β-淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元凋亡及海马亲环素A表达的变化

目的 探讨Aβ25-35对大鼠海马神经元的损伤及对亲环素A(CyPA)表达的影响. 方法 健康Wister大鼠60只按照随机数字表法分为实验组(n=30)和对照组(n-30),实验组大鼠采用Aβ25-35注射入双侧海马制造阿尔茨海默病的动物模型,对照组大鼠同样位置注射入等量生理盐水.HE染色观察2组大鼠海马CA1区神经元形态,TUNEL染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测CyPAmRNA的表达,Western blotting检测CyPA蛋白的表达. 结果 实验组大鼠海马CA1区神经元遭到破坏,细胞凋亡增加,数量减少,且随时间延长细胞凋亡情况进一步加重,造模后1d、7d、14d较对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组大鼠海马组织CyPA mRNA和CyPA蛋白表达量随时间呈现出先增长后降低的趋势,1d、7d时明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14d时明显低于对照组大鼠,其中CyPA蛋白的差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 Aβ25-35通过加重大鼠海马神经元凋亡诱发神经毒性作用,CyPA表达的增加可能是一种内源性保护因素.     

Humanin对Aβ_(1-42)所致阿尔茨海默病大鼠空间记忆的影响及其作用机制

目的 探讨Humanin(HN)对Aβ_(1-42)所致阿尔茨海默病(AD)大鼠空间记忆的影响及其作用机制.方法 36只Wistar大鼠按照随机数字表法分为生理盐水组(海马注射生理盐水)、AD模型组(海马注射Aβ_(1-42))和HN治疗组(海马注射Aβ_(1-42)制成AD模型后在同一部位注入2 μL HN),每组各12只.对各组大鼠进行Morris水迷宫空间记忆能力测试.免疫组织化学方法检测各组大鼠微管相关蛋白2(MAP2)的表达.利用Western blot方法检测各组大鼠synapsin 1蛋白水平.结果 与生理盐水组相比,AD模型组Morris水迷宫测试的潜伏期明显延长,MAP2表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),HN组则无统计学意义(P>0.05).Synapsin 1蛋白在HN治疗组中表达明显高于生理盐水组和AD模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),而生理盐水组和AD模型组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 HN可以显著改善由Aβ_(1-42)所致AD大鼠的空间记忆能力,推测与HN提高MAP2与synapsin 1蛋白表达有关.     

阿尔茨海默病大鼠海马热休克蛋白70表达变化的研究

目的:双侧海马注射Aβ1-42建立大鼠阿尔茨海默病(AD)模型,研究其海马热休克蛋白70(HSP70)表达的变化并探讨与AD病理进程可能存在的联系。方法:48只SD大鼠随机分为模型组与生理盐水对照组,双侧海马分别注射Aβ1-42,分别于术后1天、7天、14天、21天在Y迷宫行为学测试后处死大鼠,采用RT-PCR和Western-blot方法,观察各组大鼠海马HSP70表达的变化。结果:术后14天、21天模型组学习记忆能力较对照组和术前明显减退(P<0.05)。术后模型组大鼠海马HSP70表达逐渐减少,术后7天(mRNA:0.34±0.05;蛋白:0.29±0.03)、14天(mRNA:0.32±0.06;蛋白:0.23±0.04)与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),至术后21天,模型组HSP70表达减少最为明显(mRNA:0.29±0.04;蛋白:0.11±0.03)(P<0.01)。结论:大鼠海马注射Aβ1-42导致HSP70表达减少,HSP70表达减少可能参与了AD的病理发展过程。     

APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病模型小鼠早期认知功能研究

目的观察APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病(3×Tg-AD)模型小鼠空间学习和记忆能力、海马CA1区突触可塑性和可溶性β-淀粉样蛋白42(Aβ42)表达变化,探讨3×Tg-AD小鼠早期认知功能障碍发生机制。方法 4月龄雄性3×Tg-AD小鼠和相匹配的129/C57BL/6杂交野生型小鼠各10只,旷场实验和Morris水迷宫实验观察小鼠在新环境中的焦虑程度和自主活动能力,以及空间学习和记忆能力;记录海马CA1区场兴奋性突触后电位和高频强直电刺激诱导的长时程增强;酶联免疫吸附试验检测海马组织可溶性Aβ42表达变化。结果与对照组相比,3×Tg-AD组小鼠旷场实验结果无明显改变(均P0.05),定位航行实验第3~5天逃避潜伏期延长(P=0.001,0.003,0.001),空间探索实验穿越平台区时间百分比降低(P=0.000),海马CA1区高频强直电刺激诱导的长时程增强下降(均P0.01),海马组织可溶性Aβ42表达水平升高(P=0.000)。结论 4月龄3×Tg-AD小鼠海马组织可溶性Aβ42表达上调,导致海马CA1区突触可塑性受损,出现空间学习和记忆能力下降。     

