茸菖胶囊对戊四唑致痫大鼠学习记忆能力及海马苔藓纤维出芽的影响

[目的]观察茸菖胶囊对戊四唑致癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织苔藓纤维发芽(MFS)的影响。[方法]以戊四唑点燃大鼠为模型,随机分为中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、丙戊酸钠组、模型组、正常组,水迷宫实验记录逃避潜伏期和跨越平台次数,戊四唑惊厥阈实验测定惊厥潜伏期,Timm染色法观察海马苔鲜纤维出芽。[结果]各治疗组大鼠与治疗前相比,均可减少大鼠的发作程度,水迷宫实验:中药组逃避潜伏期和跨越平台次数均明显短于模型组(P>0.05)。Timm染色结果表明:各治疗组海马CA3区及齿状回分子层Timm染色颗粒MFS评分低于模型组(P<0.01)。[结论]茸菖胶囊可以有效控制癫痫大鼠的发作次数及级别,改善戊四唑致癫痫大鼠的学习记忆能力,其作用机制与抑制海葬纤维异常出芽,从而保护海马神经元有关。     

茸菖胶囊对雌性癫痫大鼠动情期雌激素及其受体的影响

目的:观察茸菖胶囊对雌性癫痫模型大鼠动情期雌激素及其受体的影响,探讨茸菖胶囊治疗月经性癫痫的作用机制.方法:选取动情周期规律的大鼠48只,分为正常组、模型组、丙戊酸钠组、拉莫三嗪组、茸菖低剂量组、茸菖高剂量组,每组8只.除正常组外,其余各组大鼠以戊四唑诱导癫痫模型.正常组不作处理;模型组灌服0.9％氯化钠溶液;丙戊酸钠...     

茸菖胶囊对幼年大鼠癫痫后NRSF和BDNF蛋白表达的影响

[目的]研究茸菖胶囊对幼年大鼠癫痫后神经元限制性沉默因子(NRSF)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。[方法]建立戊四唑点燃癫痫模型,分为中药高、中、低剂量组、西药组、模型组和空白组,用蛋白免疫印迹杂交法检测各组NRSF和BDNF蛋白的变化。[结果]幼年大鼠致痫后模型组海马NRSF和BDNF蛋白表达升高,中药高剂量组可显著降低大鼠海马齿状回NRSF和BDNF蛋白表达(P0.01),作用优于西药组和其他中药组。[结论]中药复方茸菖胶囊抗癫痫及改善癫痫后认知障碍机制可能与调控组蛋白乙酰化修饰及其所介导的神经元基因表达有关。     

茸菖胶囊对戊四唑点燃模型大鼠海马BDNF及其受体TrkB表达的影响

[目的] 阐明脑源性神经营养因子(BDNF)及其功能受体酷氨酸激酶B(TrkB)在癫痫后认知障碍中的作用以及茸菖胶囊对海马脑源性神经营养因子及其受体TrkB的远期影响.[方法] 以戊四唑点燃大鼠为模型,随机分为中药组?西药组?模型组和正常组,观察致痫大鼠的惊厥发作次数?级别?潜伏期,采用RT-PCR检测BDNF和TrkB基因表达水平.[结果] 各治疗组大鼠与治疗前相比,均可减少大鼠的发作程度,治疗前造模各组的发作次数无统计学差异(P>0.05),茸菖胶囊治疗后,治疗大鼠的发作评分明显下降,与模型组相比,各治疗组的发作评分较低(P<0.05),茸菖胶囊组与丙戊酸钠组的评分无统计学差异(P>0.05).各组海马组织BDNF mRNA表达显示,模型组海马组织BDNF mRNA表达较正常组?中药组和VPA组明显增多,中药组表达较其他各组增多均有统计学差异(P<0.01).海马组织TrkB mRNA表达与BDNF mRNA表达趋势相同.[结论] 茸菖胶囊可以有效控制癫痫大鼠的发作次数及级别,其作用机制与调控海马组织中BDNF?TrkB mRNA的表达有关.     

