三种同种异体大鼠耳廓移植模型的对比

目的 建立稳定的大鼠同种异体耳廓移植模型。方法 将大鼠分为A、B、C三组。每组均以10只SD为供体，10只WISTAR为受体进行原位及异位移植。原位移植的静脉选择颈外静脉，动脉选择颈外动脉，动脉吻合平面分别选择甲状腺上动脉及颌外动脉分支处；异位移植选择股动静脉。然后观察大鼠及其外耳廓的生存情况下组织学变化。结果 各组的外耳廓生存时间为5－11d，而异位移植大鼠的生存率最高，外耳廓的生存及病理改变与原位移植无差异。结论 大鼠同种异体耳廓异位移植模型模型对于研究带血管的体表同种异体复合组织移植排反应简便易行，稳定可靠。     

The inhibitory effect of astilbin on the arteriosclerosis of murine thoracic aorta transplant

The inhibitory effect of astilbin on transplant arteriosclerosis in murine model of thoracic aorta transplantation was examined. Model of rat thoracic aorta transplantation was established. Ninety rats were divided into three groups. In isograft group, the thoracic aorta of Brown Norway （BN） rat was anastomosed with the abdominal aorta of another BN rat. In allograft group, the thoracic aorta of BN rat was anastomosed with the abdominal aorta of Lewis rat. In astilbin group, the rats receiving allo-transplantation were given astilbin 5 mg/kg per day for a time of 28 days. The donor thoracic aorta and the recipient abdominal aorta were anastomosed by means of a polyethylene can- nula （inner diameter： 1.5 mm, length： 3 mm length）. The grafts were histologically examined for structural changes. The areas of arterial lumen and endatrium were calculated. Our results showed that, in the allograft group, 28 days after allografting, conspicuous proliferation of smooth muscles and infiltration with a great number of inflammatory cells were found in the tunica intima and tunica media. Astilbin significantly inhibited the proliferation of smooth muscles and ameliorated the infiltration of inflammatory cells thereyby prevent against the development of transplant arteriosclerosis. It is concluded that asltilbin can effectively prevent the development of arteriosclerosis in allotransplant by inhibiting the proliferation of smooth muscles and inhibit the proliferation of smooth muscles in tunica of intima and media and reducing infiltration of the inflammatory cells.     

The Origin of Neointimal Smooth Muscle Cells in Transplant Arteriosclerosis from Recipient Bone-marrow Cells in Rat Aortic Allograft

In order to investigate the origin of neointimal smooth muscle cells in transplant arterio- sclerosis in rat aortic allograft, sex-mismatched bone marrow transplantation was performed from male Wistar rats to female Wistar rats. Four weeks after transplantation, the aortic transplant model was established by means of micro-surgery in rats. The recipients were divided into 4 groups: female Wistar-female Wistar aortic isografts, female SD-female Wistar aortic allografts, male SD-male Wis- tar aortic allografts, female SD-chimera Wistar aortic allografts. Eight weeks after transplantation, aortic grafts were removed at autopsy and processed for histological evaluation and immunohisto- chemistry. The results indicated that excessive accumulation of α-SMA-positive smooth muscle cells resulted in significant neointima formation and vascular lumen stricture in rat aortic allografts. Neointima assay revealed that the neointimal area and NIA/MA ratio of transplanted artery were sig- nificantly increased in all of aortic allograft groups as compared with those in aortic isograft group (P<0.01). Neointimal smooth muscle cells were harvested from cryostat sections of aortic allograft by microdissection method. The Sry gene-specific PCR was performed, and the result showed that a dis- tinct DNA band of 225 bp emerged in the male-male aortic allograft group and chimera aortic al- lograft group respectively, but not in the female-female aortic allograft group. It was suggested that recipient bone-marrow cells, as the origin of neointimal smooth muscle cells, contributed to the pathological neointimal hyperplasia of aortic allograft and transplant arteriosclerosis.     

