）、肝细胞肝癌（HCC）患者血清148份，用半巢式聚合酶链反应扩增HBV前C／C基因部分片段，产物纯化后直接测序，检测前C区A1896及BCP区T1762／A1764变异。用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法确定HBV基因型。结果 有128份血清能够成功分型和测序，其中B基因型60份，C基因型68份。在B基因型感染者中前C区A1896变异检出率（48．33％）明显高于C基因型感染者（29．41％，X^2=4．83，P〈0．05）；而BCP区T1762／A1764变异检出率却明显低于C基因型感染者，差异亦有统计学意义（30．00％：73．54%，X^2=24．25。P〈0．05）。前C区A1896变异在CHB、LC、HCC中的阳性检出率分别为46．88％（15/32）、39．39％（13／33）、51．52％（17／33）。与ASC的13．33％（4／30）相比，P分别〈0．05，差异有统计学意义。BCP区T1762／A1764变异检出率在HCC、LC组分别为87．88％（29／33）和72．73％（24／33）．明显高于CHB组的37．50％（12／32）及ASC组10.00％（3／30）（P〈0．05）。结论 前C区A1896变异常见于B基因型感染者，而BCP区T1762/A1764变异C基因型感染者多见。除ASC外．前C区A1896变异与疾病进展关系不大．而BCP区T1762/A1764变异与乙型肝炎进展及顶后相关。     

慢性HBV感染者HBV前C区/基本核心启动子区基因突变与临床应用

目的:探讨2010年10月至2013年6月来我院门诊及住院慢性HBV感染者中HBV前C(Pre C)区/基本核心启动子(BCP)区基因突变与其病程进展的相关性。方法:165例慢性HBV感染者血清生化指标检测,血清HBV DNA含量和HBe Ag定性检测,HBV Pre C区/BCP区突变率比较,分析Pre C区l896、BCP区1762/1764变异在HBV携带者(As C)、慢性乙型肝炎(CHB)和慢性乙型肝炎肝硬化(CHB-LC)患者中的分布。结果:血清生化指标在慢性HBV感染者病程发展中呈现相关性。与As C组比较:CHB组、CHB-LC组患者血清ALT、AST、AFP、TBA水平升高,差异有显著性意义(p0.01),呈显著正相关,而TP、Alb、A/G水平降低,差异有显著性意义(p0.05),呈负相关。HBe Ag(+)、HBe Ag(-)的标本中,BCP的突变率高于前C区突变率,差异有非常显著性意义。BCP区1762/1764双突变的突变率高于Pre C1896突变率。As C、CHB、CHB-LC 3组患者Pre C A1896、BCP区1762/1764变异率依次升高,与As C组比较,CHB组差异有显著性意义(P0.05);CHB-LC组差异有非常显著性意义(P0.01)。结论:对165例慢性HBV感染者观察,HBe Ag(+)/HBe Ag(-)患者及其病程不同发展阶段,Pre C/BCP出现相关联的突变率。特别需要注意的是HBe Ag(-)的慢性HBV感染者BCP区的突变率高于Pre C区的突变率,需要慎防HBV复制的危害性。HBV Pre C区/BCP区突变率可以预测到慢性HBV感染者病情的发展程度,对临床此类患者的研究具有重要意义。     

微流芯片检测HBV前C区nt1896/BCP区nt1762基因突变的临床意义

目的探讨HBV前C区nt1896/BCPnt1762基因突变的临床意义。方法在418例血清HBeAg阴性/抗-HBe阳性的慢性乙型肝炎患者,采用微流基因芯片检测HBV前C区nt1896/BCPnt1762基因突变。同时观察血清ALT患者、HBV DNA水平和临床表现。结果nt1896变异195例(46.7%),1762变异192例(45.9%),ALT>正常上限值198例(47.4%),HBV DNA>1×105copiel/ml150例(35.8%),乏力,纳差,肝区胀痛213例(50.9%)。结论HBV前C区nt1896/BCP1762基因突变与HBeAg阴性患者ALT异常,HBV DNA升高及其临床表现具有相关性。     

HBV前C/BCP区变异与重型乙型肝炎相关性的研究进展

乙肝病毒(HBV)前C(precore,PC)区和基本核心启动子(basal core promoter,BCP)区基因变异在乙型肝炎发病中的作用日益受到重视.目前认为基因变异可通过增强病毒复制能力、免疫原性和致病性影响机体的免疫应答反应,使HBV逃避宿主的免疫清除,导致感染持续并可能加重肝细胞损害,从而参与重型肝炎的发生[1].近年有关前C/BCP区变异与重型乙型肝炎关系的认识取得了一些进展,现综述如下.     