茸菖胶囊预处理对致痫大鼠抗惊厥行为的影响

目的通过茸菖胶囊预处理干预戊四唑诱导癫痫大鼠抗惊厥行为的影响。方法将SD大鼠随机分正常组、模型组、丙戊酸钠组、茸菖胶囊组。模型组在腹腔注射前给予生理盐水灌胃,丙戊酸钠组和茸菖胶囊组亦在腹腔注射前给予预治疗量灌胃,随后进行PTZ腹腔注射。模型组、丙戊酸钠组、茸菖胶囊组均采用PTZ慢性点燃动物模型。1次/日,注射后30min内观察大鼠行为学变化,连续28天。正常组腹腔注射等剂量生理盐水。随后对各组体重、惊厥行为学、惊厥潜伏期、空间学习记忆能力等进行统计学分析。结果 (1)惊厥潜伏期比较:预处理结束后,茸菖胶囊组、丙戊酸钠组惊厥潜伏期均要长于模型组(P0.05);(2)逃避潜伏期的比较:随着训练时间延长,各组逃避潜伏期变化情况不一,到训练第4天,模型组、丙戊酸钠组逃避潜伏期较正常组和茸菖胶囊组明显延长(P0.05);(3)跨越平台次数的比较:茸菖胶囊组跨越平台数均明显高于正常组、模型组、丙戊酸钠组(P0.05)。结论通过预处理给药的方法,可以明显提高致痫大鼠惊厥潜伏期,减轻发作程度,并能提高致痫大鼠认知功能,但影响致痫大鼠体重轻微变化。     

熄风胶囊、茸菖胶囊、抗痫胶囊对海马神经元NMDA受体电流及细胞内游离钙的影响

目的:探讨中药复方(熄风胶囊、茸菖胶囊、抗痫胶囊)对海马神经元惊厥损伤的保护作用和作用机制。方法:将无镁诱导的海马神经元放电模型分为正常组、无镁组、MK801(地卓西平)组、抗痫胶囊组、茸菖胶囊组、熄风胶囊组,给予相应处理后6h、24h、72h,比较神经元放电频率、NMDA受体通道电流及细胞内游离[Ca~(2+)]i浓度。结果:放电频率:6h、24h各组较无镁组放电次数减少;72h MK801、抗痫组、熄风组较无镁组放电次数减少。NMDA受体通道电流:72h无镁组与正常组比较,通道电流增多;6h、72h抗痫组,72h茸菖组较无镁组通道电流减少。细胞内游离[Ca~(2+)]i浓度:三个时点无镁组Ca~(2+)浓度高于正常组;三个时点MK801组、熄风胶囊组,24h、72h抗痫胶囊组,72h茸菖胶囊组较无镁组Ca~(2+)浓度降低。结论:熄风胶囊、茸菖胶囊、抗痫胶囊可能通过减少NMDA受体通道电流,降低细胞内Ca~(2+)浓度,达到抑制海马神经元反复高频放电,减轻Ca~(2+)超载造成的细胞毒性,从而起到神经保护作用。     

茸菖胶囊对癫痫后认知障碍幼年大鼠神经发生的影响

目的观察茸菖胶囊对癫痫后认知障碍幼年大鼠学习记忆能力和神经发生的影响,探讨其治疗癫痫后认知障碍的可能机制。方法 102只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、西药组。运用戊四唑点燃法复制癫痫大鼠模型,并经水迷宫实验筛选认知障碍大鼠。正常组不予处理,模型组予生理盐水灌胃,中药高、中、低剂量组分别予浓度为0.44g/ml、0.22g/ml、0.11g/ml茸菖胶囊溶液灌胃,西药组予40mg/ml德巴金溶液灌胃,每次3ml,每日2次,均给药28d。每组又分别于5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记后24h和28d取材。采用水迷宫实验于治疗前后观察大鼠逃避潜伏期和跨越平台次数;观察BrdU阳性细胞形态并计数进行BrdU免疫组化评分,计算新生神经细胞迁移比率(Br-dU/DCX)、新生神经细胞分化为神经元比率(BrdU/NeuN)和新生神经细胞分化为胶质细胞比率(BrdU/GFAP)。结果治疗后西药组和中药高、中剂量组大鼠逃避潜伏期较模型组缩短(P<0.05或P<0.01),并且中药高剂量组较中药中、低剂量组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05)。中药高剂量组大鼠跨越平台的次数显著高于模型组和中药低剂量组(P<0.05)。与模型组比较,24h时中药高剂量组、西药组和28d时中药高剂量组、中药中剂量组、西药组BrdU免疫组化评分显著减少(P<0.05或P<0.01)。西药组、中药高剂量组、中药中剂量组BrdU/DCX、BrdU/NeuN低于模型组(P<0.05或P<0.01);中药高剂量组BrdU/NeuN明显低于中药中、低剂量组(P<0.01);各组大鼠BrdU/GFAP比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论茸菖胶囊可改善癫痫后认知障碍大鼠学习记忆功能,其机制可能为抑制大鼠海马齿状回神经前体细胞增、异常迁移和分化。     