受体骨髓源性内皮祖细胞(EPC)对小鼠移植性动脉硬化的影响

 目的 探讨输入受体骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对移植性动脉硬化的影响。方法 密度梯度离心法联合贴壁诱导法分离培养小鼠骨髓源性EPC,并对其进行鉴定。利用小鼠同种异体腹主动脉移植(以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体)建立移植性动脉硬化模型,术后通过尾静脉将体外培养的EPC输入模型体内,2周后观察移植动脉内膜损伤修复情况及病理改变;术后4周用计算机图像分析系统测量移植动脉新生内膜增生情况。 结果 骨髓源性单个核细胞(mononuclear cell,MNC)体外可诱导培养出EPC,其细胞表面既表达干细胞标记,又表达内皮细胞特异性标记,并具有内皮细胞的生物学功能。小鼠腹主动脉移植术后2周,EPC输入组移植动脉内膜损伤较对照组明显加重。术后4周,EPC输入组移植动脉新生内膜厚度及管腔狭窄程度较对照组显著增加。 结论 受体骨髓源性EPC参与移植动脉新生内膜形成。输入外源性EPC加重移植动脉内膜损伤,对移植性动脉硬化起促进作用。     

大黄苷元对骨髓间充质干细胞移植脑缺血大鼠基质金属蛋白酶的影响

目的：观察大黄苷元对脑缺血再灌注损伤大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrowstromal cells,BMSCs）移植术后脑组织病理改变及基质金属蛋白酶的影响。方法：体外全骨髓细胞贴壁筛选培养法扩增BMSCs;线栓法制备大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型。190只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄苷元组、BMSCs移植组（简称移植组）和BMSCs移植联合大黄苷元组（简称联合组）。再灌注后24 h将BMSCs由同侧颈内动脉移植入移植组和联合组大鼠脑内;大黄苷元组和联合组予大黄苷元灌胃用药。移植后7、14和28 d,模型各组取脑组织用于检测。光镜下观察脑组织微血管病理改变;免疫组织化学法测定BMSCs免疫球蛋白抗体G（immunoglobulin G,IgG）、Ⅳ型胶原（type Ⅳ collagen,col Ⅳ）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TI MP-1）的表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠微血管残缺、破损明显,脑组织中IgG和MMP-9表达增强,ColⅣ和TI MP-1表达减弱。与模型组比较,大黄苷元组、移植组和联合组大鼠微血管结构改善明显;大黄苷元组和联合组各时间点大鼠脑组织中IgG表达和MMP-9活性减弱,ColⅣ和TI MP-1表达增强。联合组大鼠于移植7d时的微血管结构较移植组完整,其各时间点大鼠脑组织中ColⅣ表达较移植组增强,14 d时大鼠脑组织中MMP-9活性较大黄苷元组降低,TI MP-1表达增强,28 d时TI MP-1表达较移植组增强。结论：大黄苷元可使脑缺血再灌注损伤大鼠微血管基底膜ColⅣ降解减少,通透性降低,并与BMSCs有协同作用,其作用机制可能与增加TI MP-1表达以调节MMP-9平衡有关。     

建立肝肠联合移植大鼠模型及移植肝对小肠的免疫保护作用

目的：建立新型肝肠联合移植大鼠模型，并研究移植肝是否对移植肠具有免疫保护作用。方法：肝肠联合移植切取移植物时，保留门静脉完整性，利用供体胸段下腔静脉在门静脉侧壁上建立～袖套，并安置套管。受体手术时，将此袖套与受体门静脉残端套管法吻合。动脉重建通过供体肠系膜上动脉与受体右肾动脉端端吻合。免疫保护作用通过术后病理学检查评估。结果：用此法建立肝肠联合移植大鼠模型手术无肝期显著缩短，与Kamada双套管法肝移植无肝期相同，血流动力学影响小，手术成功率高。术后7、14天异基因小肠移植组出现重度排斥反应，而肝肠联合移植组仅表现为中度排斥。结论：用该方法建立一期大鼠肝肠联合移植模型方便可行，且成功率高。肝肠联合移植时移植肝对移植小肠具有免疫保护作用。     

