不同灸量隔姜灸对脾虚证大鼠胃组织丝裂原细胞外激酶和细胞外调节蛋白激酶表达的影响

目的观察不同灸量隔姜灸对脾虚证大鼠胃组织丝裂原细胞外激酶(MEK)1/2和细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2表达的影响,探讨隔姜灸治疗脾虚证的可能作用机制及量效特征。方法将75只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、隔姜灸3壮组、隔姜灸6壮组、隔姜灸9壮组,每组15只。200%大黄浓缩液4℃灌胃制作脾虚证大鼠模型。造模成功后,隔姜灸组选取"足三里""中脘"予不同灸量治疗,连续8 d。HE染色镜下观察大鼠胃组织病理学改变,免疫组化检测大鼠胃组织MEK1/2及ERK1/2的蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠胃黏膜损伤明显,可见较大的破损、脱落;与模型组比较,隔姜灸3壮组大鼠胃黏膜表面有部分脱落、破损情况改善,隔姜灸6壮组和隔姜灸9壮组大鼠胃黏膜表面较完整、脱落及破损明显改善。与空白对照组比较,模型组胃组织MEK1/2及ERK1/2蛋白表达明显升高(P0.01);与模型组比较,隔姜灸各组胃组织MEK1/2及ERK1/2蛋白明显表达升高(P0.01);与隔姜灸3壮组比较,隔姜灸6壮组和隔姜灸9壮组胃组织MEK1/2及ERK1/2蛋白表达明显升高(P0.01),但二者作用效果相当,差异无统计学意义(P0.05)。结论隔姜灸通过提高胃组织MEK1/2及ERK1/2的蛋白表达,激活MEK/ERK信号转导通路,进而促进脾虚证大鼠胃黏膜的修复。     

不同灸量隔姜灸对脾虚证大鼠三叶因子1、粘蛋白5AC及表皮生长因子受体的影响（英文）

目的:观察不同灸量隔姜灸对脾虚证大鼠血清三叶因子1(TFF1)和粘蛋白5AC(MUC5AC)含量,以及胃黏膜表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达的影响,探讨隔姜灸治疗脾虚证的可能作用机制及量效特征。方法:将75只SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、隔姜灸3壮组(C1组)、隔姜灸6壮组(C2组)和隔姜灸9壮组(C3组),每组15只。除A组外,其余各组大鼠采用200%的大黄浓缩液4℃灌胃制作脾虚证大鼠模型。造模成功后,B组大鼠不予治疗;C1、C2和C3组大鼠分别接受3壮、6壮和9壮隔姜灸足三里和中脘治疗,连续治疗8 d。观察大鼠一般症状评分,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TFF1和MUC5AC含量;免疫组化法检测胃黏膜EGFR蛋白表达。结果:干预结束后,与A组比较,B组大鼠脾虚症状积分增高,C1、C2和C3组大鼠血清TFF1、MUC5AC含量及胃组织EGFR蛋白表达明显升高(均P0.01);与B组比较,C1、C2和C3组大鼠脾虚症状积分降低,血清TFF1、MUC5AC含量及胃组织EGFR蛋白表达升高(均P0.01);与C1组比较,C2和C3组大鼠脾虚症状积分降低,血清TFF1、MUC5AC含量及胃组织EGFR蛋白表达升高(均P0.01),但C2组与C3组差异无统计学意义(均P0.05)。结论:隔姜灸能改善大鼠脾虚症状,促进脾虚证大鼠胃黏膜的增殖修复,其作用机制可能与提高血清TFF1和MUC5AC含量,激活EGFR蛋白的表达相关,且灸9壮和6壮的疗效优于灸3壮,但灸9壮和灸6壮的效果相当。     

