米非司酮对小鼠围着床期子宫内膜Dickkopf-1表达的影响

目的 研究孕酮抑制剂米非司酮对妊娠小鼠围着床期子宫内膜Dickkopf-1（DKK1）表达的影响，探讨DKK1在胚胎着床过程中的作用。方法 用半定量逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）及免疫组织化学SP法检测米非司酮组、载剂对照组和空白对照组小鼠在妊娠第3～7天DKK1 mRNA及蛋白的动态表达。结果载剂对照组和空白对照组小鼠在妊娠第4天出现DKK1 mRNA及蛋白的表达峰值，且两组在第3～7天各时间点DKK1的表达差异无显著性意义；米非司酮组DKK1 mRNA及蛋白的表达较两对照组显著降低（P〈0．01），在妊娠第4天亦无表达高峰。结论 DKK1是介导胚胎着床的重要因子之一，其表达可能受到孕激素的正向调节。     

补肾益气和血法中药对IVF-ET妇女hCG日子宫内膜和子宫血流的影响

目的观察补肾益气和血法中药介入体外授精-胚胎移植(IVF-ET)对不孕妇女hCG日子宫内膜和子宫血流的影响。方法选择符合纳入标准的输卵管性不孕IVF-ET患者60例,随机分为中药组和对照组,每组30例。对照组采用控制性超促排卵(COH)+IVF-ET治疗,中药组采用COH+IVF-ET+中药治疗,2组COH+IVF-ET方法相同。观察2组患者hCG日子宫内膜和子宫血流参数。结果 hCG日2组子宫内膜厚度比较差异无统计学意义(P0.05),但A型内膜在中药组所占比例显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);中药组hCG日双侧子宫动脉搏动指数(PI)及阻力指数(RI)均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。结论补肾益气和血法中药联合IVF-ET,可改善不孕妇女hCG日子宫内膜厚度和形态,增强子宫内膜容受性,调节子宫动脉血流状态。     

围着床期子宫内膜解偶联蛋白2的表达变化及与不孕的关系

目的探讨解偶联蛋白2(UCP2)在子宫内膜表达规律、围着床期变化及其与不孕的关系。方法分别应用原位杂交和Westem blot检测21例正常子宫内膜，22例不同原因不孕患者分泌期子宫内膜以及7例早孕蜕膜和绒毛UCP2 mRNA和蛋白表达。结果子宫内膜组织内存在UCP2蛋白的表达，分泌期子宫内膜UCP2的表达高于增殖期子宫内膜，蜕膜组织UCP2的表达增加明显。在早孕绒毛滋养细胞层也存在UCP2的表达。与其他不孕妇女相比．输卵管积水者分泌期子宫内膜UCP2表达明显增加。结论UCP2可能参与子宫内膜蜕膜化过程，并可能参与胚胎着床调节．UCP2表达显著增加可能是子宫内膜拮抗活性氧族水平过度增高的代偿反应，反映了子宫内膜可能的氧化应激．后者可能是输卵管积水不孕的重要原因之一．     