小剂量FK506作用下同种脾组织移植诱导大鼠原位肝移植术后免疫耐受的机制

目的:观察小剂量FK506作用下同种脾组织移植对大鼠肝移植术后免疫耐受的影响,探讨其可能的机制.方法:实验分5组(每组大鼠8只),同种肝移植组(A组)以纯系雄性Lewis大鼠为供体、雌性BN大鼠为受体进行同种原位肝移植;同种肝移植 小剂量FK506治疗组(B组)于肝移植术后口服途径给予小剂量FK506(0.25 mg/kg);同种肝脾联合移植组(C组)于肝移植同时移植供体脾脏;同种肝脾联合移植 小剂量FK506治疗组(D组)于肝脾联合移植后口服途径给予小剂量FK506;异体脾组织移植组(E组)于同种原位肝移植同时移植第三品系大鼠脾脏组织,术后进行小剂量FK506治疗.观察各组的存活期,并分析受体脾脏T淋巴细胞对同种抗原的反应性、嵌合体的形成情况以及肝脏病理变化.结果:与其他各组相比,C组大鼠的存活期明显延长;其受体T细胞同种抗原反应性明显降低;受体脾脏中供体阳性细胞明显升高(P＜0.01),且在60 d后受体脾脏中供体阳性细胞仍然较高;肝脏病理分析也未见明显排斥反应.结论:小剂量FK506作用下同种脾脏移植能明显诱导受体大鼠原位肝移植术后嵌合体的形成,降低受体T细胞对同种抗原的反应性,促进免疫耐受.     

不同缺血方式制作脑室周围白质软化大鼠模型的比较

目的通过比较不同的缺血方式,创建与人类早产儿脑室周围白质软化（PVL）病理相似的可靠PVL大鼠模型。方法随机将2日龄新生大鼠分为单侧颈总动脉结扎组、双侧颈总动脉结扎组以及假手术对照组。分别于术后2d和21d进行称重、光镜和电镜下脑病理评估。结果术后2d和21d,双侧结扎组新生大鼠的体重显著低于单侧结扎组及假手术组（P均〈0．05）。光镜下病理学观察显示,双侧结扎组脑皮质结构相对完整;皮层下和脑室周围白质则病变明显,术后21d,白质内见多个囊性疏松坏死区域形成。单侧结扎组皮层神经元呈弥漫性损伤,数量明显减少：皮层下白质则基本正常。两组在术后21d白质损伤病理评分之间的差异呈非常显著统计学意义（Х^2=8．751,P=0．003）。术后21d电镜显示双侧结扎组白质内髓鞘形成较单侧结扎组明显减少。结论单侧结扎组主要造成皮质受损,双侧结扎组则主要造成白质损伤,提示双侧颈总动脉结扎是制作PVL动物模型的可靠方法。     

脑梗死患者颈动脉粥样硬化病变特征及其预测价值

目的:观察脑梗死患者颈动脉粥样硬化病变特征,评估颈动脉超声对脑梗死的预测价值。方法:对106例经CT、MRI证实的脑梗死患者的颈动脉颅外段进行彩色超声多普勒检查,观察颈动脉壁的病变性质和颈动脉管腔的狭窄率,并与对照组进行比较。结果:106例脑梗死患者中有78例(73.58%)颈动脉颅外段存在粥样硬化斑块,与对照组比较差异显著(P<0.01);粥样硬化斑块好发于颈总动脉分叉处,颈动脉狭窄程度、斑块的性质与脑梗死的发生密切相关。脑梗死组高血压病、糖尿病患者的发生率明显高于对照组(P<0.01)。结论:颈动脉粥样硬化与脑梗死有密切相关性,对合并高血压、糖尿病的高危人群常规行颈动脉超声检查可以早期预测脑梗死,防止颈动脉粥样硬化斑块形成对预防脑梗死的发生有非常重要的意义。     

