基于高通量测序分析早产认知障碍大鼠肠道菌群结构特征

目的 分析早产认知障碍大鼠肠道菌群结构特征，探讨肠道菌群改变与早产认知障碍的关系。方法 给孕16~17 d Sprague-Dawley大鼠连续2 d腹腔注射脂多糖（LPS）建立认知障碍模型，以腹腔注射PBS为对照。孕21 d行剖宫术，将早产大鼠随机分配给代母鼠喂养。于生后30 d利用Morris水迷宫中的定位航行实验对早产大鼠进行认知评估，并分为早产认知障碍组（n=21）与正常对照组（n=10）。采用苏木精-伊红染色观察两组大鼠海马病理改变，提取各组大鼠粪便进行16S rRNA测序并分析。同时对两组大鼠肠道菌群进行主成分分析（PCA）。结果 与对照组相比，早产认知障碍大鼠海马可见大量神经元变性坏死；肠道菌群丰富度及多样性降低（P < 0.05）；门水平上变形菌门丰度增加（P < 0.05）；目、科、属水平上，普氏菌属、乳杆菌属等丰度显著降低，葡萄球菌科、寡养杆菌属等丰度显著增加（P < 0.05）。PCA显示两组大鼠在肠道菌群构成上差异明显。结论 早产认知障碍大鼠肠道菌群结构发生明显变化，可为早产认知障碍导致的微生态变化的治疗及干预提供依据。     

局灶性癫痫患儿治疗前后肠道菌群的变化及意义北大核心CSCD

目的研究局灶性癫痫患儿与健康儿童肠道菌群是否不同,以及癫痫患儿治疗前后肠道菌群的变化。方法招募未经治疗的初诊局灶性癫痫患儿10例为病例组,且均用单药奥卡西平治疗。收集患儿临床资料,以及治疗前和治疗3个月后的粪便标本;另招募相同年龄段的健康儿童14例为对照组。提取粪便标本中细菌总DNA,进行16S rDNA测序,并行生物信息学分析。结果病例组经奥卡西平治疗3个月后癫痫发作频率减少>50%。门水平方面,治疗前组放线菌门丰度高于治疗后组和对照组(P<0.05);属水平方面,治疗前组埃希菌/志贺菌属、链球菌属、柯林斯菌属和巨单胞菌属丰度高于对照组(P<0.05),经治疗后其丰度降低(P<0.05)。结论与健康儿童相比,局灶性癫痫患儿的肠道菌群存在显著差异;奥卡西平可以显著改善癫痫症状,重塑癫痫患儿的肠道菌群。     

儿童幽门螺杆菌根除治疗过程中肠道菌群的变化

目的探讨儿童幽门螺杆菌根除治疗对肠道菌群的影响,并寻找影响根除治疗效果的差异菌群。方法确诊幽门螺杆菌感染儿童进行三联标准化方案治疗14天,留取治疗前、治疗7天及14天时的粪便进行16SrDNA测序。根据取样时间分为治疗前组、治疗7天组、治疗14天组,根据治疗效果分为治疗成功组、治疗失败组,根据既往根治病史分为复治成功组、初治成功组,分析不同组别之间的菌群差异。结果幽门螺杆菌感染儿童肠道菌群优势菌门依次为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、放线菌门、疣微菌门,主要优势菌属有拟杆菌、栖粪杆菌、大肠杆菌/志贺菌、双歧杆菌、Gemmiger、克雷伯菌。与治疗成功组相比,普氏菌属在治疗失败组相对丰度升高,差异有统计学意义(P0.001)。幽门螺杆菌根除治疗前、治疗7天和14天比较,各肠道菌群相对丰度均发生改变,差异有统计学意义(P0.05)。LEfSe分析及组间秩和检验发现,治疗失败组弓形杆菌属、肠道巴恩斯菌属、Coprobacter、粪球菌属、霍尔德曼菌属、假单胞菌属高于治疗成功组,差异有统计学意义(LDA2)。与初治成功组相比,复治成功组不动杆菌属、魏斯菌属、萨特菌属、普罗维登斯菌属显著升高(LDA2),另枝菌属、丹毒丝菌属、梭状芽胞杆菌属、粪杆菌属、Gemmiger显著降低(LDA2)。结论幽门螺杆菌根除治疗影响肠道菌群结构,表现为菌群多样性下降及优势菌群改变。肠道致病性细菌的生长可能影响幽门螺杆菌根除效果,导致根除治疗失败。     