补肾化瘀方对多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突及ER、PR蛋白表达的影响

目的:观察补肾化瘀方对多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突及雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白表达的影响。方法:100只SD大鼠随机选取30只为空白对照组;另70只为模型制备组,均以颈背部皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrostexone,DHEA)溶液建立多囊卵巢模型大鼠。造模成功后,随机分为模型对照组、达英-35组、补肾化瘀方组,分别给予蒸馏水、达英-35及补肾化瘀方对大鼠灌胃给药,连续灌胃21 d,停药7 d为1个周期,3个周期后停药。按雌雄鼠11合笼,并于妊娠第4天处死大鼠。采用扫描电镜观察各组多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突表达,免疫组化法检测大鼠子宫内膜ER、PR蛋白的表达。结果:补肾化瘀方可提高多囊卵巢模型大鼠胞饮突的表达,与空白对照组、模型对照组、达英-35组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫内膜表面微绒毛低矮,局部消失,可见大量胞饮突,表面光滑,形态基本规则,边界清楚。ER表达:与空白对照组比较,模型对照组、达英-35组、补肾化瘀方组分别0.491±0.020、0.379±0.014、0.383±0.019,高于空白对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,达英-35组、补肾化瘀方组低于模型对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。PR表达:与空白对照组比较,模型对照组、补肾化瘀方组分别为0.292±0.02、0.215±0.012,显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01),达英-35组为0.210±0.014,高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,达英-35组、补肾化瘀方组低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾化瘀方可提高多囊卵巢模型大鼠子宫内膜胞饮突的表达,降低ER、PR蛋白水平,这可能是其改善子宫内膜容受性的机制之一。     

围着床期子宫内膜解偶联蛋白2的表达变化及与不孕的关系

目的探讨解偶联蛋白2(UCP2)在子宫内膜表达规律、围着床期变化及其与不孕的关系。方法分别应用原位杂交和Westernblot检测21例正常子宫内膜,22例不同原因不孕患者分泌期子宫内膜以及7例早孕蜕膜和绒毛UCP2mRNA和蛋白表达。结果子宫内膜组织内存在UCP2蛋白的表达,分泌期子宫内膜UCP2的表达高于增殖期子宫内膜,蜕膜组织UCP2的表达增加明显。在早孕绒毛滋养细胞层也存在UCP2的表达。与其他不孕妇女相比,输卵管积水者分泌期子宫内膜UCP2表达明显增加。结论UCP2可能参与子宫内膜蜕膜化过程,并可能参与胚胎着床调节,UCP2表达显著增加可能是子宫内膜拮抗活性氧族水平过度增高的代偿反应,反映了子宫内膜可能的氧化应激,后者可能是输卵管积水不孕的重要原因之一。     

补肾助孕方对肾虚薄型子宫内膜大鼠组织形态ERa、PR表达影响及容受性的调控作用

目的 观察补肾助孕方对肾虚薄型大鼠子宫内膜、卵巢组织形态影响及ERa、PR表达变化,探讨中药对子宫内膜容受性的调控作用.方法 雌性SD大鼠30只随机分为正常组、模型组、中药组,每组10只.后两组经羟基脲灌胃建立肾虚薄型子宫内膜大鼠模型.模型成功后,中药组给予补肾助孕方0.3 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等...     

补肾活血中药对子宫内膜异位症的影响

【目的】观察补肾调经汤内服加活血散结栓塞肛对子宫内膜异位症(简称内异症)体液免疫及异位子宫内膜的影响。【方法】SD大鼠130只,随机分为10组,分别为正常对照组、模型组、丹那唑阳性对照组及不同剂量补肾调经汤灌胃或加用和单独使用活血散结栓塞肛治疗7个组。除正常对照组外,其他组均复制大鼠子宫内膜异位症模型,然后分别给药,治疗4周后检测血清IgG、IgM、IgA抗体和补体C3、C4及谷丙转氨酶(ALT)水平,进行胸腺、卵巢、子宫、异位移植物及肝、肾组织的病理学检查。【结果】大鼠内异症模型手术4周后,异位的子宫内膜生长良好,IgG、C3水平升高,IgM下降,子宫、卵巢增大;中药及丹那唑治疗后均可使异位的内膜萎缩,3倍人用剂量中药灌胃加塞肛或5倍量组IgG值下降,5倍量中药塞肛或加灌胃组C3值下降,5倍量中药灌胃加塞肛组子宫和卵巢缩小;丹那唑对模型动物的性周期有抑制作用,而中药组均无此作用;各给药组均对大鼠的ALT无明显影响。【结论】补肾调经汤内服加活血散结栓塞肛可使内异症模型大鼠的子宫内膜萎缩,改善其体液免疫功能。     