隔药饼灸对功能性胃肠病(肝郁脾虚证)大鼠DA含量及中枢c-fos的影响

目的观察隔药饼灸对肝郁脾虚证功能性胃肠病(Functional Gastrointestinal Disorders,FGIDs)结肠DA及中枢cfos表达的影响,探讨隔药饼灸对肝郁脾虚证FGIDs大鼠治疗作用的可能机制。方法将48只SD大鼠编号按随机数字表法随机分为4组,即:空白组(A组)、模型组(B组)、隔药饼灸组(C组)和逍遥散组(D组),每组12只。A组正常饲养,不作任何处理;余3组均采用复合病因造模法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾+摇晃)连续21d造模后,B组行捆绑束缚30min,并灌服生理盐水,灌胃容积均为1ml/100g体重(下同);C组行隔药饼灸30min,并灌服生理盐水;D组行捆绑束缚30min,灌服逍遥散,连续干预14d。实验结束后采用高效液相检测结肠DA表达,荧光定量PCR法检测海马、杏仁核c-fos表达。结果与模型组相比,逍遥散组和隔药饼灸组结肠组织中DA表达下降,差异均有统计学意义(P0.05);与逍遥散组相比,隔药饼灸组差异有统计学意义(P0.05)。在海马、杏仁核区,与模型组相比,隔药饼灸组和逍遥散组均有统计学意义(均P0.05);隔药饼灸与逍遥散组间有统计学意义(P0.05)。结论隔药饼灸能调节结肠DA及中枢c-fos表达,这可能是隔药饼灸治疗FGIDs的作用机制之一。     

艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体、磷酸化细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,每组10只。采用大黄浓缩液灌胃法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃法制备脾虚胃溃疡大鼠模型。四君子汤组予以四君子汤灌胃,艾灸组大鼠隔日交替灸"足三里""中脘"或"脾俞""胃俞",艾灸非穴位组灸艾灸组穴位的对照点,每日1次,共治疗8d。按脾虚动物模型标准观察大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃组织EGFR的表达和蛋白质印迹法检测p-ERK1/2蛋白的水平。结果:与空白组比较,其余各组造模大鼠脾虚症状明显,模型组大鼠胃黏膜损伤指数显著增加(P0.01),光镜下胃黏膜损伤严重,胃组织EGFR、p-ERK1/2蛋白表达升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组胃黏膜损伤指数显著降低(P0.01,P0.05),光镜下胃黏膜损伤改善,且胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01);与艾灸非穴位组相比,四君子汤组和艾灸组胃黏膜损伤指数呈降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05),而光镜下胃黏膜损伤恢复较艾灸非穴位组好,胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论:激活EGFR/ERK信号转导通路是艾灸启动机体的内源性保护机制之一,艾灸治疗脾虚胃溃疡可能是通过提高胃组织表皮生长因子、转化生长因子的表达,两者均结合并激活EGFR,激活后的EGFR介导ERK磷酸化从而激活EGFR/ERK信号转导通路,因而起到保护胃黏膜、促进胃黏膜增殖修复的作用。     

隔物灸调控缺氧诱导因子-1α表达抑制慢性萎缩性胃炎大鼠糖酵解的机制研究

目的：观察慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及糖酵解关键酶表达变化,探究隔物灸对CAG的作用及可能机制。方法：将雄性Wistar大鼠随机分为正常组和造模组,自由饮用170 mg/L浓度MNNG联合法进行CAG大鼠造模。鉴定模型成功后,造模组大鼠随机分为模型组、隔药饼灸组、隔姜灸组和西药组,每组6只。隔药饼灸组、隔姜灸组均取中脘、气海穴进行隔物灸干预,西药组给予叶酸悬浊液灌胃。采用HE染色法观察胃窦组织病理学变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃黏膜组织信号转导及转录激活因子3(STAT3)、丙酮酸激酶M2(PKM2)和HIF-1α的mRNA表达水平,免疫组织化学法检测胃黏膜组织STAT3、HIF-1α蛋白表达,比色法和ELISA法测定胃黏膜组织LDH、PKM2活性。结果：与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织固有腺体结构紊乱,腺体减少,出现萎缩、肠化、假幽门腺化生和(或)异型增生。模型组大鼠胃黏膜组织HIF-1α、STAT3、PKM2 mRNA表达上调(P<0.05),STAT3、HIF-1α蛋白表达增加(P<0.05),LDH...     

