二氢杨梅素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响。方法 2014年3月至2015年2月,该院采用99%纯度的DMY为抑制剂,以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,采用MTT法、流式细胞术法和免疫细胞化学来分析乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的情况。结果当使用浓度大于20μg/mL的DMY处理细胞时,出现了抑制效果,但效果不佳;当用40与80μg/mL的DMY时,明显地抑制了乳腺癌细胞MCF-6的增殖,且有不同程度的敏感性。当DMY为80μg/mL时,其IC50为226.9μg/mL。抑制率和IC50分别与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。40与80μg/mL的DMY处理乳腺癌细胞MCF-6可以诱导其周期阻滞在G2/M期(P0.01),并表现出明显的细胞凋亡现象,同时,G0/G1期也受到阻滞,S期细胞比例降低明显,差异有统计学意义(P0.05);当使用浓度大于20μg/mL的DMY时,PCNA阳性率有所下降,当浓度为40μg/mL的DMY时,乳腺癌细胞MCF-6的PCNA阳性率明显下降(P0.01),尤其浓度为80μg/mL的DMY时,阳性率为10.00%。与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论对乳腺癌患者采用DMY可以有效抑制癌细胞快速增殖,加速器凋亡,减缓患者病情,疗效突出。     

LASS2通过AMPKα/mTORC1信号通路诱导HepG2肝癌细胞自噬和凋亡

目的 研究LAG1长寿保障基因2(LASS2)过表达对HepG2肝癌细胞凋亡、自噬的作用及可能的信号通路。方法 采用HepG2肝癌细胞进行研究,设置空白对照组、空载组(重组腺病毒Adv-GFP感染细胞)、实验组(重组腺病毒Adv-LASS2-GFP感染细胞)。感染48 h后分别提取各组细胞总RNA和蛋白,采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)、Western blot检测LASS2 mRNA、蛋白表达水平的变化;CCK-8实验评价各组细胞增殖能力的差异及流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白(BCL2、Bax)、自噬相关蛋白(SQSTM1、LC3A/B、Beclin-1)及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)α/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路相关蛋白(t-AMPKα、p-AMPKα、t-Raptor和p-Raptor)的表达水平。结果 与空白对照组、空载组相比,实验组LASS2 mRNA、蛋白相对表达水平均明显上调(P<0.001),且HepG2肝癌细胞增殖能力明显被抑制(P<0.001)。流式细胞仪检...     

细胞凋亡与自噬关系的探讨

细胞凋亡与自噬同属于程序性细胞死亡,而上述二者对于维持细胞和机体的稳态均是必不可少的基本生理机制.细胞凋亡与自噬之间既有区别又有联系,而两者关系较为复杂,迄今为止尚未被完全阐明.笔者对细胞凋亡与自噬之间的关系进行综述,以期为临床研究及基础实验提供理论参考.     

自噬相关基因5通过影响p53信号通路促进肝细胞癌发展

目的 探讨自噬相关基因5(autophagy-related gene 5, ATG5)在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC进展中的作用及其影响的下游信号通路。方法 通过肿瘤基因组图谱（The Cancer Genome Atlas, TCGA）数据库查找ATG5在HCC患者的组织表达及其亚组的差异分析。采用免疫印迹法明确ATG5在HCC细胞系中的表达水平。通过CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验观察敲减ATG5基因后对HCC细胞系（HCCLM3和MHCC97-H）增殖、迁移和侵袭功能的变化。在HCC细胞系MHCC97-H敲减ATG5基因后，使用有参转录组测序分析下游相关信号通路的变化。结果 TCGA数据库分析显示，在m RNA水平，ATG5在HCC组织的表达明显高于正常肝组织（P<0.000 1）,HCC 3期患者的ATG5水平高于1期患者的水平（P=0.013）,p53变异组患者癌组织的ATG5水平高于非变异组（P<0.000 1）。免疫印迹结果显示，与正常肝细胞L02相比，ATG5蛋白水平在检测的HCC细胞株中均明显高表达...     

