神经干细胞分化过程中NgR表达的变化

目的 检测大鼠脊髓来源神经干细胞分化过程中NgR的表达情况.方法 悬浮培养法培养大鼠脊髓来源的神经干细胞,形成神经球后,以免疫荧光法鉴定神经干细胞,检测神经球及其分化后不同时间点、不同细胞亚型的NgR表达情况.结果 神经干细胞分化前和分化第1天所有细胞都显著表达NgR,NgR表达阳性率在分化第2天降至82.1%±4.14%,分化第3天降至最低点35.3%±4.31%.分化后形成的细胞中只有神经元和少量未分化细胞表达NgR,星形胶质细胞和少突胶质细胞不表达NgR.结论 在神经干细胞分化成星形胶质细胞和少突胶质细胞的过程中NgR基因表达被关闭,而在其分化成神经元的过程中则始终表达NgR.     

FGF,IGF和EGF在成体脊髓的分布（摘要）

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（FGF）、胰岛素样生长因子（IGF）和表皮生长因子（EGF）在成年猫脊髓的分布。方法：取脊髓（T11）制作20цm厚冰冻切片，用FGF、IGF和EGF（效价：1：250）兔抗血清行免疫组织化学ABC法染色。观察FGF、IGF和EGF在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位。结果：FGF的免疫阳性反应物主要分布于脊髓灰质神经元，胞浆染色，腹角较为明显，Ⅱ板层也有少量阳性细胞。背核神经元也有阳性；此外，神经突起及纤维亦有阳性染色。灰、白质内还见阳性胶质细胞，白质内血管也有阳性染色。相对之，IGF和EGF在脊髓的分布相似，免疫阳性反应物主要分布于灰质内各板层神经元，胞核染色明显，胞浆亦有浅染，灰质和白质内未见阳性胶质细胞。结论：成年猫脊，髓存在FGF，IGF及EGF，提示这些生长因子与成体脊髓功能有关。     

Fas,FasL,Laminin,Fn在成年猫脊髓的分布

目的:观察Fas,FasL,Laminin、Fn在成年猫脊髓的分布.方法:将成年猫处死后取其脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用Fas,FasL,Laminin,Fn(效价:1∶1000,1∶250,1∶250,1∶250,)行免疫组织化学ABC法染色.观察Fas,FasL,Laminin,Fn在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:Fas阳性神经元以腹角为主,胞浆染色,背角相对较少,灰质内胶质阳性反应,细胞核染色.比较之,FasL阳性神经元遍布整个灰质,胞浆染色,未见胶质细胞阳性染色.Laminin在灰、白质内见大量血管内皮阳性染色,灰质内血管内皮的免疫阳性反应比白质强.未见神经元和胶质细胞染色.与Laminin相比较,在白质内仅见少量的血管Fn免疫反应阳性染色,只有约1/20～1/50左右,未见明显阳性神经元和胶质细胞染色.结论:在成年猫脊髓有Fas,FasL,Laminin,Fn分布,提示这些因子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关.     

FGF,IGF和EGF在成体脊髓的分布

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)和表皮生长因子(EGF)在成年猫脊髓的分布.方法:取脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用FGF,IGF和EGF(效价:1∶250)兔抗血清行免疫组织化学ABC法染色.观察FGF,IGF和EGF在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:FGF的免疫阳性反应物主要分布于脊髓灰质神经元,胞浆染色,腹角较为明显,Ⅱ板层也有少量阳性细胞.背核神经元也有阳性;此外,神经突起及纤维亦有阳性染色.灰、白质内还见阳性胶质细胞,白质内血管也有阳性染色.相对之,IGF和EGF在脊髓的分布相似,免疫阳性反应物主要分布于灰质内各板层神经元,胞核染色明显,胞浆亦有浅染,灰质和白质内未见阳性胶质细胞.结论:成年猫脊髓存在FGF,IGF及EGF,提示这些生长因子与成体脊髓功能有关.     

