IV胶原检测试剂盒性能评价

目的建立IV胶原磁微粒化学发光免疫检测方法。方法采用夹心法,IV包被抗体包被于顺磁微粒上作为固相抗原,样本中的抗原和磁微粒上的抗体特异性结合,再加入酶标抗体形成夹心复合物。结果本试剂盒的线性范围为50-1000ng/mL;空白限(LOB)为0.671ng/mL,检出限(LOD)为2.49ng/mL,功能灵敏度(FS)为4.8ng/mL;分析内精密度4.6%,天间精密度5.8%;总不精密度7.1%;样品的回收率在94.10～103.40%之间。与25种临床治疗药物对检测结果无干扰。结论建立的IV胶原磁微粒化学发光定量免疫分析方法灵敏度高、测定速度快、准确度高及特异性强,利于临床研究的开展,应用和推广前景巨大。     

光激化学发光免疫分析法测定低浓度HBsAg效果评价

目的比较光激化学发光免疫分析法(LICA)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及胶体金法测定低浓度HBsAg,并评价LICA测定HBsAg的临床效果。方法以广西壮族自治区临检中心提供的临界值控制品作为质控,经ECLIA筛选的HBsAg标本吸光度与仪器所给临界值(Cut-off)的比值(COI)为1～50(低浓度)的临床标本80例(观察组),HBsAg COI<1的临床标本30例(对照组),分别使用LICA、ECLIA、ELISA及金标法测定。结果 LICA测定HBsAg的灵敏度为0.25ng/mL,平均批内变异系数(CV)为8.6%;ECLIA法测定HBsAg的灵敏度为0.12ng/mL,CV为7.8%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.50ng/mL,CV为11.9%,胶体金法灵敏度1ng/mL。观察组标本中LICA检出阳性为79例,ELISA检出阳性为75例,胶体金法检出阳性为20例。结论 LICA检测HBsAg与ECLIA有很高的符合率,在低浓度的HBsAg检测中,可最大程度地减少假阴性结果,且该法可进行自动化定量检测,适于临床使用。     

用液相芯片技术定量测定人血清CEA、AFP和HBsAg

 【目的】采用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和乙肝表面抗原(HBsAg),并对该方法进行评价。【方法】制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法对临床血清标本进行测定。【结果】同时检测CEA、AFP和HBsAg时的线性范围分别为0.032～200ng/mL、0.022～55U/mL、0.26～1000ng/mL,最低检测限分别为8.90pg/mL、0.013U/mL、0.24ng/mL,批内变异系数(CV)<9%,批间CV<14%。检测CEA、AFP、HBsAg的灵敏度分别为96.4%、95.8%、92%,特异度分别为95.6%、94.2%、100%,准确度分别为96%、95%、96%。其检测结果与化学发光免疫分析法(CLIA)或时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)之间呈显著的等级相关关系。该方法仅需1!L标本,3h即可完成检测。【结论】液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有临床应用潜力。     

雅培i2000化学发光分析仪检测降钙素原的 性能评估

目的 对新上市的雅培降钙素原（procalcitonin,PCT）磁微粒化学发光检测试剂进行性能评估。方法 参照中国卫生行业标准及美国临床和实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）文件要求,以法国梅里埃PCT测定试剂盒为参比试剂,从精密度、线性范围、正确度、参考区间等方面分析雅培i2000化学发光分析仪检测PCT的性能。结果 雅培i2000化学发光分析仪检测PCT的批内精密度低值和高值的变异系数（coefficient of variation,CV）分别为2.5%和2.4%,批间精密度低值和高值的CV分别为3.0%和3.1%。线性范围为0~100ng/ml,相关系数r2=0.9923,满足行业标准。生物参考区间为≤0.05ng/ml。雅培i2000与梅里埃mini VIDAS相比,检测结果普遍偏低,存在明显的负偏倚。结论 雅培i2000化学发光分析仪检测PCT整体性能良好,能满足实验室的工作要求,但实验室在开展PCT检测及更换检测方法时应进行性能验证和方法学比对研究。     