平痫冲剂对幼龄癫痫模型大鼠血脑屏障通透性及相关蛋白Cx43、ICAM-1表达的影响

目的:观察平痫冲剂对戊四唑点燃幼龄癫痫模型大鼠血脑屏障病理结构及相关蛋白Cx43、ICAM-l表达的影响.方法:抽选60只空白大鼠为空白组,癫痫模型制备成功后将180只幼龄大鼠随机分为模型组、丙戊酸钠组(0.02 g/mL)及平痫冲剂组(0.19g/mL),每组各60只,灌胃21天,每天1次,空白组予等量生理盐水灌胃....     

益脑康胶囊对脑梗死大鼠溶栓后血脑屏障的保护作用及对ZO-1蛋白表达的影响

目的:观察益脑康胶囊(YC)配伍对急性脑梗死大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂rt-PA溶栓后血脑屏障通透性及紧密连接的附着蛋白(ZO-1)蛋白表达的影响.方法:将SD大鼠随机等分为假手术组、溶栓组、益脑康胶囊低剂量组(1 g·kg-1)、益脑康胶囊高剂量组(3 g·kg-1),连续口服3d.建立大鼠自体血栓栓塞大脑中动脉闭塞模型,采用分光光度计法及Western blot法分别检测大鼠脑组织伊文思蓝含量及ZO-1蛋白的表达.结果:与假手术组相比,各组脑内EB含量均显著增高,ZO-1蛋白水平明显降低;与溶栓组相比,YC低剂量组脑内EB含量差异不显著,高剂量组脑内EB含量显著下降,高、低剂量组ZO-1蛋白表达水平均显著增加;与YC低剂量组相比,高剂量组脑内EB含量显著下降,ZO-1蛋白表达水平显著增加.结论:益脑康胶囊可以减轻溶栓后血脑屏障破坏,可能与其上调ZO-1蛋白的表达有关.     

石菖蒲对血脑屏障超微结构及通透性的影响

目的:研究石菖蒲对大鼠血脑屏障超微结构及通透性的影响,证实其"醒脑开窍"之药理作用.方法:用电镜观察大鼠大脑皮层血脑屏障的超微结构在给药前后的变化,测定伊文思蓝(EB)的含量,并采用HPLC测定石菖蒲对中枢神经系统药苯妥英钠在脑内的蓄积程度的影响.结果:石菖蒲可以影响大鼠血脑屏障的超微结构,使内皮细胞之间的紧密连接松弛;同时,增加伊文思蓝透过血脑屏障的含量,促进中枢神经系统药苯妥英钠在脑内的蓄积,即增加血脑屏障的通透性.结论:说明石菖蒲能够提高血脑屏障通透性,具有醒脑开窍的药理作用.     

高剂量抗痫胶囊对致痫小鼠齿状回DNA和RNA的影响

目的：探讨戊四唑对小鼠鼠状回DNA和RNA的变化。方法：选用健康昆明种小鼠（2级）40只,体重18－22g。分3组即正常对照组、病模组、高剂量抗痫胶囊组。采用吖啶橙荧光染色法,观察抗痫胶囊对戊四唑致痫后小鼠齿状回DNA和RNA的变化。结果：与对照组相比,戊四唑致痫组小鼠齿状回颗粒层和苔藓纤维内DNA和RNA荧光染色强度增强、抗痫胶囊高剂量组较病模组较高模组荧光强度减弱,但高于正常组。结论：齿状回神经内DNA和RNA的变化与戊四唑致痫小鼠神经元的兴奋性损伤密切相关,抗痫胶囊对癫痫小鼠神经元兴奋性有一定的抑制作用。     