儿童急性淋巴细胞白血病化疗前后肠道菌群变化特点北大核心CSCD

目的探索儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患儿初诊时肠道菌群的变化及化疗对肠道菌群的影响。方法采集40例初诊ALL患儿化疗前、化疗后2周、化疗后1个月和化疗后2个月及10例健康对照组儿童的粪便样本,进行16S rDNA测序及分析,比较ALL组与健康对照组及ALL患儿化疗前后的肠道菌群差异。结果与化疗前及健康对照组相比,ALL患儿化疗后1个月及2个月时肠道菌群丰度显著下降(P<0.05)。与健康对照组比较,ALL患儿化疗前后肠道菌群多样性均明显降低(P<0.05)。门水平上,放线菌门的相对丰度在ALL患儿化疗后2周、1个月及2个月时较健康对照组显著降低(P<0.05),变形菌门的相对丰度在ALL患儿化疗后1个月及2个月时较健康对照组显著升高(P<0.05)。属水平上,双歧杆菌属的相对丰度在ALL患儿化疗后2周、1个月及2个月时均较健康对照组显著降低(P<0.05);克雷伯菌属的相对丰度在ALL患儿化疗后1个月及2个月时较健康对照组显著升高,并且在化疗后1个月时较化疗前显著升高(P<0.05);Faecalibacterium相对丰度在ALL患儿化疗前后均较健康对照组显著降低,并且在化疗后2周及1个月时较化疗前显著降低(P<0.05)。肠球菌属相对丰度在ALL患儿化疗后1个月及2个月较健康对照组及化疗前均明显升高(P<0.05)。结论ALL患儿肠道菌群多样性明显低于健康儿童。化疗导致肠道菌群丰度显著降低,并可致部分有益菌(双歧杆菌属、Faecalibacterium)丰度下降、病原菌(克雷伯菌属、肠球菌属)丰度增加。     

Diversity and functional prediction of gut microbiota in children with autism spectrum disorder北大核心CSCD

目的分析孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童肠道菌群结构和多样性,并预测分析菌群的代谢功能。方法采集30例ASD儿童(ASD组)和20例正常发育(typically developing,TD)儿童(TD组)的粪便样本。提取基因组DNA,PCR扩增16S rDNA V4区,使用Illumina NovaSeq6000平台进行高通量测序。分析2组肠道菌群的构成和分布特征,并预测分析菌群的代谢功能。结果ASD组和TD组儿童肠道菌群的α多样性指数(Chao1、Shannon和Simpson)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在门和纲水平,2组儿童肠道菌群的结构差异无统计学意义(P>0.05)。在属水平,ASD组巨单胞菌属、巴恩斯氏菌属、小杆菌属、巨球菌属、瘤胃球菌属扭链群及梭杆菌属的丰度大于TD组(P<0.05)。功能预测分析显示,ASD组肠道菌群的色氨酸降解、谷氨酸降解及丁酸盐生成等代谢功能的丰度低于TD组(P<0.05),而γ-氨基丁酸降解功能的丰度高于TD组(P<0.05)。结论ASD儿童和TD儿童肠道菌群的α多样性无显著差异,但属水平物种构成不同,菌群的代谢功能有差别。     

益生菌联合应用行为分析法治疗儿童孤独症谱系障碍的前瞻性随机对照研究

目的 探讨益生菌联合应用行为分析法（applied behavior analysis,ABA）治疗儿童孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder,ASD）的疗效。 方法 选取2019年5月至2020年12月在江苏大学附属医院就诊的ASD患儿41例,随机分为观察组（n=21）和对照组（n=20）。观察组给予口服益生菌联合ABA干预,对照组仅给予ABA干预,比较两组的疗效。在干预前、干预后3个月分别依据孤独症治疗评估量表（autism treatment evaluation checklist,ATEC）对两组患儿行为症状的严重程度进行评分,并分别留取患儿的粪便标本,基于16s rRNA高通量测序分析两组患儿的肠道菌群差异。 结果 干预前,观察组与对照组ATEC评分差异无统计学意义（P>0.05）;干预后3个月,观察组与对照组ATEC评分均较干预前明显下降,且观察组ATEC评分低于对照组（P<0.05）。干预前,观察组与对照组肠道菌群构成情况无明显差异;干预后3个月,观察组与对照组肠道菌群构成情况存在明显差异。观察组双歧杆菌属、乳杆菌属、粪杆菌属、瘤胃菌属、普雷沃菌属、布劳特菌属的相对丰度明显高于对照组（P<0.05）,志贺氏菌属、梭状菌属的相对丰度明显低于对照组（P<0.05）。 结论 益生菌可能通过调节肠道菌群微生态进一步改善传统ABA治疗儿童ASD的疗效。 引用格式:     