电针对功能性消化不良大鼠MEK-ERK1/2信号通路的影响

目的观察电针对功能性消化不良(FD)大鼠胃组织MEK-ERK1/2信号通路的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组及造模组,其中空白组10只。对除空白组外的30只大鼠进行造模,将造模成功的20只大鼠再随机分为模型组及电针组各10只。造模方法均采用夹尾刺激配合不规则饮食的复合造模方法制备FD大鼠模型。造模后,电针组进行电针足三里干预10 d,干预结束后用WB对大鼠胃组织丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、细胞信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-MEK)、磷酸化细胞信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白水平进行检测。结果与空白组比较,模型组大鼠胃组织MEK、ERK1/2、p MEK、pERK1/2蛋白表达水平升高(P 0.05);与模型组相比,电针组MEK、ERK1/2、p-MEK、p-ERK1/2蛋白表达水平下降(P 0.05)。结论电针干预可下调FD模型大鼠MEK、ERK1/2、pMEK、p ERK1/2蛋白表达水平。     

隔药灸对克罗恩病大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2及c-fos调节作用的研究＊

目的 观察隔药灸对克罗恩（Crohn s Disease，CD）大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2、c-fos的影响，探讨隔药灸治疗CD的作用机制。方法 将清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和假灸组4组。采用TNBS合50%乙醇溶液灌肠制备大鼠CD模型。模型制备成功后，隔药灸组取天枢穴（双）、气海穴进行隔药饼灸治疗；假灸组取穴、操作与隔药灸组相同，但不点燃艾炷。治疗结束后，采用HE染色，光镜下观察大鼠结肠组织形态学变化；采用实时荧光定量PCR技术检测结肠p38MAPK mRNA表达；应用ELISA技术检测结肠p38MAPK、c-fos蛋白含量，Western blot技术检测结肠ERK1/2蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠结肠组织损伤严重，可见全壁性炎症、裂隙状溃疡，部分大鼠结肠可见纤维化；与模型组、假灸组比较，隔药灸组大鼠结肠形态结构改善，肠道炎症减轻；假灸组大鼠结肠损伤程度、炎症反应与模型组类似。与正常组比较，模型组p38MAPK mRNA表达增加（P < 0.01），p38MAPK、ERK1/2、c-fos蛋白含量均增加（均P < 0.05）；与模型组比较，隔药灸组p38MAPK mRNA表达降低（P < 0.05），p38MAPK、ERK1/2、c-fos蛋白含量均降低（均P < 0.05）；假灸组均无显著变化（均P > 0.05）。结论 隔药灸能下调克罗恩病大鼠结肠p38MAPK、ERK1/2、c-fos的表达，改善炎症、促进肠道组织修复。     

隔药饼灸对慢性疲劳综合征大鼠血乳酸及AMPK/PGC-1α信号通路的影响

目的:观察隔药饼灸对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血乳酸(BLA)及腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(AMPK/PGC-1α)信号通路的影响,探讨隔药饼灸治疗CFS的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、假药饼灸组和中药灌胃组,每组10只。采用慢性束缚与力竭游泳交替进行21 d的复合应激造模方法复制CFS大鼠模型。隔药饼灸组以逍遥散组方的药物制成药饼,于大鼠“神阙”“关元”“足三里”“期门”进行隔药饼灸,每穴灸5壮;假药饼灸组用赋形剂制备的假药饼,每穴灸5壮;中药灌胃组选择逍遥散悬浊液(60 mg·kg^-1)灌服。以上干预均每日1次,共10 d。旷场实验与悬尾实验评价各组大鼠行为学变化;ELISA法检测大鼠血清中BLA、趋化因子CXC配体9(CXCL9)及β-内啡肽(β-EP)含量;HE染色法观察大鼠股四头肌病理形态;免疫组织化学法检测大鼠股四头肌磷酸化(p)-AMPK与PGC-1α蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠旷场实验站立次数与水平跨格数均显著减少(P<0.05);与模型组、假药饼灸组...     

复方七芍降压片对SHR大鼠P2Y6、MEK1/2、ERK1/2及血管重塑标志物MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究复方七芍降压片对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉中G蛋白偶联受体P2Y6、酪氨酸激酶受体(MEK1/2)、丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2)及血管重塑标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等蛋白表达的影响,探讨复方七芍降压片干预血管重塑的作用机制。方法将雄性SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦片组(13.5 mg·kg^-1)、复方七芍降压片组(8.73 g·kg^-1),每组10只,另设10只WKY大鼠为正常对照组;灌胃给药,每日1次,连续给药6周。采用无创血压仪测定每周大鼠尾动脉血压;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9及TIMP-1蛋白的表达;肠系膜动脉组织HE染色后进行体视学分析,测量肠系膜动脉血管中膜厚度及相同位置的管腔直径,计算两者比值作为动脉壁厚度(WT)值。结果与正常对照组比较,模型组大鼠各周血压明显上升(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值明显升高(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显降低(P<0.01);血清中IL-1β水平明显升高(P<0.01)。药物干预后,与模型组比较,复方七芍降压片组各周血压均明显降低(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值均明显降低(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显升高(P<0.05);血清中IL-1β水平明显降低(P<0.05)。结论复方七芍降压片能够显著降低SHR大鼠血压,改善血管重塑,可能与调控肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达,减轻炎症反应有关。     

