不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤小鼠急性期脑水肿的影响

目的探讨不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)小鼠急性期脑水肿的影响。方法健康成年雄性C57BL/6J小鼠132只,随机分为六组:正常对照组(C组)、假手术组(Sham组)、创伤性脑损伤组(TBI组)、右美托咪定20μg/kg组(D20组)、40μg/kg组(D40组)、60μg/kg组(D60组),每组22只。应用电子控制性脑皮质撞击仪(eCCI)建立TBI小鼠模型,即刻经腹腔注射不同剂量右美托咪定(20、40、60μg/kg),每隔2小时给药1次,共3次。伤后24h分别采用干/湿重法测定脑含水量,HE染色法观察损伤侧皮质细胞形态变化,Western blot法检测损伤侧脑组织中水通道蛋白4(AQP4)和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白含量。并于伤后第1、2、3、7天采用改良神经功能缺陷评分(mNSS)评价其神经功能受损程度,伤后第4、5、6、7天应用Morris水迷宫实验观察其行为学改变。结果与Sham组比较,TBI组不同时点mNSS评分明显升高,逃避潜伏期明显延长,脑含水量明显升高,损伤侧皮质损伤严重,AQP4和NF-κB蛋白含量明显升高(P0.01)。与TBI组比较,右美托咪定各剂量组mNSS评分明显降低,逃避潜伏期明显缩短,脑含水量明显降低,损伤侧皮质细胞空泡变性和炎症反应有所改善,AQP4和NF-κB蛋白含量明显降低(P0.05或P0.01);D60组上述指标改变较D20组更为明显(P0.05或P0.01)。结论右美托咪定20~60μg/kg可以减轻TBI后急性脑水肿和认知功能障碍,随着剂量的增高,此作用更为明显,这可能与降低TBI后AQP4和NF-κB表达密切相关。     

静脉移植转染GDNF基因的人脐血CD34~+细胞改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能

目的 观察静脉移植转染胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的人脐血CD34~+细胞对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响及其可能机制.方法 密度梯度离心结合免疫磁珠法收集人脐血CD34~+ 细胞,以携带GDNF基因的质粒转染CD34~+细胞,以空载体转染者作对照.取SD大鼠,线栓法制备大脑中动脉栓塞模型,将模型随机分为3组:治疗组于成模后24 h经尾静脉注射转染GDNF基因的CD34~+细胞1×10~6个;阳性对照组经尾静脉注射空载体转染的CD34~+细胞1×10~6个;空白对照组经尾静脉注射等量生理盐水.另以正常SD大鼠为假手术组.移植后采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)评价神经功能恢复状况;图像分析法检测脑梗死体积;酶联免疫吸附试验检测细胞培养液与脑组织匀浆中GDNF水平;免疫组化方法检测CD34~+细胞及其人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和人神经元核抗原(NeuN)表达.结果 转染GDNF基因的CD34~+细胞培养上清液中GDNF的含量明显高于空载体转染者(P<0.05).移植后7d,治疗组、阳性对照组和空白对照组间两两比较,mNSS评分的差异均无统计学意义(P>0.05);至移植后28 d,治疗组运动功能改善,mNSS评分为5.0±1.0,显著低于阳性对照组的5.9±1.4和空白对照组的7.0±1.7(P<0.05,P<0.05).移植后28 d,治疗组梗死脑组织体积为(142±44)mm~3,显著低于阳性对照组的(196±58)mm~3(P<0.05)和空白对照组的(233±50)mm~3(P<0.01).移植后28 d,治疗组NeuN阳性细胞为(6.7±2.0)个,GFAP阳性细胞为(14.1±3.3)个,明显高于阳性对照组和空白对照组(P<0.05,P<0.05),而在空白对照组和假手术组未见上述阳性细胞.移植后第28天,治疗组脑组织匀浆中GDNF水平较阳性对照组明显升高(P<0.05).结论 静脉移植转染GDNF基因的人脐血CD34~+细胞可改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能,效果优于单纯CD34~+细胞移植,脑组织中GDNF水平的高低可能是导致疗效差异的机制之一.     