γδT细胞调控多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的作用

目的:探讨γδT细胞对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法:采用Ficoll分离法获取健康成年人外周血单个核细胞(PBMNC),体外刺激诱导获取γδT细胞,流式细胞术检测γδT细胞纯度。收集γδT细胞与骨髓瘤细胞RPMI-8226或U-266按照不同效靶比于transwell小室中分别共培养。采用CCK-8法检测细胞增殖,通过流式细胞术和Western blot方法检测细胞周期分布和细胞凋亡情况,通过Western blot方法检测自噬相关蛋白表达情况。结果:PBMNC在体外刺激诱导下,可获得大量扩增的γδT细胞。γδT细胞具有抑制骨髓瘤细胞增殖的作用,同时诱导细胞周期阻滞并促进细胞的凋亡,且作用具有效靶比依赖性。此外,γδT细胞可增强骨髓瘤细胞的自噬能力,抑制骨髓瘤细胞PI3K、P-AKT和P-mTOR的表达,上调AMPK和Beclin-1的表达水平。结论:γδT细胞在体外具有抑制骨髓瘤细胞RPMI-8226或U-266的增殖,促进其凋亡和增强自噬的作用。其作用机制可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,和/或激活AMPK/Beclin-1信号通路。     

1,25-二羟维生素D3对人结肠癌细胞凋亡和自噬的影响及机制研究

目的 观察1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对人结肠癌HCT-116细胞凋亡和自噬的影响并初步探讨其机制.方法 体外培养人结肠癌细胞HCT-116,分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和联合组[1,25-(OH)2D3高剂量联合腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂]共5组,观察并比较各组细胞凋...     

吴茱萸碱抑制Wnt通路诱导人胰腺癌细胞凋亡和自噬的作用研究

目的探讨吴茱萸碱诱导人胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1凋亡和自噬的作用机制。方法不同浓度吴茱萸碱干预胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1后,用甲基三氯硅烷（MTS）法检测吴茱萸碱对胰腺癌细胞增殖的影响,并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。用蛋白质印记试验（Western blot）检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、自噬相关蛋白胞浆型（LC3-Ⅰ）和膜型（LC3-Ⅱ）,以及Wnt通路下游靶分子c-Myc、细胞周期素D1（Cyclin D1）的表达水平。结果 MTS实验结果显示2μmol/L的吴茱萸碱干预48 h后的胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1的存活率分别为（68.13±0.79）％和（57.19±1.47）％,明显低于未干预的胰腺癌细胞株,差异均有统计学意义（t分别=31.45、21.65,P均＜0.05）。4μmol/L的吴茱萸碱干预48 h后的胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1的存活率分别为（55.07±1.97）％和（50.32±0.86）％,也低于2μmol/L吴茱萸碱干预的胰腺癌细胞株,差异均有统计学意义（t分别=6.13、4.02,P均＜0.05）。2μmol/L吴茱萸碱干预的BxPC-3和PANC-1胰腺癌细胞株凋亡率分别为（11.37±0.36）％和（11.36±0.32）％,明显高于未干预的胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1凋亡率（4.60±0.90）％和（4.00±0.86）％,两组之间,差异有统计学意义（t分别=8.27、10.14,P均＜0.05）。2μmol/L吴茱萸碱干预的BxPC-3和PANC-1胰腺癌细胞株较未干预的胰腺癌细胞株凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降, Bax表达明显增加;LC3-Ⅱ/LC-3Ⅰ比值分别为对照组的2.5倍和6.4倍;Wnt通路下游靶分子c-Myc和Cyclin D1的表达均明显降低。结论吴茱萸碱能够通过抑制Wnt通路的活性诱导胰腺癌细胞凋亡和自噬。     

