对氨基水杨酸钠对体外染锰大鼠基底核神经元氨基酸类神经递质含量的影响

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对体外染锰致大鼠基底核原代神经元γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)等氨基酸类神经递质水平的影响。方法培养至第8天的基底核神经元随机分为正常对照组(对照组)、染锰组、低、中、高剂量PAS-Na(L-、M-、H-PAS)对照组和干预组。对照组、L-、M-、H-PAS对照组神经元给予培养液培养24 h;染锰组、L-、M-、H-PAS干预组神经元暴露于含MnCl2·4H2O 50μmol/L培养液培养24 h。随后弃掉原培养液。L-、M-、H-PAS对照组、干预组分别给予含PAS-Na 50、150、450μmol/L的培养液培养24 h,其余组用正常培养液培养24 h。然后,用高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定细胞内外Glu、Gln、Gly及GABA含量。结果染锰组神经元Glu、Gln含量比对照组低,GABA、Gly含量比对照组高;与染锰组比较,L-、M-、H-PAS干预组Gly和L-PAS干预组GABA含量降低,L-、H-PAS干预组Gln和H-PAS干预组Glu含量增高(P0.05)。染锰组神经元外Glu、Gln含量比对照组低,Gly含量比对照组高;L-、M-、H-PAS干预组Gly含量比染锰组低,M-PAS干预组Glu和M-、H-PAS干预组Gln含量高于染锰组(P0.05)。结论体外染锰引起大鼠原代基底核神经元氨基酸类神经递质水平改变异常,PAS-Na对锰致神经元氨基酸类神经递质的毒性影响有干预作用。     

PAS-Na对锰致大鼠基底核原代星形胶质细胞损伤的拮抗模型探讨

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对锰(Mn)致大鼠基底核原代星形胶质细胞损伤的拮抗作用,为深入Mn中毒机制及其防治研究提供科学技术平台。方法取SPF级新生24 h内SD大鼠基底核进行消化、传代培养,用荧光免疫法鉴定星形胶质细胞。给予不同浓度Mn (125、250、500和1 000μmol/L)和PAS-Na (5、50、500和5 000μmol/L)对星形胶质细胞处理24 h,用MTT法测定细胞存活率,按细胞存活率75%为Mn细胞毒性的筛选标准,细胞存活率100%为PAS-Na无细胞毒性标准,选择染Mn和PAS-Na干预剂量。结果染不同浓度Mn 24 h后,星形胶质细胞出现不同程度的肿胀或皱缩,并随染锰浓度增加而加重。正常培养液(对照)、125、250、500和1 000μmol/L Mn组细胞存活率依序为100. 0%、91. 5%、83. 3%、78. 2%和55. 6%。与对照组比较,250、500和1 000μmol/L Mn组细胞存活率均降低(P<0. 05)。随着Mn浓度增高,细胞存活率呈剂量-反应性下降(r=0. 979)。给予5、50、500和5 000...     

PAS-Na对铅致幼龄大鼠学习记忆及氨基酸类神经递质含量的影响

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对铅致幼龄大鼠学习记忆损伤及海马氨基酸类神经递质改变的影响。方法 50只雌雄各半初断乳SD大鼠随机分为对照组,染铅组,低、中、高剂量PAS-Na治疗(L-、M-、H-PAS)组。染铅、L-、M-和H-PAS组大鼠腹腔注射(ip)15 mg/kg醋酸铅,对照组ip等容量生理盐水,1次/d,连续2周。然后L-、M-和H-PAS组背部皮下注射(sc)100、200和300 mg/kg PAS-Na,染铅组和对照组背部sc等容量生理盐水,1次/d,连续3周。用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,石墨炉原子吸收分光光度法测定大鼠血铅含量,高效液相色谱法测定海马谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果与对照组相比,染铅组大鼠各周体重均较低,逃避潜伏期长,血铅含量升高,Glu和Gln含量低,Glu/GABA比值下降(P0.05);与染铅组比较M-PAS组逃避潜伏期短,L、M和HPAS组海马Glu和Gln含量升高,H-PAS组海马GABA含量降低,L-、M-和H-PAS组Glu/GABA比值高(P0.05)。结论PAS-Na对铅致幼龄大鼠学习记忆能力受损和海马氨基酸类神经递质异常改变具有一定的拮抗作用。     