大豆异黄酮对β淀粉样肽介导的大鼠学习记忆损伤及海马ChAT表达的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)对β淀粉样肽(Aβ)介导的大鼠学习记忆损伤的影响及可能的机制。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和SIF组,每组10只。SIF组按规定剂量灌胃给药,对照组和模型组灌胃等量的0.5%CMC-Na。连续灌胃14d后,模型组和SIF组大鼠双侧海马CA1区注射Aβ25-35,对照组注射等量生理盐水,于术后7d,Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力,免疫组化方法检测大鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),ChAT阳性细胞数明显减少(P0.01)。与模型组相比,SIF组大鼠学习记忆能力有所提高(P0.05),ChAT阳性细胞数增多(P0.05)。结论 SIF改善Aβ介导的大鼠学习记忆下降可能与其增加ChAT表达有关。     

胰岛素抵抗大鼠认知功能的变化及其脑组织Alzheimer样病变

目的研究胰岛素抵抗大鼠(IR)认知功能的变化及其脑组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性、β-淀粉样(Aβ42)、P-Tau(ser396)、淀粉样前体蛋白(APP),β-分泌酶(BACE1)及早老素(PS1)的表达,探讨胰岛素抵抗在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用机制。方法从25只Wistar雄性大鼠中随机选取10只作为正常对照组(NC),以普通标准饲料+自来水喂养;余15只为模型组以普通标准饲料+10%果糖水连续喂养12周后筛选出IR大鼠13只;12周末用Morris水迷宫试验测定各组大鼠认知功能行为学改变,放免法检测血浆胰岛素水平,葡萄糖氧化酶法检测血浆葡萄糖水平,化学比色法测定ChAT的活性,免疫组化法检测APP、Aβ42,蛋白印迹法检测BACE1,PS1及P-Tau(ser396)蛋白表达水平。结果 IR组大鼠逃避潜伏期较NC组明显延长(P0.01);IR组血浆血糖、胰岛素水平及运用HOMA-IR计算的胰岛素抵抗指数均显著高于NC组(P0.01);IR组ChAT的活性较NC组明显降低(P0.01);与NC组相比,IR组APP、Aβ42平均光密度值明显升高,组间差异有统计学意义(P0.01);IR组大鼠脑组织中BACE1,PS1及P-tau(ser396)蛋白表达水平较NC组显著增高(P0.01)。结论胰岛素抵抗大鼠认知功能受损,其程度与ChAT的活性相关;胰岛素抵抗通过上调BACE1,PS1的活性,使Aβ生成增加,同时P-Tau蛋白表达增加,从而可能参与类AD病变的发生。     

钙调神经磷酸酶对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马区基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨钙调神经磷酸酶对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马区基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法采用Aβ_(1-42)海马注射建立AD模型,以他克莫司(FK506)干预。用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,RT-PCR、免疫组化以及明胶酶谱技术检测海马区MMP-9的表达。结果与对照组相比,AD模型组大鼠学习记忆能力明显减退(P0.01),MMP-9基因转录、蛋白表达和酶活性均明显增加(P0.05)。FK506干预后,AD大鼠学习记忆能力明显改善,其海马区MMP-9基因转录减少、酶活性降低(P0.05)。结论抑制CaN激活可改善AD症状,可能与影响MMP-9的表达有关。     

拟阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区HSP27及IL-1表达

目的 探讨Aβ(β-淀粉样肽)诱AD大鼠模型中海马HSP27和IL-1的表达, 研究信号转导及炎性机制在AD中的作用.方法 采用立体定向下双侧海马注射Aβ1-42建立AD动物模型,通过免疫组化染色及Western blot等方法, 观测大鼠学习记忆能力、海马组织结构的病理改变及HSP27和IL-1 的表达情况.结果 HE染色显示,模型组大鼠海马神经元变性、缺失,胶质细胞浸润;免疫组化结果显示模型组大鼠海马CA1区HSP27和IL-1 免疫阳性细胞表达多见(P＜0.05);Western blot显示模型组海马组织HSP条带增宽表达强度高于对照组(P＜0.05).结论 HSP27在AD的炎症反应机制中可能具有重要作用.     

阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元胰岛素受体、胰岛素受体底物-Ⅰ和蛋白激酶B表达的变化

目的 探索β-淀粉样蛋白(Aβ)寡聚体对大鼠海马神经元胰岛素受体( InsR)、胰岛素受体底物-Ⅰ(IRS-Ⅰ)和蛋白激酶B(PKB)表达的影响,以进一步探讨阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的发病机制.方法 按照完全随机化的原则应用随机数字表将实验大鼠分为3组(每组12只),采用立体定位仪下侧脑室注射的方法给模型(AD)组大鼠注射Aβ1-422寡聚体5μl,生理盐水(NS)组大鼠注射NS 5μl,正常手术组大鼠只穿刺无注射.1周后重复操作1次,再过1周用Y-迷宫对大鼠行行为学检测以验证造模是否成功,然后通过免疫组织化学染色的方法观察海马组织相关蛋白的表达.结果 与两对照组相比,AD组大鼠在Y-迷宫检测中出现学习和记忆障碍,表现为学习获得次数增多和记忆获得次数减少.然而,NS组和正常组大鼠行为学表现无明显差别.此外,AD组大鼠海马区神经元InsR(0.12±0.01)、IRS-Ⅰ(0.14±0.02)和PKB(0.12±0.03)的表达水平也比两个对照组低(NS组:0.40±0.02、0.39±0.06、0.38±0.03,均数差异为-0.13、-0.13、-0.17；正常手术组:0.38±0.07、0.35±0.03、0.35±0.06,均数差异为-0.15、-0.07、-0.73；均P＜0.05),表现为免疫组织化学染色平均吸光度值降低.结论 Aβ1-42寡聚体引起的大鼠学习记忆功能障碍可能是由Aβ介导的海马神经元胰岛素信号转导通路发生紊乱,从而使相关蛋白表达降低所导致.     

行为学训练对低剂量X线照射后SD大鼠认知能力的改善作用研究

目的 探讨行为学训练对低剂量X线照射后幼年SD大鼠学习记忆的影响及其相关机制. 方法 出生后35d的SD大鼠按抽签法随机分为训练组、照射组及对照组,每组各16只.照射组、训练组每天均接受1次低剂量[以临床中婴幼儿(0～6岁)所采用剂量为基准]X线照射,共7d.对照组接受假照射.通过Morris水迷宫训练其学习记忆能力,7.0T MR检测3组大鼠海马区N-乙酰-天门冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)比值.荧光免疫组化法和Western blotting检测各组大鼠海马区细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ(COXⅣ)蛋白表达的变化.HE染色观察海马CA1区神经元形态,透射电镜观察神经元线粒体形态. 结果 (1)照射组NAA/Cr值(1.611±0.013)较对照组(1.873±0.032)明显降低,训练组NAA/Cr值(1.870±0.018)较照射组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)定位航行实验中照射组大鼠第1～4天逃避潜伏期均长于对照组大鼠,差异有统计学意义(P＜0.05);训练组大鼠第1～4天逃避潜伏期与对照组大鼠无明显区别,差异无统计学意义(P＞0.05).空间探索实验中,照射组大鼠穿越原站台次数、原站台象限停留时间均明显少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);训练组大鼠穿越原站台次数、原站台象限停留时间与对照组大鼠无明显区别,差异无统计学意义(P＞0.05).(3)荧光免疫组化结果显示照射组大鼠海马CA1区COXⅣ蛋白表达减少,训练组COXⅣ表达增加.Western blotting结果显示照射组大鼠海马CA1区COXⅣ蛋白表达(0.298±0.049)较对照组(0.998±0.056)明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05);训练组COXⅣ表达(0.987±0.053)接近训练组,差异无统计学意义(P＞0.05).(4)照射组大鼠可见核固缩及较多受损的线粒体,训练组大鼠仅见少量受损线粒体. 结论 行为学训练可能通过增加COXⅣ蛋白表达,改善线粒体形态及功能来恢复低剂量X线照射后幼年SD大鼠受损的学习记忆能力.     