Intestinal and pharyngeal microbiota in early neonates: an analysis based on high-throughput sequencing北大核心CSCD

目的 初步探讨早期新生儿肠道和咽部微生物群的分布特点及相关性。 方法 选取上海市浦东新区妇幼保健院2021年9月—2022年1月出生的混合喂养的足月健康新生儿为研究对象。采用16S rRNA基因测序技术分析新生儿出生当天及出生后5~7 d的粪便和咽拭子样本,分析比较早期新生儿肠道和咽部微生物群的组成及功能差异。 结果 多样性分析表明,早期新生儿咽部微生物群的多样性高于肠道,但差异无统计学意义（P>0.05）。门水平上,出生当天肠道变形菌门相对丰度高于咽部（P<0.05）;出生后5~7 d肠道放线菌门和变形菌门相对丰度高于咽部、厚壁菌门相对丰度低于咽部（P<0.05）。属水平上,出生当天肠道和咽部的优势菌属组成差异无统计学意义（P>0.05）;出生后5~7 d肠道和咽部的链球菌属、葡萄球菌属、罗氏菌属、双歧杆菌属及埃希菌-志贺菌属等共生菌差异有统计学意义（P<0.05）。直系同源序列聚类数据库分析显示,咽部菌群更多地集中在染色质结构和动力学及细胞骨架上,而肠道菌群在RNA加工修饰、能量生成和转换、氨基酸转运代谢、碳水化合物转运代谢、辅酶转运和代谢等方面表现丰富（P<0.05）。京都基因和基因组百科全书分析显示,与咽部菌群相比,肠道菌群对细胞运动、细胞进程和信号转导、内分泌系统、排泄系统、免疫系统、代谢性疾病、神经系统和转录功能参数的预测程度更高（P<0.05）。 结论 新生儿出生时肠道和咽部的微生物群组成及多样性无显著差异,随着出生时间的推移,两个生态位的微生物群组成开始出现分化,并逐渐显现出各自不同的功能。     

Features of intestinal flora in children with food protein-induced proctocolitis based on high-throughput sequencing北大核心CSCD

目的 通过高通量测序分析食物蛋白诱导性直肠结肠炎（food protein-induced proctocolitis，FPIP）患儿肠道菌群特征。 方法 选取2018年10月至2021年2月遵义医科大学第三附属医院门诊就诊的小于6月龄纯母乳喂养发生FPIP患儿31例纳入FPIP组，正常健康婴儿31例纳入健康对照组；采集两组粪便样本提取DNA并通过PCR扩增，采用高通量测序分析粪便样品中的16S rDNA V3~V4片段并进行相关生物信息学分析。 结果 肠道菌群多样性分析示FPIP组菌群多样性Shannon指数低于健康对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）；菌群丰富度Chao指数高于健康对照组（P<0.01）。在门水平上，两组菌群组成均主要由厚壁菌门、放线菌门、变形菌门、拟杆菌门4个菌门构成；与健康对照组相比，FPIP组中放线菌门构成比显著降低（P<0.001），变形菌门构成比明显增加（P<0.05）。在属水平上，FPIP组主要由大肠埃希氏菌属、梭状芽孢杆菌属、肠球菌属、克雷伯氏菌属和双歧杆菌属组成；健康对照组主要由双歧杆菌属、链球菌属组成；与健康对照组相比，FPIP组中双歧杆菌属和瘤胃球菌属构成比明显降低（P<0.05），梭状芽孢杆菌属和志贺氏菌属构成比明显增加（P<0.05）。 结论 FPIP组与健康对照组相比，肠道菌群多样性下降，丰富度升高；在菌群组成结构上某些细菌菌属存在差异。提示在FPIP的发生发展过程中，肠道微生物群在属水平上的构成改变可能起到了重要作用。     