微粒化非诺贝特对原发性高血压并高甘油三酯血症颈动脉内膜中层厚度和血压的影响

目的:探讨微粒化非诺贝特对原发性高血压并高甘油三酯血症患者颈动脉内膜厚度和血压影响。方法:随机将78例原发性高血压并高甘油三酯患者分为治疗组和对照组,治疗组在波依定应用基础上加用微粒化非诺贝特,对照组仅给予波依定降压治疗,治疗期12个月,观察治疗前后患者颈动脉超声、血压、血脂、肾功、肝功变化。结果:治疗组12个月颈动脉内膜厚度明显变薄,IMT/内径(D)比率与治疗前相比降低(P<0.05),同时患者舒张压水平进一步降低与对照组相比(P<0.05)呈显著性差异。结论:原发性高血压并高甘油三脂患者在降压治疗同时加用非诺贝特可逆转患者颈动脉内膜厚度的增长,并且在降压药物的基础上,可能对患者舒张压有额外降低作用。     

大鼠单肺原位移植模型的建立及改良

目的:改进大鼠原位单肺移植模型建立的方法,建立稳定的动物模型?方法:将46只健康SD雄性大鼠随机配对,采用三袖套法进行肺动?静脉及支气管的吻合,建立大鼠肺移植模型?结果:手术成功20例,失败3例,其中肺静脉撕裂1例,吻合肺动脉失败1例,术后出血失败1例?供肺获取时间为(11.6±2.1)min,供肺套管时间为(13.6±2.4)min,动静脉和支气管套管吻合时间为(17.7±3.5)min?血气?胸片及病理检查证实成功建立大鼠单肺原位移植模型?结论:改良的建立大鼠单肺原位移植模型的方法能够更好的满足肺移植研究的需要?     

大鼠原位异体肾移植硬化加快模型的建立

目的 建立大鼠移植肾慢性失功加快动物模型。方法 分别采用雄性SD大鼠和Wistar大鼠作为供受体,进行原位肾移植。术中强化缺血／再灌注损伤,观察术后2、4、6、8及12周各时相血肌酐及移植肾病理变化。结果 经强化缺血／再灌注损伤1h处理的异体原位肾移植大鼠于术后6周起血肌酐开始明显升高,8周出现明显的慢性同种异体移植肾肾病(CAN)的病理改变,与未强化缺血／再灌注损伤对照组相比有明显的统计学差异．结论采用SD→Wistar 大鼠作为供受体,通过强化缺血／再灌注损伤建立原位异体肾移植硬化加快模型简便可行。     

NBD多肽预处理的树突状细胞延长移植心存活时间的实验研究

目的 探讨NBD多肽预处理的供体源性树突状细胞(DC)在诱导心脏移植免疫耐受中的作用及可能机制.方法 体外培养供体源性BALB/c小鼠骨髓树突状细胞并以NBD多肽预处理(NBD多肽-DC,在小鼠心脏移植前7 d,将NBD多肽.DC输至受者C57BL/6小鼠体内.应用Cu-T建立小鼠颈部异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,病理分析检测排斥反应程度.混合淋巴细胞反应(MLR)测定受者脾脏T细胞对供者同种抗原的反应性,并用ELISA方法测定受者血清Thl型细胞因子(IFN-γ和IL-12)和Th2型细胞因子(IL-4和IL-10)水平的变化.结果 NBD多肽-DC可使移植心脏存活天数延长至(21.83±3.54)d,较PBS对照组的(6.66±1.21)d明显延长(P＜0.01),降低排斥反应病理分级(Stanford 1～2级),能诱导受者脾脏T细胞的抗原特异性低反应性,使受者小鼠血清INF-γ和IL-12水平显著降低(P＜0.01).而IL-4和IL-10水平明显升高(P＜0.01).结论 NBD多肽预处理的供体源性DC能够诱导针对移植供者产生的特异性免疫耐受现象,其机制可能与诱导受者T细胞的抗原特异性低反应性及Th1/Th2免疫偏移有关.     

