低密度脂蛋白受体3′非翻译区单核苷酸多态性对黄连素调节低密度脂蛋白受体表达的影响

目的：中药黄连素具有降低血清中低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的作用,其作用机制是否与低密度脂蛋白受体（LDLR）的单核苷酸多态性（SNP）有关尚不清楚。现探讨LDLR3′非翻译区（LDLR 3-′UTR）的SNP对黄连素调节LDLR表达的影响。方法：收集113例高脂血症合并冠心病患者,提取外周血基因组DNA,检测LDLR 3′-UTR的SNP,分析LDLR 3-′UTR的基因型与中国人群血脂水平的关系。此外,构建了携带不同LDLR 3-′UTR基因型（TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）的荧光素酶报告基因载体（pLuc）,转染HepG2细胞后采用黄连素（Berberine,BBR）作用12h后观察pLuc的活性变化。结果：中国人群的LDLR 3-′UTR存在着Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等SNP分布,但这些基因型频率与中国人群的血脂水平无明显相关性,携带有不同SNP基因型的荧光素酶报告基因载体转染HepG2细胞,在BBR作用后LDLR表达上调程度相似。结论：LDLR 3-′UTR的基因型频率及其分布的遗传性变异不能影响BBR对LDLR表达的上调作用,从而可为临床使用黄连素治疗高脂血症提供理论依据。     

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3′-非翻译区单核苷酸多态性

目的：探讨变性高效液相色谱(DHPLC)在胰岛素受体底物-2(IRS-2)基因3′-非翻译区单核苷酸多态性(SNP)检测中的应用。方法：采用聚合酶链式反应(PCR)，DHPLC，单链构象多态性(SSCP)和DNA序列分析对30例正常对照和30例2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区进行SNP和突变检测。结果：PCR-DHPLC检测出4例PCR-SSCP分析未能发现的2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区的SNP，并得到测序验证。结论：DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术。它为进一步研究IRS-2基因3′-非翻译区的变异与2型糖尿病的关系奠定了基础。     

急性 ST 段抬高心肌梗死患者低密度脂蛋白受体基因启动子的单核苷酸多态性

目的：初步分析急性ST段抬高心肌梗死（ STEMI）患者低密度脂蛋白受体（ LDLR）基因启动子区9个基因位点的单核苷酸多态性（ SNP）。方法选择经急诊确诊的急性STEMI患者24例（病例组）和健康体检者13例（对照组）,抽取静脉血检测血脂和用于DNA提取,以高分辨溶解曲线方法分析技术检测SNP。比较两组三酰甘油（ TG）、总胆固醇（ TC）、高密度脂蛋白（ HDL）和低密度脂蛋白（ LDL）的水平,以及LDLR基因启动子区9个SNP位点基因型和等位基因频率。结果病例组血清LDL高于对照组（ P＜0.05）,而 HDL低于对照组（ P＜0.05）,两组血清TG、TC比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 LDLR启动子区9个SNP位点的基因型和等位基因频率差异无统计学意义（ P＞0.05）,9个SNP位点的HRM曲线变异未出现群组效应,且出现变异的样品号高度一致。结论急性STEMI患者存在血脂的异常,但其LDLR基因启动子区基因位点未发生变异修饰。     

胰岛素样生长因子2受体基因3′非翻译区的单核苷酸多态性及其生物信息学分析

目的：基因3′非翻译区（3′untranslated region ,3′UTR）中miRNA结合区域的遗传突变能够影响基因的表达调控,文中利用生物信息学技术预测胰岛素样生长因子2受体（insulin-like growth factor 2 receptor, IGF2R）基因3′UTR的遗传突变,并检测其对基因表达的影响。方法运用多个在线数据库,获取IGF2R基因3′UTR中具有最小等位基因频率（minor al-lele frequency, MAF）的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）,计算其在不同人种中的频率分布及各SNPs之间的连锁不平衡,并预测与其相应结合的miRNA。最后,检测在淋巴母细胞系中不同变体基因型对IGF2R基因mRNA表达的影响。结果在IGF2R基因3′UTR 的33个SNPs中,仅有5个SNPs（rs8191959、rs200237825、rs3832385、rs201568808、rs1050015）具有＞0．05的MAF,其中只有rs1050015基因型突变对mRNA表达水平差异具有统计学意义（P＝0．010）。结论IGF2R基因3′UTR的rs1050015突变能够促进其表达,可作为帮助预测癌症风险的遗传标志物及个体化治疗的潜在靶点。     

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3''''-非翻译区单核苷酸多态性

目的探讨变性高效液相色谱(DHPLC)在胰岛素受体底物-2(IRS-2)基因3′-非翻译区单核苷酸多态性(SNP)检测中的应用.方法采用聚合酶链式反应(PCR),DHPLC,单链构象多态性(SSCP)和DNA序列分析对30例正常对照和30例2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区进行SNP和突变检测.结果PCR - DHPLC检测出4例PCR-SSCP分析未能发现的2型糖尿病患者IRS-2基因3′-非翻译区的SNP,并得到测序验证.结论DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术.它为进一步研究IRS-2基因3′-非翻译区的变异与2型糖尿病的关系奠定了基础.     

