缺氧对肾小管损伤的研究进展

急性肾功能衰竭(acute renal failure ARF)是以肾小管细胞损伤为主的病理过程,缺氧则是导致急性肾小管损伤的主要原因之一。近年来,国外学者将体外分离的肾小管节段制造缺氧模型,进行细胞和分子水平研究,揭示了缺氧致肾小管损伤的主要机制,现综述如下。     

缺氧对肾小管的损伤机制及其修复的新进展

急性肾小管损伤是急性肾功能不全主要病因之一 ,而缺氧则是引起急性肾小管损伤的主要原因之一。现主要对缺氧致肾小管损伤的机制及抗缺氧的细胞保护研究综述如下。1　缺氧对肾小管损伤的机制近年来 ,国外学者对体外分离的或经培养后的肾小管节段直接给予缺氧为模型 ,进行了许多细胞和分子水平研究。这些研究揭示了体内缺氧致肾小管损伤的主要机制包括以下几项。1.1　肾小管细胞内能量代谢障碍和生化代谢障碍　缺氧首先导致细胞有氧代谢的障碍 ,使细胞内的ＡＴＰ合成量急剧下降 ,细胞膜的通透性增高 ,膜上Ｎａ+-Ｋ+-ＡＴＰ酶功能降低 ,细胞Ｎ…     

缺氧-复氧肾小管上皮细胞损伤的信号传导机制

目的 探讨肾小管上皮细胞在缺氧-复氧(H-R)损伤后的信号传导机制.方法 将不同方法处理的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)分为对照组、模型组和PDTC组,模型组和PDTC组再分别分成缺氧6、12、24 h组、缺氧24 h后分别复氧6、12、24 h组;检测细胞成活率、NF-κB p65蛋白表达、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及蛋白表达情况.结果 与对照组比较,模型组随缺氧时间延长细胞数量逐渐减少,24 h达高峰(P＜0.05),复氧后细胞数量略有增加;随缺氧时间延长NF-κB p65阳性蛋白表达增多,复氧6h组达高峰(P＜0.05);ICAM-1 mRNA及蛋白表达随H-R时间延长渐增高(P＜0.05).PDTC组中NF-κBp65蛋白和ICAM-1 mRNA及蛋白表达较模型组有明显下降(P＜0.05).结论 H-R诱导HK-2细胞中NF-κcB p65的活化,从而上调ICAM-1 mRNA及蛋白表达.     

丹参酮ⅡA对缺氧/复氧损伤肾小管上皮细胞的作用 及机制研究

目的：探讨丹参酮磺酸钠ⅡA（TanshinoneⅡA,TSNⅡA）对缺氧/复氧（hypoxia/reperfusion,H/R）肾小管上皮细胞（human kidney-2,HK-2）氧化应激和凋亡的影响。方法：取传代培养的HK-2细胞建立H/R诱导细胞模型,实验分为正常对照组,单纯H/R组,H/R+20 μg/mL TSN ⅡA组,H/R+10 μg/mL TSN ⅡA组,H/R+5 μg/mL TSN ⅡA组共5组。光镜下观察各组细胞的形态变化;CCK-8法测定H/R HK-2细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;荧光显微镜观察细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的产生;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果：与正常对照组比较,单纯H/R组HK-2细胞增殖活性明显减少,为（43.6±10.1）%;中低浓度TSN可提高H/R HK-2细胞的增殖活性,10 μg/mL浓度的TSNⅡA对H/R HK-2细胞的增殖具有最明显的保护作用,为（79.1±11.1）%,与单纯H/R组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μg/mL浓度TSNⅡA组相对于10 μg/mL浓度组对细胞增殖有一定的抑制作用,为（51.0±10.4）%（P＜0.05）。与H/R组比较,共聚焦荧光显微镜下TSNⅡA减少细胞内活性氧产生。流式细胞术检测发现各浓度TSNⅡA均对H/R HK-2细胞凋亡有一定抑制作用,其中以20 μg/mL最为明显（P＜0.05）。Western blot结果提示TSNⅡA作用H/R HK-2细胞后凋亡抑制蛋白Bcl-2上调,而促凋亡蛋白Bax下调。结论：TSNⅡA可能通过抑制氧化应激反应减少细胞凋亡,对H/R HK-2细胞产生保护作用。     

