退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及Caspase-8表达的研究

目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记和免疲组织化学方法,对比观察57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达。结果57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为54.0%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分率为43.0%;42例创伤对照颈椎间盘AI为39.6%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分比为35.4%。两组间AI、Caspase-8蛋白表达差异均有显著性意义(P<0.05)。Caspase-8表达越强,凋亡细胞数越多。结论Caspase-8蛋白参与了颈椎间盘组织中细胞调亡的调节,可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用。     

退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及TRAIL表达的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrotic factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)在颈椎间盘退变中的作用.方法 采用原位DNA片段末端标记(TUNEL)法和免疫组织化学方法,对比观察30例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及30例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及TRAIL的表达.结果 TUNEL染色观察示颈椎病组的髓核内的平均凋亡细胞率为(10.93±1.87)%,高于对照组的(6.43±1.56)%(P＜0.01).SP免疫组织化学染色示颈椎病组髓核内TRAIL染色阳性细胞率为(49.13±15.66)%,高于对照组的(20.26±2.81)%,差异有统计学意义(P＜0.01).将对照组和颈椎病组全部60例颈椎间盘标本合并后进行Pearson相关分析,颈椎间盘髓核内TRAIL染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关,相关系数r=0.921(P＜0.01).结论 颈椎病椎间盘组织细胞凋亡数与TRAIL阳性细胞数均明显高于创伤对照组,且凋亡与TRAIL的表达呈正相关.     

退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及死亡受体DR5表达的研究

目的 探讨死亡受体5(death receptor 5,DR5)在颈椎间盘退变中的作用.方法 采用原位DNA片段末端标记(TUNEL)法和免疫组织化学方法,对比观察30例颈椎病患者(实验组)及30例创伤患者(对照组)颈椎间盘组织细胞凋亡状态及死亡受体DR5的表达.结果 TUNEL染色显示实验组的髓核内平均凋亡细胞率为(10.93±1.87)%,高于对照组的(6.43±1.56)%(P<0.01).免疫组织化学染色显示实验组的髓核内DR5阳性细胞率为(50.73±15.92)%,高于对照组的(41.23±16.35)%(P<0.05).Pearson相关分析表明颈椎间盘髓核内DR5阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关(r=0.755,P<0.01).结论 高水平的DR5表达参与了退变颈椎间盘髓核细胞的凋亡,由DR5/TRAIL诱导的凋亡途径可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥作用.     

Caspase-8及Caspase-3与细胞凋亡

细胞凋亡与多种疾病的发生、发展密切相关。Caspasec依赖的凋亡过程中caspase-8与caspase-3着关键作用。就Caspase-872．Caspase-3在细胞凋亡过程中的作用及其研究进展做一综述。     

Caspase-3、Caspase-9在胃癌组织中的研究进展

胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一,发病率居恶性肿瘤发病率的第二位,病死率占人类恶性肿瘤的第三位,严重危害人类的健康。胃癌病人多选用手术治疗、化疗、放疗和联合治疗,进展期胃癌5年生存率仍不足30%[1]。了解胃癌发生、发展的机制并对其早期发现和干预,有益于制定合理有效的治疗方案、提高胃癌生存率及改善患者的预后。目前,关于胃癌的病因及发病机制尚未完全明确。诸多研究表明,其发生、发展是多因素、多步骤共同作用的结果。近年来,细胞凋亡机制成为胃癌发病机制研究中的热点。Caspase是一组半胱氨酸蛋白酶家族,在细胞凋亡的启动和完成中起重要作用,是细胞凋亡的执行者,决定了细胞凋亡的形态改变和生物化学改变。Caspase-3、Caspase-9是Caspase家族中引起凋亡的关键成分,它们在肿瘤的发生、发展中扮演重要角色。本文就Caspase-3、Caspase-9在胃癌组织中的表达及与胃癌生物学行为之间的关系进行了综述。     