壳聚糖多孔支架复合BMSCs移植修复大鼠创伤性脑损伤的实验研究

目的探讨壳聚糖多孔支架复合BMSCs移植修复大鼠创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)的可行性。方法取成年SD大鼠胫骨及股骨骨髓,采用全骨髓贴壁培养法分离培养BMSCs,并传代。取第3代细胞行表面抗原CD29、CD45鉴定及BrdU标记。采用冷冻干燥法制备壳聚糖多孔支架,并与BrdU标记的第3代BMSCs进行体外共培养;扫描电镜观察细胞黏附情况,MTT法检测支架内细胞生长情况。取50只成年SD大鼠,随机分为A、B、C、D、E组(n=10)。A～D组大鼠采用Feeney自由落体打击致伤原理制备TBI模型,造模后72 h分别移植BMSCs-壳聚糖多孔支架复合体、BMSCs、壳聚糖多孔支架和完全培养基;E组为假手术组。于造模前及造模后1、7、14、35 d,各组大鼠行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,mNSS);造模后进行Morris水迷宫测验,包括定位航行测验(造模后31～35 d连续5 d检测潜伏期)及空间探索测验(造模后35 d检测穿越平台次数);造模后36 d取标本行HE染色、BrdU与高分子量神经丝蛋白免疫组织化学双重染色以及BrdU与神经胶质酸性蛋白免疫组织化学双重染色,观察大鼠脑损伤区BMSCs的迁移与分化情况。结果流式细胞仪检测示第3代BMSCs的CD29阳性率为98.49%,CD45阳性率仅为0.85%;扫描电镜示支架-细胞共培养48 h后,BMSCs呈梭形并分泌细胞外基质黏附于支架上;MTT法检测示壳聚糖多孔支架对BMSCs的增殖分化无不良影响。TBI造模后35 d,A组大鼠mNSS评分、定位航行测验的潜伏期显著低于B、C、D组,空间探索测验的穿越平台次数显著高于B、C、D组,差异均有统计学意义(P0.05);A、E组间上述指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。HE染色示A组壳聚糖多孔支架已部分降解,其与脑组织融合良好,修复程度优于B、C、D组。免疫组织化学双重染色结果示,A组移植的BMSCs存活、分化为神经元和神经胶质细胞,并迁移至正常脑组织内,修复程度优于B、C、D组。结论壳聚糖多孔支架介导的BMSCs移植能够明显改善大鼠TBI后的神经功能,亦能抑制大鼠脑损伤区胶质瘢痕形成,并可使BMSCs在脑损伤区存活、增殖和分化为神经细胞。     

维生素K2对大鼠创伤性脑损伤的影响及其与NLRP3炎症小体的关系

目的评价维生素K2对大鼠创伤性脑损伤的影响及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法 SPF级健康雄性SD大鼠36只, 体重280～300 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、创伤性脑损伤组(TBI组)和创伤性脑损伤+维生素K2组(TBI+VK2组)。采用改良Feeney法建立大鼠创伤性脑损伤模型。TBI+VK2组于脑损伤模型制备后30 min时腹腔注射维生素K2 400 mg/kg(用DMSO溶解), Sham组和TBI组分别腹腔注射等容量DMSO。于模型制备后24 h时进行改良神经功能缺损评分(mNSS)和旷场实验, 行为学测定结束后处死大鼠, 取脑, 采用干湿重法测定脑含水量, 采用TTC法检测脑损伤体积百分比, 采用ELISA法检测损伤侧皮层IL-1β、IL-18和caspase-1含量, 采用Western blot法检测损伤侧皮层NLRP3、caspase-1和IL-18表达水平。结果与Sham组比较, TBI组大鼠mNSS评分升高, 运动总路程和中央区域停留时间减少, 脑含水量和脑损伤体积百分比升高, 损伤侧...     

神经激肽1受体拮抗剂对大鼠创伤性脑损伤的影响

目的 研究大鼠创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)后血P物质(Substance P,SP)的表达和神经激肽1受体拮抗剂对TBI的作用,探讨抑制神经源性炎症反应对创伤性脑损伤的影响.方法 建立大鼠自由落体创伤模型,药物组于创伤后立即尾静脉给予n-乙酰左旋色氨酸(n-acetyl-L-tryptophan,NAT)(25 μmol/kg).大鼠TBI后30分钟和6小时利用酶联免疫吸附法检测血SP的含量,TBI后24小时采用rotarod试验评估大鼠神经行为功能及干湿称重法检测脑组织含水量.结果 大鼠TBI后30分钟时血SP浓度出现明显升高(P＜0.01),6小时时血SP浓度降低.大鼠TBI后24小时脑组织含水量明显升高,其神经行为功能下降,NAT可减少TBI后24h脑组织含水量并改善神经功能损伤(P＜0.05).结论 大鼠TBI早期血SP浓度增高,NAT通过抑制神经源性炎症可减轻脑水肿及神经功能损伤.     