晚期早产儿喂养不耐受肠道菌群研究

目的探讨晚期早产儿发生喂养不耐受时肠道菌群的变化。方法选取2018年1月至12月,新生儿重症监护室收治的出生24小时内,母亲无产前感染及胎膜早破,胎龄34～36~(+6)周的早产儿,收集喂养不耐受(不耐受组)30例、无喂养不耐受(对照组)30例,及喂养不耐受患儿缓解后(缓解组)的粪便标本,检测并比较粪便标本菌群的差异。结果不耐受组与缓解组的拟杆菌门和放线菌门的相对丰度均低于对照组,不耐受组变形菌门的相对丰度高于对照组及缓解组,差异有统计学意义(P0.05)。不耐受组肠球菌属和拟杆菌属的相对丰度低于对照组与缓解组;不耐受组链球菌属和葡萄球菌属的相对丰度高于对照组与缓解组;不耐受组与对照组的梭菌属的相对丰度低于缓解组;不耐受组与缓解组的双歧杆菌属相对丰度低于对照组;差异均有统计学意义(P0.05)。不耐受组的Observed_otus 数值、Chao1指数和Shannon指数均低于对照组及缓解组,差异有统计学意义(P0.05)。结论喂养不耐受早产儿的肠道菌群的相对丰度及多样性降低,随着喂养不耐受症状缓解,肠道菌群的相对丰度及多样性亦在逐渐恢复。     

妊娠期糖尿病对母乳喂养的12周龄婴儿肠道菌群影响

目的 比较妊娠期糖尿病（GDM）及正常孕妇的持续母乳喂养的12周龄婴儿肠道菌群的分布特点,以探索GDM对12周龄婴儿肠道菌群的影响。方法 选择2016年6月—2019年12月入组的母亲及其随访至12周龄的母乳喂养的婴儿,依据母亲孕期血糖检测结果将母乳喂养婴儿分为GDM组（n=13）和对照组(n=27)。采集婴儿12周龄粪便,采用16S rDNA高通量测序技术对所有粪便样本进行检测,比较两组肠道菌群分布特点。采用Spearman相关分析法分析肠道菌群与孕期血糖、婴儿体重的相关性。结果 共纳入40对研究对象,GDM组13对,对照组27对。两组的优势菌门均为放线菌门、厚壁菌门和变形菌门,GDM组的疣微菌门相对丰度高于对照组,差异有统计学意义（Z=2.233,P <0.05）。在属水平上,GDM组中肠道菌群优势菌属来自放线菌门和厚壁菌门,对照组中肠道菌群的优势菌属来自放线菌门、厚壁菌门和变形菌门。LEfSe差异分析结果显示,GDM组中疣微菌门/目/科、阿克曼氏菌、劳森氏菌、哈利真杆菌的丰度明显升高（LDA>2）,而在对照组中芽孢杆菌目、孪生球菌属、丹毒梭菌属的丰度明显升高（LDA&...     

CD4+NKG2D+T细胞在幼年特发性关节炎疾病活动中的作用

目的 分析幼年特发性关节炎(juvenile idiopathic arthritis,JIA)活动期及稳定期CD4⁺NKG2D⁺T细胞及NKG2D可溶性配体,即可溶性MHC-Ⅰ类链相关分子A和B (soluble MHC classⅠchain-related molecules A/B,sMICA/sMICB)表达水平,探讨其在JIA疾病活动中的作用。方法 前瞻性纳入2019年11月—2021年12月重庆医科大学附属儿童医院确诊的全身型JIA 19例和关节型JIA 20例,6例健康儿童为对照组。收集外周血标本,采用酶联免疫吸附法测定sMICA和sMICB水平,采用流式细胞术检测CD4+NKG2D⁺T细胞比例,采用全身型幼年关节炎疾病活动评分-27 (systemic Juvenile Arthritis Disease Activity Score,sJADAS-27)/幼年关节炎疾病活动评分-27 (Juvenile Arthritis Disease Activity Score-27,JADAS-27)评估JI...     