乙型肝炎病毒e抗原(磁微粒化学发光法)试剂盒评价

目的本公司旨在建立乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)磁微粒化学发光免疫检测方法,为乙型肝炎疾病的治疗提供可靠的性能指标。方法本公司采用夹心法,固相顺磁微粒包被技术,样本中的HBeAg和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Anti-HBe与包被在磁微粒上的AntiHBe形成夹心复合物,通过与参比试剂盒进行临床比对,保证其有同等的临床诊断价值。结果本试剂盒的线性范围为0.1-200 PEI U/mL;空白限(LOB)为0.02 PEI U/mL,检出限(LOD)为0.04 PEI U/mL,功能灵敏度(FS)为0.05 PEI U/mL;分析内精密度8%,天间精密度10%;总不精密度15%;样品的回收率在85-115%之间。与血红蛋白、胆红素、甘油三脂无交叉。结论建立的乙型肝炎病毒e抗原磁微粒化学发光定量免疫分析方法灵敏度高、测定速度快、准确度高及特异性强,利于临床研究的开展,应用和推广前景巨大。     

精氨酸对热加速稳定性的影响

目的基于磁微粒化学发光法甲胎蛋白(AFP)试剂盒研究精氨酸洗脱液对热加速稳定性的影响,为磁微粒化学发光试剂盒热加速稳定性提供一种新的解决方法。方法采用化学发光法研究精氨酸洗脱液对热加速稳定性的影响。结果通过精氨酸洗脱液对包被后磁微粒的洗脱处理可明显提高磁微粒AFP试剂盒热加速稳定性。结论通过精氨酸洗脱液洗脱处理的方法可提高试剂盒磁微粒混悬液组分热加速稳定性,缩短热处理时间,降低时间成本,更加快速便捷。     

磁定量免疫层析法降钙素原试剂盒性能评估研究

目的:评价磁定量免疫层析法降钙素原(PCT)检测试剂盒的临床性能。方法:以梅里埃VIDAS PCT试剂盒为参比试剂,对PCT检测试剂盒进行精密度、线性范围、方法学一致性的比对研究。结果:PCT检测试剂盒批内低值和高值的变异系数(CV)分别为6.67%(0.49ng/ml)和4.39%(4.89ng/ml),总精密度为7.26%(0.48ng/ml)和4.74%(4.91ng/ml),满足精密度检测要求。试剂盒线性范围具有良好的线性梯度关系(r2=0.9989)。方法学比对试验结果显示,PCT试剂盒检测结果与VIDAS检测结果具有良好的相关性,相关系数r2=0.9668,临床参考值0.5ng/ml和2ng/ml的检测结果与VIDAS的符合率为94.5%和93.6%,表明两者具有很好的一致性。结论:PCT检测试剂盒与VIDAS试剂盒在临床应用上具有等效性,可用于临床诊断及疗效监控。     

探讨样本吸附反应杯对临床检验结果的影响及解决办法

目的研究磁微粒化学发光平台中,样本吸附反应杯造成检测结果的假阳性,为医学实验室提供一种研究样本吸附的方法,并提出相关解决办法。方法首先对磁微粒化学发光和酶联免疫吸附测定(ELISA)平台间测试结果进行比对,确认平台差异标本,然后通过替换磁微粒化学发光试剂盒中磁微粒组分,查找造成平台差异的主要原因,最后在样本稀释液中加入表面活性剂,试图通过表面活性剂的作用,使磁微粒化学发光平台与ELISA平台检测结果一致。结果 5例样本出现平台间差异,其在磁微粒平台全部为阳性,ELISA平台全部为阴性;将磁微粒试剂盒中磁微粒组分替换成缓冲液后,其检测结果仍为阳性,证实磁微粒平台样本与反应杯发生非特异性结合;通过在样本稀释液中添加0.5%Triton X-100后,5例样本在磁微粒化学发光平台的假阳性现象消失。结论磁微粒化学发光平台检测结果易受非特异性结合因素影响,特别是在间接法免疫分析中,人体内免疫球蛋白非特异性结合在反应杯上,导致检测结果偏高,在样本稀释过程中加入适当浓度的表面活性剂可以降低此现象的发生概率。     