甲酰基肽受体1促进创伤性脑损伤后小胶质细胞诱导的神经炎症

目的观察模式识别受体在创伤性脑损伤(TBI)后炎性反应中的作用, 并探讨可能的调控机制。方法将成年C57小鼠按照随机数字表法随机分为假手术组(Sham组)和TBI组, 每组各3只, 分别将Sham组正常皮层组织和TBI后3 d损伤周围皮层组织进行转录组测序分析;将小鼠随机分为Sham组和4个不同时间点TBI组(术后6 h、1 d、3 d和7 d), 每组各6只, 通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测Fpr1的表达变化情况;然后将小鼠随机分为Sham组、TBI组、TBI+溶剂组和TBI+HCH6-1(Fpr1抑制剂)干预组, 每组各6只, 通过Western blot、脑含水量测定和行为学检测等实验评估各组炎性反应和神经功能等。两组比较采用t检验;多组间比较采用单因素方差分析。结果 TBI组损伤周围皮层组织Fpr1的蛋白表达水平在第3天高于Sham组最显著(相对表达量为2.480±0.331, t=7.757, P<0.01), 且主要表达于小胶质细胞。TBI+HCH6-1(Fpr1抑制剂)干预组中炎症分子IL-1β、IL-18、TNF-α、Caspase-1...     

白藜芦醇通过单磷酸腺苷活化的蛋白激酶信号促进颅脑创伤远期神经功能恢复

目的观察白藜芦醇通过调节单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)信号活性对创伤性脑损伤远期神经修复的作用。方法将SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠随机将小鼠分为白藜芦醇组、生理盐水组和白藜芦醇+Compound C组, 每组10只, 建立创伤性脑损伤(TBI)后1～14 d、1～28 d模型。免疫荧光染色方法检测TBI后各组梗死周边皮层GAP-43的表达;改良神经功能评分(mNSS)评分量表评价白藜芦醇对神经功能影响;蛋白质印迹法(Western blot)检测p-AMPK的表达;mNSS评分采用重复测量, 组间采用t检验。结果神经功能分析, 在1 d白藜芦醇组mNSS评分[(12.20±1.03)分]与对照组[(12.10±1.28)分]比较, 差异无统计学意义(P>0.05);在14 d[(5.50±0.85)分]、28 d[(3.30±0.95)分]时间点白藜芦醇组的mNSS评分均低于对照组14 d[(10.60±1.51)分]、28 d[(10.00±1.33)分]时间点, 差异有统计学意义(14 d:t=-9.329, P<0.05;28 d:t=-12.948, ...     

颅脑创伤后自噬表达的变化及bFGF保护作用的研究

目的探索颅脑创伤后神经细胞自噬表达的变化及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的保护作用,为临床治疗脑外伤提供实验依据。方法用雷帕霉素制作体外神经细胞自噬模型,观察在体外培养神经细胞中b FGF对自噬表达的影响。将150只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组(假手术组、颅脑创伤组、b FGF治疗组),每组50只。精密颅脑损伤撞击器制作大鼠创伤性脑损伤模型,假手术组暴露硬脑膜而不撞击,b FGF治疗组于建模后10分钟由右侧侧脑室注入b FGF,而假手术组和创伤组在建模后10分钟由右侧侧脑室注入等量的生理盐水。应用大鼠行为学评分观察大鼠脑损伤后神经功能的变化;用干湿法测脑组织含水量;用免疫荧光显微镜观察神经细胞自噬表达的变化。结果在体外培养细胞中,b FGF组能明显抑制雷帕霉素引起的LC3-Ⅱ表达增高(P0.05)。与假手术组相比,颅脑创伤组大鼠和b FGF治疗组的行为学评分明显降低(P0.05),但b FGF治疗组的评分恢复快于颅脑创伤组(P0.05)。b FGF治疗组脑组织的含水量明显小于颅脑创伤组(P0.05)。与假手术组相比相比,颅脑创伤组和b FGF治疗组伤后LC3-Ⅱ蛋白表达均明显提高(P0.05);与颅脑创伤组相比,b FGF治疗组LC3-Ⅱ的上调被明显抑制(P0.05)。结论 b FGF能明显抑制颅脑创伤后过度的自噬反应,减轻脑水肿,并改善大鼠神经功能。     