软骨终板细胞凋亡与颈椎间盘退变关系的研究

目的：探讨脊柱软骨终板细胞凋亡与颈椎间盘退变之间的关系。方法：24只清洁型wista大鼠,随机分为实验组和对照组。实验组沿C1-C7棘突做正中切口,剥离椎旁肌,切除C1-C7的棘上、棘间韧带及两侧关节突关节后外1/2,诱发加速脊柱退变;对照组仅切开皮肤后缝合。分别于第9周、18周、36周对两组动物施行过度麻醉处死,完整取下包含上下椎体的椎间盘。对颈椎标本行矢状位切片,分离软骨终板和椎间盘。颈椎间盘按Thompson椎间盘退变病理分级标准进行分级评定;将软骨终板石蜡包埋,切片。HE染色和Tunnel染色后,计数椎间盘软骨终板凋亡数量,评估软骨终板消失状况。结果：两组软骨终板细胞凋亡随时间进展而加速。与对照组相比,18周实验组软骨终板细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）;在9周和27周时,实验组与对照组软骨终板细胞凋亡率无统计学差异。结论：脊柱退变模型显著增加了软骨终板细胞凋亡数量,加速了脊柱退变;随年龄增加,软骨终板凋亡细胞数量逐渐增加,软骨终板破坏程度增加,颈椎间盘退变过程加速;年龄是颈椎间盘退变的重要因素;软骨终板细胞凋亡是椎间盘发生退行性变的重要原因。     

乳癌组织中Caspase-9的表达

目的：探讨乳癌组织中凋亡调控因子Caspase-9的表达及意义。方法：选取存档蜡块巾的乳腺浸润性导管癌38例（其中伴有腋窝淋巴结转移者30例）、导管内癌8例及乳腺纤维腺瘤10例,进行Caspase-9免疫组织化学和原位杂交检测。结果：Caspase-9 mRNA及其蛋白在乳癌中呈现高表达。Caspase-9蛋白和mRNA在乳腺浸润性导管癌、乳腺导管内癌和乳腺纤维腺瘤组间表达差异有统计学意义,乳腺浸润性导管癌Caspase-9蛋白和mRNA表达显著高于乳腺纤维腺瘤。乳腺浸润性导管癌中Caspase-9蛋白表达和mRNA阳性率在淋巴结转移组与无淋巴结转移组的差异无统计学意义。结论：Caspase-9异常表达与乳癌的发生密切相关,可以作为乳癌预后判断的指标之一。     

颈椎间盘退变过程中细胞凋亡与Bax,Caspase-3的表达

目的:检测人颈椎间盘组织中的细胞密度、细胞凋亡率以及Bax和Caspase-3的表达.方法:实验组椎间盘标本来自颈前路椎间盘切除椎间融合手术的患者,所有病变节段均经MRI证实.对照组标本为无脊柱相关疾病史的青年死亡者新鲜尸检颈椎间盘.采用组织形态学观察法和TUNEL法检测人颈椎间盘中的凋亡细胞,用免疫组织化学S-P法检测Bax及半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)的表达.结果:实验组内的细胞密度均低于对照组;实验组内的TUNEL阳性细胞率均高于对照组;实验组髓核内Bax,Caspase-3染色阳性细胞率均高于对照组(P<0.01).将对照组和患者组全部50例颈椎间盘标本合并后进行相关分析,对照组和实验组颈椎间盘TUNEL阳性细胞率与细胞密度间呈负相关;两组髓核内Bax, Caspase-3阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关(P<0.01).结论:细胞密度下降参与了人颈椎间盘的退变过程.细胞凋亡是椎间盘髓核细胞减少的原因之一,通过调控Bax和Caspase-3的表达可降低人颈椎间盘内的细胞凋亡率,延缓人颈椎间盘的退变.     

骨肉瘤中survivin、Caspase-8的表达及其与凋亡的相关性研究

目的探讨survivin mRNA、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组化技术检测40例骨肉瘤及正常组织中survivin mRNA和Caspase-8蛋白的表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果77.5%的骨肉瘤组织survivin mRNA呈阳性表达,显著高于正常组织;Caspase-8蛋白在骨肉瘤和正常组织中的阳性表达率分别为27.5%和85%(P<0.05);在骨肉瘤组织中,survivin mRNA和Caspase-8蛋白表达呈负相关;survivin mRNA阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显低于survivin mRNA阴性组(P<0.05);Caspase-8蛋白阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显高于Caspase-8蛋白阴性组(P<0.05)。结论survivin、Caspase-8均参与骨肉瘤的发生、发展变化,survivin是通过抑制Caspase-8的活性而发挥其抑制细胞凋亡作用的。     

hrHPV感染与宫颈癌组织Fas、Caspase-3及Caspase-8蛋白表达的关系

目的 探讨宫颈癌组织高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)感染与凋亡相关因子(Fas)、含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)及Caspase-8蛋白表达的关系.方法 选取重庆市大足区人民医院2016年6月-2019年5月收治的宫颈癌行手术治疗患者91例,收集对应的术后病理组织,采用PCR反向杂交法检测宫颈癌组...     