ELISA检测HBsAg结果判定方式的探讨

目的 :ELISA法测定HBsAg结果判定方式P/N比值法与P/C比值法进行比较 ,以便寻求更好的判定方式。方法 :将 1ng/mL、5ng/mL临界值血清及由高浓度HBsAg稀释的各浓度血清随常规标本一起检测 ,并计算P/N比值和P/C比值 ,将不同浓度HBsAgP/N比值和P/C比值结果 ,比较其批内变异系数 ,通过对具有代表性的 62ng/mL血清用不同批号试剂进行检测 ,观察其批间差异 ,并用两个临床低浓度标本血清进行验证。结果 :不同浓度HBsAGP/N比值的批内变异系数为 1 3.5 %～ 38.6% ,P/C比值的批内变异系数 1 4.4%～ 2 0 %。其批间结果经统计学t检验 ,P/N比值有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,P/C比值无差异 (P >0 .0 5 ) ,用两个临床低浓度标本血清进行验证 ,P/C比值比P/N比值稳定。结论 :以P/C比值代替P/N比值报告结果 ,其批内、批间差异较小 ,利于室内质控 ,是ELISA法检测HBsAg法检测HB sAg可靠的结果判定方式     

sST2检测的性能评价及其在心力衰竭中的临床应用

目的对可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulating express gene 2,sST2)检测试剂盒的性能进行评价,并探讨sST2在心力衰竭中的临床应用。方法选取2015年8月—2016年8月确诊为心力衰竭的患者60例作为实验组和健康体检者50例作为对照组,检测两组sST2和N末端脑钠肽前体(N terminal pro B-type natriureticpeptide,NT-proBNP)浓度,探讨sST2水平与心力衰竭的临床联系,比较两指标对心衰的诊断价值和相关性分析。结果 sST2检测试剂盒批内精密度变异系数(coefficient of variation,CV)%分别为4.8%和2.8%,批间精密度CV%分别为5.9%和6.7%,线性范围为0~206.622 ng/mL。实验组sST2浓度为(52.63±9.38)ng/mL,与对照组(20.93±9.76)ng/mL相比,差异有统计学意义(P0.05);实验组sST2浓度与心功能分级和不同左心室射血分数(left ventricular ejectionfractions,LVEF)有关,Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级心衰患者的sST2浓度分别为(30.42±10.43)ng/mL、(38.10±12.61)ng/mL和(68.52±11.76)ng/mL,差异均有统计学意义(P0.05);LVEF0.5和LVEF0.5的患者sST2浓度分别为(39.41±10.32)ng/mL和(64.35±9.89)ng/mL,差异有统计学意义(P0.05);sST2浓度在心衰患者起病病因中差异无统计学意义(P0.05);实验组sST2和NT-proBNP相关系数为0.420,心衰患者sST2水平与NT-proBNP存在相关性。结论 sST2检测性能满足实验室检测要求。sST2作为一种新型血清标志物,可与NT-proBNP联合检测,提高对心衰的诊断价值。     

氧氟沙星ELISA检测方法的建立

目的:建立氧氟沙星(OFL)的ELISA快速检测方法。方法:在制备抗OFL单克隆抗体基础上,采用间接竞争酶联免疫吸附方法(ciELISA)检测OFL的含量。结果:筛选得到特异性分泌抗OFL的单克隆抗体细胞株3G3和3D9,应用3G3所制备腹水建立的ciELISA工作曲线的线性范围为0.5-128 ng/mL(r2=0.985 8),最低检出浓度为0.5 ng/mL,半数抑制浓度IC50为7.0 ng/mL,样品加样回收率为84%~120%,批内变异系数和批间变异系数均小于15%。结论:本文建立的氧氟沙星ELISA检测法可满足OFL残留检测的需要。     