颈动脉球囊损伤对高同型半胱氨酸诱导兔动脉粥样硬化病变的形成无明显影响

目的观察颈动脉球囊损伤对高同型半胱氨酸诱导的家兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)病变形成的影响。方法新西兰家兔20只,随机分成对照组(n=10),As模型组(n=10)。两组均行颈动脉球囊拉伤术,术后As模型组每日经皮下注射甲硫氨酸80 mg/(kg/d)以诱导家兔形成动脉粥样硬化病变;对照组每日经皮下注射生理盐水。24周后处死动物,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组家兔实验前后血清同型半胱氨酸(Hcy)水平,运用光学显微镜检测24周后HE染色的动脉壁横切面病理改变,通过图像分析软件测量血管壁厚度变化,并与对照组进行比较。结果 24周后,As模型组家兔血清同型半胱氨酸含量较对照组明显升高(P0.05);同时主动脉壁出现不同程度地病理改变。但球囊损伤后的颈动脉壁厚度与对照组相比无统计学差异。结论球囊拉伤颈动脉对高同型半胱氨酸诱导的家兔动脉粥样硬化病变形成无显著影响。     

颈动脉球囊损伤对高同型半胱氨酸诱导兔动脉粥样硬化病变形成的影响

目的 观察颈动脉球囊损伤对高同型半胱氨酸诱导的家兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)病变形成的影响．方法 新西兰家兔 20 只,随机分成对照组 （n＝10）,As模型组 （n＝10）。两组均行颈动脉球囊拉伤术,术后As模型组每日经皮下注射甲硫氨酸80 mg/（kg?d）以诱导家兔形成动脉粥样硬化病变;对照组每日经皮下注射生理盐水。24周后处死动物,采用酶联免疫吸附法( EL ISA) 检测两组家兔实验前后血清同型半胱氨酸( Hcy)水平,运用光学显微镜检测24周后HE 染色的主动脉壁横切面病理改变,通过图像分析软件测量血管壁厚度变化,并与对照组进行比较。结果 24周后,As模型组家兔血清同型半胱氨酸含量较对照组明显升高( P < 0.05);同时主动脉壁出现不同程度地病理改变。但球囊损伤后的颈动脉壁厚度与对照组相比无统计学差异。结论 球囊拉伤颈动脉对高同型半胱氨酸诱导的家兔动脉粥样硬化病变形成无显著影响。     

慢性帕金森病MPTP猴模型自体颈动脉体细胞纹状体移植术后1H-MRS研究

目的　应用质子磁共振波谱 (1H- MRS) 技术, 进行慢性帕金森病 (PD) 1 甲基 4 苯基 1, 2, 3, 6- 四氢吡啶 (MPTP) 猴模型自体颈动脉体 (CB) 细胞纹状体区移植术后细胞结构生存能力检测。方法　采用 4 只按非人类灵长类帕金森病评分量表 (PPRS) 评价, 行为学症状持续稳定 1 个月的慢性 PD MPTP雄性猴模型, 应用 GE Signa1 5T NV/i磁共振扫描系统进行移植术前定位, 取一侧自体颈动脉体, 使用 Leksell立体导向系统行纹状体区立体定向移植术, 于移植术后 8 周内每 2 周行双侧纹状体区1H MRS 采集, 检测大脑主要代谢物氮 乙酰天门冬氨酸(NAA)、胆碱化合物 (Cho)、肌酸及磷酸肌酸 (Cr), 采用随机软件FuncTool 4 .0对各代谢物含量行半定量分析, 观察NAA/Cr和Cho/Cr的变化, 以配对 t检验行统计学分析, 按PPRS标准进行移植后行为学评分并与代谢物比值进行对照分析。结果　移植术4周后, 移植侧纹状体区 NAA/Cr逐渐增高, Cho/Cr逐渐下降, 术后 6 周与未移植侧纹状体区比较出现显著性差异 (P<0 .05)。行为学评分呈下降趋势。结论　1H MRS能够显示慢性PD MPTP猴模型移植区域的代谢及生化改变, 自体CB细胞移植能够促进局部多巴胺神经元的生长, 可以作为有效手段应用于 PD的治疗。     