丹红注射液对体外培养星形胶质细胞的影响

目的 观察丹红注射液对星形胶质细胞（astrocyte, As）增殖作用. 方法 不同浓度丹红注射液作用于体外培养的大鼠As, 噻唑蓝染色（MTT）比色法对丹红注射液进行细胞毒性分析, 流式细胞技术分析细胞增殖情况. 结果 MTT比色分析得出丹红注射液对细胞生长的半数抑制率（IC50）约为17.8%（丹红注射液与培养基的体积比）, 安全作用浓度<8%;流式细胞分析结果：药物组细胞DNA合成期细胞所占百分比（S%）和增殖指数（PI值）（S+G2/M）×100%较正常对照组显著增高（P<0.01）. 结论 适当浓度丹红注射液可促进星形胶质细胞增殖.     

大鼠脑星形胶质细胞的体外培养及鉴定

目的 探讨新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞的分离、培养以及鉴定方法.方法 取出生1～2 d的Wistar大鼠大脑皮质,用机械法和胰酶消化法分散细胞,制成细胞悬液,差速黏附处理后,将未贴附的细胞接种培养.待细胞铺满瓶底后,置摇床摇晃,舍弃含脱落细胞的培养液,细胞传代.GFAP免疫细胞化学染色鉴定.结果 成功分离培养了原代星形胶质细胞,传代培养的星形细胞形态典型,纯度可达95%以上.结论 成功建立了大鼠星形胶质细胞体外培养方法.     

孕酮对大鼠大脑皮质神经元氨基酸类神经递质释放的影响

目的研究孕酮对大鼠大脑皮质神经元GLU和GABA释放的影响。方法孕酮(10μmol.L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,采用OPA-巯基乙醇柱前衍生,荧光检测-高效液相色谱法测定处理后不同时间点(0.5、1、1.5、2、24、36、48、72)细胞培养液中GLU和GABA的水平。结果与对照组相比,孕酮处理组1、1.5、2、24、36、48、72h GLU水平均下降(P<0.01);孕酮处理组0.5、1、1.5、2、24、36、48、72h GABA水平均升高(P<0.05或P<0.01)。结论孕酮通过抑制神经元GLU的释放,促进GABA的释放来调节氨基酸类递质系统,进而影响神经系统的兴奋性。     

丙泊酚对新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡的影响

目的研究丙泊酚对新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡的影响及其机制。方法原代分离和培养AST细胞,用GFAP免疫细胞化学鉴定。不同浓度丙泊酚(0、10、30、90μmol·L-1)作用AST细胞8 h。MMT法检测细胞生存率;Annexin V/PI双染检测细胞凋亡;Western blot法测定线粒体cyt-C漏出;分光光度计法检测caspase-3和caspase-9活性。结果分离培养出原代AST,不同浓度丙泊酚(0、10、30、90μmol·L~(-1))浓度依赖性地降低AST细胞生存率,诱导细胞线粒体cyt-C漏出,上调促凋亡蛋白caspase-3和caspase-9,诱发AST凋亡。结论丙泊酚在体外能诱发新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡,其机制可能与丙泊酚诱导线粒体cyt-C释放,激活线粒体凋亡通路有关。     

叶酸对脑梗死大鼠星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的:探讨叶酸对脑梗死大鼠星形胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术(SO)组、缺血(IM)组、缺血 低剂量叶酸(IM LFA)组和缺血 高剂量叶酸(IM HFA)组。通过叶酸灌胃给药28d后制备大脑中动脉栓塞模型,采用免疫荧光双标记的方法检测各组大鼠脑缺血后脑组织GFAP的荧光强度及BrdU GFAP双标阳性细胞密度。结果:在7d及14d4组均可见BrdU GFAP双标阳性星形胶质细胞,缺血 叶酸组GFAP荧光强度及BrdU GFAP双标阳性细胞密度均高于IM组及SO组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:补充叶酸可以使星形胶质细胞GFAP表达增强,并促进神经干细胞的分化,从而对脑梗死大鼠具有保护作用。     

