正常骨髓基质细胞促进残留耐药Jurkat细胞凋亡的研究

目的探讨正常骨髓基质细胞对残留耐药Jurkat细胞凋亡的促进作用及其可能机制。方法体外分离培养急性淋巴细胞白血病患者和健康供者骨髓基质细胞(BMSCs),分别模拟白血病和正常骨髓造血微环境,并与获得柔红霉素(DNR)耐药的Jurkat细胞(Jurkat/DNR细胞)共培养。绘制悬浮培养和与BMSCs共培养4d的Jurkat/DNR细胞的增殖曲线,并检测悬浮培养及共培养14、1、0d的Jurkat/DNR细胞的caspase3/7活性和bcl-2、bax、DAPK1 mRNA表达情况。结果与骨髓基质细胞共培养比较,悬浮培养的Jurkat/DNR细胞生长受到明显抑制。共培养41、0d后,Jurkat/DNR细胞caspase3/7活性升高,且共培养10d的活性高于共培养4d(P<0.05)。共培养4、10d后,Jurkat/DNR细胞bcl-2表达增加,共培养14、1、0d后,死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达增加(P<0.05)。而bax表达在各时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。结论正常骨髓基质细胞能促进Jurkat/DNR凋亡,其机制可能与过表达的DAPK1诱导Jurkat/DNR细胞凋亡和bcl-2转录下调c、aspase3/7活性升高有关。     

自制细胞分离器提取表皮细胞治疗白癜风36例

白癜风为皮肤科常见病，病因不明，治疗棘手。目前，国内外医学界普遍认为表皮细胞移植术治疗白癜风疗效较好，尤其对局限性、稳定期的病变，疗效更显著。1999开始，我们应用自制表皮细胞分离器提取含有黑素细胞的表皮移植，在门诊治疗白癜风36例，疗效良好。     

细胞凋亡及凋亡细胞的检测

近几年细胞凋亡逐渐为生命科学界所重视，在检测技术和实际应用等方面取得了很大进展，成为医学领域研究的热点之一。随着相关研究的深入将推动基础及临床医学的进展。１　生物学含义１．１　命名　１９７２年ＫｅｒｒＪＦＲ根据细胞发生与坏死不同的死亡现象，提出了凋亡的概念，称为Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ（ＡＰ）。该词根据希腊语ａｐｏ（脱离）、ｐｔｏｓｉｓ（下降）组成，意如秋天落叶，是生命的自然过程。因细胞凋亡按一定程序进行，故又称程序性死亡（ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ，ＰＣＤ）［１，２］。目前，凋亡与程序性…     

病毒性心肌炎患儿NK细胞、LAK细胞活性及T细胞亚群的变化

 目的 探讨机体的免疫状态与小儿病毒性心肌炎(VMC)发病的相互关系,为临床治疗提供依据.方法 对29例病毒性心肌炎患儿和15例健康体检儿采用单克隆抗体标记的间接ABC免疫组化法测定T细胞亚群,3H-TdR标记测定NK细胞、LAK细胞活性.结果 VMC患儿急性期外周血NK细胞、LAK细胞的活性及T细胞亚群CD3、CD4/CD8比值明显低于对照组,CD8明显高于对照组(P＜0.01).结论 VMC患儿急性期存在NK细胞、LAK细胞功能紊乱,T细胞亚群表达及比例失调,证实了免疫细胞功能紊乱与VMC发病有关.     

疟原虫伴戈谢细胞样细胞增多1例

患者 ,女 ,32岁 .因反复寒战、发热、出汗、呕吐 3个月 ,于 2 0 0 1 - 0 8- 0 9入院。体检 :浅表淋巴结未触及 ,皮肤及粘膜轻度黄染 ,未见出血点 ,心肺正常。脾脏显著肿大 ,质硬。贫血貌 ,消瘦。　　实验检查 :RBC :2 .35× 1 0 1 2 ·L-1 ,Hb :6 9g·L-1 ,WBC :1 3.2× 1 0 9·L-1 ,BPC 1 5 1× 1 0 9·L-1 。疑病人患疟疾 ,多次采用薄 (厚 )血膜涂片法 ,均未找见疟原虫。进一步作骨髓涂片检查。骨髓涂片经瑞氏染液染色后油镜下可见散在恶性疟原虫配子体 ,同时出现较多异常细胞 ,此类细胞体积大 ,直径 39μm～ 5 6 μm ,类圆形 ,核小…     