雷帕霉素联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡和自噬及对细胞侵袭力的影响

目的研究雷帕霉素联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡、自噬及其对细胞侵袭转移能力的影响。方法将雷帕霉素以及顺铂分别或联合作用于HepG-2细胞,采用MTT法检测HepG-2细胞增殖抑制情况,采用透射电镜、流式细胞仪检测HepG-2细胞凋亡,采用MDC染色、转染pGFP-LC3检测细胞自噬,用Transwell小室测定HepG-2细胞对细胞外基质的侵袭力。结果与对照组相比,单独应用雷帕霉素组未出现明显的细胞凋亡情况;单独应用顺铂组细胞凋亡情况较明显,凋亡率达到(21.27±3.65)%;顺铂联合应用雷帕霉素组细胞凋亡率最高,达到(43.33±5.64)%。雷帕霉素组、顺铂组和顺铂联合应用雷帕霉素组HepG-2细胞均出现点状的自噬泡,顺铂联合应用雷帕霉素组自噬泡数量显著高于雷帕霉素组和顺铂组。雷帕霉素组、顺铂组和顺铂联合应用雷帕霉素组对HepG-2细胞侵袭抑制率分别为(19.2±5.1)%、(47.8±4.1)%和(78.0±2.4)%。结论顺铂可直接诱导HepG-2细胞凋亡,雷帕霉素本身不诱导HepG-2细胞凋亡,但其可显著促进顺铂诱导的HepG-2细胞凋亡;同时顺铂和雷帕霉素均可直接诱导HepG-2细胞自噬,但两者联合应用促进HepG-2细胞自噬情况非常明显。体外侵袭实验结果表明顺铂联合应用雷帕霉素可显著降低HepG-2细胞的体外侵袭能力。     

Survivin抑制剂YM155对K562细胞凋亡和自噬的影响

目的:本研究旨在探讨survivin抑制剂YM155对人慢性髓系白血病细胞株K562凋亡和自噬的影响。方法:采用不同浓度YM155处理K562细胞,用CCK-8法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,RTPCR检测survivin、BCL-2及beclin1的mRNA表达水平,Western blot检测survivin、BCL-2、caspase-3、PARP及LC-3的蛋白表达。结果:YM155抑制K562细胞的增殖,且呈时间及剂量依赖性。随着药物浓度的升高及作用时间的延长,survivin和BCL-2的mRNA及蛋白表达水平下降,而caspase-3、PARP、beclin1及LC-3的表达水平升高。YM155联合3-MA组的LC-3和caspase-3蛋白表达水平以及K562细胞凋亡率均显著低于YM155单用组。结论:YM155通过诱导凋亡和自噬而抑制K562细胞的增殖,其自噬诱导效应与凋亡诱导效应有协同抗CML的作用。     

鸢尾黄酮通过促进自噬抑制结肠癌细胞增殖并诱导其凋亡研究

目的：探究鸢尾黄酮对结肠癌细胞自噬及其对细胞增殖能力和凋亡的影响。方法：鸢尾黄酮对结肠癌细胞的半抑制浓度（IC50）采用CCK-8法检测;结肠癌细胞的长期增殖能力采用克隆平板实验检测;采用CCK-8法检测不同抑制剂预处理后鸢尾黄酮对结肠癌细胞增殖活性的影响;采用蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白的变化情况;透射电镜观察结肠癌细胞中自噬体的数量;采用CCK-8法检测小干扰RNA（siRNA）沉默自噬关键蛋白ATG5转染后鸢尾黄酮对结肠癌细胞增殖活性的影响。结果：通过不同浓度鸢尾黄酮作用下结肠癌细胞系SW480的生长抑制情况绘制IC50曲线,确定其IC50为（221.90±35.31） μM;克隆平板实验表明鸢尾黄酮对结肠癌细胞的长期增殖能力具有抑制作用;凋亡抑制剂Z-VAD显著逆转了鸢尾黄酮对结肠癌细胞的增殖抑制作用;Western blot实验结果表明,随着鸢尾黄酮作用浓度的升高,SW480细胞内LC3-Ⅱ含量逐渐上升,p62含量下降;电镜结果表明,经鸢尾黄酮作用后SW480细胞内自噬体含量明显增加;沉默ATG5可部分逆转鸢尾黄酮对SW480细胞的增殖抑制作用。结论：鸢尾黄酮通过促进自噬抑制了结肠癌细胞的增殖能力,并诱导结肠癌细胞的凋亡。     