健脾解毒方对脾虚肝癌大鼠生存的影响及与TCR、ERK1/2信号通路的关系

目的探讨健脾解毒方对脾虚肝癌大鼠生存的影响及与TCR、ERK1/2、p-ERK1/2的关系。方法 105只Wistar大鼠脾虚肝癌模型组,进行造模和干预。随机分为空白对照组(A组),肝癌模型组(B组),脾虚对照组(C组),脾虚肝癌模型组(D组),健脾解毒方低浓度E组、高浓度F组及胸腺五肽组(G组)。实验中记录动物的体质量、生存时间、肝癌大鼠濒死状态时恶液质积分并采集标本。Western blot方法检测大鼠肝组织、肝癌组织、T淋巴细胞中TCR蛋白表达,以及T淋巴细胞中ERK1/2、p-ERK1/2蛋白的表达。结果健脾解毒方高浓度组和胸腺五肽组大鼠终末期体质量、累积生存率高于脾虚肝癌模型组及肝癌模型组(P 0. 05),终末期恶液质积分则更低(P 0. 05)。健脾解毒方高浓度组大鼠肝组织、癌组织中TCR蛋白表达量,外周T淋巴细胞中TCR蛋白、ERK1/2蛋白、p-ERK1/2蛋白表达量均较脾虚肝癌模型组明显增加(P 0. 05)。结论高浓度健脾解毒方能延缓荷瘤鼠恶液质的发生和进展,明显延长荷瘤鼠生存时间,其作用可能与健脾解毒方上调TCR、ERK1/2及p-ERK1/2有关。     

隔药饼灸对肝郁脾虚型功能性胃肠病大鼠胃排空、小肠推进功能影响等效性随机平行对照研究

[目的]观察隔药饼灸对肝郁脾虚型功能性胃肠病大鼠胃排空、小肠推进功能影响。[方法]使用随机平行对照方法,将60只SD大鼠编号按随机数字表法随机分为空白组(A)、模型组(B)、隔药饼灸组(C)、逍遥散组(D)和多潘立酮组(E)5组(12只/组)。A组正常饲养,不做任何干预;余4组均采用复合病因造模法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾+摇晃)连续21d造模后,B组行捆绑束缚30min,并灌服生理盐水(各组灌胃容积均为1mL/100g体重);C组行隔药饼灸30min,灌服生理盐水;D组行捆绑束缚30min,灌服逍遥散;E组行捆绑束缚30min,灌服多潘立酮,连续干预14d。观测大鼠体重和食量、胃排空率、小肠推进率。[结果]隔药饼灸组、逍遥散组与多潘立酮组体重和食量明显上升(P<0.05或P<0.01),三组间无明显差异(P>0.05);胃内残留率明显下降,小肠推进率明显升高(P<0.01);三组间无明显差异(P>0.05)。[结论]隔药饼灸和逍遥散、多潘立酮具有等效性,可促进胃排空和小肠推进。     