血液透析者低密度脂蛋白受体基因多态性及其对血脂的影响

[目的]探讨血液透析患者低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因多态性及其对脂代谢的影响.[方法]生化方法检测 112例血液透析血清脂质水平,多聚酶链反应-限制性片段长度法检测 105例血液透析患者 LDLR内含子 4 TaqⅠ位点与 80例血液透析患者外显子 13 AvaⅡ位点基因多态性.[结果]血液透析患者脂代谢紊乱主要表现为血清甘油三酯、载脂蛋白 B水平显著增高.血液透析组与对照组 LDLR内含子 4 TaqⅠ 位点与外显子 13 Ava II 位点基因型及等位基因分布频率无显著差异(P >0.05). LDLR内含子 4 Taq Ⅰ 位点基因多态性对血脂水平的影响表现为,对照组血清总胆固醇水平按 LDLR内含子 4 Taq Ⅰ位点基因型- /-、 /-、 / 的顺序递减(P< 0.01),但均在正常水平,血液透析患者血清总胆固醇不同基因型无显著差异(P >0.05);血液透析组血清甘油三酯水平按上述基因型顺序递减 (P< 0.05),对照组不同基因型的甘油三酯水平无显著差异(P >0.05). LDLR 外显子 13 Ava Ⅱ 位点基因多态性对血脂水平的影响表现为,对照组基因型为 / 者血清甘油三酯水平显著增高(P< 0.05),不同基因型血液透析患者血脂水平无显著影响 (P >0.05).[结论]正常人 LDLR内含子 4 TaqⅠ 位点存在基因多态性,并对脂代谢有显著影响.血液透析患者该基因多态性与正常人无显著差异,但不同基因型患者脂代谢紊乱有不同特点,其机理与不同基因型血液透析患者 LDLR活性的差异有关.     

低密度脂蛋白受体基因NcoI多态性与血脂含量的关系

目的：探讨中国人低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）基因ＮｃｏⅠ多态性及其与血脂含量的关系。方法：合成引物一对，用ＰＣＲ技术扩增ＬＤＬ－Ｒ基因外显子１８的特异片段，用限制性内切酶ＮｃｏⅠ酶切，得Ｎ＋Ｎ＋、Ｎ＋Ｎ－、Ｎ－Ｎ－３种基因型。结果：沈阳地区１０２例健康汉族人的ＬＤＬ－Ｒ基因ＮｃｏⅠ多态性Ｎ＋Ｎ＋占４４．１％、Ｎ＋Ｎ－占４５．１％、Ｎ－Ｎ－占１０．８％。Ｎ＋等位基因频率０．６６７，Ｎ－等位基因频率     

氧化低密度脂蛋白受体基因多态性及临床意义

寻找易感基因是当今分子生物学研究的热点,遗传相关性研究和连锁分析已经找到了多个动脉粥样硬化及急性冠状动脉综合征的基因位点,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体基因正是其中之一。多个研究证实,氧化低密度脂蛋白受体基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病、急性心肌梗死、他汀类药物的抗血小板活性和阿尔茨海默病发病之间的关系。血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病等动脉粥样硬化疾病关系的研究结果之间存在差异,二者相关性的检出有待于进一步更大规模的研究。     

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3′-非翻译区单核苷酸多态性

目的 :探讨变性高效液相色谱 (DHPLC)在胰岛素受体底物 2 (IRS 2 )基因 3′ 非翻译区单核苷酸多态性 (SNP)检测中的应用。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR) ,DHPLC ,单链构象多态性 (SSCP)和DNA序列分析对 30例正常对照和 30例 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区进行SNP和突变检测。结果 :PCR DHPLC检测出 4例PCR SSCP分析未能发现的 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区的SNP ,并得到测序验证。结论 :DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术。它为进一步研究IRS 2基因 3′ 非翻译区的变异与 2型糖尿病的关系奠定了基础。     