蛋白尿对肾小管间质的损伤作用及其机制

在慢性肾脏病进展过程中最为常见的临床表现是不同程度的蛋白尿。蛋白尿不仅是肾脏损伤的标志,同时也是加速肾脏病进展的重要因素。临床治疗过程中,较好地控制蛋白尿可以明显延缓慢性肾脏病的进展。因此,临床常把控制蛋白尿作为治疗的重要目标之一,现就蛋白尿导致肾损害的机制综述如下。     

肾小球疾病中肾小管损伤机制探讨

近年来 ,无论是人类原发性或继发性肾小球肾炎 ,还是实验性动物模型的研究结果都表明 ,肾小管间质病变较肾小球病变更密切相关于肾功能的损伤和预后[1] 。目前 ,小管间质病变在进行性肾小球损伤中的重要性已经被越来越多的国内外学者所重视。本文针对肾小球疾病中肾小管损伤的机制进行探讨。1　完整肾单位学说196 0年NealBricker首次提出肾小球和肾小管做为一个完整的肾单位在肾脏疾病进展中密切相关[2 ] 。 1970年CarlGottsclalk等通过超微结构观察慢性肾炎鼠模型以及重金属所致肾小管损伤模型发现 :单个肾单位肾小球滤过率波动在正常的 …     

异丙酚对大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 探讨异丙酚不同给药时机对肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制研究.方法 噻唑蓝(MTT)法检测异丙酚不同给药时机对肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤后细胞活力的影响,流式细胞仪分析细胞凋亡的状况.RT-PCR法检测细胞中bcl-2mRNA表达.结果 ①缺氧/复氧组细胞死亡率和凋亡率与对照组相比明显增高,差异有显著性(P＜0.01).异丙酚预先和即时给药组明显降低细胞死亡率和凋亡率,差异有显著性(P＜0.01),而异丙酚延迟给药组此作用不明显,差异无显著性(P＞0.05).②缺氧/复氧后bcl-2mRNA的表达明显减少(P＜0.05),异丙酚预先和即时给药组上调bcl-2mRNA的表达,差异有显著性(P＜0.05),而异丙酚延迟给药组此作用不明显,差异无显著性(P＞0.05).结论 异丙酚预先和即时给药明显降低细胞死亡率和凋亡率,而异丙酚延迟给药此作用不明显.异丙酚预先和即时给药能上调bcl-2mRNA的表达,而异丙酚延迟给药此作用不明显.     

高原缺氧对人体损伤机制及防治研究进展

海拔3000米以上被称为高原地区,此种特殊环境,除对人体各器官系统的功能、代谢等产生广泛影响外,还会引起一组以缺氧为突出表现的特殊类型疾病——高原病（Higha ltitude sickness）。近年来高原旅游业日益兴旺,高原运动项目的开展,急进高原发生高原病和致命性高原肺水肿的情况屡见不鲜,如果救治不及时死亡率很高。本文就高原缺氧对人体损伤机制及防治研究进展做一述评。     

糖尿病肾病的肾小管损伤机制的研究进展

糖尿病肾病（DIN）是糖尿病最为常见的慢性微血管并发症之一,该病的发病机制迄今尚未完全阐明,既往认为DN的早期病变部位在肾小球,近年来的研究发现肾小管的病变无论从发病时间或发病机制均有其独立性,并且肾小管病变及肾间质纤维化的程度与肾功能的相关性比肾小球硬化与肾功能的相关性更为密切。糖尿病患者尿白蛋白排泄率在正常范围时,就已经存在肾小管损伤。现对DN肾小管损伤机制作一综述。     

脯氨酸羟化酶抑制剂对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

 目的 探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸（DMOG）通过稳定人肾小管上皮细胞（HKC）中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达抗缺氧/复氧损伤（HRI）的作用及其机制。方法 无糖缺氧12 h,复氧6 h制作HKC细胞HRI模型,分别于缺氧前2、4、6、12 h给予DMOG预处理,四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）检测细胞增殖活性,试剂盒检测细胞培养液中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,Annexin/PI染色流式细胞仪技术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR方法检测bcl-2和bax mRNA的表达,Western印迹检测HIF-1α、bcl-2和bax蛋白的表达。结果 DMOG预处理使HKC中HIF-1α表达增加,细胞损伤明显改善,表现为细胞增殖活性提高,培养上清液中MDA含量下降、SOD活性增强,细胞凋亡率下降（P<0.05）;同时bax mRNA和蛋白表达下调（P<0.05）,bcl-2 mRNA和蛋白表达上调（P<0.05）。结论 DMOG可通过稳定HIF-1α,影响凋亡相关基因的表达,改善HRI诱导的HKC细胞损伤。     