神阙穴隔药饼灸、单纯灸及灯光灸对胃黏膜损伤保护作用的对比研究

目的对比神阙穴隔药饼灸、神阙穴单纯灸、非穴点隔药饼灸及神阙穴灯光加热对应激性溃疡胃黏膜损伤的保护效应,以阐述神阙穴隔药饼灸的优越性及其发挥作用的效应因素。方法将54只SD大鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、神阙穴单纯灸组(单纯灸组)、神阙穴隔药饼灸组(隔药饼灸组)、非穴隔药饼灸组(非穴组)、神阙穴灯光加热组(灯光加热组)。采用水浸-束缚应激法(WRS)制备应激性溃疡模型。按Guth法计算胃黏膜损伤指数(UI),用激光多普勒血流仪测定胃黏膜血流量(GMBF),用放免分析法测定各组大鼠胃黏膜PGE2、TGF-α及CGRP含量的变化。结果神阙穴隔药饼灸及单纯灸组胃黏膜损伤指数均明显低于非穴组和灯光加热组(P<0.01);神阙穴隔药饼灸和单纯灸组胃黏膜前列腺素E2(PGE2)、转化生长因子(TGF-α)和降钙素基因相关肽(CGRP)、含量与非穴和灯光加热组比较有不同程度的增加,差异有非常显著性意义(P<0.01或P<0.05),尤以神阙穴隔药饼灸作用最强。结论神阙穴隔药饼灸对应激性溃疡胃黏膜损伤的保护作用优于神阙穴单纯灸、非穴点隔药饼灸及神阙穴灯光加热,提示神阙穴隔药饼灸的保护作用不仅与艾灸的加热效应有关,还与穴位的特异性及艾绒与药物的作用有关。     

隔药饼灸对功能性消化不良肝郁脾虚模型大鼠血清CRH、ACTH、CORT及胃排空率的影响

目的观察隔药饼灸对功能性消化不良(FD)肝郁脾虚模型大鼠血清CRH、ACTH、CORT及胃排空率的影响,从HPA轴途径探讨隔药饼灸治疗FD的可能作用机制。方法将50只SD大鼠按随机数字表法随机分为5组,每组10只,分别为空白组(A组)、模型组(B组)、多潘立酮组(C组)、隔药饼灸组(D组)和逍遥散组(E组)。除空白组外,余下4组均采用复合病因造模法造模,连续3周。造模成功后,按组分别施加被试因素,连续2周。治疗结束后,通过灌服营养性半固体糊的方法检测大鼠的胃排空率,采用ELISA法检测大鼠血清中CRH等的含量。结果治疗结束后,与空白组比较,模型组大鼠的血清中CRH、ACTH、CORT含量均升高,胃排空率降低,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,多潘立酮组、隔药饼灸组及逍遥散组大鼠的血清中CRH、ACTH、CORT含量均降低,胃排空率升高,差异有统计学意义(P0.01);但三组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 FD肝郁脾虚模型大鼠HPA轴功能亢进,胃动力下降;隔药饼灸和多潘立酮、逍遥散一样,能调控FD肝郁脾虚模型大鼠的HPA轴功能,增强胃动力;HPA轴途径可能是隔药饼灸调节胃肠功能的作用机制之一。     

红芪多糖对脾虚型糖尿病大鼠Bcl-2/Bax表达的影响

目的观察红芪多糖对脾虚型糖尿病大鼠Bcl-2/Bax表达的影响,探究其对脾虚型糖尿病大鼠胃黏膜细胞凋亡的作用机制。方法 SPF级GK大鼠雄性65只,随机选出10只作为空白组,正常饮食喂养。剩余采用苦寒泻下法合并饮食不节法制备脾虚证模型,造模成功后,分为5组:即模型组,二甲双胍组,红芪多糖高、中、低剂量组。红芪多糖高剂量组、中剂量组、低剂量组分别以0.2,0.1,0.05g·kg~(-1)·d~(-1),二甲双胍组以0.675g·kg~(-1)·d~(-1)进行灌胃,连续灌胃8周后处死大鼠,取胃窦部组织采用TUNEI(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测胃窦部组织胃黏膜细胞凋亡率;实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测Bcl-2,Bax基因表达含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bax蛋白表达含量。结果与空白组比较,模型组大鼠胃窦组织胃粘膜细胞凋亡率明显升高(P0.05),胃窦组织中Bcl-2 mRNA表达及蛋白表达降低(P0.05),Bax mRNA表达及蛋白表达升高(P0.01)。与模型组比较,红芪多糖高、中剂量组胃窦组织胃粘膜细胞凋亡率显著降低(P0.01),胃窦组织中Bcl-2 mRNA表达(P0.05)及蛋白表达升高(P0.01),Bax mRNA表达及蛋白表达降低(P0.05)。结论红芪多糖可能通过提高Bcl-2/Bax的表达,抑制脾虚型糖尿病大鼠胃窦组织胃黏膜细胞的凋亡。     