不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤大鼠神经炎症反应及神经营养因子的影响

目的 探讨不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤（TBI）大鼠神经炎症反应及神经营养因子的影响。
方法 健康清洁级成年雄性SD大鼠75只,10～12周龄,体重220～250 g。采用随机数字表法将大鼠随机分为五组：假手术组（S组）、TBI组（T组）、右美托咪定25 μg/kg组（D25组）、右美托咪定50 μg/kg组（D50组）和右美托咪定100 μg/kg组（D100组）,每组15只。S组仅行头皮切开钻孔手术,T组采用Feeney自由落体法建立TBI模型,D25组、D50组、D100组分别于TBI模型建立后立即腹腔注射右美托咪定25、50、100 μg/kg。采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估建模后12、24、48、72 h的神经功能,干/湿比重法检测脑组织含水量,Western blot法检测脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）及白细胞介素-6(IL-6)蛋白含量,免疫组织化学染色法观察脑组织皮层区脑源性生长因子（BDNF）、神经生长因子（NGF）表达情况。
结果 与S组比较,T组不同时点mNSS明显升高（P<0.05）,脑组织含水量明显增多（P<0.05）,脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白含量明显升高（P<0.05）,脑组织皮层区BDNF、NGF表达及阳性细胞数明显增多（P<0.05）。与T组比较,D25组、D50组、D100组mNSS明显降低（P<0.05）,脑组织含水量明显减少（P<0.05）,脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白含量明显降低（P<0.05）,脑组织皮层区BDNF、NGF表达及阳性细胞数明显增多（P<0.05）。与D25组比较,D50组不同时点mNSS明显降低（P<0.05）,脑组织含水量明显减少（P<0.05）,脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白含量明显降低（P<0.05）,脑组织皮层区BDNF、NGF表达及阳性细胞数明显增多（P<0.05）。D25组、D100组各指标差异无统计学意义。
结论 相对于右美托咪定25和100 μg/kg,右美托咪定50 μg/kg腹腔注射可明显改善脑水肿,减轻神经炎症反应,增加TBI后皮层神经营养因子表达水平,缓解神经功能障碍。     

吗啡延迟预处理对小鼠缺血性脑损伤的影响及经典型蛋白激酶C在其中的作用

目的 评价吗啡延迟预处理对小鼠缺血性脑损伤的影响及经典型蛋白激酶C(cPKC)在其中的作用.方法 雄性BALB/C小鼠40只,体重20～22 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=10):假手术组(S组)、缺血性脑损伤组(ICI组)、吗啡延迟预处理组(MP组)和cPKC抑制剂Go6983组(G组).采用大脑中动脉阻塞法制备缺血性脑损伤模型.MP组于模型制备前24h时腹腔注射吗啡10 mg/kg；G组于模型制备前24h时腹腔注射吗啡10 mg/kg,并于模型制备前即刻侧脑室注射5μlGo6983(6 nmol).模型制备后6h时,进行神经功能缺陷评分,随后处死小鼠,取脑组织,测定脑水肿率和梗死体积,计算细胞凋亡率.结果 与S组相比,ICI组、MP组和G组神经功能缺陷评分、脑梗死体积、水肿率和细胞凋亡率升高(P＜0.01)；与ICI组相比,MP组神经功能缺陷评分、脑梗死体积、水肿率和细胞凋亡率降低(P＜0.01),G组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 吗啡延迟预处理可减轻小鼠缺血性脑损伤,机制与激活cPKC信号通路有关.     