颈椎间盘髓核组织中TRAIL及DR5的表达与髓核细胞凋亡的相关性研究

目的检测颈椎间盘内髓核组织细胞密度、细胞凋亡率以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及死亡受体5（DR5）的表达。方法实验组30个标本来自脊髓型颈椎病患者前路手术所切取的椎间盘组织（C3-C7）,对照组30个标本为颈椎创伤患者前路手术所取得的椎间盘组织。采用HE染色观察髓核组织中凋亡小体和细胞密度,原位DNA片段末端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞率,用免疫组织化学法检测TRAIL、DR5的表达。结果实验组髓核组织中的细胞密度均低于对照组,TUNEL阳性细胞率均高于对照组（P〈0.01）;实验组TRAIL、DR5染色阳性细胞率均高于对照组（P〈0.05）。将两组全部60例颈椎间盘标本合并后进行Pearson相关分析,颈椎间盘TUNEL阳性细胞率与细胞密度之间呈负相关（r=-0.969,P〈0.01）;两组髓核内TRAIL、DR5染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关r=0.921和0.755,P〈0.01）。结论细胞密度下降参与了颈椎间盘的退变过程,细胞凋亡是椎间盘髓核细胞减少的原因之一,颈椎间盘组织中存在DR5/TRAIL诱导的凋亡途径。     

Anxiety and depression affect pain drawings in cervical degenerative disc disease

Introduction: Pain drawings have been frequently used in the preoperative evaluation of spine patients. Until now most investigations have focused on low back pain patients, even though pain drawings are used in neck pain patients as well. The aims of this study were to investigate the pain drawing and its association to preoperative demographics, psychological impairment, and pain intensity.

Methods: We carried out a post hoc analysis of a randomized controlled trial, comparing cervical disc replacement to fusion for radiculopathy related to degenerative disc disease. Preoperatively the patients completed a pain drawing, the Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS), and a visual analogue scale (VAS). The pain drawing was evaluated according to four established methods, now modified for cervical conditions. Comparisons were made between the pain drawing and age, sex, smoking, and employment status as well as HADS and VAS.

Results: Included were 151 patients, mean age of 47 years, female/male: 78/73. Pain drawing results were not affected by age, sex, smoking, and employment status. Patients with non-neurogenic pain drawings according to the modified method by Ransford had higher points on HADS-anxiety, HADS-depression, and HADS-total. Patients with markings in the head region had higher score on HADS-depression. Markings in the neck and lower arm region were associated with high values of VAS-neck and VAS-arm.

Conclusions: Pain drawings were affected by both pain intensity and anxiety/depression in cervical spine patients. Therefore, the pain drawing can be a useful tool when interpreting the patients’ pain in correlation to psychological impairment and pain location.     

靶向Livin的RNA干扰对食管癌Eca-109细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9表达的影响

目的:探讨靶向Livin的RNA干扰对食管癌凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的影响.方法:采用慢病毒载体转染Livin高表达的食管癌Eca-109细胞株,从而有效地进行靶向Livin的RNA干扰.分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中Livin、Caspase-3、Casp...     

半胱氨酸蛋白酶-8蛋白在下咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Caspase-8在下咽癌组织中的表达及其与各临床、病理因素的关系。方法采用流式细胞术检测41例下咽癌组织和41例相应癌旁组织中的Caspase-8的表达,并以15例非下咽癌患者咽部正常黏膜组织作对照。并分析下咽癌组织中Caspase-8表达与临床病理因素的关系。结果(1)下咽癌组织中Caspase-8蛋白的表达量及阳性表达率均明显低于癌旁组织及正常咽黏膜组织(P<0.05),癌旁组织及正常咽黏膜组织的表达差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Caspase-8蛋白的表达与下咽癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度呈相关性(P<0.05);与肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P>0.05)。结论Caspase-8蛋白的低表达可促进下咽癌的发生、发展,其蛋白检测可作为判断下咽癌分化、浸润、转移、分期的重要指标。     