人血红蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂的研制及初步应用

目的建立人血红蛋白(Hb)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂,探讨在大便潜血(FOB)检测中的应用。方法采用固相双抗体夹心法建立检测Hb的TRFIA方法,并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果自制试剂盒的最低检测量为0.8ng/mL或32ng(Hb)/g(粪便),线性范围为0.8～1000ng/mL或32～40000ng(Hb)/g(粪便)。分析内和分析间变异系数分别为3.4%～8.9%和5.2%～13.4%。与羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb不发生交叉反应。90份临床确诊标本用本试剂盒和胶体金免疫层析(GICA)试剂同时测试,TRFIA法的敏感性和特异性均为100%,GICA法的灵敏度和特异性分别为95.6%、100%。结论Hb-TRFIA试剂盒各项指标均达到临床检测要求,适用于临床上大便潜血Hb的检测。     

乙型肝炎表面抗体化学发光免疫分析法的建立

目的建立乙型肝炎表面抗体(HBsAb)化学发光免疫分析(CLIA)检测试剂盒。方法采用两株乙型肝炎表面抗原(HBsAg)分别包被磁微球和标记吖啶酯(AE),建立双抗原夹心化学发光免疫检测试剂盒,优化反应体系并对试剂盒的各项性能指标进行评价。结果 HBsAb-CLIA检测试剂的灵敏度为0.03 mIU/ml,测量范围为0.03~960 mIU/ml;分析内和分析间精密度分别为2.94%~5.14%和3.03%~6.33%;与乙型肝炎E抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)等无交叉反应;673名正常人血清测试结果表明该检测试剂的正常参考范围为0~10 mIU/ml;用本试剂与进口雅培同类试剂同时检测1 411例临床样本,其相关方程为y=0.944x+4.056,相关系数为0.947。结论已成功制备操作简单,成本低,各项性能指标均能达到临床检测要求的HBsAb-CLIA试剂盒,可用于临床血清样本HBsAb浓度的测定。     

肌酸激酶同工酶质量法的优势及其性能评价研究

目的 对北京九强生物技术有限公司肌酸激酶同工酶CKMB 测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）进行性能评价。方法 自2019 年5～12 月期间采用东芝2000FR 全自动生化分析仪,检测肌酸激酶同工酶的准确度、精密度、线性范围、空白检测限、最大稀释倍数、临床可报告范围、参考范围进行实验性能验证。统计学方法采用直线相关回归分析。结果 北京九强CKMB 试剂盒的准确度验证中测定值与定值的相对偏差分别为0.62%、-2.89%,批内精密度CV 分别为1.29%、0.67%,批间精密度CV 分别为1.53%、1.14%。线性范围为0.00～218.36 ng/mL,临床可报告范围为0.12～1642.56 ng/mL,随机抽取的20 例健康体检样本的测定结果95%在参考值范围（0.00～5.00 ng/mL）内。结论 该试剂盒的胶乳免疫比浊法测定肌酸激酶同工酶性能符合要求,可满足临床测试要求。     

磁微粒化学发光免疫分析法检测肝纤四项的性能验证

目的对磁微粒化学发光免疫分析法检测透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)性能进行评价。方法按照美国临床实验室标准化委员会文件中的方法对批内精密度、日间精密度、线性范围、携带污染率、正确度进行方法学验证。结果批内精密度和日间精密度高,变异系数(CV)<15%;线性范围性能验证结果肝纤四项线性相关系数R~2均>0.99;携带污染率为0.839 2×10~(-5);肝纤四项低浓度的正确度在-0.66%~7.53%之间,高浓度在-0.93%~7.98%之间。结论磁微粒化学发光免疫分析法检测肝纤四项的五大性能指标均符合标准要求。     

血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的 建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法.方法 采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价.结果 试剂盒的可测范围为3～200 ng/mL,灵敏度为0.12 ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交叉反应低,与2000 U/L的hCG的交叉反应结果小于100 ng/ml.51份血样用本试剂盒与国外同类试剂同时检测,其相关系数为0.95.结论 时间分辨荧光免疫分析法是目前血清游离β-HCG检测中最灵敏的方法.该分析法稳定性好,具有很好的应用前景.     