基于网络药理学、分子对接、分子动力学模拟探讨茸菖胶囊治疗小儿癫痫的靶点机制

[目的]笔者团队前期研究已证实茸菖胶囊治疗小儿癫痫（epilepsy）与雌激素水平、自噬过程、AMPK、mTOR信号通路有关,但暂无成份与靶点间的关系,研究将通过网络药理学、分子对接、分子动力学模拟的方法探讨茸菖胶囊多分子、多靶点、多通路的作用机制,为其基础及临床研究提供参考。[方法]通过TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM及文献检索筛选出茸菖胶囊的生物活性成分及靶点,通过GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库检索疾病靶点信息并取药物、疾病的交集靶点;使用String数据库获得蛋白相互作用关系,并利用Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点图以及药物-靶点-KEGG网络关系图;利用AutoDockTools、Vina软件进行分子对接;利用Gromacs软件对ESR1与柚皮素进行分子动力学模拟。[结果]茸菖胶囊中共筛选出117个活性成份,115个药物疾病交集靶点,通过CytoNCA插件筛选出18个核心靶点;GO分析表明,主要涉及类固醇代谢过程、对金属离子的反应等;KEGG分析表明,主要涉及脂质和动脉粥样硬化通路、AGE-RAGE信号通路等;分子对接结果显示30...     

针刺对戊四唑致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的观察针刺对戊四唑诱发癫痫大鼠海马神经元损伤的保护作用。方法将SD大鼠72只随机分为模型组、针刺组、正常组。正常组腹腔注射0.9%氯化钠注射液(2 mL)、其余各组腹腔注射戊四唑(50 mg/kg),于注射后4 h与24 h两个时间段取脑组织。分别于光镜下和电镜下观察海马结构改变。结果癫痫发作后4 h光镜、电镜均可见大鼠海马神经元损伤,24 h后损伤进一步加重;针刺组大鼠海马神经元损伤明显减轻。结论针刺具有明显保护癫痫继发脑神经元损伤作用。     

抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠行为的影响及其对海马神经元的保护作用。方法观察模型组、抗痫煎剂低剂量组、抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组的大鼠痫性发作,采用免疫组化染色法观察Bcl-2蛋白的表达。结果抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组与模型组相比,癫痫发作潜伏期差异有统计学意义。抗痫煎剂低、高剂量组、丙戊酸钠组较模型组Bcl-2细胞增多。结论抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元有一定的保护作用。     

治偏痛胶囊治疗偏头痛的疗效及对血浆5-羟色胺的影响

目的:探讨治偏痛胶囊治疗偏头痛的疗效及对血浆5-羟色胺(5-HT)的影响.方法:将124例偏头痛患者随机分为观察组和对照组各62例.对照组采用氟桂利嗪胶囊,5 mg/次,每晚服用1次;观察组采用治偏痛胶囊,4粒/次,3次/d,口服.治疗期间若发生难以忍受疼痛,均可采用布洛芬片,0.1g/次,口服.两组疗程均为8周.观察头痛发作次数、头痛发作天数、头痛发作程度等临床症状;经颅多普勒(TCD)检测血液速度;检测血浆5-HT水平.结果:观察组总有效率(90.32％)优于对照组(77.41％)(P＜0.05);观察组证候疗效总有效率(91.93％)优于对照组(75.81％)(P＜0.05);治疗后观察组头痛发作次数、头痛发作程度及头痛发作天数均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组血浆5-HT水平升高,优于对照组(P＜0.01);观察组在研究期间止痛药使用量低于对照组(P＜0.01);观察组双侧大脑中动脉(MCA),大脑前动脉(ACA),大脑后动脉(PCA),椎动脉的颅内段(VA)和基底动脉(BA)的血流速度均低于对照组(P＜0.01).结论:治偏痛胶囊能降低颅内动脉平均血流速度,改善偏头痛临床症状,治疗偏头痛疗效显著,其作用机制可能与提高患者血浆5-HT含量有关.     

康痫丸对致痫大鼠行为及病理学影响

目的 探讨康痫丸治疗原发性癫痫的作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、康痫丸组,每组10只.采用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量造模.观察药物处理后致痫大鼠癫痫发作行为的改变,大脑海马和皮层病理形态学改变.结果 康痫丸能延长癫痫发作潜伏时间并缩短惊厥时间.改善行为学异常状态,与癫痫模型组比较均有显著性差异;癫痫模型组出现以神经元变性甚至细胞坏死为主的病理变化,康痫丸变性、坏死神经元百分比明显低于模型组.结论 康痫丸可减轻致痫大鼠异常行为发作程度,减轻致痫大鼠的神经元损伤.     

