一种简单快速祛黑色素的改良方法

日常病理工作中的标本有时会遇到黑色素在组织和细胞中沉积,造成组织结构和细胞形态不清楚、细胞的异型性和核分裂观察困难.病理标本处理中使用的脱色素法包括:氯化钾乙醇盐酸法、高锰酸钾草酸法、溴水脱色法、铬酸脱色法、过氧化氢脱色法、过醋酸脱色法等[1].郭以河等[2]报道两种(0.25%高锰酸钾和2%草酸)脱黑色素法.比较常用的是高锰酸钾草酸法和过氧化氢脱色法.用传统高锰酸钾草酸法,容易掉片;过氧化氢脱色法,需24～48 h,耗时较长.本文现采用10%过氧化氢加热处理法,对因黑色素沉积严重影响诊断的组织进行快速处理,时间仅需3～14 min,祛除黑色素的组织细胞形态和结构清晰,免疫组化标记定位准确,取得良好的效果.     

两种快速脱黑色素的方法

某些含有黑色素的肿瘤,由于肿瘤细胞中含有大量的黑色素,在冷冻切片染色中,大量色素遮盖了肿瘤的组织结构,无法正确做出诊断,必须进行脱色素处理。传统的脱黑色素疗法,耗时长（2～3h）,易脱片,不适宜冷冻切片的诊断。我科采用快速脱黑色素法,不仅能够在1—8min内脱掉组织中的黑色素而且能够满足诊断要求,避免了因术中诊断不明确而造成的患者的二次手术,并且该方法适用于石蜡切片、免疫组化切片快速的脱色素。     

DAB显色后去黑色素法在免疫组化中的应用

<正>在病理科的日常工作中,经常会遇到含有黑色素的组织,由于未经染色的黑色素呈棕褐色或深褐色的颗粒,特别是在免疫组化的诊断中,DAB的显色与黑色素的颜色相近,会影响免疫组化结果的判读。去除黑色素的方法有很多,文献报道比较常用的是高锰酸钾草酸法和过氧化氢脱色法[1],但两者均为强氧化剂,在先去除黑色素后再进行相关免疫组化染色时,对抗原有一定的损伤。为解决上述问题,本科室     

免疫组化染色中消除黑色素影响的方法

常规免疫组化通常采用辣根过氧化物酶检测系统，但在富有黑色素细胞的病变中，如S-100蛋白、黑色素相关抗原HMB-45等免疫组化染色阳性反应胞质中的棕黄色颗粒与组织内原有的棕褐色的黑色素颗粒混杂在一起，不易区别，往往给判断造成较大困难，甚至误诊。笔者利用氧化剂先将黑色素脱色，再进行免疫组化染色，效果满意。     

新型黑色素脱色剂的配制和应用

某些人体和肿瘤组织中存在着内源性黑色素,常常影响病理医师对组织切片的观察和诊断,尤其是干扰免疫组化染色的定位表达.在实践工作中,我们结合文献资料[1,2],经过不断摸索,配制了一种新型黑色素脱色剂,能有效地脱去组织中的内源性黑色素,现介绍如下.     

新型黑色素脱色利的配制和应用

某些人体和肿瘤组织中存在着内源性黑色素，常常影响病理医师对组织切片的观察和诊断，尤其是干扰免疫组化染色的定位表达，在实践工作中，我们结合文献资料，经过不断摸索，配制了一种新型黑色素脱色剂，能有效地脱去组织中的内源性黑色素，现介绍如下。     

一种显示黑色素的免疫组织化学新方法

一种显示黑色素的免疫组织化学新方法周素英张谷黑色素细胞肿瘤的诊断与鉴别诊断，往往需要依靠免疫组化染色。但常用的ＡＢＣ法或ＳＰ法中，由于经ＤＡＢ显色后阳性颗粒呈棕黄色，与组织内原有的黑色素难以区别，给免疫反应真假性的判断带来很大的困难。我们建立了一种较...     