隔药灸对克罗恩病大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2型极化的影响

目的:观察隔药灸对克罗恩病(CD)大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2型极化及炎性因子表达的影响，探讨其作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、隔药灸组，每组10只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法制备CD模型。造模成功后隔药灸组大鼠给予隔药饼灸“天枢”“气海”,每次每穴灸2壮，每日1次，共10 d。西药组大鼠给予美沙拉嗪灌胃，每日2次，共10 d。治疗结束后取各组大鼠结肠上皮组织，分离、纯化和培养结肠黏膜固有层巨噬细胞。HE染色法观察结肠组织病理变化；透射电镜观察结肠组织超微结构；Western blot法检测结肠黏膜巨噬细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核因子κB(NF-κB) p65、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平；流式细胞术检测结肠黏膜组织M1、M2型巨噬细胞的数量；免疫荧光法检测结肠黏膜组织M1、M2型巨噬细胞的表达情况。结果:与正常组比较，模型组大鼠结肠组织呈现巨大溃疡及炎性表现，结肠上皮细胞连接疏松，细胞器结构破坏；结肠黏膜巨噬细胞α7nAChR表达水平降低(P<0.01),NF-κB p65和TNF-α表达水平升高(P&l...     

艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠KGF-1、KGF-2和IL-6蛋白表达的影响

目的:观察艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠角质细胞生长因子-1 (Keratinocyte Growth Factor-1,KGF-1)、角质细胞生长因子-2(Keratinocyte Growth Factor-2,KGF-2) KGF-2和白介素-6(Interleukin-6,IL-6)蛋白表达的影响,进一步探讨艾灸治疗溃疡性结肠炎的作用机制.方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和柳氮磺胺吡啶(Sulfasalazine,SASP)组.隔药灸组采用隔药灸天枢和气海穴治疗;SASP组采用柳氮磺胺吡啶灌胃干预.干预结束后,应用HE染色光镜下观察各组大鼠结肠病理学变化,采用免疫组织化学法检测大鼠结肠KGF-1、KGF-2和IL-6蛋白表达变化.结果:与模型组比较,隔药灸组和SASP组大鼠结肠病理学均有一定的改善;与正常组比较,模型组大鼠结肠KGF-1、KGF-2和IL-6蛋白表达均显著增加(P＜0.05);经隔药灸和SASP干预后,大鼠结肠KGF-1、KGF-2和IL-6蛋白表达均显著降低(P＜0.05).结论:隔药灸和SASP均能下调溃疡性结肠炎大鼠结肠KGF-1、KGF-2和IL-6的蛋白表达,该作用可能是隔药灸和SASP治疗溃疡性结肠炎的重要机制之一.     

香砂六君子汤对萎缩性胃炎大鼠IL-6、IL-17及ERK1/2基因蛋白表达的影响

目的:观察香砂六君子汤对脾胃虚弱型慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)及胃组织细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)基因和蛋白表达的影响。方法:按随机数字表法将受试大鼠分为空白组和造模组,通过综合法成功复制CAG模型大鼠后,把造模成功大鼠随机分为5组,即:模型组、阳性对照组和香砂六君子汤高、中、低剂量组。香砂六君子汤高、中、低剂量组分别灌胃24、12、6 g/(kg·d)剂量香砂六君子汤,模型组和空白组灌胃10 mL/kg蒸馏水,阳性对照组灌胃0.30 g/(kg·d)维酶素,连续造模120天后,采用ELISA法检测大鼠血清IL-6、IL-17含量;采取实时荧光定量PCR检测胃窦黏膜组织IL-6、IL-17基因表达水平;Western Blot技术检测ERK1/2蛋白及其磷酸化表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,且大鼠血清IL-6含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA表达升高(P0.05);血清IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-17 mRNA表达升高(P0.01),胃黏膜组织ERK1/2蛋白表达降低(P0.01),p-ERK1/2蛋白表达升高(P0.05);与模型组比较,香砂六君子汤各剂量组大鼠一般生存状况改善,大鼠血清IL-6、IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA及IL-17 mRNA表达降低(P0.05),ERK1/2蛋白表达升高(P0.05);p-ERK1/2蛋白表达降低(P0.05);与阳性对照组比较,香砂六君子汤高、中剂量组大鼠血清IL-6、IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA及IL-17 mRNA表达降低(P0.05),ERK1/2蛋白表达升高(P0.05);p-ERK1/2蛋白表达降低(P0.05)。结论:香砂六君子汤通过下调IL-6、IL-17表达,激活ERK1/2,抑制p-ERK1/2水平,对脾胃虚弱型CAG胃窦黏膜起保护作用。     