组蛋白甲基化酶MLL1在小鼠围着床期子宫内膜的表达

目的:探讨组蛋白甲基化酶MLL1在小鼠围着床期子宫内膜的表达规律及对胚胎着床的作用。方法:收集妊娠小鼠(D0、D1、D4、D5、D6、D8)子宫内膜,分别采用RT-PCR和Western Blot检测小鼠内膜MLL1 mRNA和蛋白的表达情况,利用免疫组化检测MLL1蛋白的定位;宫角注射MLL1抑制剂进行干预。结果:①MLL1、HOXA10 mRNA的表达量在妊娠后随天数逐渐上升,且在D4达到高峰(P<0. 05),而后逐渐下降;②免疫印迹发现MLL1蛋白,与mRNA表达趋势相同,在小鼠妊娠后上调,D4表达最强(P<0. 05),而后下降;免疫组化发现在D0和D1、D4,MLL1蛋白主要表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮;妊娠D5,MLL1主要表达于子宫基质细胞中,妊娠D6、D8主要表达于蜕膜化细胞中;③宫角注射MLL1抑制剂后,与空白组相比,抑制组胚胎着床数量明显减少,并且MLL1 mRNA和蛋白的表达水平低于溶剂组和空白对照组。结论:组蛋白甲基化酶MLL1可能参与了子宫内膜容受性的建立和胚胎植入的过程;还可能参与了胚胎植入后的子宫内膜蜕膜化反应。     

益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制

目的：研究益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只，随机分为正常对照组、肾虚型颈椎病模型组（简称模型组）和益气化瘀补肾方组，每组10只。除正常对照组不施加任何手术外，采用由动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型和去卵巢肾虚模型复合法建立肾虚型颈椎病模型。手术3个月后，益气化瘀补肾方组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。放射免疫法检测血清雌二醇（estradiol，E2和血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）含量；锥板法检测血液流变学；流式细胞仪检测血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha—granular membrane protein，CD62p）表达；HE染色观察颈椎间盘组织病理学改变，免疫组织化学检测颈椎间盘Ⅱ型胶原蛋白表达情况，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应法检测聚集蛋白聚糖（aggrecan-1，Agcl）、Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene，Col2al）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）mRNA表达。结果：与模型组比较，益气化瘀补肾方组大鼠血清E2含量升高（P〈0．05）；血浆cAMP、cGMP含量有所升高，但差异无统计学意义；全血低切黏度、低切还原黏度和CD62p表达百分率下降（Pd0．05或P〈0．01）；颈椎间盘退变有所改善，Miyamoto评分下降（P〈0．05），11型胶原表达增加；Agcl、Col2al和TIMP-1 mRNA表达增加（P〈0．05，P〈0．01），MMP-13 mRNA表达下降（Pd0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过调节免疫系统、代谢系统、凝血系统和内分泌系统等指标，改善肾虚型颈椎病证候指标，并延缓椎间盘退变。     

益气活血方与补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带形态学影响

目的观察益气活血方（脑络欣通）和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带形态学的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血方组及补肾生髓方组。采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,脑缺血2 h,分别再灌注1,2,3周,采用苏木精-伊红、Spoerrl染色法观察缺血半暗带形态学变化。结果苏木精-伊红染色示再灌注3周时模型大鼠缺血半暗带神经细胞变性坏死严重,可见核浓缩现象与胶质细胞增生及少量淋巴细胞浸润。两种中药复方在再灌注3周时,缺血半暗带神经细胞变性坏死减轻,胶质细胞增生不明显,可见少量核浓缩现象。Spoerrl染色示神经细胞突触呈蓝红色,模型组神经突触阳性总面积单位显著减小（P〈0.01）;再灌注各时间点,两种中药复方组神经细胞突触阳性总面积单位较模型组显著增多（P〈0.01）;再灌注2周补肾生髓方组比益气活血方阳性染色面积显著减少（P〈0.01）。结论益气活血方与补肾生髓方通过减轻缺血半暗带区神经细胞突触损伤或促进神经细胞突触再生,提高中枢神经系统可塑性,抗脑缺血损伤。     