神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠海马突触素表达和学习记忆能力的影响*

背景：前期实验已证实,移植入阿尔茨海默病大鼠脑内的神经干细胞能够存活、增殖,但其是否可替代损伤或坏死的神经细胞而重建神经通路,改善学习记忆能力尚不清楚。突触素是突触重建的重要标记之一。 目的：观察神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及突触表达的影响。 方法：SD大鼠随机数字表法分为正常对照组、阿尔茨海默病模型组、2周移植组和4周移植组,除正常对照组外制备阿尔茨海默病模型。另取新生24 h SD大鼠海马齿状回分离、培养神经干细胞,经Hoechst33258标记后植入2周和4周移植组海马CA1区,行Y迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,然后取脑进行尼氏染色和突触素免疫组织化学染色。阿尔茨海默病模型组则以同样的方法、同样的位点注入等量无菌生理盐水。正常对照组不施以任何处理。 结果与结论：①2周和4周移植组海马CA1区细胞比阿尔茨海默病模型组增多,但仍少于正常对照组(P < 0.05),平均吸光度与正常对照组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。②2周移植组和4周移植组大鼠海马结构内突触素吸光度值明显高于正常对照组和阿尔茨海默病模型组(P < 0.05)。③与阿尔茨海默病模型组相比,2周和4周移植组大鼠学习能力和记忆能力均显著增强,正确反应率明显提高(P < 0.05),而与正常对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。提示移植入脑内的神经干细胞可促进突触形成,改善学习记忆能力。     

重组人促红细胞生成素对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力及凋亡相关蛋白P53和Bcl-2表达的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力及凋亡相关蛋白P53和Bcl-2表达的影响. 方法 16只健康雄性SD大鼠结扎双侧颈总动脉(2VO)建立永久性慢性脑缺血模型,将其按照随机数字表法分为对照组和实验组,每组各8只.模型建立3d后,实验组每7天经鼻腔给予150 U/125 μL rhEPO,至建模后8周末;对照组于同一时间鼻腔给予等量的生理盐水.8周后应用Morris水迷宫观测2组大鼠的运动及空间学习记忆能力.采用HE染色观察大脑皮层及海马CA1区神经元形态学的变化,并采用图像分析软件对大脑皮层厚度与神经元数目进行比较.免疫组化法检测P53及Bcl-2蛋白的表达水平.原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞数. 结果 (1)行为学测试结果显示:实验组平均逃避潜伏期及穿越平台次数均较对照组有所改善,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)HE染色结果显示:与实验组相比,对照组大鼠皮层及海马CA1区锥体神经元胞体萎缩、核固缩且皮层厚度变薄,数目减少,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)免疫组化结果显示:与对照组相比,实验组Bcl-2的表达明显增强,P53平均灰度值明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)TUNEL染色结果显示:对照组凋亡细胞数较实验组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 rhEPO能改善慢性脑缺血大鼠运动、记忆及空间定向能力,这种神经功能保护作用的机制可能与减少神经元凋亡相关.     

促红细胞生成素对β淀粉样蛋白诱导大鼠海马CA1区细胞凋亡的保护作用及机制

目的 探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)大鼠脑损伤的保护机制.方法 采用大鼠海马内注射B淀粉样蛋白制作AD模型.将SD大鼠随机分为假手术对照组、生理盐水对照组及EPO处理组.大鼠海马内注射Aβ1-40加造模,然后在生理盐水对照组大鼠行脑室立体定向注射生理盐水,EPO处理组则行脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素(rHu-EPO).观察手术后24h大鼠海马CA1区抗凋亡蛋白Bcl-xl表达变化,以及术后7d海马CA1区细胞凋亡变化.结果 EPO处理组和生理盐水组海马CA1区大鼠Bcl-xl蛋白表达较假手术对照组减少,但是EPO处理组Bcl-xl蛋白表达高于生理盐水(P<0.05).生理盐水组海马CA1区凋亡细胞明显多于EPO组(P<0.05).结论 EPO可以抑制β淀粉样蛋白诱导海马CA1区细胞凋亡,与其抑制Bcl-xl蛋白表达下降有关.     