肾草酸钙结石大鼠肾小管细胞损伤的机制

目的探讨肾草酸钙结石大鼠肾小管上皮细胞损伤的机制,为临床预防和治疗肾结石提供理论依据。方法 20只大鼠随机分为模型组和对照组,每组10只。模型组制备肾草酸钙结石大鼠模型。分离大鼠肾小管上皮细胞并进行培养,用乳酸脱氢酶释放法检测上皮细胞活性,酶联免疫吸附法检测肾小管上皮细胞中caspase-3活性,Western blot方法检测肾小管上皮细胞中Bcl-2、Bax和Cyto C的表达。结果模型组大鼠肾小管上皮细胞活性显著低于对照组(P<0.05),且细胞中caspase-3活性显著升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),Cyto C释放显著增多(P<0.05)。结论肾草酸钙结石大鼠肾小管上皮细胞的损伤可能是由线粒体途径介导的细胞凋亡引起的。     

高尿酸血症损伤肾小管上皮细胞钠钾泵的机制

高尿酸血症与肾小管损伤密切相关,其致病机制众多,其中血尿酸损伤肾小管上皮细胞Na+-K+-ATPase(NKA)信号转导是导致肾小管上皮细胞损害的重要机制,目前相关研究较少.本文将高尿酸血症对肾小管上皮细胞NKA的损伤机制进行综述,探究高尿酸环境下,尿酸是否通过诱导肾小管上皮细胞的氧化应激,从而诱导线粒体功能障碍,并最...     

大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型的建立

目的 探讨建立大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧损伤模型的一种新方法. 方法 本实验使用大鼠NRK-52E细胞.实验分为对照组和实验组,实验组分为缺氧2,4,6 h及缺氧后复氧1,12和24 h组.缺氧时换用缺氧液,再置入N294% O2 1% CO2 5%缺氧环境;缺氧后换用含10%胎牛血清的EMDM/F12,置入95%空气 CO2 5%有氧环境,制作缺氧/复氧模型;台盼蓝摄取法进行细胞计数及检测细胞存活率,分光光度法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量. 结果 大鼠肾小管上皮细胞经过缺氧/复氧处理后,与对照组相比,台盼蓝摄取率显著提高,细胞存活率显著下降,LDH含量升高,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 采用三气孵箱法建立大鼠.肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型,较其他制模方法 操作简单、易行、可靠.     

缺氧预处理对人心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其机制

目的：探讨缺氧预处理（ＰＣ）对于人类心肌细胞缺氧复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的影响及其机制。方法：在体外分离的人心房和心室肌细胞的Ｈ／Ｒ模型上观察缺氧ＰＣ的作用，及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂与蛋白磷酸酶激动剂和抑制剂对ＰＣ现象的影响。结果：缺氧ＰＣ明显减轻Ｈ／Ｒ造成的心肌细胞损伤，ＰＫＣ抑制剂Ｈ７和蛋白磷酸酶激动剂ＢＤＭ分别完全消除ＰＣ的细胞保护，而蛋白磷酸酶抑制剂ＯＡ则能模拟ＰＣ的上述保护效应。结论：人类     

缺氧预处理对人心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其机制

探讨缺氧预处理（PC）对于人类心肌细胞缺氧复氧（H／R）损伤的影响及其机制。方法：在体外分离的人心房和心室肌细胞的H／R模型上观察缺氧PC的作用，及蛋白激酶C（PKC）抑制剂与蛋白磷酸酶激动剂和抑制剂对PC现象的影响。结果：缺氧PC明显减轻H／R造成的心肌细胞损伤，PKC抑制剂H_7和蛋白磷酸酶激动剂BDM分别完全消除PC的细胞保护，而蛋白磷酸酶抑制剂OA则能模拟PC的上述保护效应。结论：人类心肌细胞存在缺氧PC现象，其保护机制可能涉及PKC激活和蛋白磷酸化过程。     