依达拉奉对大鼠星形胶质细胞水通透性的影响

目的 探讨依达拉奉对缺氧复氧大鼠星形胶质细胞模型水通透性和水通道蛋白4（AQP4）的影响.方法 原代培养大鼠星形胶质细胞,通过95％（体积分数）N2培养8h和95％（体积分数）的空气复氧培养6h,构建缺氧复氧水肿模型.设置空白组（正常细胞）、对照组（水肿细胞未经受药物刺激）和刺激组（接受0.1、1、10或100μg/mL的依达拉奉溶液刺激）.采用细胞水通透性系数（Pd）检测、荧光定量PCR和Western Blot定量空白组、对照组和刺激组细胞水肿、AQP4 mRNA AQP4蛋白表达.结果 缺氧8h和复氧6h后细胞水肿,且AQP4表达量上升.0.1μg/mL依达拉奉刺激后,模型细胞水通量、AQP4 mRNA水平和蛋白表达量与未刺激过的水肿星形胶质细胞比较,差异无统计学意义（P均＞0.05）,1、10或100μg/mL依达拉奉刺激后,水肿星形胶质细胞水通量、AQP4 mRNA水平和蛋白表达量显著低于未刺激过的水肿星形胶质细胞（P均＜0.05）,与正常的星形胶质细胞比较,差异无统计学意义（P均＞0.05）.结论 1、10或100 μg/mL依达拉奉可通过抑制AQP4 mRNA水平和蛋白表达,从而抑制细胞水肿.     

PAS-Na对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构的影响

目的研究对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构改变的影响。方法雄性大鼠腹腔注射(ip)二氯化锰15mg/(kg·d),每周5天,连续3周。然后每日背部皮下注射PAS-Na100或200mg/kg(L-或H-PAS),连续5周。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,透射电镜观察大鼠海马CA1区超微结构变化。结果染锰组第4和5天逃避潜伏期、游泳总路程与正常对照组差异较大;H-PAS组测得值接近正常组,但是差异无统计学意义(P﹥0.05)。染锰组穿环轨迹路线比较分散,H-PAS组穿环轨迹路线集中于第一象限目标区,与对照组相似。染锰大鼠海马神经元出现变性、凋亡和胀亡,神经元突起肿胀,神经原纤维排列紊乱、中断,线粒体嵴间隙增宽,崩解呈空泡状。PAS-Na治疗后大鼠海马胀亡神经元形态不典型,线粒体结构恢复接近正常,在H-PAS组较为明显。结论在本试验条件下,PAS-Na对锰致海马神经元的损害可能有干预作用。     

对氨基水杨酸钠对染锰大鼠行为的影响

人类锰中毒的特征表现是椎体外系障碍。啮齿类动物对锰虽具有相当的耐受力,但暴露于锰的大鼠和小鼠仍可出现行为功能障碍。近年来,临床上试用PAS-Na治疗锰中毒患者,取得较好的效好的效果。本研究以MnCl_2·4H_2O对大鼠亚慢性染毒后,给予PAS-Na,观察对锰染毒大鼠的     

清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响

目的：探讨清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响。方法：参照Longa法复制大鼠脑缺血模型，清开灵有效组分干预，免疫组化分析缺血脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、酸性钙结合蛋白(S-100β)表达的组间与时效特征。结果：脑缺血后GFAP、S-100β表达增强。用药可增强缺血：12hGFAP、S-100β的表达，促进星形胶质细胞的激活，对受损神经元发挥保护作用；至缺血24h，除珍珠母水解液组外，其余用药组促进GFAP、S-100β表达的作用减弱。结论：清开灵有效组分促进星形胶质细胞活化的作用具有明显时效性和相对特异性，黄芩苷、栀子苷的作用在于促进星形胶质细胞的反应性增生，而胆酸、珍珠母水解液则表现为对星形胶质细胞功能活化的促进作用。     