黄连素对巨噬细胞清道夫受体表达的影响

目的:探讨黄连素(berberine)对巨噬细胞清道夫受体CD36、LOX-1、CD68等表达的影响.方法:以佛波醇酯(PMA)诱导分化的单核源巨噬细胞为细胞模型,黄连素(50 μmol/L)预处理1h后,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激,采用流式细胞仪检测巨噬细胞表面清道夫受体的表达.结果:单核细胞分化成巨噬细胞后,CD36表达明显升高,而黄连素预处理显著抑制CD36的表达.oxLDL刺激巨噬细胞24 h后,巨噬细胞表面清道夫受体CD36、LOX-1和CD68表达明显升高(P＜0.01),黄连素预处理后巨噬细胞表面CD36、LOX-1的表达受到抑制,但CD68的表达未受影响(P＞o.05).结论:黄连素抑制巨噬细胞表面清道夫受体CD36、LOX-1的表达,一定程度上可减少巨噬细胞通过清道夫受体途径对脂质oxLDL的吞噬.     

mRNA3'末端非编码区及其多态性在炎症与免疫中的调控作用

信使RNA 3'末端非编码区(3'UTR)含有多种顺式反应元件,该顺式元件参与基因表达的转录后调节。其中,存在于3'UTR的A/U富集元件(ARE)具有调控基因表达作用。ARE介导的基因表达的转录后调控广泛存在。人类细胞内ARE-containing基因主要编码一些短暂生物学过程,如免疫、炎症及凋亡等的蛋白质。另外,人类基因中广泛存在多个可选择性多聚腺苷酸化位点,产生不同3'UTR长度或不同蛋白质产物的转录本,而且人体很多3'UTR改变的事件涉及机体免疫及炎性反应。     

浙东地区汉族人群低密度脂蛋白受体基因rs2228671多态性与颅内动脉瘤的关系分析

目的 探讨低密度脂蛋白受体基因（LDLR）单核苷酸多态性位点rs2228671与浙东地区汉族人群颅内动脉瘤患病风险因素之间的关系.方法 在162个颅内动脉瘤患者及113个对照组中,采用病例对照研究的方法对rs2228671单核苷酸多态性位点进行颅内动脉瘤患病风险的分析.结果 颅内动脉瘤组和对照组的基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 rs2228671-T与浙东地区汉族人群颅内动脉瘤患病风险没有关联性.     

低密度脂蛋白受体基因多态性对微粒化非诺贝特调脂疗效影响的研究

目的:探讨低密度脂蛋白受体(LDLR)基因HincⅡ酶切位点多态性对微粒化非诺贝特调脂疗效的影响.方法:血清总胆固醇(TC)≥5.20mmol/L 和/或甘油三酯(TG) 2.00～5.65mmol/L 之间者,共 52 例,随机分为药物组 30 例和安慰剂组 22 例.结果:根据LDLR基因HincⅡ酶切多态性分层比较微粒化非诺贝特和安慰剂的调脂疗效,发现药物组和安慰剂组三种基因型(H1H1、H1H2和H2H2)患者之间的TC、LDTC和TG下降的有效率(TC和LDLC下降分别≥10%,TG下降≥20%)无明显差异(P均＞0.05);不同基因型之间的TC和LDLC下降幅度亦无显著差异(TC依次平均下降 30.3、30.2 和 33.4%,LDLC依次平均下降 28.0、29.1 和 31.8%, P均＞0.05);对血清TG的观察结果亦是如此.说明具有不同LDLR等位基因不论对微粒化非诺贝特的降低血清TG作用,还是对降低血清胆固醇作用均无明显影响.结论:LDLRHincⅡ酶切位点不参与微粒化非诺贝特调整血清胆固醇和TG的作用.     

雌激素受体基因单核苷酸多态性与复发性自然流产的关系

目的 分析雌激素受体α和β基因4个单核苷酸多态性位点(ERα:rs2234693、rs9340799,ERβ:rs1256049、rs4986938)与宁夏回族自治区汉族女性复发性自然流产(RSA)的关系。方法 采用TaqMan探针基因分型法,比较ER基因4个SNPs位点基因型及等位基因频率在RSA患者(病例组95例)和正常女性(对照组190例)的分布情况。结果 ERα基因rs2234693位点等位基因分布频率在病例组和对照组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),且隐性模型下,CC+CT和TT基因型在两组的分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。ERα基因rs9340799位点的基因型及ERβ基因rs1256049、rs4986938 2个位点的基因型及等位基因分布频率在病例组和对照组间比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 ERα基因rs2234693位点单核苷酸多态性与RSA有关,携带T等位基因的基因型可能会增加宁夏回族自治区汉族女性RSA的发病风险;ERβ基因单核酸多态性与RSA无明显关联。     