OMgp及其受体NgR在大鼠中枢神经系统发育中的表达

目的探讨再生抑制相关蛋白OMgp及其受体NgR在中枢神经系统发育中的表达规律及其意义。方法 SD大鼠按不同发育阶段（E20,2、6、10 w,1 y）取材,用RT-PCR、免疫组织化学方法检测OMgp和NgR在海马、脑干、脊髓部位的表达情况。结果 RT-PCR结果显示,OMgp的表达从E20开始逐渐升高,6 w达到最高峰,之后逐渐下降直到1 y;NgR在E20开始有微弱的表达,之后逐渐升高。免疫组织化学结果显示,NgR在E20无表达,但从2～10 w表达逐渐增强,并且10 w时可见其在脊髓白质少突胶质细胞表达。结论 OMgp在中枢神经系统发育中可能是作为一种正常环境因子参与轴突生长、突触联系的调节以及少突胶质细胞和神经元轴突间的识别,NgR也可能具有与轴突再生抑制无关的其他功能。     

大鼠钝性脊髓损伤后BMPR Ia型受体的表达

摘要：目的观察脊髓损伤后BMPR Ia型受体的表达。方法运用免疫组织化学方法,首先检测3种BMP受体（BMPR）Ia、
Ib、II型在正常成体大鼠脊髓中的表达分布。运用大鼠钝性脊髓损伤模型,以150 kdyn的撞击力直接撞击脊髓,观察动物
撞击后1、3、7、14、30、60 d后脊髓中BMPR Ia的表达改变。结果在正常成年大鼠脊髓中,BMPR Ia、II型受体主要在少突
胶质细胞、灰质神经元中表达,在部分星形胶质细胞和大多数小胶质细胞中表达。灰质神经元中未检测到Ib型受体的表
达或表达很低。脊髓损伤后,BMPR Ia在星形胶质细胞中表达激剧增加,高表达可持续至损伤后1个月;脊髓损伤诱导脊
髓小胶质细胞活化,活化的小胶质细胞中表达BMPR Ia明显增加。结论大鼠脊髓损伤后,诱导BMPR Ia受体在星形胶
质细胞、小胶质细胞激剧增加,BMPR Ia高表达提示BMP信号在胶质细胞的重要病理生理作用,这一发现为进一步研究
BMP信号的功能作用提供基础。     

电针对脊髓损伤后星形胶质细胞增生的影响

目的 :探讨督脉电针对成年大鼠脊髓损伤后星形胶质细胞增生的影响。方法 :选用成年雌性wistar大鼠 ,Allen氏法制作脊髓损伤模型 ,分别应用督脉电针治疗不同时间 ,以激素组和损伤不治疗组作对照。观察星形胶质细胞的形态、数量的变化 ;应用RT-PCR法检测GFAP表达变化。结果 :脊髓损伤后星形胶质细胞反应性增生 ,灰质强于白质 ,尾侧强于头侧 ,电针治疗组胶质反应较轻 ;电针组星形胶质细胞线粒体、核糖体增多 ,吞噬变性髓鞘增强 ;培养观察 ,电针组GFAP表达减少。结论 :电针可抑制脊髓损伤后星形胶质细胞反应性增生 ,防止胶质瘢痕形成     

CD44,CD54在成体脊髓表达（摘要）

目的：观察CD44，CD54在成年猫脊髓的分布。方法：将成年猫处死后取其脊髓（T11）制作20цm厚冰冻切片，用CD44，CD54兔抗体（效价：1:250）行ABC免疫组织化学染色。观察CD44,CD54在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位。结果：脊髓灰质内见CD44神经元阳性，阳性细胞遍布灰质各板层，阳性反应物主要见于细胞核。腹角阳性神经元明显，大小不等，背核神经元亦有阳性反应。灰、白质内未见阳性反应的胶质细胞。与CD44者比较，背核、腹角神经元仅见CD54的弱阳性反应，未见胶质细胞阳性反应，但后角Ⅰ，Ⅱ板层见大量CD54阳性神经膨体。结论：成年猫脊髓有CD44,CD54分布，提示这些神经细胞黏附分子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关。     