移植重编程星形胶质细胞对大鼠损伤脊髓恢复的影响

目的探讨移植经直接重编程后的星形胶质细胞对大鼠脊髓损伤功能恢复的影响。方法建立SD大鼠脊髓损伤模型48只,随机均分为四组,分别为移植转染了含有神经原素2(Ngn2)的星形胶质细胞组(A组)、移植转染了绿色荧光蛋白基因的星形胶质细胞组(B组)、移植星形胶质细胞组(C组)和移植PBS组(D组)。移植后4周,免疫荧光染色观察脊髓组织的神经元特异性核蛋白(NeuN)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达;利用Basso Beattie and Bresnahan(BBB)评分系统对移植后的大鼠进行连续8周的BBB评分,观察其运动功能的恢复情况。结果连续观察8周后,A组的BBB评分高于其他三组(P<0.05)。A组的NeuN和MAP2表达均高于B组(P<0.05)。结论在大鼠脊髓损伤模型中,移植经直接重编程处理过的星形胶质细胞能提高受损脊髓组织的神经元数量,有助于损伤脊髓的运动功能恢复。     

EGB对大鼠神经干细胞分化为星形胶质样细胞的影响

目的：观察银杏叶提取物（EGB）对大鼠海马神经干细胞（NSCs）增殖及分化为星形胶质样细胞的影响。方法：取新生24h内的Wistar大鼠海马组织的细胞进行体外培养，1周后将其接种在培养板中．观察不同浓度的EGB对细胞的生长作用．并检测胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果：各实验组NSCs的生长明显好于对照组．免疫细胞化学显示：同一时间内，诱导NSCs分化为星形胶质样细胞的百分率增高；同一浓度的EGB，诱导神经干细胞分化为星形胶质样细胞的百分率随着时间的延长呈上升的趋势。结论：EGB能促进神经干细胞的存活、增殖及向星型胶质样细胞的方向分化。     

褪黑素对烫伤大鼠脑组织抗氧化能力与星形胶质细胞的影响

目的 观察褪黑素(melatonin,MT)对烫伤大鼠脑组织GSH、SOD与MDA含量与星形胶质细胞的影响,以探讨烫伤后MT的神经保护机制.方法 随机将30只SD大鼠,分为正常对照组、烫伤组和MT治疗组;MT治疗组在烫伤后10 min,3 h分别给予MT (10 mg/kg)腹腔注射治疗,对照组与烫伤组给予等量体积的生理盐水.MT治疗结束后1 h取脑行GSH、SOD与MDA含量检测,然后取额叶皮质行GFAP免疫组化染色,光镜下观察星形胶质细胞的形态变化并进行计量分析.结果 与正常对照组相比,烫伤组大鼠脑组织GSH含量下降,而SOD与MDA含量增加,GFAP阳性神经元增多(P<0.05).与烫伤组相比,MT治疗组大鼠脑组织GSH含量增加,SOD与MDA含量下降,GFAP阳性神经元减少 (P<0.05).结论 烫伤后早期应用MT治疗,可以改善机体的氧化应激水平和神经系统的继发性损伤.     

钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

目的:观察钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响。方法:采用条件性位置偏爱实验和脑电超慢涨落分析技术。结果:氯胺酮和钩藤碱均能消除苯丙胺导致的位置偏爱效应;苯丙胺使大鼠呈现完全偏离的“脑功能平衡图”,氯胺酮和钩藤碱可使其恢复至平衡态;苯丙胺导致大鼠脑内抑制性氨基酸含量明显下降(P<0.01),兴奋性氨基酸含量明显上升(P<0.01),氯胺酮和钩藤碱均可恢复其至正常水平,钩藤碱本身对这些均无影响。结论:钩藤碱可调整苯丙胺引起的大鼠脑内氨基酸神经递质含量的异常变化。