大鼠深Ⅱ度烫伤后创面自噬及凋亡的表达规律

目的 观察大鼠深Ⅱ度烫伤后72 h内创面自噬及凋亡的表达规律,探讨其与深Ⅱ度创面早期加深之间的关系.方法 Wistar大鼠背部10％ TBSA深Ⅱ度烫伤,观察烫伤后1h、6h、12 h、24 h、48 h、72 h创面组织自噬标志蛋白LC3、Beclin-1的表达及变化规律;TUNEL法检测创面凋亡水平的变化规律;HE染色及Masson染色显示创面组织形态和创面深度的变化.结果 烫伤后创面组织LC3、Beclin-1蛋白水平持续下降,至伤后24h达到最低,此后稍有升高,但仍远低于正常水平;伤后创面组织TUNEL阳性细胞持续增多,至伤后48 h达到最高,此后稍有下降,但仍远高于正常水平;创面组织真皮深层自噬被激活;烫伤后创面深度随着时间的推移进行性加深.结论 大鼠深Ⅱ度烫伤后早期创面组织自噬减少,凋亡增加,可能是参与创面加深的因素;真皮深层自噬的激活,可能是一种保护机制.     

放射诱导多倍体结肠癌细胞凋亡与自噬的研究

目的:探讨放射诱导多倍体结肠癌细胞的凋亡和自噬。方法:采用14 Gy剂量的X射线处理SW1116细胞,分别在放射处理后的第3天、第5天、第7天、第10天及第25天观察细胞的形态变化,分别记为A组、B组、C组、D组和E组;在第5天、第25天用流式细胞术检测细胞倍性、细胞凋亡的变化;采用Western blot检测细胞周期...     

重复异丙酚麻醉通过mTOR通路诱导新生大鼠海马细胞凋亡及自噬的研究

目的 研究重复异丙酚麻醉对新生大鼠海马细胞凋亡及自噬的影响及分子机制。方法 选择7日龄的雄性SD大鼠,以随机数字表法随机分为对照组(0. 9%氯化钠溶液7. 5 m L/kg腹腔注射)、异丙酚组(异丙酚75 mg/kg腹腔注射)、异丙酚+雷帕霉素组(异丙酚75 mg/kg及雷帕霉素3. 0 mg/kg腹腔注射),均每天1次、连续给药7 d。分离海马组织,检测细胞凋亡率及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路分子、凋亡基因、自噬基因的表达水平。结果 对照组、异丙酚组、异丙酚+雷帕霉素组海马组织中的细胞凋亡率分别为(3. 27±0. 93)%、(14. 27±3. 12)%、(6. 58±1. 21)%,磷酸化-m TOR/总-m TOR水平分别为0. 42±0. 09、0. 89±0. 15、0. 61±0. 12,磷酸化-S6K/总-S6K水平分别为0. 34±0. 07、0. 83±0. 15、0. 49±0. 09,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的mRNA表达量分别为0. 73±0. 14、1. 94±0. 31、1. 05±0. 20,Beclin-1的mRNA表达量分别为0. 91±0. 12、0. 47±0. 09、1. 83±0. 15。异丙酚组海马组织中的细胞凋亡率、磷酸化-m TOR/总-m TOR、磷酸化-S6K/总-S6K、Caspase-3的mRNA表达量分均明显高于对照组,Beclin-1的mRNA表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05);异丙酚+雷帕霉素组海马组织中的细胞凋亡率、磷酸化-m TOR/总-m TOR、磷酸化-S6K/总-S6K、Caspase-3的mRNA表达量均明显低于对照组,Beclin-1的mRNA表达量均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论 重复异丙酚麻醉能够通过增强m TOR通路使新生大鼠海马细胞的凋亡加剧、自噬受阻。     