Fas,FasL,Laminin,Fn在成年猫脊髓的分布（摘要）

目的 :观察Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ、Ｆｎ在成年猫脊髓的分布 .方法 :将成年猫处死后取其脊髓 (Ｔ11)制作 2 0 μｍ厚冰冻切片 ,用Ｆａｓ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ (效价 :1∶10 0 0 ,1∶2 5 0 ,1∶2 5 0 ,1∶2 5 0 ,)行免疫组织化学ＡＢＣ法染色 .观察Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位 .结果 :Ｆａｓ阳性神经元以腹角为主 ,胞浆染色 ,背角相对较少 ,灰质内胶质阳性反应 ,细胞核染色 .比较之 ,ＦａｓＬ阳性神经元遍布整个灰质 ,胞浆染色 ,未见胶质细胞阳性染色 .Ｌａｍｉｎｉｎ在灰、白质内见大量血管内皮阳性染色 ,灰质内血管内皮的免疫阳性反应比白质强 .未见神经元和胶质细胞染色 .与Ｌａｍｉｎｉｎ相比较 ,在白质内仅见少量的血管Ｆｎ免疫反应阳性染色 ,只有约 1/ 2 0～ 1/ 5 0左右 ,未见明显阳性神经元和胶质细胞染色 .结论 :在成年猫脊髓有Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ分布 ,提示这些因子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关     

成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质细胞的特异识别

目的研究成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质特异标记核蛋白（NeuN）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）在两类动物脊髓的分布及其特异性.方法取成年恒河猴和大鼠脊髓组织,冰冻切片,用NeuN抗体和GFAP抗体行免疫组织化学SP法染色,观察NeuN和GFAP在大鼠和猴脊髓的免疫反应分布,探讨抗体标识特异性.结果猴和大鼠脊髓灰质神经元胞浆、突起和胞核均有NeuN阳性染色,但大鼠脊髓染色强于猴脊髓染色,特异性更高.GFAP在大鼠和猴脊髓星型胶质细胞均有分布,白质强于灰质,两者类似.结论识别鼠类的神经元核蛋白抗体NeuN和GFAP抗体可于灵长类脊髓染色,能有效标示灵长类脊髓神经元和星型胶质细胞.     

血管内皮生长因子受体在大鼠脊髓组织中的表达与分布

目的观察血管内皮生长因子受体VEGFR-1与VEGFR-2在大鼠脊髓组织的表达与分布. 方法取成年雄性Wistar大鼠腰段脊髓组织,采用免疫组织化学方法和逆转录-聚合酶链式反应技术,对VEGF受体蛋白及mRNA在大鼠脊髓组织中的表达与分布进行研究.结果 VEGF的两种受体蛋白在大鼠正常脊髓组织的微血管均有表达,并且VEGFR-2更主要的表达于脊髓运动神经元、胶质细胞及周边白质中的神经纤维,其mRNA的表达水平明显高于VEGFR-1(P<0.05). 结论VEGF通过VEGFR-1、VEGFR-2两种受体共同作用促进脊髓微血管的形成,维持神经内环境的稳定;通过VEGFR-2发挥神经营养和神经保护作用,为今后进一步应用VEGF治疗脊髓损伤奠定了实验及理论基础.     

低温预处理对大鼠脊髓损伤早期病理形态学的影响

目的观察低温预处理对大鼠脊髓损伤早期病理形态学的影响。方法采用改良Allen氏打击法建立大鼠脊髓损伤模型,损伤前应用局部脊髓低温灌注给予低温预处理,采用HE染色观察脊髓损伤早期病理形态学改变,Hplas-100病理图文分析系统对脊髓损伤中心区残留白质面积进行定量分析。结果实验组脊髓损伤早期病理形态学改变较对照组轻,损伤中心区残留白质面积大于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论低温预处理对大鼠正常脊髓形态结构无明显影响,可明显减轻大鼠脊髓损伤早期病理形态学损害,减少损伤中心区白质面积的丢失。     

水通道蛋白-4在正常大鼠脊髓内的分布

目的: 明确正常大鼠脊髓内水通道蛋白-4(AQP4)的表达与分布,为进一步研究其生理功能提供理论依据. 方法: 采用AQP4 mAb,对正常SD大鼠脊髓的冰冻切片进行免疫组织化学染色,检测AQP4蛋白的表达水平. 结果: 免疫组织化学染色结果显示阳性着色细胞包括有胶质细胞、中央管室管膜上皮细胞、脊髓前角运动神经元、软脊膜上皮细胞,着色部位主要在细胞膜,其中在胶质细胞表现出一定的方向性,主要分布在与毛细血管内皮细胞接触的一侧. 结论: AQP4在正常大鼠脊髓内具有广泛的表达,在胶质细胞上其表达分布于与血脑屏障相关的毛细血管内皮细胞的一侧. 其表达的解剖分布提示AQP4在脊髓内主要参与中央管内水代谢以及神经组织间的水代谢调节.     