恶性黑色素瘤改良脱黑色素的方法和体会

正恶性黑色素瘤是病理科日常工作中经常遇到的一类肿瘤,在经HE染色初诊后,需行免疫组化标记,以进一步明确。但往往因为组织切片中黑色素大量沉积,遮盖了正常组织结构和细胞形态,而这种内源性黑色素颜色与免疫组化染色常用的棕黄色DAB显色剂的颜色近似~[1],给诊断带来困     

强氧化剂脱黑色素对免疫组化染色影响的评估

黑色素瘤是临床上较为常见的皮肤黏膜和色素膜恶性肿瘤,也是发病率增长最快的恶性肿瘤之一[1].免疫组化染色是黑色素瘤病理学诊断常用的检查方法.富含黑色素的瘤组织行免疫组化染色时,组织中沉积的大量黑色素与免疫组化阳性所显示的DAB棕黄色颗粒互相干扰,影响结果判读[2].     

Caspase家族在肿瘤血管生成拟态形成过程中的作用

目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-3及其上游的Caspase-8、Caspase-9在肿瘤血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)中的作用。方法建立C57BL小鼠B16恶性黑色素移植瘤模型,并随机分为Caspase-3抑制剂组、Caspase-8和Caspase-9抑制剂联合用药组、对照组,待成瘤后每日分别注射Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9抑制剂,记录肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线。通过免疫组化-PAS双染法检测并计数各组肿瘤组织VM的形成数目;通过明胶酶谱法检测肿瘤组织中MMP-2和MMP-9的活性。结果与对照组相比,Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤体积的生长速度较缓慢,差异有统计学意义(P<0.05),Caspase-3抑制剂组和Caspase-8、Caspase-9抑制剂联合用药组肿瘤组织中VM的数量小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-2、MMP-9的活性强于Caspase-3抑制剂组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组MMP-9的活性强于Caspase-8、Caspase...     

肝脏组织块脱胆色素的制片方法

在病理技术中 ,人们对色素的处理方法通常用脱黑色素法和脱福尔马林色素法等 ,却没有关于脱胆色素的方法。常用脱色素法对处理胆色素的效果不佳。在日常病检工作和教学研究工作中 ,偶尔遇到肝脏标本被胆汁污染的情况。被胆汁污染的标本用自来水冲洗不能洗脱胆色素 ,组织切片后显微镜下仍可见胆色素沉积在肝组织中 ,影响组织切片的观察和免疫组化染色。胆汁中的有机物不溶于水 ,微溶于醇。笔者采用铬酸 (三氧化铬 )氧化法脱胆色素获得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　选用被胆汁污染的肝脏标本 ,取材 ,组织体积为3ｃｍ× …     

鼻腔恶性黑色素瘤的光镜、电镜及免疫组化研究

目的 探讨鼻腔恶性黑色素瘤的临床病理、免疫组化和超微结构特点.方法 对32例鼻腔黑色素瘤进行临床和病理(HE染色、免疫组织化学染色和电镜)资料观察.结果 临床症状为进行性鼻塞和或鼻衄,6例伴有轻重不等的头痛.12例临床诊断为鼻息肉、鼻窦炎,16例诊断为鼻肿瘤,4例诊断为恶性黑色素瘤.治疗为手术加放、化疗综合手段.生存时间为3-65个月.组织学特征为:黑色素瘤组织结构既有象癌的组织像,又有似肉瘤的组织像,肿瘤细胞大小不一,形态多样,部分病例瘤细胞内外可见粗大的黑色素颗粒.4例电镜检查各种瘤细胞胞浆内均可见数量不等的圆形或椭圆形黑色素小体.免疫组化阳性率分别为HMB4590.6%、S-100100%、Vim71.9%、CK21.1%、EMA8.3%,LCA及Actin不表达.结论 鼻腔性黑色素瘤是一种少见的肿瘤,其生存期短,恶性度高.根据其组织学特点,结合免疫组化染色及电镜下特征,可以作出明确的病理诊断.     