肺炎支原体感染对哮喘患儿支气管肺泡灌洗液中T细胞功能的影响

目的 评价肺炎支原体（MP）感染对哮喘患儿急性期、稳定期支气管肺泡灌洗液（BALF）中T 细胞功能的影响,探讨MP 感染与哮喘的关系。方法 71 例患儿（支气管炎、肺炎、哮喘）,分为无MP 感染对照组（无MP 感染的肺炎、支气管炎）、无MP 感染的哮喘组、MP 感染的哮喘组;用流式细胞仪技术检测各组患儿急性期、稳定期BALF 中CD3+、CD4+、CD8+T 细胞和CD4+/CD8+ 水平。结果 哮喘患儿无论在急性期还是稳定期,BALF 中CD3+、CD4+、CD8+ 和CD4+/CD8+ 与对照组比较均有明显差异（P+、CD4+ 较对照组有所降低,CD8+ 上升,而CD4+/CD8+ 则有明显降低（P+、CD4+及CD4+/CD8+ 低于对照组,CD8+ 稍有上升（P+、CD4+ 显著下降,CD8+ 升高（P+/CD8+ 显著下降（P+、CD4+、CD8+ 无明显差异（P>0.05）,CD4+/CD8+ 明显下降（P结论 MP 感染的哮喘患儿在急性期和稳定期可使气道T 细胞功能明显降低,进而引起免疫紊乱,提示MP 可能与哮喘发病有关。     

白细胞相关免疫球蛋白样受体-1在免疫性血小板减少症患儿中的表达

目的 观察白细胞相关免疫球蛋白样受体-1（LAIR-1）在免疫性血小板减少症（ITP）患儿中的表达变化,探讨其在ITP发病中可能的机制。方法 采用流式细胞术检测40例ITP患儿外周血CD4+ T细胞、CD8+ T细胞及CD19+CD20+ B细胞膜LAIR-1的表达率;ELISA检测ITP患儿血清中可溶性LAIR-1（sLAIR-1）含量及实时荧光定量PCR法检测ITP患儿LAIR-1 mRNA表达水平。32名同龄健康儿童作为对照组。结果 ITP组CD19+CD20+ B细胞比例高于对照组（P+ T细胞比例低于对照组（P+ T细胞、CD8+ T细胞膜LAIR-1的表达低于对照组（PP结论 ITP患儿中CD4+ T细胞、CD8+ T细胞膜上LAIR-1表达降低,血清sLAIR-1表达增高,提示LAIR-1可能是导致ITP患儿免疫失衡的重要因素。     

不同年龄段儿童Delta变异株感染所致新型冠状病毒感染的临床特征分析

目的 分析不同年龄段儿童Delta变异株感染所致新型冠状病毒感染患儿的临床特征,为儿童新型冠状病毒感染的临床诊疗提供参考。方法 将2021年11月17日—12月17日河南省定点救治医院收治的Delta变异株感染所致的新型冠状病毒感染患儿45例分为3组(<6岁组16例,6～13岁组16例,>13岁组13例),比较3组患儿的临床特征及实验室检查结果。结果 各年龄组均以轻型病例为主,均以咳嗽、咳痰为主要临床表现,发热仅在6～13岁组中出现。<6岁组血清天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶水平高于其他两组(P<0.05)。6～13岁组血肌酐水平升高患儿比例最高,达50%。仅>13岁组中4例患儿出现血清C反应蛋白增高。在3个年龄组中,6～13岁组外周血CD3⁺CD4⁺淋巴细胞、CD3⁺CD8⁺淋巴细胞及自然杀伤细胞计数均最低。>13岁组入院时SARS-CoV-2 IgG阳性率高于其他两组(P<0.05)。3组患儿胸部CT影像学表现差异无统计学意义(P>...     

连续血液净化对严重脓毒症患儿T细胞亚群的影响

目的 探讨连续血液净化（CBP）治疗对严重脓毒症患儿T 细胞亚群及预后的影响。方法 选择严重脓毒症患儿42 例,随机给予常规治疗（对照组,22 例）和常规治疗+CBP 治疗 （CBP 组,20 例）,分别于治疗前及治疗后3 d、7 d 动态测定外周血调节性T 细胞亚群的变化及相关临床指标。结果 CBP 组患儿PICU 入住时间及机械通气时间均明显短于对照组（均PP+、CD4+、CD8+ T 淋巴细胞百分比及PCIS 评分较治疗前明显升高,差异均有统计学意义（P+、CD4+、CD8+ T 淋巴细胞百分比及PCIS 评分明显高于对照组（P+、CD4+、CD8+ T 淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+ 比值及PCIS 评分均较对照组明显升高（P结论 CBP 治疗可以提高严重脓毒症患儿受抑制的免疫功能,改善患儿预后。     