补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR表达的影响

目的 观察中药补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠胚泡着床情况及对类肝素结合样表皮生长因子(HB-EGF)及其受体(EGFR)表达的影响.方法 将妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组30只.分别于妊娠第5、6天(Pd5、6)用伊文思蓝尾静脉注射后取妊娠子宫.观察妊娠第5天(Pd5)各组对伊文思蓝的着色反应;运用RT-PCR方法检测HB-EGF mRNA的含量,采用免疫组织化学法测定HB-EGF及其受体EGFR的表达.结果 Pd5,模型组对伊文思蓝反应和平均反应点数显著低于正常组,中药组与模型组有显著差异.Pd5、6,模型组子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR的表达在时间上明显滞后于正常组并且表达量减少,中药组与模型组有显著差异(P<0.05).结论 补肾安胎方改善胚泡着床障碍小鼠胚胎着床可能与提高着床位点的HBEGF及其受体EGFR的表达有关.     

Effects of Acupuncture on Progesterone and Prolactin in Rats of Embryo Implantation Dysfunction

Objective:To investigate the effect of acupuncture on progesterone(P4) and prolactin(PRL) in rats of embryo implantation dysfunction(EID).Methods:On the first day of pregnancy,72 female Wistar rats were randomly allocated into the normal group,the EID model group,the acupuncture group and the P4 group(18 in each group).The normal group was injected sesame oil,while the other three groups were given mifepristone to establish the EID model.The acupuncture group and the P4 group were given treatment of acupuncture and P4 injection,respectively.The serum of P4 and PRL were detected by radioimmunoassay,and the mRNA and protein expressions of P4 receptor(PR) and PRL receptor(PRLR) were detected using real-time polymerase chain reaction and immunohistochemical method,respectively.Results:Compared with the normal group,the serum levels of P4 and PRL as well as the mRNA and protein expression levels of PR and PRLR in the EID model group were significantly lowered(P<0.01 or P<0.05).The above indices in the acupuncture group and the P4 group were significantly elevated compared with the EID model group(P<0.01 or P<0.05).Conclusion:Acupuncture can promote embryo implantation effectively,which might be related to the effects of acupuncture on upregulating the P4 and PRL levels in serum and the PR and PRLR expression levels in rats.     

益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的机制研究

目的：研究益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、模型组和益气化瘀补肾方组,每组10只。气虚血瘀肾虚型颈椎病模型通过病、证模型复合而成。益气化瘀补肾方组采用益气化瘀补肾方治疗1个月。通过放射免疫学、组织病理学、免疫组织化学和分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方的作用机制。结果：与正常组比较,模型组动物出现精神萎靡、少动,舌质、尾色瘀紫,体质量减轻,子宫及附件质量降低,环磷酸腺苷与环磷酸乌苷及其比值无明显差异,血黏度、血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha-granular membraneprotein,CD62p）增高,血清雌二醇（estradiol,E2）降低。益气化瘀补肾方组与模型组比较,除子宫及附件质量外,上述指标均有不同程度改善。HE染色显示模型组颈椎间盘高度降低,纤维环出现裂隙,胶原纤维排列紊乱,髓核减少,软骨终板变薄;益气化瘀补肾方组椎间盘高度正常,纤维环排列稍紊乱,髓核结构良好,软骨终板变化不明显。与正常组比较,模型组Ⅱ型胶原表达减少;益气化瘀补肾方组Ⅱ型胶原在纤维环的表达比模型组有所增加。模型组与正常组比较Ⅱ型前胶原基因和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissuein—hibitorofmetallopr。teinase1,TIMP1））基因表达降低（P〈0．01）,益气化瘀补肾方组与模型组比较,Ⅱ型前胶原基因和TIMP-1基因表达增高,基质金属蛋白酶-13基因表达降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论：益气化瘀补肾方通过调节免疫、凝血和内分泌系统等改善模型动物气虚血瘀肾虚状态,通过调节椎间盘细胞外基质以及相关金属蛋白酶延缓椎间盘退变。     