AGTR1、AGTR2在阿尔茨海默病模型大鼠海马中的变化

目的探讨AGTR1和AGTR2在阿尔茨海默病（alzheimer disease,AD）模型大鼠海马中的变化及缬沙坦的作用。方法用β-淀粉样蛋白（β-amyloid,Aβ）1-42海马注射建立AD大鼠模型,通过Y-形电迷宫进行学习记忆能力测定,HE染色、刚果红染色进行形态学观察,免疫组化（immunohistochemistry,I H）检测AGTR1、AGTR2的表达水平。结果模型组较对照组正确逃避电刺激所需要的次数多（P〈0.001）、海马CA1区神经元密度较对照组减少（P〈0.001）、AGTR1及AGTR2光密度值增加（P〈0.05）;缬沙坦组较模型组正确逃避电刺激所需要的次数少（P〈0.001）,海马CA1区神经元密度较模型组增加（P〈0.001）、AGTR1及AGTR2光密度值减少（P〈0.05）。结论缬沙坦可改善AD模型大鼠学习记忆能力,抑制AGTR1的表达而延缓AD进展;AGTR2可能延缓AD的进展。     

冈田酸对拟AD模型大鼠海马CA1区Aβ1-40和nNOS表达的影响

目的观察冈田酸(OA)对大鼠海马CA1区Aβ1-40和nNOS表达的影响,建立更接近临床表现的拟AD大鼠模型。方法在大鼠海马CA1区多次微量注射OA,水迷宫实验观测大鼠行为学改变;Bielschowsky染色观察海马CA1区神经原纤维缠结(NFT)和老年斑(SP)等特征性病理变化;免疫组化方法观察海马CA1区Aβ1-40和nNOS的表达。结果模型组学习记忆减退;海马CA1区出现NFT(P<0.05)和SP特征性病理变化,及Aβ1-40的高表达(P<0.05)和nNOS的低表达(P<0.05)。结论冈田酸海马CA1区微量多次注射,可建立更接近AD临床表现和病理特征的大鼠模型,大鼠海马CA1区SP和NFT的形成,以及Aβ1-40表达增加、nNOS表达减少,是该模型大鼠学习记忆能力减退的可能机制。     

海人酸致痫大鼠海马IL-1β、TNF-α的表达

目的 立体定向手术建立海人酸(KA)颞叶癫痫大鼠模型,检测海马内IL-1β、TNF-α蛋白及其mRNA的表达.方法 大鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组和模型组.模型组大鼠一侧海马CA3区注射KA (生理盐水组注射生理盐水),观察其行为学特征,HE染色和Nissl染色以及电镜观察其病理学改变,免疫组化法检测大鼠海马内IL-1β、TNF-α蛋白的表达,原位杂交法检测TNF-α mRNA的动态表达.结果 大鼠注射KA后出现湿狗样抖动、头面部肌阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作等,病理结果显示海马神经元变性、缺失及胶质细胞增生,模型组IL-1β在致痫后3 、6 h表达水平明显增加并于12 h达高峰,之后逐渐下降,7 d后与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);TNF-α蛋白与mRNA表达时程基本一致,3 h出现,12 h达高峰,而后逐渐下降,7 d后回归至对照组表达水平,15 、30 d又高于对照组(P＜0.05).结论 (1)大鼠一侧海马注射KA是人类颞叶癫痫理想的动物模型;(2)内源性IL-1β、TNF-α参与了癫痫发病机制.     

低频率电刺激通过调控Rho/ROCK/NF-κB途径对癫痫大鼠作用的研究

目的探究低频率电刺激(LFS)对癫痫的作用及其可能的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、癫痫模型组、假刺激组和LFS治疗组,每组15只。记录大鼠Racine评分和脑电图,Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色和尼氏染色检测大鼠海马CA1区病理学变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;ELISA检测大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平;Western blotting检测大鼠海马RhoA、ROCK1、ROCK2、p65、p-p65和凋亡相关基因蛋白表达;RT-PCR检测大鼠海马RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA表达。结果癫痫模型组大鼠出现了连续性棘波。癫痫模型组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较对照组升高,差异有统计学意义(P0.05)。癫痫模型组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量、Bcl-2蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P0.05)。LFS治疗组大鼠波峰下降。LFS治疗组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较假刺激组降低,差异有统计学意义(P0.05)。LFS治疗组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量和Bcl-2蛋白表达较假刺激组升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 LFS可能通过抑制Rho/ROCK/NF-κB途径来抑制炎症产生,从而发挥抗癫痫作用。     

