热疗对肺癌A549细胞周期和凋亡的影响

目的:研究在不同温度、不同加热时间的条件下热疗对人肺腺癌A549细胞生长的影响。方法:不同温度、不同时间加热后,采用流式细胞技术观察热疗对人肺腺癌A549细胞株细胞周期和凋亡的影响。结果:流式细胞技术检测显示A549细胞经热疗处理后,细胞生长相应的滞留于细胞生长周期的G1期,细胞凋亡明显,细胞减少。热疗在不同温度、不同时间加热时间的条件下,导致A549细胞出现凋亡和坏死的程度不同,其中加热至42℃维持2 h处理组中凋亡最为明显。结论:热疗可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,使细胞周期阻滞于G1期,并且在加热至42℃维持2 h时细胞凋亡最为明显。     

不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞生长及JNK磷酸化的影响

目的:研究热疗及化疗联合对肺癌A549细胞生长的影响及其可能的机制.方法:以不同的临床常用温度(39 ℃、41 ℃、43 ℃、45 ℃)加热联合50 μg/L紫杉醇化疗的方法处理肺癌A549细胞,以37 ℃加热联合紫杉醇处理的A549细胞和未处理的A549细胞作对照.应用噻唑蓝比色法检测各组细胞增殖率的变化,损伤修复试验比较各组细胞的侵袭力,Western blotting检测JNK磷酸化水平.另取A549细胞如上分组,加入JNK特异性抑制剂SP600125预处理30 min,同法检测上述指标.结果:A549细胞的增殖率有随温度的升高而降低的趋势(P<0.05),并以43 ℃组最低.给予JNK特异性抑制剂SP600125后,除39 ℃组外,细胞增殖率均较加入前升高(P<0.05);细胞的侵袭力变化具有与此相似的趋势;43 ℃组JNK磷酸化水平最高,39 ℃组几乎未检测到JNK的磷酸化,差异有统计学意义(P<0.05).结论:不同温度热疗联合紫杉醇作用于肺癌A549细胞后,可对细胞产生不同程度的抑制作用,这种抑制作用可能是通过不同程度地激活JNK信号通路而产生的.     

不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖及Akt蛋白表达的影响

目的:探讨不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及可能机制.方法:采用不同温度(39 ℃,41 ℃,43 ℃, 45 ℃)热疗联合化疗(50 μg/L紫杉醇)处理A549细胞,以未处理的A549细胞作空白对照,应用MTT法检测各组细胞的增殖率,Western Blotting观察各组细胞Akt磷酸化水平(p-Akt)的变化;在43 ℃热疗联合化疗组加入Akt抑制剂Wortmannin预处理30 min,同上方法分别检测细胞的增殖率和p-Akt.结果:A549细胞的增殖率有随温度的升高而降低的趋势,并以43 ℃组最低(F＝18.26,P<0.05);p-Akt亦随温度升高而降低,并以43 ℃组最低(F=14.25,P<0.05).加入抑制剂Wortmannin后,与未加抑制剂相比,43 ℃热疗联合化疗组p-Akt降至最低,细胞增殖率降低(P<0.05).结论:不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖均有抑制作用,并以43 ℃为最佳,这种抑制作用可能与抑制Akt信号转导通路的激活有关.     

热化联合对肺癌患者A549细胞生长、c-Jun N-末端激酶磷酸化及热休克蛋白70表达的影响

目的观察热化联合对肺癌患者A549细胞生长的影响及机制探讨。方法对A549细胞分别进行单独热疗、单独化疗,热化联合干预及热化联合并SP600125干预,同时选取未做任何处理的A549细胞作为对照组。观察各组细胞增殖率、细胞侵袭力的变化。同时采用蛋白免疫印记法(Western Bolt)检测JNK磷酸化以及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果热化联合组的A549细胞增值率明显低于单独热疗、单独化疗和热化联合并SP600125组(P<0.05)。热化联合组JNK磷酸化表达明显高于对照组及单独化疗组(P<0.05),热化联合组HSP70表达明显低于单独热疗组(P<0.05)。热化联合干预下,p-JNK表达水平出现上升,与对照组、单独热疗组和单独化疗组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);热化联合并SP600125组的p-JNK的表达水平较热化联合组显著下降(P<0.05)。结论热化联合抑制A549细胞增殖的效果优于单独热疗或单独化疗,作用机制可能与激活JNK信号通路或抑制HSP70表达有关。     

芹菜素促肺癌A549细胞的凋亡作用研究

目的探讨芹菜素对肺癌A549细胞诱导凋亡作用。方法采用不同浓度的芹菜素作用于常规培养的肺癌A549细胞株,根据给药的不同分为空白对照组、药物对照组和芹菜素高、中、低浓度组。采用MTT法对A549细胞的增值能力进行测,Western blotting检测凋亡相关蛋白Akt的相对表达量,流式细胞术检测A549细胞凋亡水平。结果随着芹菜素浓度的增高,A549细胞的增殖抑制率明显增高,差异具有统计学意义(P0.05);芹菜素可调控肺癌A549细胞凋亡相关蛋白Akt的表达,随着芹菜素浓度的升高,Akt的相对表达量逐渐降低;芹菜素可促进肺癌A549细胞凋亡,凋亡率随其浓度升高和时间延长而增加。结论芹菜素能够有效抑制肺癌A549细胞增值,并诱导其凋亡,可为肺癌的临床治疗提供一定的参考。     