肾损伤分子-1在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的保护作用

目的 观察肾损伤分子-1(KIM-1)对肾小管上皮细胞缺氧损伤时增殖及凋亡的影响,证实KIM-1对肾缺氧损伤的保护作用.方法 以人近端肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,用pcDNA-hKIM-1质粒转染HK-2细胞,获得稳定表达KIM-1的pcDNA-hKIM-1-HK2细胞株.观察pcDNA-hKIM-1-HK2细胞(A组)和KIM-1抗体预处理pcDNA-hKIM-1-HK2细胞(C组)在缺氧损伤后细胞活力、凋亡指标及凋亡相关信号分子表达,以未转染缺氧HK-2细胞(B组)作为对照.结果 A组细胞活力指数高于B组(0.427±0.046 vs.0.210±0.036,P＜0.05),细胞凋亡数量及流式细胞仪检测的缺氧早、晚期凋亡指数明显低于B组(P＜0.05).A组细胞缺氧时磷酸化ERK、磷酸化Akt表达较C组明显升高(P＜0.05).结论 KIM-1对肾小管上皮细胞缺氧损伤具有保护作用,其机制与激活PI3K-Akt/PKB和ERK信号通路抑制凋亡有关.     

急性缺血再灌流对肾小管上皮细胞的损伤及其再生机制

急性缺血再灌流损伤 (ischemiareperfusioninjury ,IRI)是临床常见的急性缺血性肾功衰、肾实质切开取石、肾移植术等发生及转归过程中的主要肾损害方式之一 ,而在此过程中 ,肾脏最易受损进而严重影响肾功能的则是肾小管上皮细胞。因此 ,阐明急性肾缺血再灌流过程中的肾小管上皮细胞损伤及修复机制 ,并提出行之有效的预防和治疗措施已成为当今研究的热点之一。本文综述了肾小管上皮细胞在急性缺血再灌流过程中的损伤及修复机制的研究进展。1　急性肾缺血再灌流性上皮细胞的损伤机制1.1　肾小管细胞能量耗竭 ,细胞骨架破坏在肾完全性缺血 10…     

胡黄连苷Ⅱ对大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究胡黄连提取物对缺氧/复氧后肾小管上皮细胞氧化应激的保护作用和机制。方法:采用小鼠肾小管上皮细胞建立缺氧/复氧损伤模型,分别用不同梯度浓度胡黄连苷Ⅱ(1,10,100,1 000μg/ml)进行药物干预。MTT法检测细胞活性,BCA蛋白质分析试剂盒检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组化检测Bax蛋白的表达,Western Blot法检测高迁移率族蛋白(HMGB1)的表达,Realtime PCR检测Bax和Bcl-2mRNA表达。结果:与正常组相比,各缺氧/复氧组细胞内氧化应激水平增高,凋亡细胞或死亡细胞数量明显增加。与单纯缺氧/复氧组比较,不同浓度梯度的胡黄连苷Ⅱ可抑制细胞内的氧化损伤。胡黄连苷Ⅱ使肾小管上皮细胞增殖活性增强,细胞凋亡数量减少,培养液中MDA含量下降、SOD活性增强,Bax蛋白和HMGB1蛋白表达下调,Bax mRNA水平下调,Bcl-2mRNA水平上调。结论:缺氧/复氧导致肾小管上皮细胞内氧化应激增强,胡黄连苷Ⅱ能通过抑制肾小管细胞内氧化应激来改善缺氧/复氧后的细胞凋亡和坏死。     

整合素β1在新生猪肾小管上皮细胞缺氧损伤中的变化

目的探讨新生儿窒息所致肾脏损害机制.方法运用抗霉素(antimycin) A无糖血清的培养基,建立30、60、90和120 min肾小管上皮(RTE)细胞缺氧模型,检测RTE细胞中三磷酸腺苷(ATP)含量,采用流式细胞技术测定RTE细胞整合素β1数量的变化.结果成功建立了30、60、90、120 min低ATP管上皮细胞模型.各时段(30、60、90和120 min)组ATP含量较正常组明显降低(P＜0.001).随缺氧时间的延长,整合素β1水平有逐渐下降趋势,30、60、90和120 min组较正常组明显降低(P均<0.001),各组间比较,P均<0.001.结论整合素β1在缺氧新生猪RTE细胞的减少,可能直接参与了新生动物缺氧缺血肾脏损害的发病.