HIF-1α对大鼠创伤后认知功能障碍的影响研究

目的提高低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的水平对大鼠颅脑创伤(Traumatic Brain Injury,TBI)后认知功能障碍的影响及其机制初步探索。方法将大鼠随机分为3组:sham组、TBI组、脯氨酸羟化酶(Prolyl Hydroxylase,PHD)抑制剂组,TBI组和PHD抑制剂组均采用皮质撞击致伤法构建模型; TBI完成3 d后每组大鼠随机取10只,取海马组织,采用Western blot法检测HIF-1α及其下游蛋白表达水平,荧光原位末端标记法(Td T-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测神经细胞凋亡; 1 m后采用Morris水迷宫试验检测大鼠记忆功能,取海马组织,检测认知功能障碍相关蛋白。结果大鼠TBI术后3 d TBI组与sham组相比HIF-1α、促血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)表达水平升高(P 0. 01),差异具有统计学意义,PHD抑制剂组与TBI组相比HIF-1α、VEGF、EPO表达水平升高(P 0. 01),差异具有统计学意义;大鼠TBI术后1m TBI组与sham组相比平均逃避潜伏期延长(P 0. 01),目标象限停留时间与穿越平台次数减少(P 0. 01),海马组织中淀粉样蛋白β1-42(β-amyloid peptide1-42,Aβ1-42)、tau含量明显升高(P 0. 01),差异具有统计学意义; PHD抑制剂组与TBI组相比平均逃避潜伏期缩短(P 0. 01),目标象限停留时间与穿越平台次数增加(P 0. 01),海马组织中Aβ1-42、tau含量明显减少(P 0. 01),差异具有统计学意义。结论提高HIF-1α的表达水平可明显改善大鼠神经功能预后,提高大鼠记忆水平,减少TBI大鼠的海马组织中Aβ1-42和tau的含量,减少大鼠TBI后认知功能障碍的发生,为TBI后认知功能障碍的治疗及预防提供一个新的靶点。     

雌激素受体β对阿尔茨海默病大鼠海马内炎症反应及淀粉样β蛋白的沉积的影响

目的研究雌激素受体β(ERβ)对阿尔茨海默病大鼠海马内炎症反应及淀粉样β蛋白沉积的影响,并探讨其可能的机制。方法β淀粉样蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型,并将模型分为对照组、ERβ组和shRNA组。对照组不做任何处理,ERβ组和shRNA组大鼠分别通过脑室内注射载有雌激素受体β基因或shRNA的慢病毒质粒。通过Morris水迷宫检测各组大鼠行为学,Western blot检测各组大鼠脑组织内Akt及β淀粉样蛋白表达水平,qRT-PCR检测TNF-α和IL-1βmRNA表达,并通过免疫荧光染色检测Aβ的表达。结果ERβ组大鼠记忆能力明显高于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05),ERβ组大鼠海马内Akt含量明显高于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05),并且ERβ组大鼠海马内IL-1和TNF-αmRNA以及β淀粉样蛋白含量明显低于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05)。结论过表达ERβ在不依赖雌激素的情况下可减轻AD大鼠海马内炎症反应和β淀粉样蛋白的沉积,改善AD大鼠行为学的变化,其神经保护作用可能是通过激活Akt途径实现。     

葛根素对AD大鼠脑内Aβ1-40和Bax表达的影响

目的研究杏仁核注射β-淀粉样肽(Aβ25-35)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑内Aβ1-40、Bax的表达变化,以及葛根素(Pue)的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、AD模型组和Pue治疗组,以Aβ25-35右侧杏仁核注射制备大鼠AD模型,用Y-型迷宫检测大鼠学习记忆能力,用免疫组织化学方法检测大脑皮层与海马组织Aβ1-40和Bax的表达。结果假手术组脑内有Aβ1-40、Bax的少量表达,两者均以皮层内为多,海马组织内少;AD模型组大鼠皮层和海马组织Aβ1-40与Bax的表达增加,较假手术组大鼠有显著性差异,P<0.01;Pue能改善AD模型组大鼠的学习记忆能力,Pue治疗组大鼠皮层和海马组织Aβ1-40、Bax表达减少,与AD模型组比较有显著性差异,P<0.05。结论Pue可能通过下调脑组织Aβ1-40和Bax表达,抑制β-淀粉样肽的神经毒性,减轻脑皮层和海马神经元凋亡,具有神经保护及抗痴呆作用。