NF-κB活化在氯化钆诱导ANP肺泡巨噬细胞凋亡中的作用

目的：观察氯化钆（GdCl3）诱导急性坏死性胰腺炎(ANP)肺泡巨噬细胞(AM)凋亡时核因子-κB（NF-κB）表达情况,探讨NF-κB在其中的作用及机制。
方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组,ANP组,GdCl3治疗组。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立ANP大鼠模型,正常对照组大鼠以同法注入生理盐水,GdCl3治疗组制模后即刻自阴茎背静脉注射GdCl3。各组大鼠于成模后6 h经支气管肺泡灌洗获取AM,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-1β含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平。用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测AM的凋亡情况;Western-blot检测AM中NF-κB活性。同时对肺组织行病理学检查。
结果：ANP组TNF-α和IL-1β含量高于对照组（P<0.05）,而治疗组显著低于ANP组（P<0.05）。仅治疗组DNA电泳见典型的细胞凋亡的梯状条带。对照组,ANP组,治疗组AM凋亡率分别为（10.81±0.86）%,（6.47±1.52）%,（17.41±3.36）%,3组间差异均有统计学意义（P<0.05）;Western-blot检测3组AM中NF-κB表达的相对灰度值分别为（0.80±0.05）,（1.96±0.15）,（1.42±0.10）,3组间差异亦有统计学意义（P<0.05）。AM的凋亡率与NF-κB活性呈负相关（r＝-0.554,P<0.01）。
结论：GdCl3可能通过抑制NF-κB的活化诱导大鼠ANP肺泡巨噬细胞凋亡,从而减轻肺损伤。     

NF-κB诱骗寡核苷酸对内毒素性肝损伤的保护作用和机制

目的探讨NF-κB诱骗寡脱氧核苷酸对大鼠内毒素性肝损伤的保护作用及其机制。方法60只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(LPS)组、诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)处理组。取各组大鼠肝组织检测NF-κB蛋白结合活性(EMSA),观察组织病理学改变(光镜)及肝细胞凋亡(TUNEL)。取静脉血检测AST(自动生化仪)以及TNF-α,IL-6的表达水平(ELISA)。结果与对照组相比,内毒素组NF-κB活性明显升高,诱发大量肝细胞凋亡,肝脏损伤明显;同时血清AST,TNF-α及IL-6明显升高(P0.01)。与内毒素组相比,NF-κB诱骗寡核苷酸处理组NF-κB活性受抑制(P0.01)、肝脏组织病理学改变和肝细胞凋亡明显减轻,血清中TNF-α和AST表达水平降低(P0.01),但IL-6表达与内毒素组差异无统计学意义(P0.05)。结论NF-κB诱骗策略能高效抑制NF-κB的活性,抑制其下游有害细胞因子的产生,从而减轻内毒素性肝损伤。     

硫化氢在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用

目的：探讨硫化氢（H2S）在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用.方法：雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、脓毒症组、脓毒症＋Naris组、脓毒症＋DL-炔丙基甘氨酸（PAG）组和脓毒症＋氨基-羟乙酸（AOAA）组.除对照组行假手术外,其余各组采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制作大鼠脓毒症模型,术前30 min分别腹腔注射等量生理盐水、NariS（10 mg/kg）、PAG（50 mg/kg）、AOAA（20 mg/kg）.20 h后处死大鼠,取结肠组织,测定其H2S、肿瘤坏死因子-а（TNF-а）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量,髓过氧化物酶（MPO）活性和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）mRNA、胱硫醚-β-合成酶（CBS）mRNA表达水平,光学显微镜下观察结肠组织病理学变化.结果：①与对照组相比,脓毒症组结肠组织中H2S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性明显增强（P〈0.01）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平提高（P〈0.01）,其组织结构遭到破坏,炎性细胞浸润增多.②与脓毒症组相比,脓毒症＋NariS组结肠组织中H：S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性增强（P〈0.05）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平降低（P〈0.01）,结肠组织结构破坏加剧,更多炎性细胞浸润.与脓毒症组相比,脓毒症＋PAG组和脓毒症＋AOAA组结肠组织中H2S,TNF-а、IL-1β浓度降低,MPO活性减弱.但脓毒症＋PAG组各指标变化的差异无统计学意义,而脓毒症＋AOAA组各指标的变化差异有显著性（P〈0.01）;两组结肠组织结构破坏减轻.炎性细胞浸润减少.结论：脓毒症时,结肠组织内主要由CBS催化产生H2S,增多的H2S通过增强炎症反应加重结肠黏膜损伤.     