慢性乙型肝炎患者HBV前C区点突变及临床意义

应用３′端碱基特异性聚合酶链反应分析方法，对７７例慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区第１８９６位点突变进行了检测，报告如下。资料和方法１研究对象：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、ＨＢＶＤＮＡ阳性７７例慢性乙型肝炎患者均系１９９６年６月～１９９７年８月住院者，据第...     

HBV前C区A1896变异产生和HBe转换时相的关系

乙型肝炎病毒Ａ１８９６变异与ＨＢｅ血清转换的时相有何关系？探讨如下。 一、资料与方法 １．研究对象：血清ＨＢＶ ＤＮＡ阳性各临床类型ＨＢＶ感染共５５例,男４２例、女 １３例;年龄 １３～ ６０岁;急性肝炎 １例,ＨＢＶ携带者 １１例,肝炎肝硬化 ８例。所有研究对象排除甲、戊、丙肝,未经过抗病毒及免疫治疗。采集分离血清待检。 ２．研究方法：ＨＢｅＡｇ／ＩＣ检测参照文献［１］。血清 Ａ１８９６ ｍｓ－ＰＣＲ检测：引物： Ｉ１８７９—１８９６ ５’－ＧＴＧＣＣＴＴＧＧＧＴＧＧＣＴＴＴＧ—３’, ＩＩ １８７９—１８９…     

234例慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP区突变分析

目的调查慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/基本核心启动子（BCP）区的突变情况,分析各种突变对HBeAg表达的影响。方法抽提患者血清DNA,采用改进的巢式PCR技术,扩增HBV前C/BCP区基因,对PCR产物进行DNA测序。用NTI软件比对结果,根据文献报道,选取1753、1762、1764、1862、1896和1899共6个位点进行突变分析,并重点分析不同突变对患者血清HBeAg阳性率和病情的影响。结果在234例中6个位点均无突变者为74例（31.6%）,其血清HBeAg阳性率为74.3%（55/74）。在234例中6个位点检出至少1种突变的病例为160例（68.4%）,突变形式包括4种单一位点突变和21种组合形式的突变;检出G1896A突变73例（31.2%）,其中36例检出有共存未突变序列,37例仅检出突变序列,后者血清HBeAg的阳性率为18.9%（7/37）。检出G1896A以外其他形式突变的有87例,HBeAg阳性率为63.2%（55/87）;其中以A1762T＋G1764A最为常见,HBeAg阳性率为69.4%（34/49）。在1753、1862位点上检出4种特殊碱基突变,前C区有基因片段插入或缺失的有2例。结论多数慢性乙型肝炎患者在HBV前C/BCP区可检出突变,突变形式多样,其中G1896A突变样本血清HBeAg阳性率显著下降,而其他突变对其影响较小。应用DNA序列测定法分析HBV前C/BCP区基因突变,获得的信息全面,对临床评估病情进展和实施抗病毒治疗有参考价值。     

慢性HBV感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子及前C区突变的检测及意义

目的研究慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子（BCP）突变和前C区（PreC）突变与HBeAg、HBV DNA水平和慢性肝病进展的关系。方法收集283例慢性HBV感染者抗病毒治疗前的血清标本,其中慢性乙型肝炎（CHB）185例,肝硬化（LC）98例。采用PCR后直接测序法检测HBV BCP和PreC区突变,同时确定基因型。结果在HBeAg阴性和HBeAg阳性CHB患者中,前C区A1896变异率分别为44.6%（37/83）和21.6%（22/102）（χ2=11.154,P=0.001）,LC患者分别为43.4%（23/53）和17.0%（8/47）（χ2=8.101,P=0.004）。在HBeAg阳性患者中,BCP T1762/A1764双突变率LC组和CHB组分别为89.4%（42/47）和70.6%（72/102）（χ2=6.310,P=0.012）。在单变量分析中,只有年龄（≥45岁）（χ2=27.861,P〈0.001）、BCP T1762/A1764双突变（χ2=8.675,P=0.003）和HBV DNA（≥105拷贝/ml）（χ2=20.499,P〈0.001）与LC进展有关。多因素Logistic回归分析（匹配年龄和性别）发现,BCP T1762/A1764双突变（OR=3.260,95%CI：1.401～7.586;wald=7.517,P=0.006）和HBV DNA（≥105拷贝/ml）（OR=4.640,95%CI：2.331～9.237;wald=19.089,P〈0.001）是LC进展的危险因素。结论前C区A1896突变与HBeAg的消失有关;年龄（≥45岁）、BCP T1762/A1764双突变和HBV DNA高载量（≥105拷贝/ml）与肝硬化进展有关。     

慢性乙型肝炎前C区和基本核心启动子突变的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV ）全球有高流行率，超过20亿人感染过HBV ，其中约4亿人为慢性 HBV感染，约占世界人口的5％，每年有50万人因肝硬化或肝癌死亡［1-2］，这些表明 HBV具有高度传染性是全球的公共卫生问题。