升降胶囊对化疗致呕家鸽体内5-羟色胺水平的影响

目的：观察升降胶囊对顺铂所致家鸽呕吐的作用,探讨其防治呕吐的机制。方法：采用家鸽腹腔注射顺铂制造呕吐模型,观察家鸽呕吐频率及呕吐潜伏期;用高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ED）检测家鸽血清、十二指肠组织中5-羟色胺（5-HT）的含量。结果：升降胶囊对化疗致呕家鸽有明确的止呕作用。升降胶囊组家鸽血清和十二指肠组织中5-HT的含量显著减少（P〈0.05）。结论：升降胶囊止呕的机制与降低5-HT水平有关。     

熄风胶囊对匹罗卡品致痫大鼠电压门控性钠通道功能的影响

[目的]研究中药复方熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马神经细胞电压门控性钠通道(VGSC)功能的影响。[方法]建立氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠模型。将实验大鼠随机分为空白组、模型组、熄风胶囊低剂量治疗组(熄低组)、熄风胶囊中剂量治疗组(熄中组)和熄风胶囊高剂量治疗组(熄高组)。通过全细胞膜片钳检测海马神经细胞VGSC功能的变化。[结果] 1)成功复制氯化锂-匹罗卡品大鼠模型。与模型组比较,熄高组、熄中组和熄低组发作次数均低于模型组(P0.01),而熄风胶囊治疗组中,随剂量增加发作次数逐渐减少,其中熄高组和熄低组比较差异有统计学意义(P0.05)。2)全细胞膜片钳记录钠电流结果:与空白组比较,各组的钠电流密度明显增加、激活曲线阈值下降、失活曲线阈值上升、失活后恢复时间缩短,差异有统计学意义(P0.01);与模型组相比较,各熄风胶囊治疗组的钠电流密度下降、激活曲线阈值上升、失活曲线阈值下降、失活后恢复时间延长,差异有统计学意义(P0.01);各治疗组间比较,从电流-电压曲线可见,熄高组和熄中组相比有随剂量增加而电流下降趋势,但无统计学意义(P0.05),而熄高组、熄中组分别与熄低组比较有显著性差异(P0.01);激活曲线和失活可见各中药治疗组之间,随剂量升高电流有下降趋势,提示治疗后激活和失活阈值有上升趋势,但各治疗组间无统计学意义(P0.05);失活后恢复曲线可见总体上随剂量升高恢复时间有延长趋势,但各治疗组间无统计学意义(P0.05)。[结论]熄风胶囊通过减少VGSC电流,增强VGSC失活,抑制失活后的恢复,延长恢复时间来达到降低VGSC异常活化的作用,从而降低癫痫反复自发性发作,这可能是其作用机制之一。     

姜黄素对匹罗卡品致痫大鼠海马COX-2和5-LOX表达的影响

目的:观察氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马组织环氧酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LOX)表达,探讨姜黄素对癫痫大鼠神经保护作用机制。方法:动物随机分为5组,生理盐水对照组,癫痫组,丙戊酸钠组,姜黄素低剂量组,姜黄素高剂量组。癫痫模型采用氯化锂-匹罗卡品诱导大鼠癫痫持续状态(SE),SE后各治疗组分别予丙戊酸钠口服溶液(140 mg/kg)、低剂量姜黄素(100 mg/kg)及高剂量姜黄素(300 mg/kg)腹腔注射,大鼠癫痫造模后24 h和72 h取海马组织,苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织病理形态学变化,荧光定量PCR检测COX-2和5-LOX mRNA表达,免疫印迹法(Westetn Blot)检测海马组织COX-2和5-LOX蛋白的表达。结果:癫痫组海马神经元脱失和损伤明显,丙戊酸钠组和姜黄素治疗组明显减轻;与对照组相比,癫痫组海马组织COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达增加(癫痫72 h组5-LOX除外),差异显著(P0.05);与癫痫组比较,姜黄素治疗组海马组织COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达降低,差异显著(P0.05),且姜黄素高剂量组上述指标下降幅度大于低剂量组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:姜黄素治疗可降低匹罗卡品致痫大鼠海马神经元COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达,可能通过影响花生四烯酸代谢通路COX-2和5-LOX表达来减轻癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用。