高温对人肺腺癌耐药细胞株A549／DDP放射增敏作用研究

目的观察高温对人肺腺癌耐药细胞株A549／DDP的放射增敏作用并探讨其机制,为临床上联合应用热放疗治疗非小细胞肺癌提供理论依据。方法流式细胞仪检测热疗或热放疗作用后A549／DDP细胞周期的改变,原位末端转移酶标记术（TUNEL）法和流式细胞仪检测热放疗对A549／DDP细胞凋亡的作用;应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SEL-DI—TOF—MS）技术分析各组A549／DDP细胞蛋白质图谱的差异。结果流式细胞仪显示热疗后G2～M期细胞明显增多,Go～G2期细胞明显减少;TUNEL法和流式细胞仪观察到热放疗有诱导A549／DDP细胞凋亡作用;SELDI—TOF-MS技术分析热放疗组中质荷比分别为3974Da,4288Da,4680Da的3种蛋白质表达增高,质荷比为3270Da的蛋白质表达降低;热疗组质荷比分别为4288Da,4680Da的蛋白质表达增高,而质荷比为8941Da的蛋白质表达降低;放疗组只有质荷比4680Da的蛋白质表达增高。结论热疗可能通过影响细胞蛋白质表达,诱导细胞停滞于对放射线敏感的G2～M期,从而诱导细胞凋亡,增加放射敏感性。     

罗格列酮对体外培养人肺癌细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的探讨罗格列酮（Rosiglitazone, ROS）对体外培养人肺癌细胞系A549细胞增殖抑制和凋亡的影响.方法体外培养人脐静脉内皮细胞系（HUVEC）、人肺癌细胞系（A549）,每种细胞实验组中分别加入不同浓度罗格列酮,对照组加入等量PBS.采用改良MTT比色法分别检测罗格列酮作用HUVEC、A549细胞不同时间后的细胞增殖抑制率;流式细胞仪分析法分别检测HUVEC、A549细胞的细胞周期分布及凋亡率;间接免疫荧光流式细胞仪分析法分别检测HUVEC、A549细胞的细胞内蛋白PPARγ表达.结果罗格列酮对A549细胞的增殖具有抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,对HUVEC细胞的增殖抑制作用弱,与A549细胞相比差异有显著性（P〈0.05）;罗格列酮作用于A549细胞后细胞周期分布及凋亡率与HUVEC细胞比较,G0/G1期细胞明显增多,且G1期细胞前出现明显的亚G1凋亡峰;罗格列酮作用于A549细胞后,细胞内 PPARγ的表达进行性上调.结论罗格列酮对肺癌细胞系A549的增殖具有明显抑制作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过活化PPARγ途径诱导细胞凋亡.     

8-溴-7-甲氧基白杨素通过上调Bim诱导肺癌A549细胞凋亡

目的:探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡作用及分子机制。方法:流式细胞术(PI染色)分别检测白杨素及BrMC处理后的细胞凋亡。蛋白印迹法检测BrMC对Bim蛋白表达以及N-乙酰半胱氨酸对BrMC介导Bim表达的影响。siRNA沉默Bim基因后流式细胞仪检测BrMC对细胞凋亡影响。结果:BrMC对A549细胞的凋亡作用较白杨素更强。经BrMC(10μmol/L)处理后,Bim蛋白水平呈时间依赖性增加。siRNA干扰后,BrMC诱导的A549细胞凋亡率明显降低。结论:BrMC通过上调Bim诱导肺癌A549细胞的凋亡。     

二氯化钴所致缺氧对A549细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的:探讨CoCl2作用不同时间所致缺氧对体外培养的人肺腺癌A549细胞株增殖、凋亡和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:对肺腺癌细胞A549分别进行常氧和氯化钴模拟缺氧培养,采用MTT法检测CoCl2作用不同时间所致缺氧对A549细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法测定缺氧不同时间HIF-1αmRNA表达水平的变化。AnnexinV-FITC/PI双标记染色,流式细胞术检测CoCl2作用不同时间缺氧肿瘤细胞凋亡情况。结果:CoCl2对A549细胞增殖抑制作用表现出时间依赖性抑制作用。常氧条件下的A549细胞即有一定水平的HIF-1αmRNA的表达,随着CoCl2作用时间的延长,HIF-1αmRNA水平呈升高趋势,与正常对照组比较,各缺氧组差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、CoCl2作用4、12、24、48 h组细胞凋亡率分别为(0.60±0.10)%、(1.10±0.10)%、(8.63±0.75)%、(12.80±0.85)%和(19.33±0.80)%。结论:CoCl2对A549细胞具有上调HIF-1αmRNA表达作用,可抑制细胞的增殖和一定的凋亡诱导作用,这些说明HIF-1α可能在肺癌的发展中扮演着重要的作用。     

C2-神经酰胺在A549/PC9细胞凋亡中的作用及影响

目的 探讨C₂神经酰胺(鞘磷脂类物质之一)对非小细胞肺癌(A549和PC9)细胞凋亡的影响。方法 培养非小细胞肺癌细胞系(A549和PC9),提取总蛋白进行Western blot,检测两种细胞中凋亡蛋白Caspase-3及cleaved Caspase-3蛋白的表达情况;使用CCK-8比色法筛选药物浓度;Hoechst 33258凋亡染色检查细胞凋亡情况;流式细胞化学术检测细胞凋亡比率,RT-PCR检测凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果 神经酰胺在50μmol/L浓度处理后细胞活力均在70%左右;与对照组相比,神经酰胺组凋亡蛋白表达升高(P<0.05);流式细胞化学术及凋亡染色检测显示神经酰胺处理组凋亡率与对照组相比增加(P<0.05);在基因水平检测mRNA显示凋亡蛋白Caspase-3表达增加(P<0.05)。结论 C₂-神经酰胺可以促使非小细胞肺癌细胞凋亡,从而为临床肺癌的化疗提供新的治疗靶点。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。