miR-422a通过ATG12调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的研究

目的 探讨miR-422a调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的作用和机制及其与靶基因ATG12的关系.方法 采用瞬时转染miR-422a模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤细胞的miR-422a表达水平,采用MTT法检测各时间点骨肉瘤细胞的增殖能力,瞬时转染miR-422a后采用流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚...     

缺糖缺氧心肌细胞中miRNA-155对Notch信号通路及自噬和凋亡的影响

目的 探讨miRNA-155在缺糖缺氧心肌细胞模型中对Notch信号通路及心肌细胞凋亡与自噬的影响.方法 建立缺糖缺氧细胞(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,细胞分为正常对照组,OGD组,OGD组+miRNA-155 inhibitor阴性对照组及OGD组+miRNA-155 inhi...     

Hippo-YAP信号通路通过Beclin1调控自噬参与血管平滑肌细胞表型转换的机制研究

目的:探索Hippo-YAP信号通路与自噬在血管平滑肌细胞表型转换中的作用关系及其机制。方法:(1)培养小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),选取第4～8代用于实验,使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,1×10^-7mol/L)处理24 h构建VSMCs表型转换模型,对照组细胞以同浓度的二甲基亚砜(DOSO)处理。(2)使用Western Blot、qRT-PCR技术在蛋白质及mRNA水平对YAP,VSMCs表型标志物OPN、α-SMA,以及自噬相关标志物LC3、P62、Beclin1进行检测。(3)分别构建YAP与Beclin1的小干扰RNA(siRNA)对其进行敲减,构建YAP的过表达质粒(pcDNA-YAP)对其进行过表达,使用WB与qRT-PCR验证各基因的表达变化。结果:(1)与对照组相比,AngⅡ处理后VSMCs收缩型标志物α-SMA表达下调、合成型标志物OPN表达上调,YAP及自噬相关标志物LC3Ⅱ、Beclin1表达上调、P62表达下调,在蛋白质及mRNA水平均差异有统计学意义。(2)与对照组相比,YAP siRNA转染后,VSMCs中YAP在蛋白质与mRNA水...     

Tspan1通过诱导细胞自噬拮抗奥沙利铂诱导的结直肠癌细胞凋亡

目的 探讨四次跨膜蛋白1(Tspan1)过表达对奥沙利铂（OXA）诱导的人结直肠癌细胞系HCT116细胞凋亡的影响并分析其可能作用机制。方法 将Tspan1过表达质粒及其阴性对照空载质粒分别转染至HCT116细胞中,q RT-PCR和Western blot法检测胞中Tspan1 m RNA及其蛋白表达水平。采用14.15μg/mL OXA或联合5 mmol/L自噬抑制剂3-MA干预转染后HCT116细胞,MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;免疫荧光检测细胞中LC-3B蛋白表达情况;Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白LC-3、Beclin1和p62蛋白表达水平。结果 Tspan1过表达可显著上调HCT116细胞中Tspan1mRNA和蛋白表达水平,降低HCT116细胞对OXA的敏感性,抑制OXA诱导的HCT116细胞凋亡,并增强细胞中LC3B蛋白荧光强度,上调细胞中LC-3II/LC-3I比值及Beclin1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平。然而,联合3-MA处理可逆转Tspan1过表达对OXA诱导HCT116细胞凋亡的抑制作用,提高细胞对OXA的敏感...     