内皮细胞Toll-2受体在血液透析患者急性冠脉综合征发病机制中的作用

目的 探讨在维持性血液透析（MHD）患者合并急性冠脉综合征(ACS)血清体外干预下对内皮细胞Toll-2受体（TLR2）表达的影响。方法 体外以MHD患者血清培养内皮细胞模拟人体尿毒症内环境,并用健康人群作对照,分为3组：健康对照组、稳定性心绞痛组（SA组）和ACS组,用3组人群的血清分别干预体外培养的人脐静脉内皮细胞。其中ACS组又分为加（封闭组）或不加抗TLR2抗体,血清干预18h后,收集细胞及细胞上清液,利用RT-qPCR检测各组TLR2、核转录因子（NF-κB）、白介素-6（IL-6）、血管细胞粘附分子（VCAM-1） mRNA的表达,免疫细胞化学法定位TLR2,ELISA法检测各组IL-6、VCAM-1的表达。结果 研究显示ACS血清干预组TLR2 mRNA、NF-κB mRNA、IL-6 mRNA表达均显著高于SA组和健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但其在SA组及健康对照组间差异无统计学意义（P>0.05）。抗体封闭组内皮细胞NF-κB mRNA、IL-6 mRNA及VCAM-1 mRNA及IL-6、VCAM-1的表达均较未封闭组表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR2可能通过介导炎症反应参与了MHD患者ACS的发病。     

PI3K／PKB信号转导通路在重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/PKB）信号转导通路对重症急性胰腺炎胰腺损伤的作用。方法 健康成年雄性SD大鼠30只，随机分为对照组、SAP组（S组）和SAP＋wortmannin（S＋W）组，每组10只。胆胰管内逆行注射法制作SAP模型。制模6h后取胰腺组织，检测各组含水量、MPO水平及病理改变；采用酶联免疫吸附法（ELISA）及RT-PCR技术检测胰腺组织TNF-α和IL-1β的蛋白及mRNA的变化、蛋白印迹（Western Blot）法检测p-PKB的活性变化。结果 制模6h后S组和S+W组较对照组胰腺组织含水量增加（P<0.01），MPO水平明显升高（P<0.01）；病理学发现胰腺明显出血、坏死和炎性细胞浸润；胰腺组织TNF-α和IL-1β的蛋白及mRNA水平明显增加（P<0.01），p-PKB水平明显升高（P<0.01）。S＋W组较S组胰腺组织水肿及病理改变减轻（P<0.01）、MPO水平降低（P<0.01），同时TNF-α和IL-1β的蛋白含量及mRNA表达减少（P<0.01），p-PKB水平降低（P<0.01）。结论 PI3K/PKB信号传导通路被激活是重症急性胰腺炎胰腺损伤的重要发病机制之一。     

异丙酚对创伤后全身炎症反应综合征患者炎性细胞因子的影响

目的：研究异丙酚对合并全身性炎症反应综合征（SIRS）的骨科创伤患者炎性细胞因子的影响。方法：将40例合并SIRS、麻醉前创伤评分≤13分、手术时间4h以内、估计累计出血量≥1000ml的骨科创伤患者随机分为两组（n=20）,两组均行切开复位内固定术,均采用静吸复合麻醉,全麻诱导方式相同,对照组给予依托咪酯0．2～0．3mg／kg静脉注射,异丙酚组给予异丙酚1．O～2．0mg／kg静脉注射,并术中维持,其余处理方法相同。分别于全麻诱导前、麻醉后5min、术毕、术后1d和7d检测血浆白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）含量。结果：两组患者麻醉前炎性细胞因子水平差异无显著性;各组于麻醉后5min与诱导前比较亦无明显变化;术毕及术后1d两组炎性细胞因子均升高,但异丙酚组升高幅度较小,相同时间点两组间IL-6、IL-8、TNF—α差异有显著性（Pd0．05）;术后7d两组炎性细胞因子水平差异无显著性（P〉O．05）。结论：异丙酚对SIRS患者炎性细胞因子生成具有抑制作用,能在一定程度上抵抗机体过度炎性反应。     