miR-196a2成熟区单核苷酸多态性对靶基因LSP1表达的影响

目的:研究miR-196a2成熟区单核苷酸多态性rs11614913(T/C)对预测靶基因LSP1表达的影响.方法:构建含有不同基因型miR-196a2的真核表达载体pCDNA3.1-miR196a2-C和pCDNA3.1-miR196a2-T;同时利用化学合成含有不同基因型的成熟miR-196a2探针miR-196a2-C和miR-196a2-U.将靶基因LSP1的3'UTR序列克隆至pMIR-REPORTTM Luciferase载体中而获得LSP1报告基因载体pMIR-LSP1.采用所构建的miR-196a2真核表达载体以及化学合成的成熟miR-196a2探针分别与靶基因LSP1报告基因载体组建两套转染体系.分别共转染于HEK293、A549和CHO 三种细胞后进行荧光素酶活性分析.结果:miR-196a2真核表达载体与靶基因LSP1报告基因表达载体共转染于HEK293、A549和CHO三种细胞后进行荧光素酶活性分析.pCDNA3.1-miR196a2-C等位基因荧光素酶相对活性与pCDNA3.1-miR196a2-T等位基因相比均有显著降低(P<0.05);含不同基因型的化学合成的成熟miR-196a2探针与靶基因LSP1报告质粒共转染HEK293、A549和CHO三种细胞,miR-196a2-C等佗基因荧光素酶活性与miR196a2-T等位基因相比也有显著降低(P<0.05).结论:荧光索酶活性强弱间接反映了miR-196a2与靶基因LSP1结合能力的大小.当miR-196a2成熟区rs11614913位点为C时,miR-196a2可能更为有效地与预测靶基因LSP1结合,从而在转录后水平调控靶基因表达.     

低密度脂蛋白受体基因多态性与湘西苗族高脂血症的相关性

：目的 探讨低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor,LDL-R）基因单核苷酸多态性rs5932位点在人群中的分布及其与血脂的关系。方法 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术分析112例高脂血症患者和132例健康对照人群的LDL-R基因型及等位基因频率分布状况,同时测定血脂水平。结果 高脂血症组和健康对照组的LDL-R基因型频率及等位基因频率的分布无统计学意义（x2=0.173,p=0.917; x2=0.098,p=0.754）;高LDL-C组中AA型的血浆LDL-C水平低于非AA型,（t=35.2,P<0.05）有统计学意义;健康对照组A等位基因频率高于高LDL-C组（x2=4.223,p=0.04）。结论 A等位基因可能具有降低苗族人群血清LDL-C水平的作用,LDL-R基因多态性与其余血脂水平无明显相关性。     

SET8基因3'端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性与肝癌患者预后的关系

目的 研究SET8基因3'端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性与肝癌患者预后的关系.方法 在河北医科大学第四医院完成肝癌患者80例SET8基因3'端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性测序分析,生存曲线分析采用Kaplan-Meier方法,组间对比使用Log-rank检验,使用Cox比例风险回归模型进行多因素分析.结果 研究发现肝癌患者SET8基因 3'端非翻译区种子区域miR-502结合部位一个多态位点rs16917496 CC基因型患者生存时间较长,差异有统计学意义(相对危险度0.187,95%可信区间0.073～0.757,P=0.005).结论 SET8基因3'端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性是肝癌患者预后的一种独立危险因素.     

大鼠Hrh1基因的编码区单核苷酸多态性研究

目的：对大鼠Hrh1基因编码区进行单核苷酸多态性（SNP）检测及定位。方法：提取健康SD大鼠全血基因组DNA,聚合酶链式反应（PCR）高保真扩增Hrh1基因的编码区（CDS）全长序列,结合DNA测序方法进行cSNP（coding SNP）筛查。结果：在大鼠Hrh1 CDS全长1461bp中,共有4个cSNP位点,分别为：①237位C／T多态;②928位A／G多态;③1041位C／T多态;④1342位A／G多态。其中928位、1342位为非同义cSNP,237位、1041位为同义cSNP。结论：大鼠Hrh1基因编码区内4个cSNP位点中928位A／G多态与1342位A／G多态引起的错义突变,可造成编码氨基酸多肽链一级结构的改变,从而可能影响受体蛋白的特性和功能。大鼠Hrh1 928 cSNP与1342 cSNP可能导致大鼠Hrh1基因遗传多态性,表现出Hrh1受体活性的个体差异。     

生长激素受体基因单核苷酸多态性与特发性矮小的相关性

生长激素受体(GHR)与生长激素结合,介导其在人体细胞内的信号转导,影响生长激素释放激素-生长激素-胰岛素样生长因子内分泌轴的功能,对软骨的发育起重要作用。同时,GHR基因变异与特发性矮小的发生密切相关。GHR基因的单核苷酸多态性(SNP)广泛存在于普通人群及特发性矮小人群中,不同SNP位点对GHR功能影响不同,GHR SNP与部分特发性矮小的发生密切相关。因此,GHR SNP可能是影响血浆胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及部分特发性矮小发生的重要因素。