大建中汤介导ERK1/2信号通路调控脾阳虚胃癌动物模型MMP-9的表达

目的:探讨大建中汤对SD大鼠脾阳虚胃癌模型胃癌组织中细胞外调节蛋白激酶1、2(ERK1、ERK2)、基质金属蛋白酶-明胶酶(MMP-9)mRNA的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、大建中汤高、低剂量组(C、D组,给药剂量为生药10.8、5.4 g/kg)、西药对照组(E组,给药剂量为0.019g/kg)。A组予生理盐水,1次/d;B、C、D、E组予番泻叶水浸液灌胃、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)储存液自由饮用,并使其饮食失节、疲劳过度复制脾阳虚胃癌动物模型。5个月后,B组予生理盐水,1次/d;C、D组予大建中汤,1次/d;E组予环磷酰胺,1次/d。15d后,处死大鼠。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测大鼠ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量。结果:模型组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量明显高于正常组,差异有统计学意义(P0.05);大建中汤高、低剂量组、西药组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的量明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:大建中汤可通过调节ERK1/2信号通路调控MMP-9的表达。     

黄连素通过ROS/ERK1/2通路抗幽门螺旋杆菌相关性胃炎 的实验研究

目的:从抗氧化应激、调节ERK1/2蛋白表达方面来探讨黄连素抗幽门螺旋杆菌(HP)相关性胃炎胃黏膜损伤、保护胃黏膜的作用机制。方法:建立HP相关性胃炎大鼠模型,随机分成正常组、正常+黄连素组、模型组和模型+黄连素组。正常+黄连素组与模型+黄连素组用黄连素配合0.5%羧甲基纤维素钠溶液制成浓度为100mg/ml的混悬液,正常组和模型组用0.5%的羧甲基纤维素钠溶液,四组均按2ml/(kg·d)体积灌胃,连续给药4周。Wester Blot法检测NOX2、NOX4、SOD、i NOS、ERK1/2的蛋白含量。结果:黄连素能显著降低HP相关性胃炎大鼠胃黏膜的NOX2、NOX4、i NOS、ERK1/2蛋白含量,增加SOD的含量。结论:黄连素可能是通过ROS/ERK1/2通路抗HP相关性胃炎胃黏膜损伤、保护胃黏膜的。     

扶阳强心方通过调节ERK1/2信号通路改善CHF血流动力参数

目的:研究扶阳强心方对兔CHF模型血流动力学变化和ERK1/2信号通路调节的影响。方法:将新西兰大白兔40只随机等分为耳缘注射阿霉素并扶阳强心方组(A)、耳缘注射阿霉素并地高辛组(B)、耳缘注射阿霉素组(C)、正常对照组(D)共4组,A、B、C组采用注射阿霉素的方法构建CHF模型,D组不做任何处理。造模后第14天开始给药,A组用扶阳强心方中药浸膏溶液(12 m L·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,B组用地高辛(1.25μg·m L~(-1)·d~(-1))灌胃,C、D组分别给予等量生理盐水灌胃。以上各组连续灌胃30 d后行超声心动图观察其血流动力学变化,苏木素-伊红(HE)染色观察各组组织形态学差异,RT-PCR与Western blot分别检测ERK1/2mRNA和蛋白表达。结果:与C组相比较,A和B组LVSD、LVDD明显降低(P0.05),LVFS、LVEF显著升高(P0.05)。HE染色显示A、B两组心肌纤维化程度有所改善,并且两组改善情况相似。RT-PCR检测:与D组比较,A、B、C3组兔心肌组织ERK1/2 mRNA表达明显升高(P0.05);治疗后,与C组比较,A组ERK1/2 mRNA表达均明显下调(P0.05),B组ERK1 mRNA表达显著下调(P0.05)。与B组比较,A组ERK1/2 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。与C组比较,A、B两组ERK1/2蛋白表达显著减少(P0.05)。结论:扶阳强心方能明显改善兔CHF兔血流动力学参数,其机制可能是通过调控CHF模型兔心肌组织内ERK1/2信号通路,影响ERK1/2信号通路的活化而改善血流动力学参数。