小鼠恶性黑色素移植瘤模型的建立及其淋巴管内皮细胞透明质酸受体1的表达

目的:建立小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型,探讨小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织内淋巴管的生成情况。方法:体外培养B16瘤细胞,接种B16瘤细胞于C57BL/6小鼠右侧背部皮内,构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型;应用H-E染色、淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(1ymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1, LYVE-1)免疫组化染色确认模型和观察肿瘤组织内淋巴管的生成情况。结果:建立了恶性黑色素移植瘤模型;LY- VE-1主要着色于正常组织和移植瘤组织中淋巴管内皮细胞的细胞膜上;恶性黑色素瘤组织中淋巴管密度明显高于正常皮肤组织。结论:构建C57BL/6小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤模型是获得恶性黑色素瘤组织和进一步研究的有效手段;LYVE-1是特异性较高的淋巴管内皮标记物;小鼠皮肤恶性黑色素移植瘤组织中可能存在淋巴管的新生。     

FR显色剂在含色素组织免疫组化染色中的应用

<正>免疫组化染色技术在现代病理诊断工作中起着十分重要的作用。了解常规HE染色无法区分或较难辨别的情况,为病理肿瘤的鉴别诊断、预后判断提供不可或缺的重要依据。但在一些病理组织标本中含有与免疫组化阳性颗粒相近的色素,如黑色素。这些色素沉积若大量存在会不同程度遮盖组织细胞的结构与形态。特别是免疫组化染色时会与DAB显色的阳性颗粒相互干扰,难以区分。对免疫组化结果判读造成一定的影响。这就需要有一些办法来解决。传     

脑脊膜黑色素细胞瘤的临床病理分析

目的：探讨脑脊膜黑色素细胞瘤的临床病理特征、组织发生及预后。方法：报道2例罕见的椎管内软脊膜黑色素细胞瘤（0.05％），并结合国内外文献中报道的58例脑脊膜黑色素细胞瘤进行讨论。结果：2例均为妇性，分别为14岁和46岁，肿瘤均发生于脊髓软脊膜，大体上呈黑色，包膜完整。光镜下见瘤细胞由上皮样细胞和梭形细胞混合而成，细胞无异型，大部分瘤细胞质内含有多量黑色素颗粒，核分裂象无偶见（0－1个／10HPF），无出血坏死。免疫表型HMB45和S－100蛋白呈阳性表达。1例颈髓单发者全切除术后生存14个月，无肿瘤复发，另1例开始为颈髓单发性，本切除术后12年复发，为颈、胸髓多发性，再次行肿瘤部分切除术。结论：脑脊膜黑色素细胞瘤生物学行为相对良性，好发于后颅凹及脊髓的软脑脊膜，具有明显的临床和组织学特征。免疫组化和电镜检查有助于本瘤与其他黑色素性肿瘤的鉴别诊断早期完全切除有望治愈或减少复发，术后放疗对控制复发并无意义。     

中枢神经系统黑色素细胞瘤临床病理分析

目的：探讨中枢神经系统黑色素细胞瘤的临床病理特征。方法：对1例发生于脊髓的黑色素细胞瘤的临床表现、组织形态、免疫组织化学等进行分析,并复习相关文献。结果：患者女性,52岁,右侧肢体活动不灵活9个月。MRI示颈3、4椎体水平见一软圆形界限清楚肿块,大小约3.7 cm ×0.8 cm ×1.3 cm。镜检示肿瘤细胞排列呈巢团状、漩涡状及束状;瘤细胞呈软圆形或梭形,部分细胞呈上皮样,大部分细胞质内见多量黑色素颗粒;瘤细胞无明显异型,无核分裂像。免疫组织化学Vimentin、HMB45、S-100、Melan-A均为阳性,Ki67指数5%~10%;其余Ckpan、EMA、GFAP、CD34、SMA、Desmin和P53均为阴性。结论：黑色素细胞瘤是一种罕见的低度恶性中间型肿瘤,临床上易与弥漫性黑色素细胞增多症和黑色素瘤病、恶性黑色素瘤以及伴有黑色素分化的其他肿瘤混淆。其诊断主要靠病理形态学特征、免疫组化、影像学及电镜检查有助于诊断与鉴别诊断。治疗主要依靠肿块切除,必要时可局部放疗,术后随访非常重要。     

