端粒酶hTRT基因反义寡核苷酸抑制白血病细胞增殖和端粒酶活性的研究

目的：探讨端粒酶基因反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法：采用MTT法检测不同反义寡核苷酸不同时间白血病细胞HL－60增殖的影响。采用TRAP－PCR法检测经反义寡核苷酸处理后的白血病细胞不同时间端粒酶活性的变化。结果：不同剂量端粒酶基因hTRT反义寡核苷酸与HL－60细胞共育48h后，表现出其对白血病细胞增殖抑制作用，端粒酶基因hTRT反义寡核苷酸5μmol/L处理HL－60细胞24h后，端粒酶活性明显下降，而且随作用时间的延长粒酶活性不断降低，96h后下降至对照组的44．4％，结论：反义寡核苷酸通过抑制端粒酶活性达到抑制白血病细胞的增殖。     

PS-ODN对结肠癌细胞生长及端粒酶活性影响的研究

目的：观察全硫化修饰的抗端粒酶反义寡核苷酸（PS-ODN）对结肠癌LS-174T细胞的抑制作用,探讨端粒酶抑制剂PS-ODN对结肠癌细胞的抑制作用机制.方法：采用反义技术在逆转录水平阻断端粒酶模板,从而诱导细胞凋亡,通过电镜、FCM、PCR-Elisa等方法评估抑制效果.结果：PS-ODN的最佳剂量为10 μmol/L;作用10天后,PS-ODN组LS-174T细胞集落形成率明显低于CPS-ODN组和对照组（P＜0.01）;PS-ODN组细胞有明显的形态学改变;作用72 h后PS-ODN组细胞出现凋亡峰,而对照组未出现;PS-ODN组细胞端粒酶活性明显低于CPS-ODN组和对照组相（P＜0.01）.结论：特定的核苷酸序列可抑制端粒酶活性,诱导细胞凋亡,为肿瘤的治疗提出新手段和新思路奠定了实验基础.     

端粒酶反义寡核苷酸对体外培养ACC-M细胞的影响

目的　研究端粒酶反义寡核苷酸 (AS ODN)对体外培养人涎腺高肺转移性腺样囊性癌 (ACC M)细胞的影响。方法　采用细胞形态学观察及PCR TRAP端粒酶活性检测法来观察其形态学和端粒酶活性的变化。结果　反义寡核苷酸在转染ACC M细胞后 72小时内 ,其形态学改变不明显 ,其端粒酶活性明显受到抑制 (P <0 .0 1)。结论　AS ODN可显著抑制ACC M的端粒酶活性 ,提示AS ODN可抑制ACC M细胞的生长 ,抑制效果可能与AS ODN的剂量、转染效率等因素有关。     

端粒酶反义寡核苷酸对食管癌细胞端粒酶活性及细胞生长的影响

端粒酶是一种特殊的逆转录酶。食管癌是消化系统常见恶性肿瘤,研究表明,食管癌组织中端粒酶阳性率高达90. 9%,正常食管组织、食管平滑肌瘤端粒酶活性为阴性 [1]。本研究将互补于瑞粒酶RNA(hTR)模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸 (PS ASODN)作用于Eca 109人食管癌细胞,观察其对食管癌细胞端粒酶活性的影响及细胞生长的影响,旨在探讨PS ASODN对食管癌的治疗价值。1　材料和方法1.1　材料　Eca 109食管癌细胞株购自中国医科院肿瘤研究所;RPMI 1640培养基:购自GIBCO公司;MTT:Sigma公司产品。端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸 (PS A…     

抑制端粒酶活性对As2O3诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的： 〖HT5"SS〗观察端粒酶反义寡核苷酸、As2O3对肝癌细胞生长的影响,寻找低剂量、低毒、高效、安全的抗肝癌新疗法。〖HT5W〗方法：〖HT5"SS〗 自行设计合成靶向端粒酶模板区的20 nt硫代反义寡核苷酸,观察端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞端粒酶活性的影响及两者协同对肝癌细胞生长的影响,采用HE染色、流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳观察端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞的凋亡诱导作用,以流式细胞术检测肝癌细胞的Fas、FasL、bcl2蛋白的表达。〖HT5W〗结果： 〖HT5"SS〗5 μmol/L的端粒酶反义寡核苷酸作用24h可显著抑制肝癌细胞端粒酶活性（P<0.01）;肝癌细胞端粒酶活性被抑制后对As2O3诱导凋亡的敏感性显著增加,表现为低浓度、短时间即可诱导肝癌细胞凋亡（P<0.01）,端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞的凋亡诱导作用是通过Fas、FasL途径实现的。〖HT5W〗结论：〖HT5"SS〗抑制肝癌细胞端粒酶活性可显著增强其对As2O3诱导凋亡的敏感性,减少砷剂用量,两者协同有潜在的临床应用前景。     

端粒酶抑制剂研究进展

端粒酶在体细胞中不表达及在绝大多数肿瘤细胞中阳性表达,使得端粒酶不但成了新的肿瘤标记物,而且已成了抗肿瘤治疗研究的新的靶分子.端粒酶抑制剂的开发已成为抗癌药物研究的新策略.本文对端粒酶抑制剂研究的最新进展作一综述,并对其将来的发展前景作一展望.     