益气健脾方对化疗后骨髓及免疫功能影响简

目的：探讨益气健脾方对环磷酰胺化疗后骨髓抑制及免疫抑制的影响。方法：灌胃第11天：眼眶取血,进行血细胞分析;采用称重法测定胸腺、脾脏重量并计算脏器指数;腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定;NK细胞活性检测。结果：益气健脾方显著提高化疗小鼠胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性。结论：益气健脾方具有促进骨髓细胞生长,提高机体免疫功能,抵御化疗所引起的骨髓抑制及免疫功能下降的作用。     

Effect of Bushen Yiqi Hexue recipe on pinopodes expression on endometrial surface in embryo implantation dysfunctional mice

Objective: To explore the therapeutic mechanism of Bushen Yiqi Hexue recipe (BYHR), and observe its effect on pinopodes expression on endometrial surface in mifepristone induced embryo implantation dysfunctional mice.Methods: Pregnant Kunming mice were randomly divided into the normal group, the control group and the treated group. Mice in the treated group were administered with BYHR, and those in the normal group and the control group were administered with normal saline, starting from the very first day of pregnancy (Pd1). On the Pd4, mifepristone (RU486) was subcutaneously injected into mice in the control group and the treated group. Pinopodes expression on endometrial surface at 09:30–10:00 pm on Pd4 (regarded as time point 1, T1) and at 09:30–10:00 am on Pd5 (as time point 2, T2) was determined by scanning electron microscopy. Pregnancy rate and average implanted embryos were observed on Pd7.Results: Pregnancy rate and average implanted embryos in the control group were obviously lower than those in the normal group (allP<0.01), while the two parameters were significantly higher in the treated group (P<0.05,P<0.01, respectively) than those in the control group. In the normal group, abundant developing pinopodes were distributed over the whole endometrial surface in T1, and they were altered to a great deal of fully developed pinopodes in T2. But in the control group, only a few pinopodes were expressed locally on endometrial surface in T1, showing a nonsynchronous figure of development, and they completely disappeared in T2. In the treated group, a lot of developing pinopodes were expressed like those in the normal group but somewhat lagged behind, whereas many fully developed pinopodes were expressed in T2.Conclusion: The decrease of the pinopodes in Tl and the cleaning up of them in T2 is possibly the partial mechanism of mifepristone in inducing embryo implantation dysfunction. It is indicated that BYHR could improve pinopodes expression on endometrial surface, eventually better the uterine receptivity and improve the embryo implantation. Project supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30171193)     

益气健脾方对H22肝癌腹水小鼠生存期及体重的影响

目的:探讨益气健脾方对于H22肝癌腹水的生存期及体重的影响。方法:取传代后的H22腹水接种于小鼠腹腔,造成H22肝癌腹水模型,随机分为4组:模型组、5-Fu组、益气健脾小剂量组、益气健脾大剂量组,每组10只,造模后开始给药,模型组予灌NS 0.4 mL;5-Fu组,予隔日灌胃0.2 mL/d;益气健脾大、小剂量组分别灌益气健脾方不同浓度0.4 mL/d,灌胃至空白组出现第1只死亡时停止灌胃,观察各组小鼠的生存时间及体重的变化。结果:其他3组小鼠体重增长情况较空白组有无显著差异;生存期大剂量组与小剂量组之间存在差异,5-Fu组生存时间最长,较其他3组有显著差异。结论:益气健脾方对于H22肝癌腹水小鼠模型的体重无明显有影响,对于小鼠的生存期存在剂量依赖性。