阿托伐他汀对老年高胆固醇血症内皮依赖舒张功能及颈动脉粥样硬化的影响

目的探讨阿托伐他汀的降脂疗效及对老年高胆固醇血症患者动脉血流介导舒张功能、颈动脉早期粥样硬化及颈动脉斑块的影响.方法采用治疗前后自身对照比较的方法,选择30例合并有颈动脉斑块的高胆固醇血症患者,给予阿托伐他汀10mg,qd,总疗程1年,分别测定治疗前及治疗后6个月及12个月动脉血流介导舒张功能及颈动脉内膜-中层厚度、颈动脉斑块及颈动脉血流指数的变化.结果阿托伐他汀治疗6个月及12个月后,TC,LDL-C,TG降低,HDL-C升高;颈动脉内径有所扩大,颈动脉斑块缩小,血流动力学参数改善,且FMD改善,尤以12个月后改变更加明显(P＜0.01).结论阿托伐他汀降脂疗效确切,并有改善血管内皮功能,改善颈动脉血流动力学参数,减小并稳定斑块的作用.     

阿托伐他汀治疗急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的临床研究

目的观察阿托伐他汀治疗急性缺血性卒中患者颈动脉粥样硬化斑块的临床疗效。方法 120例急性缺血性卒中且颈动脉粥样硬化斑块患者随机分为两组,对照组采用常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用阿托伐他汀,观察两组颈动脉内膜-中层厚度(IMT)、斑块面积变化、血脂变化及不良反应情况。结果治疗后两组颈动脉IMT变薄、斑块面积减小,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),组间治疗后比较,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平明显下降,高密度脂蛋白(HDL-C)水平升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前后血脂比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿托伐他汀可显著减轻患者的颈动脉粥样硬化,缩小斑块面积,调节血脂,预防卒中事件复发。     

兔子颈总动脉缺损拉伸吻合的实验研究

目的研究兔子颈总动脉纵向拉伸以及吻合情况,为临床修复颈总动脉长短缺损提供实验依据。方法新西兰大白兔6只,均游离出长60mm颈总动脉,分3组（各2只）分别切除18、21和24mm,纵向拉伸后进行端端吻合,相当于23.8%、28.2%及33.3%的纵向伸长率。15d后对动脉血管进行病理学检查。结果切除18和21mm组颈总动脉吻合成功,切除21mm组吻合难度较大,切除24mm组吻合失败。吻合成功血管术后15d病理检查显示,动脉的吻合口平滑,血管内径无狭窄,血管存在水肿和纤维增生;血管内膜处于极度的拉伸状态。结论颈总动脉可被拉伸延长后进行端端吻合,伸长率可达28.2%。长段游离后拉伸动脉是有效的修复创伤性动脉长段缺损的方法之一。     

骨髓间充质干细胞肾动脉注射移植修复裸鼠急性肾小管坏死

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对裸鼠急性肾小管坏死(ATN)的修复作用,为MSCs移植治疗ATN提供实验依据。方法:5周龄裸鼠随机分为健康对照组、ATN模型组、MSCs移植治疗组。ATN模型采用50%甘油肌内注射诱导,MSCs移植采用经肾动脉注射途径向肾脏内移植增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的MSCs。实验期间观察饮食、活动等变化,检测血肌酐(Scr)水平,H-E染色观察肾组织病理学变化,荧光显微镜观察EGFP标记的阳性细胞在裸鼠肾脏的分布及数量。结果:ATN模型组裸鼠肾脏肾小管上皮细胞变性、局部坏死,病变于肾皮质或皮髓交界处明显,而肾小球未见明显异常。MSCs移植治疗组的肾小管上皮细胞无混浊肿胀和细胞核固缩溶解,间质无明显的充血和水肿。MSCs细胞移植后第14天的受体鼠肾小管中EGFP阳性细胞明显增多。结论:肾动脉注射途径移植的MSCs能定位于肾小管上皮,可促进ATN中损伤的肾小管上皮细胞的修复。