镁对健康人外周血CD4~＋T细胞凋亡和自噬的影响

背景：研究表明镁参与了机体免疫系统的调节,包括细胞增殖、凋亡等过程。目前国内外尚未见报道镁浓度对健康人外周血CD4＋T淋巴细胞的凋亡和自噬有何影响。目的：拟观察镁离子浓度对体外培养的健康人外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡和自噬的影响。方法：分离20名健康人外周血CD4＋T淋巴细胞,与不同浓度的镁共培养24-72h,分别为低浓度镁（0.2和0.4mmol/L）、生理浓度镁（0.8mmol/L）和高浓度镁（5和10mmol/L）,然后以流式细胞术检测细胞的凋亡和自噬水平。结果与结论：①CD4＋T细胞与低浓度镁共培养后,细胞的凋亡和自噬水平均显著增加（P〈0.05）。②高浓度镁则显著下调CD4＋T细胞的凋亡和自噬水平（P〈0.05）。③非生理浓度的镁对CD4＋T细胞凋亡和自噬的影响呈浓度依赖性和时间依赖性,但是生理浓度镁（0.8mmol/L）对健康人外周血CD4＋T细胞的凋亡和自噬无影响（P〉0.05）。结果提示细胞外镁缺乏可以诱导健康人外周血CD4＋T细胞的凋亡和自噬,而补充镁可以下调其凋亡和自噬水平,生理浓度的镁不影响其凋亡和自噬水平。     

白藜芦醇通过激活mTOR/自噬抑制缺氧缺糖/复氧复糖诱导的PC12细胞损伤及凋亡

目的:白藜芦醇对缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)诱导的PC12细胞损伤及凋亡的影响及作用机制。方法:以PC12细胞建立OGD/R自噬性损伤模型,设置空白对照组、模型组、不同浓度(5、10μmol/L)白藜芦醇组,自噬抑制剂(3-MA)组。使用CCK-8试剂盒检测PC12的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;ELISA检测各组细胞培养液中TNF-α和IL-6的浓度变化;DHE荧光探针检测ROS的变化;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-PX)含量;Westernblot法检测各组mTOR的磷酸化情况及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达。结果:与空白对照组相比模型组能够显著降低PC12的增殖能力,增加细胞中ROS的含量和凋亡率,诱导TNF-α和IL-6分泌,LDH、MDA含量显著增加,SOD、GSH-PX活性显著下降,而P-mTOR/mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin-1表达增加(P<0.01)。与模型组比较,不同浓度白藜芦醇作用PC12时,细胞存活率逐渐上升,ROS含量及凋亡率逐渐下降,LDH、MDA含量减少,SOD、GSH-PX活性随之上升,TNF-α和IL-6分泌显著下降,P-mTOR/mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin-1表达进一步增加(P<0.01)。自噬抑制剂(3-MA)组上述指标的检测结果与白藜芦醇组相反。结论:白藜芦醇可能部分通过激活mTOR/自噬通路对神经细胞发挥保护作用。     

DOCK1通过AMPK/mTOR通路对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的调控机制研究

目的 探讨胞质分裂作用因子1(dedicator of cytokinesis 1,DOCK1)在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）中的表达及其对癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及相关机制。方法 选取MM患者骨髓组织及人MM细胞株U266和RPMI 8266进行研究,采用实时荧光定量PCR(real time-quantitative PCR,RT-qPCR)法检测MM骨髓组织及细胞中DOCK1相对表达;构建敲低DOCK1表达细胞系,采用CCK-8法和流式细胞术检测DOCK1对MM细胞增殖与凋亡的影响;Western blot实验检测细胞增殖相关蛋白（c-Myc,cyclin D1）、凋亡相关蛋白（Bax,Bcl-2）、自噬相关蛋白（LC3-II/LC3-I,P62）及AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果 LV-DOCK1-shRNA2组的U266和RPMI8266细胞增殖率在24,48和72h均显著低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义（FU266=21.130～100.108,FRPMI8266=35.067～95.677,均P<0.001）...