癌胚抗原化学发光免疫定量分析方法的建立

目的建立检测癌胚抗原化学发光免疫定量分析方法。方法采用双抗体异位点一步夹心法,以癌胚抗原单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行癌胚抗原多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireⅡ发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清CEA的化学发光免疫定量分析法。用该法检测800份正常人血清,确定参考值范围,将临床血清标本100份与bayerAcs:180全自动发光系统进行比较。结果本方法的最低检出量为0.5 ng/mL,线性范围0.5~640.0ng/mL,批内和批间的变异率分别为8.6%和7.5%,回收率在97.4%~101.8%之间。与AFP(3μg/mL)的交叉≤0.015%;与铁蛋白(10μg/mL)≤0.034%;与人血清白蛋白(200 g/L)≤4.5×10-8,与人血清丙球蛋白(100 g/L)≤5.0×10-8,与bayerAcs:180比较相关系数r=0.968(P<0.001)。结论建立的癌胚抗原化学发光免疫分析法可常规用于临床检测。     

用液相芯片技术定量测定人血清CEA、AFP和HBsAg

【目的】采用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和乙肝表面抗原（HBsAg），并对该方法进行评价。【方法】制备抗体交联微球及生物素标记抗体，用双抗体夹心法对临床血清标本进行测定。[结果]同时检测CEA、AFP和HBsAg时的线性范围分别为0．032-200ng／mL、0．022-55U／mL、0．26—1000ng／mL，最低检测限分别为8．90pg／mL、0．013U／mL、0．24ng／mL，批内变异系数（cv）〈9％，批间CV〈14％。检测CEA、AFP、HBsAg的灵敏度分别为96．4％、95．8％、92％，特异度分别为95．6％、94．2％、100％，准确度分别为96％、95％、96％。其检测结果与化学发光免疫分析法（CLIA）或时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）之间呈显著的等级相关关系。该方法仅需1μL标本，3h即可完成检测。【结论】液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点，具有临床应用潜力。     

热力学平衡对加速稳定性的影响

目的 体外诊断试剂的稳定性作为试剂体系的重要技术指标之一,在体外诊断试剂的质量和使用安全中具有重要的指导意义,本文主要以磁微粒β2-MG检测试剂盒为例,为解决磁微粒化学发光试剂稳定性提供一种新思路。方法 通过对化学试剂进行热平衡处理,研究热平衡对稳定性的影响,以2～8℃校准品的发光值（RLU）为对照,测定经处理的试剂放置37℃10 d后的发光值的下降率（ROD）来观察稳定性的改善,并对其进行统计学分析。结果 通过热平衡酶结合物的方式可显著提高磁微粒β2-MG试剂盒热加速稳定性。结论 在不改变配方的条件下仅通过热平衡方式可以显著提高试剂热稳定性,为体外诊断试剂同行提供一种新思路。     

液相芯片技术定量检测人血清PSA反应模式的建立

目的 建立利用液相芯片技术定量检测人血清中前列腺特异性抗原的反应模式,并对该方法进行评价.方法 应用液相芯片技术检测50例前列腺增生患者血清中的前列腺特异性抗原(PSA),评价该方法的线性范围、最低检测限、精密度等指标,并将结果与化学发光免疫分析法(CLLA)进行相关性分析.结果 液相芯片技术检测PSA标准曲线的线性范围为0.022～129.6ng/mL,PSA的最低检测限为0.018ng/mL,检测PSA的批内CV为2.18%～2.28%,批间CV为1.61%～4.18%.用液相芯片技术和化学发光法分别对受检血清标本进行PSA定量分析,结果表明两法差异无显著性(P>0.05),r=0.9984,相关性良好.结论 液相芯片技术具有线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有临床应用潜力.