三氧化二砷对恶性黑色素瘤A375细胞端粒酶活性的抑制作用

背景与目的 :研究三氧化二砷(As2O3)对人恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性的抑制作用,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制 ,为砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。 材料与方法 :用TRAP_ELISA和TRAP_PAGE银染法测定A375 细胞端粒酶活性。结果 :As2O3 对人恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性抑制有明显的浓度和时间依赖关系。结论 :As2O3 对恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性抑制率随药物浓度的增加或作用时间的延长而提高     

反义PKCα对CNE-2Z细胞端粒酶活性的影响

 目的　观察反义PKCα对鼻咽癌CNE 2Z细胞生长及端粒酶活性的影响。方法　脂质体转染反义PKCα ,MTT法检测细胞生长 ,TRAP ELISA法检测细胞端粒酶活性。结果　CNE 2Z细胞端粒酶活性为阳性 ,转染反义PKCα可使细胞生长指数 (P <0 .0 1)及端粒酶活性 (P <0 .0 5 )降低。结论　反义PKCα可以抑制CNE 2Z细胞的生长及端粒酶活性 ,PKCα可能通过调控端粒酶活性影响CNE 2Z细胞的生长。     

hTERT反义酸对淋巴白血病细胞端粒酶活性的抑制(英文)

目的 研究和探索hTFRT反义核酸对淋巴白血病细胞端粒酶活性的影响。方法 用PCR ELISA试剂合测定端粒酶的活性;免疫组织化学和流式细胞仪技术测定hTERT蛋白的含量;用RT-PCR和电泳技术测定hTERT mRNA水平。结果 实验结果显示,10μmol/L AS PS-ODN作用72 h以后,hTERT mRNA和蛋白的水平显著下降,端粒酶的活性明显受到抑制。结论 hTERT反义核酸是淋巴白血病细胞端粒酶活性的良好的抑制剂。     

hTERT反义酸对淋巴白血病细胞端粒酶活性的抑制(英文)

目的研究和探索 hTERT 反义核酸对淋巴白血病细胞端粒酶活性的影响。方法用 PCR ELISA 试剂合测定端粒酶的活性;免疫组织化学和流式细胞仪技术测定 hTERT 蛋白的含量;用 RT-PCR 和电泳技术测定 hTERT mRNA 水平。结果实验结果显示,10 μmol/L AS PS-ODN 作用72 h 以后,hTERT mRNA 和蛋白的水平显著下降,端粒酶的活性明显受到抑制。结论 hTERT 反义核酸是淋巴白血病细胞端粒酶活性的良好的抑制剂。     

RNA干扰对肾癌细胞端粒酶活性及增殖、凋亡的影响

目的 探讨针对人端粒酶RNA（hTR）及其催化亚基（hTERT）的小干扰RNA（siRNA）对肾癌细胞端粒酶活性及其增殖、凋亡的影响。方法 将hTR-siRNA、hTERT-siRNA（100nmol／L）单独或联合转染人肾癌786—0细胞,采用RT-PCR法检测hTR、hTERT mRNA表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。结果 （1）hTR-siRNA可显著降低786—0细胞hTR mRNA表达（P〈0．01）,hTERT-siRNA可显著降低hTERT mRNA表达（P〈0．01）,但彼此互不影响。（2）二者均能显著抑制端粒酶活性（P〈0．01,P〈0．01）,并增加786—0细胞增殖抑制率及凋亡细胞阳性率（P〈0．01,P〈0．01）。二者联合应用与单独应用差异亦无显著性（P〉0．05）。结论 hTR、hTERT siRNA通过抑制各自基因表达,抑制人肾癌细胞端粒酶活性,进而抑制增殖、促进凋亡。     

抑制端粒酶活性对人肾癌细胞生长的抑制作用

目的 :探讨抗端粒酶在肾细胞癌治疗中的意义。方法 :采用脂质体介导法将pBBS2 12 hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体 )导入人肾癌GRC 1细胞系中 ,采用TRAP法测定端粒酶活性 ,通过MTT法检测细胞动力学 ,观察细胞的增殖 ,电镜下观察其对细胞凋亡的影响。结果 :端粒酶反义RNA能显著抑制细胞的端粒酶活性 ,抑制细胞增殖并促进其凋亡。结论 :以端粒酶反义RNA抑制端粒酶活性是治疗肾癌的潜在途径     

乳腺癌组织中端粒酶活性的研究

目的 :研究乳腺癌组织、癌旁组织、良性乳腺病变、正常乳腺组织中的端粒酶活性 ,探讨其作为乳腺癌肿瘤标志物的可能性。方法 :采用端粒重复序列扩增法 (telomeraicrepeatamplificationprotocol ,TRAP)来检测 36例乳腺癌及其相应癌旁组织 ,12例良性乳腺病变 ,6例正常乳腺组织中的端粒酶活性。结果 :36例乳腺癌组织中 ,有 33例端粒酶表达阳性 ,其阳性率为 91 7% ,而且与肿瘤的大小 ,淋巴结的状态 ,临床分期有相关性。 36例癌旁组织中 ,有 2例端粒酶表达阳性 ,阳性率为 5 6 %。 12例良性乳腺病变中 ,仅有 1例端粒酶表达阳性 ,阳性率为 8 3%。 6例正常乳腺组织端粒酶表达均为阴性。结论 :乳腺癌组织中普遍存在端粒酶活性表达 ,端粒酶有可能成为诊断乳腺癌的肿瘤标志物。     

冬凌草甲素对K562细胞端粒酶活性调控和细胞周期的影响

目的　目的 :研究冬凌草甲素 (ORI)对K5 62细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法　采用MTT法观察不同浓度ORI对K5 62细胞增殖的影响 :采用端粒重复序列扩增法 (TRAP) 酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测了端粒酶活性变化 ;采用流式细胞仪测定细胞周期各时相百分比。结果　ORI可明显抑制K5 62细胞增殖 ;在一定的浓度范围内 ,ORI可下调K5 62细胞端粒酶活性。流式细胞仪结果显示 ,经ORI处理的K5 62细胞 ,细胞周期各时相分布发生变化 ,G2 /M期细胞增多 ,S期细胞减少。结论　ORI可下调K5 62细胞的端粒酶活性 ,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。