腺苷诱导HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化

目的:探讨腺苷诱导HepG2肝癌细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9活性变化,确定caspase-3,-8,-9在腺苷诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法:用3 mmol/L腺苷处理HepG2细胞,作用48 h后,用DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪定量检测凋亡细胞细胞比例;分别作用0,12,24,36,48 h,用荧光比色法检测HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化,Western-blotting法检测caspase-3的活性片段;并检测加入caspase-3抑制剂后经3 mmol/L腺苷作用48 h后细胞凋亡变化情况。结果:3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞48 h,检测到(27.5±2.1)%的细胞出现凋亡,而对照组仅有(1.1±0.1)%的细胞出现凋亡(P<0.01)。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞12 h后caspase-3活性开始升高,于36 h达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),而caspase-8,-9活性无明显变化。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞36 h后Western-blotting分析发现caspase-3被蛋白酶水解切断后形成的17 kU活性片段。使用caspase-3抑制剂30 min后,再经3 mmol/L腺苷作用48 h,肝癌细胞凋亡比例明显下降,抑制剂组与腺苷组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:在腺苷诱导肝癌细胞凋亡过程中caspase-3被活化,caspase-8和-9没有被活化,caspase-3可能参与了腺苷诱导的HepG2肝癌细胞凋亡。     

退变性颈椎不稳的回顾性调查与临床研究

目的 :探讨退变性颈椎不稳的定义、诊断标准和治疗原则 ,分析其外科手术的远期疗效和影响因素 ,了解颈椎手术和颈椎稳定性之间的相关性。　方法 :对 10 3例退变性颈椎疾病患者进行回顾性调查 ,包括收集完整的病案资料 ,进行影像学测量和随访。　结果 :无论采用何种手术入路 ,术后手术疗效评价 (JOA)评分均比术前有显著提高 (P <0 .0 1) ;前路手术对脊神经功能的改善效果明显优于后路手术 (P <0 .0 1) ;融合笼植入术维持手术节段术后椎间隙高度的效果明显优于自体髂骨植入 (P <0 .0 1) ;就恢复颈椎生理弧度的效果而言 ,融合笼植入术亦优于自体髂骨植入 (P <0 .0 5 ) ;关于手术对颈椎不稳的改善效果 ,前入路组优于后入路组 (P <0 .0 5 ) ,使用椎间融合器组好于未使用组 (P <0 .0 5 )。　结论 :退变性颈椎不稳并不是单独存在的疾病 ,而是缓慢进行性发展的力学状态改变 ,常和脊髓型颈椎病伴随发生 ,并对后者的进展起推波助澜的作用 ,提高临床医师的警惕性 ,密切结合临床症状、体征和影像学检查 ,才能做到早期发现、早期处理 ,从而改善患者的预后     

FasL受体在突出腰椎间盘髓核细胞中的表达及意义

目的:检测突出的腰椎间盘髓核中FasL受体的表达情况,探讨其与腰椎间盘突出症发生与发展的关系。方法:根据美国矫形外科学会(AAOS)及国际腰椎研究会(ISSLS)分类,将20例术中取出的腰椎间盘突出症患者髓核标本分成退变组(10例)、脱出组(10例),并以7例外伤性脑死亡青年患者作为正常对照组,应用免疫组化法检测髓核中FasL受体表达情况并通过电镜查找凋亡细胞。结果:(1)FasL受体主要定位于细胞膜,呈均匀的棕黄色细颗粒状或粗细不等;(2)3组FasL阳性表达率明显不同(P<0.05);(3)Fas阳性表达率的高低同年龄有关(r=0.4102,P<0.05),但与性别及病程无关;(4)电镜可观测到细胞凋亡的一些形态学变化。结论:腰椎间盘、突出髓核细胞中存在FasL受体的表达,突出类型不同,FasL受体表达的程度也不同,其异常表达诱导了髓核细胞的凋亡,可能在腰椎间盘突出症的发病过程中起着重要作用。     