乳腺肿瘤冷冻切片诊断中快速EliVision技术的价值

目的探讨快速免疫组化技术（immunohistochemistry,IHC）在乳腺肿瘤术中冷冻病理诊断中的应用价值。方法采用EliVision快速IHC技术检测乳腺肿瘤冷冻切片中常用抗体（SMA、CK5／6、p63、c—erbB一2、CD34、CD117、ER、PR）的表达情况,以相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法以及冰余组织EliVision常规免疫组化法作对照。结果EliVision快速IHC免疫组化法在30min内完成检测,7种抗体显示明确而定位可靠的阳性表达结果（c—erbB-2仅在常规IHC中表达）,阳性率及阳性强度高于相应病例冷冻切片的EliVision常规IHC法、接近于冰余组织EliVision常规IHC法。结论EliVision快速IHC技术可以作为乳腺肿瘤术中冷冻切片病理诊断中有价值的辅助手段。     

鸡尾酒双染CD31/D2-40和CKpan在脉管癌栓病理诊断中的应用价值

脉管癌栓与肿瘤患者的术后辅助治疗及预后关系密切。近年多采用免疫组化CD31/D2-40标记血管、淋巴管内皮细胞,然而仅使用单项的免疫组化标记,仍无法确定脉管内细胞团是否有癌细胞,免疫组化鸡尾酒双染法是一种可以在组织中同时标记两类不同抗原的方法,可同时双染脉管内皮细胞和其内癌细胞[1-2]。本实验联合检测CD31/D2-40和上皮细胞标志物(CKpan),分别行HE染色、免疫组化单染CD31/D2-40、鸡尾酒双染CD31/D2-40/CKpan,分析鸡尾酒双染法在脉管癌栓病理诊断中的价值。     

Polymer双染检测技术在肿瘤研究中的应用及改进

在肿瘤的诊断研究中,免疫组化是常用的方法之一,包括PAP法、ABC法、LSAB法、SP法、LDP法、EPOS法、CSA法等[1].这些方法都常用来检测组织细胞中一种抗原成分.如果要明确两种抗原在同一细胞或组织内的相互关系,就需要进行免疫组化的双重标记.     

免疫组化法与双色银染原位杂交法用于乳腺癌HER-2检测诊断中的应用价值分析

目的 探讨免疫组化法与双色银染原位杂交(DISH)法用于乳腺癌HER-2检测诊断中的价值情况.方法 选取本院收治的乳腺癌患者242例,单侧肿瘤患者201例,双侧肿瘤患者41例,比较分析免疫组化法与双色银染原位杂交对肿瘤组织HER-2检测诊断的阳性率情况等,完成比较评价.结果 本研究中共纳入242例,均为女性,平均年龄43.7±5.4岁;单侧肿瘤患者201例,平均年龄42.3±5.9岁,淋巴转移患者23例,占11.44%;双侧肿瘤患者41例,平均年龄41.9±5.8岁,6例淋巴转移(14.63%).使用DISH法检测HER-2的阳性率为83.06%,略低于免疫组化法的检出阳性率87.19%, P<0.05.进一步分析DISH和免疫组化检测HER-2阳性情况,发现DISH和IHC检测方法检测HER-2阴性的一致率为100%,IHC(+)与DISH检测一致率为83.72%,IHC(++)与DISH检测一致率为97.37%,IHC(+++)与DISH检测一致率为98.91%.结论 原位杂交法和免疫组化方法两种不同方法在检测乳腺癌HER-2表达中检出阳性率均良好,IHC检出HER-2表达越高,DISH检测的阳性率与其一致性也越高.作为新方法的DISH法值得临床推广.