新生儿重症监护室环境布局对极/超早产儿临床结局及神经发育的影响

目的 探讨新生儿重症监护室（neonatal intensive care unit,NICU）环境布局对极/超早产儿临床结局及神经发育的影响。方法 选取重庆医科大学附属儿童医院2021年1月—2022年6月收治、生后24 h内入院的304例极/超早产儿为研究对象。采用回顾性队列研究方法,根据NICU不同环境布局将患儿分为两组,即集中式布局组（157例）和分散式布局组（147例）,比较两组患儿临床结局和校正胎龄34～51+6周时婴儿运动表现测试评分结果。结果 分散式布局组支气管肺发育不良（44.9%vs 62.4%）和颅内出血（17.7%vs 28.0%）的发生率低于集中式布局组（均P<0.05）;分散式布局组治愈率高于集中式布局组（68.7%vs 56.7%,P<0.05）。在校正胎龄34～51+6周时,分散式布局组婴儿运动表现测试评分高于集中式布局组（P<0.05）。结论 NICU分散式环境布局较集中式布局在极/超早产儿临床结局及早期神经发育方面显示出积极的影响。[中国当代儿科杂志,2023,25(8):812-817]     

Two color flow cytometric analysis of lymphocytes in HTLV-I-carrier children

Phenotypic changes in lymphocytes from healthy children with antibody for human T lymphotrophic virus type I (HTLV-I) were studied using two color flow cytometry. The subjects were high school students within a small district of Kyushu, Japan. In the carrier group, a subset of lymphocytes which expressed CD8⁺CD57⁺ was significantly lower in percentage (P < 0.01) and in number (P < 0.05). There was no significant difference between carriers and non-carriers in the percentage and number of CD4⁺ Leu8⁺cells or CD4⁺ HLA-DR⁺ cells. The IgG levels were slightly higher in carriers than in non-carriers (P < 0.05). These findings suggest that HTLV-I-infected cells may affect the immune system in healthy carrier children.     

CD4+CXCR5+Tfh细胞比例及其调控因素变化对哮喘患儿的影响

目的 探讨哮喘患儿外周血滤泡样辅助性T细胞(CD4+CXCR5+Tfh细胞)比例及其转录调控因子BCL-6、BLIMP-1的表达变化.方法 依据病情将64例哮喘患儿分为哮喘急性期组(n=36)和哮喘缓解期组(n=28),另选取同期在我院行健康体检儿童25例为对照组.流式细胞术检测各组外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞数量;实时荧光定量 PCR仪检测各组转录调控因子BCL-6、BLIMP-1 mRNA表达;双抗夹心ELISA法检测血浆总IgE、IL-2、IL-6 、IL-21浓度水平.结果 哮喘急性期组患儿CD4+CXCR5+Tfh细胞比例明显高于对照组及哮喘缓解期组(PPPPPP+CXCR5+Tfh细胞数量呈正相关(分别r=0.76、0.46,均Pr=-0.68, P结论 外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞比例增高可能参与了儿童哮喘的急性发病过程,转录调控因子BCL-6 及BLIMP-1 mRNA的异常表达,以及局部微环境中总IgE和细胞因子IL-2、IL-6、IL-21的浓度改变可能与哮喘患儿CD4+CXCR5+Tfh细胞分化异常有关.     

Necrotising enterocolitis: is there a relationship to specific pathogens?

Outbreaks of necrotising enterocolitis (NEC) have often been related to specific pathogens such as Enterobacteriaceae. This relationship, however, remains uncertain because of the retrospective nature of the studies addressing this issue. We performed a prospective study to investigate whether there is indeed an association between NEC and specific pathogens. Between April 1993 and March 1997, stools of neonates of <36 weeks admitted to our neonatal unit were investigated for bacteria in weekly intervals. Clinical and bacteriological data from each infant who developed NEC were compared with those from two control infants matched for gestational age and date of admission. Eighteen infants developed 19 episodes of NEC (clinical signs + air in portal vein); 8 of these had laparotomy; two died. Occurences of NEC were homogeneously distributed over the 4- year study period. The only significant differences in the clinical course prior to NEC were a more severe stage of respiratory distress syndrome [median 2 (0–4) vs. 0 (0–3), P < 0.05] and a higher proportion of infants who had only been formula fed (63 vs. 32%, P < 0.05) in the cases. Within the last week prior to NEC, potentially pathogenic bacteria were identified in stools of all cases and 79% of controls (P < 0.05). However, there was no significant difference in the occurrence of specific pathogens or groups of pathogens in cases compared with controls. Conclusion Although gut colonisation with potential pathogens appeared to be a prerequisite for the development of NEC, there were no specific bacteria associated with this disease if data from infants with NEC were compared with those from time- and gestational age-matched controls. Received: 5 September 1997 / Accepted in revised form: 2 March 1998