大鼠皮质脊髓束Luxol Fast Blue染色

目的:探讨显示大鼠皮质脊髓束的特殊染色方法。方法:选用正常成年SD大鼠延髓和脊髓冰冻切片,应用Luxol Fast Blue染色法进行染色。结果:Luxol Fast Blue染色后,在延髓和脊髓切片中可见灰质呈淡红色,白质呈蓝色,延髓锥体染成深蓝色。锥体中Luxol Fast Blue标记的深蓝色阳性纤维,经锥体交叉后至脊髓灰质后连合背侧,沿脊髓后索腹侧深层下行,至荐段后逐渐消失。在延髓锥体和脊髓颈、胸、腰段后索中,深蓝色的Luxol Fast Blue阳性纤维边界清晰,与周围结构区分明显。结论:运用Luxol Fast Blue染色可清楚显示大鼠皮质脊髓束在脊髓内的定位,是一种简便可靠的皮质脊髓束形态学研究方法。     

大鼠脊髓来源神经干细胞NgR的表达

目的：检测大鼠脊髓来源神经干细胞Nogo-66受体（NgR）是否表达。方法：悬浮培养法培养大鼠脊髓来源的神经干细胞，形成神经球后，以免疫荧光法鉴定神经干细胞并检测NgR的表达情况。结果：神经球及单个神经干细胞均显著表达NgR。结论：NgR在脊髓神经发育的干细胞阶段即开始表达。     

血管内皮生长因子在脊髓损伤后的表达及其意义

目的　研究大鼠SCI后VEGF在脊髓神经细胞的表达情况。方法　SD大鼠 32只随机分为椎板切除组和脊髓损伤组 ,采用Allen法从背侧致伤T10脊髓 ,于术后 8h ,1,2 ,3d ,1,2 ,3周切取脊髓 ,S -P法免疫组化染色 ,观察VECGF的分布 ,对神经细胞的阳性表达率进行定量分析。结果　对照组脊髓中 ,无VEGP的表达 ,SCI后 8h出现VEGF强表达 ,1～ 3d达到高峰 ,并持续 1周。 2 ,3周后 ,VEGF表达率大幅度下降 (P<0 .0 1) ,前角大运动神经元较其他神经细胞阳性表达率明显增高 (P <0 .0 1) ,背侧白质中胶质细胞较灰质和腹侧白质胶质细胞阳性表达率高 (P <0 .0 1)。结论　大鼠SCI早期 ,脊髓损伤区周围神经细胞可见不同程度VEGF表达     

细胞外基质蛋白Tenascin在鼠脊髓内的分布

用ＴＮ多克隆抗体，采用免疫组织化学和免疫电镜方法，对胚胎１８天，生后１、２及５ｄ幼鼠脊髓内ＴＮ的分布进行了观察。在胚胎１８ｄ鼠脊髓，ＴＮ阳性免疫反应产物主要见于灰质；而在生后５ｄ，灰质和白质内均可见到，并以白质内反应较强。电镜下ＴＮ阳性反应见于神经元和神经胶质细胞的突起周围并和细胞质膜相关；ＴＮ阳性标记也出现在突触附近。ＴＮ在鼠脊髓内分布的变化提示其可能与脊髓发生、生长过程中，神经元和神经胶质细胞的移行及细胞构筑的排列密切相关，并与脊髓内轴突生长有一定联系。     

骨形态发生蛋白及其受体在正常成年大鼠脊髓中的表达分布

目的:观察骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)及其受体在正常成年大鼠脊髓中的表达分布.方法::取正常成年大鼠脊髓并切片,运用免疫组织化学方法分别检测BMP2,4,7及其受体BMPR Ⅰa,BMPR Ⅰb,BMP Ⅱ的表达.结果:在正常成年大鼠脊髓的前角运动神经元、背角感觉神...