自体CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌30例

目的探讨自体CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法对我科30例晚期非小细胞肺癌患者采用自体CIK细胞治疗。结果26例部分缓解,近期有效率56.60％,中位生存期为8.5个月。结论自体CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌能延长患者生存期,提高患者生存质量。     

过氧化氢对肠上皮细胞线粒体膜电位及细胞凋亡的影响

目的 :探讨过氧化氢在体外对肠上皮细胞线粒体膜电位的影响及其与细胞凋亡的关系。方法 :肠上皮细胞株 (SW -4 80 ) ,采用过氧化氢 (H2 O2 )损伤模型 ,用 5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μmol·L-1和 4mmol·L-1作用 1、3、6、12及 2 4h。线粒体功能采用噻唑蓝法 (MTT法 ) ;用罗丹明 (Rhodamine- 12 3)荧光探针检查活细胞线粒体膜电位变化 ;用Annexin -Ⅴ荧光探针 ,流式细胞仪检测早期凋亡细胞 ;同时观察细胞形态学和线粒体超微结构的改变。结果 :H2 O2 在低浓度 (5 0、10 0、2 0 0 μmol·L-1)时线粒体功能未见明显改变 ,在高浓度 (4 0 0 μmol·L-1、4mmol·L-1)时可导致线粒体功能不可逆的进行性下降 ,线粒体内嵴减少、肿胀 ;同时使线粒体膜电位显著降低 ,细胞凋亡率显著增加。结论 :线粒体参与了H2 O2 诱导肠上皮细胞的早期程序性死亡及随后的细胞死亡 ,这种损伤作用与线粒体结构、功能改变和膜电位下降密切相关。     

难治性贫血与巨幼细胞性贫血细胞形态学鉴别分析

目的 探讨难治性贫血（MDS—RA）与巨幼细胞性贫血（MA）形态学特征。方法回顾分析40例RA,48例MA血象、骨髓象及骨髓细胞铁染色检查的特点。结果RA与MA血象均以全血细胞减少为主,MCV〉100fl,血片中可见到幼红细胞及幼稚粒细胞;红系巨变,骨髓细胞内外铁增加。RA骨髓象中红系以中晚幼红细胞增生为主,MA骨髓象中红系以巨早、中幼红细胞为主;RA病态遗血表现为粒系核浆发育不平衡、双核、环状核粒细胞,红系巨大,巨系出现小巨核、淋巴样巨核等。MA骨髓象表现为巨晚幼粒、杆状核粒细胞及分叶过多的粒细胞;红系早、中幼阶段巨幼变;分多个小核巨核细胞。结论RA与MA细胞形态学既具有相似性,又具有各自不同特征,这些特征可为这两种疾病的诊断和鉴别诊断提供线索和依据。     

完整细胞打点杂交技术的建立

介绍一些将完整细胞收集在硝酸纤维素膜上裂解释放DNA，并在此基础上进行点杂交的新方法，结果可达到相对定量，此技术较传统打点杂交更为简便、快速且适于批量检测和筛选，易于推广。     

细胞生长因子对电场诱导血管平滑肌细胞定向迁移的影响

目的:探讨细胞生长因子(GF)对生物电场(EF)诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)定向迁移的影响。方法:体外培养大鼠主动脉VSMC,在不同条件培养基中用150 mV.mm-1EF干预6h,显微成像及图象分析技术检测平滑肌细胞迁移情况。结果:在含有10%胎牛血清(FBS)的培养基中,VSMC在EF作用下向阴极迁移。在无血清的培养基中,细胞没有定向迁移。在无血清培养基中补充血小板源生长因子-BB、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子-β1(PDGF-BBb、FGF、TGF-β1)时,部分恢复细胞向阴极迁移。结论:EF诱导的VSMC定向迁移依赖于血清的存在,血清中的生长因子与EF协同作用,促进细胞向阴极迁移。     

树突状细胞:诱导移植免疫耐受的工具细胞和靶细胞

目前,树突状细胞（dendritic cells,DC）生物学研究的热点已由诱导免疫应答转向诱导免疫耐受。经典的髓细胞样DC（mDC）及最近新发现的类浆细胞样DC（pDC）亚群的致耐受作用已经明确;DC诱导耐受的特性可能与调节性T细胞（Treg）的作用密切相关;DC细胞具有独特的获取并交叉呈递外来抗原的能力。因此,在非炎性环境中DC可以诱导抗原特异性免疫耐受。本文综述了这三方面的研究现状,并探讨了DC诱导器官移植免疫耐受的应用前景。     