中国汉族人群Trp2等位基因多态性与椎间盘退变性疾病的关联分析

目的 探索Trp2等位基因多态性与中国汉族人群椎间盘退变性疾病(DDD)的关联.方法 采用"病例-对照"研究方法,对Trp2等位基因对应的的单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛查.125例中国汉族DDD患者(DDD~+)与125例中国汉族非DDD受访者(DDD~-),其年龄、性别相匹配.提取外周血DNA,根据COL9A2基因在326位的氨基酸位置处存在两个突变位点,在NCBI基因序列数据库中确定其对应的位点SNP1(rs7533552)和SNP2(rs2077871).根据椎间盘退变程度、单节段或多节段退变、退变的节段分布,将DDD~+组为不同的亚型.用SNP分型系统-SNPstream UIT对所有样本的所选SNP位点行基因型鉴定.对检测数据分别行拟和优度χ~2检验、基于等位基因频率/基因型的关联分析.结果 病例组中和对照组中,两个位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡;病例/对照组中等位基因频率分别为:SNP1A=105(42%)/117(58%)、SNP1G=145(47%)/133(53%),SNP2C=220(88%)/30(12%)、SNP2T=224(90%)/26(10%);基因型频率分别为:SNP1AA=21(17%)/25(20%)、SNP1AG=63(50%)/67(54%),SNP1GG=41(33%)/33(36%);SNP2CC=95(76%)/100(80%)、SNP2CT=30(24%)/24(19%),SNP2GG=1(0%)/1(%1),差异均无统计学意义.进一步对候选基因与DDD~+组的不同亚型进行关联分析中,发现SNP2的基因型与椎间盘退变程度有相关性(χ~2=6.920,P=0.031).结论 中国汉族人群中,Trp2等位基因的基因多态性可能是决定椎间盘退变发展与退变程度的危险因素之一.     

Follow-up Study on the Motion Range after Treatment of Degenerative Disc Disease with the Bryan Cervical Disc Prosthesis

This study examined effect of a new intervertebral cervical disc prosthesis in relieving the neurological symptoms and signs, improving the patients' ability to perform daily activities, reducing pain, and maintaining the stability and segmental motion. From December 2003 to October 2004, 12 patients, who had received 14 replacements of cervical artificial discs, were followed-up for 2 to 8 months (with a mean of 5.2 months). Of them 5 had cervical spondylotic myelopathy and 7 had cer- vical disc herniation. The patients included 7 males and 5 females, with their age ranging from 35 to 62 y and a mean of 50.3 y. Single-level replacements were performed in 10 cases and 2 cases re- ceived two-level replacement. Operation time of the single-level surgery averaged 130±50 min and the time of two-level surgery was 165±53 min on average (from skin incision to skin suturing). Neurological or vascular complications during or after surgery was not observed. Japanese Orthope- dic Association scores (JOA scores) increased from 8.6 to 15.8 on average. There was no prothesis subsidence or excursion. Replaced segments were stable and the range of motion was partially re- stored, being 4.68° (3.6°-6.1°) in flexion and extension position and 3.51° (2.5°-4.6°), 3.42° (2.6° -4.3°) in left and right bending position. No obvious loss of physiological curvature was noted. CT or MRI follow-up showed that excursion was less than 1.5 mm) in 2 of 14 levels and between 1.5 mm and 3 mm) in 1 of 14 levels. No ossification in the replaced levels was observed. It is concluded that satisfactory short-term results were achieved in the 12 cases of artificial disc replacements. Different from anterior cervical discectomy and fusion, the replacement could achieve quick functional recov- ery and did not lead to the movement limitation of cervical vertebrae. At least a 5-years follow-up was needed to assess the long-term effect of the prosthesis on its neighboring segments.     

Caspase-8在喉癌组织中的表达及其与细胞凋亡相关性研究

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)在喉癌组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性。方法采用流式细胞术检测45例喉癌患者喉癌组织和相应癌旁组织中Caspase-8的表达,并以20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照;同时检测喉癌组织中的细胞凋亡率。结果 (1)喉癌组织中Caspase-8蛋白的表达量及阳性表达率均明显低于癌旁组织及正常喉黏膜组织(P<0.01),癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Caspase-8蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性(P<0.05);与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P>0.05)。(3)喉癌组织细胞凋亡率与临床分期、淋巴结转移有相关性;与临床分型、病理分级、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关。(4)喉癌组织中Caspase-8蛋白表达水平与喉癌组织细胞凋亡率呈正相关(P<0.01)。结论 Caspase-8蛋白的低表达可促进喉癌的发生、发展,并通过抑制凋亡并促进细胞增殖参与喉癌发展。