腹腔引流灌洗时机对大鼠重症急性胰腺炎的影响及作用机制

目的 拟在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）模型中探讨腹腔引流灌洗时机对病程转归的影响并探究其作用机制。方法 清洁级SD大鼠,随机分为SAP模型组、早期引流组、延期引流组、早期灌洗组和延期灌洗组。比较各组24 h后大鼠生存率,检测大鼠血清和腹水中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的浓度。结果 ①与模型组比较,早期引流组和早期灌洗组生存率显著提高（P＜0.01 ）,而延期引流组和延期灌洗组与模型组差异无统计学意义（P＞0.05）。②与模型组比较,早期引流组血清TNF-α浓度显著下降（P＜0.05）;与早期引流组比较,早期灌洗组血清IL-8浓度下降、IL-10浓度升高（P＜0.05）。③与模型组比较,早期引流组和早期灌洗组腹水中IL-1β、IL-6、和TNF-α水平显著降低（P＜0.05）,且早期灌洗组腹水中IL-10浓度升高（P＜0.05）;延期引流组中仅腹水TNF-α水平显著降低（P＜0.0）,但延期灌洗组中细胞因子未见明显变化（P＞0.05）。与早期引流组相比,延期引流组的IL-1β、IL-8浓度升高,IL-10水平下降（P＜0.05）,而早期灌洗组的IL-1β、IL-8浓度降低,IL-10水平升高（P＜0.05）。早期灌洗组与延期灌洗组的腹水中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α浓度均有显著差异（P＜0.05）。结论 在SAP病程早期进行腹腔置管引流灌洗可以提高大鼠生存率。与血清中细胞因子浓度变化相比,腹水中细胞因子浓度的改变更为明显。早期引流灌洗后降低腹水中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8浓度,并使IL-10浓度升高可能是提高大鼠生存率的关键因素。     

连续性血液净化对重症急性胰腺炎血浆炎症介质的影响

【摘要】　目的 探讨连续性血液净化(CBP)对重症急性胰腺炎(SAP)患者血浆炎症介质的影响。方法 对36例重症急性胰腺炎患者进行CBP治疗,使用ELISA法检测治疗前和治疗后24 h、48 h血浆TNF -α、IL -1β、IL -6、IL -8的浓度,并与同期健康人群做比较。结果 31例患者好转出院,存活率为86.1%,血生化指标明显改善;SAP患者血浆TNF -α、IL -1β、IL -6、IL -8浓度显著高于正常对照组,CBP治疗24 h后四种细胞因子明显低于治疗前水平(P<0.05),治疗48 h后有不同程度的回升,但仍低于治疗前水平(P<0.05)。结论 CBP可有效清除SAP患者血浆炎症介质,从而阻断全身炎症反应,改善预后。     

维持性血液净化患者微炎症状态的临床研究

目的：观察血液透析患者与腹膜透析患者微炎症状态存在情况,比较两种不同类型血液净化治疗微炎症状态的差别。方法：选择我院透析中心血液透析患者58例,腹膜透析患者49例,健康对照组57例,空腹采取静脉血检测超敏CRP（hs-CRP）、IL-6、IL-8、TNF-α,比较各组数值的情况。结果：血液透析组、腹膜透析组超敏CRP（hs-CRP）、IL-6、TNF-α均高于健康对照组（P〈0.05）;IL-8均高于对照组,但无统计学差异（P〉0.05）。血液透析组与腹膜透析组比较,超敏CRP（hs-CRP）高于腹膜透析组（P〈0.05）;两组比较IL-6、IL-8、TNF-α均无统计学差异。结论：血液透析、腹膜透析患者均存在较高的微炎症状态,两者相比血液透析患者微炎症状态高于腹膜透析,但腹膜透析患者的前炎症因子与血液透析水平相同。     

Treatment of TBI with collagen scaffolds and human marrow stromal cells increases the expression of tissue plasminogen activator

This study examines the effects of combination therapy of collagen scaffolds and human marrow stromal cells (hMSCs) on the expression of tissue plasminogen activator (tPA) after traumatic brain injury (TBI) in rats. Adult male Wistar rats (n=48) were injured with controlled cortical impact and treated either with scaffolds suffused with hMSCs (3×10(6)) or hMSCs (3×10(6)) alone transplanted into the lesion cavity 1 week after TBI. A control group was treated with saline. Neurological function was assessed using the Morris Water Maze test (MWM) and modified Neurological Severity Scores (mNSS). The rats were sacrificed 14 days after TBI and brain samples were processed for immunohistochemical analysis and quantitative Western blot and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) studies. Enhanced functional improvement was observed on both the mNSS and MWM tests in the scaffold+hMSC-treated group compared to the other two groups. Immunostaining with anti-human mitochondrial antibody (E5204) showed more hMSCs in the injury zone of the scaffold+hMSC group compared to the hMSC-alone group. Triple staining showed that more neurons were tPA-positive in the scaffold+hMSC group compared to the other two groups (p<0.05). Western blot analysis and qRT-PCR showed that scaffold+hMSC and hMSC-alone treatment enhanced the expression of tPA compared to controls (p<0.05), but tPA expression was significantly greater in the scaffold+hMSC group. The induction of tPA by hMSCs after TBI may be one of the mechanisms involved in promoting functional improvement after TBI.