早期白血病细胞清除与成人急性淋巴细胞白血病

目的 探讨早期白血病细胞清除在成人急性淋巴细胞白血病中的临床意义.方法 45例成人急性淋巴细胞白血病患者以长春新碱、柔红霉素、环磷酰胺、泼尼松及左旋门冬酰胺酶方案诱导化疗,评估第15～21天期间骨髓白血病细胞比例,以白血病细胞占骨髓有核细胞5%以下作为早期白血病细胞清除标准,统计分析早期白血病细胞清除与成人急性淋巴细胞白血病临床结局的关系.结果 病例随访时间1～61个月,中位随访时间9个月.获得早期白血病细胞清除的病例占总数的57.8%,与性别无关(P=1.0),但年龄大不利于早期白血病细胞清除(P=0.0419).化疗后早期骨髓抑制有利于早期白血病细胞清除(P=0.018).早期白血病细胞清除与4周内完全缓解密切相关(P=0.000).未获早期白血病细胞清除者,几乎不可能达4周内完全缓解,这些病例4周以后获完全缓解的比例也不高(52.7%).早期白血病细胞清除组的总生存时间长于对照组(P=0.0076).但早期白血病细胞清除者的完全缓解持续时间、复发率、无病生存率、总生存率(1、2年)与未获早期白血病细胞清除者均无显著差异(P＞0.05).结论 早期白血病细胞清除是成人急性淋巴细胞白血病又一个有利的预后指标.     

HeLa细胞去核条件的优化

细胞去核技术〔１〕的原理是：细胞在细胞松弛素Ｂ（ｃｙ－ｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ，ＣＢ）作用下，微丝聚集受到抑制，细胞核与细胞质间连接变得松散。在离心力的作用下，细胞核从细胞中脱出，从而得到去核细胞。这一技术主要应用于细胞重组，研究核、质间信息传递、ｍＲ...     

树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤的护理

近年来,生物学方法应用于临床治疗恶性肿瘤逐渐显现出较好的疗效。树突状细胞（dendriticcell,DC）是体内免疫系统最强大的抗原递呈细胞,在抗原摄取、加工和提呈中起关键作用;抗原刺激后的DC在体内既可以诱发免疫记忆,还可增强机体的非特异性免疫应答。细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine—inducedkiller,CIK）是一种杀瘤活性高、广谱的非主要组织相容性复合体（majorhisto-compatibilitycomplex,MHC）限制性免疫效应细胞。两者的联合能有效地抑制和杀死肿瘤细胞,     

浓缩铀诱发PC12细胞的凋亡

细胞凋亡是一种正常生理条件下的程序性死亡和外来因素的细胞自杀过程 ,是细胞针对所处环境因素的特定改变所产生的应答 ,与细胞生长一样 ,在机体中承担着重要调节作用[1 ] 。大剂量照射产生细胞坏死 ,但是发生细胞凋亡的剂量远远低于细胞快速死亡所需的剂量。研究辐射诱发细胞凋亡的量效、时相关系以及阐明细胞凋亡和有关的影响因素具有极为重要临床应用意义[2 ] 。随着α辐射体在核燃料和工业、医疗等方面的应用[3] ,由放射性核素所产生的内照射危害已成为一个具有现实意义的重要课题。笔者研究了浓缩铀诱发神经元样细胞凋亡的时相关系。…     

低剂量辐射对CIK细胞杀伤乳腺癌细胞作用的影响

目的 研究低剂量辐射对CIK细胞杀伤乳腺癌细胞MCF-7和SK-BR-3作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法 取健康人外周血浓缩白细胞,常规分离出单个核细胞,加入不同的细胞因子培养7 d,诱导DC与CIK细胞,并将其按1 :5的比例共同培养7 d获得DC-CIK细胞。DC-CIK及CIK细胞分别给予40、80、120 mGy X射线照射,流式细胞仪检测细胞表型变化,运用CCK-8的方法检测其对乳腺癌细胞的杀伤作用。结果 DC-CIK组对乳腺癌细胞SK-BR-3较CIK组在不同效靶比均有更强的杀伤活性(t=3.63、5.62、8.21、5.49,P<0.05)。与CIK 0 mGy组相比,CIK细胞联合40、80、120 mGy低剂量辐射对乳腺癌细胞MCF-7和SK-BR-3的杀伤活性明显增高,而DC-CIK细胞联合低剂量辐射组与DC-CIK 0 mGy组相比,差异无统计学意义。结论 低剂量辐射对CIK细胞杀伤乳腺癌细胞有协同作用。