阿尔茨海默病转基因小鼠肝内核受体和细胞色素氧化酶基因转录谱变化

目的探讨阿尔茨海默病(AD)病变与肝Ⅰ相药酶基因表达的相关性,为早期和长期药物干预AD病程提供实验参考。方法制备B6.129-PS1M146V/APPSwe/Tau P301L三重转基因AD模型小鼠(3×Tg AD小鼠)及同系非转基因正常小鼠(NTg小鼠)肝组织总RNA和总蛋白质样品,逆转录PCR/实时荧光定量PCR技术检测肝核因子4(HNF4)等7种核受体和细胞色素氧化酶P4501a2(Cyp1a2)等7种CYP基因mRNA相对表达量,比较基因转录谱差异;Western蛋白印迹法检测技术检测差异显著的目的基因蛋白质水平。结果与NTg小鼠相比,3×Tg AD小鼠HNF4、雌激素受体(ERα)及组成型雄甾烷受体均下调近66%(P<0.01),孕烷X受体和芳香烃受体分别上调1.84和1.64倍(P<0.05),糖皮质激素受体及受氧化应激激活的核因子E2相关因子未见显著变化;主要药物代谢酶Cyp2b10及Cyp2a5 mRNA分别降低至正常小鼠水平的3%(即下降97%,P<0.01)和30%(P<0.05),Cyp2e1、Cyp2j9、Cyp3a11基因的转录水平则分别上调了2.26倍、2.42倍和3.66倍(P<0.05);Cyp1a2和Cyp2d22基因转录在两种小鼠中无明显差异。Western蛋白印迹分析证实,3×Tg AD小鼠ERα和CYP2a5明显下降(P<0.05)而Cyp3a11表达则明显上升(P<0.05),蛋白质表达变化的趋势与其相应mRNA水平改变一致。结论 3×Tg AD小鼠肝内核受体基因及CYP酶基因转录谱发生显著改变,提示AD病变可能干扰机体肝代谢功能,对机体内源性及外源性化合物生物转运产生影响。     

丁香酸和柠檬苦素对小鼠肝脏CYP450酶的影响

目的 研究丁香酸和柠檬苦素对小鼠肝脏细胞色素P450主要亚型mRNA及蛋白表达水平的影响.方法 C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、丁香酸组、柠檬苦素组和苯巴比妥组,连续灌胃给药2周,末次给药后处死,提取小鼠肝脏总RNA及肝微粒体,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术和蛋白质免疫印迹(Western blot)测定CYP450酶主要亚型mRNA和蛋白表达水平.结果 在mRNA水平上,丁香酸对Cyp1a2、Cyp2c37、Cyp2d9 mRNA表达没有明显作用,柠檬苦素对Cyp1a2 mRNA的表达有显著诱导作用;在蛋白水平上,丁香酸对CYP1A1、CYP1A2、CYP3A、CYP2D和CYP2E1蛋白的表达有明显的诱导作用,柠檬苦素对CYP1A1、CYP1A2、CYP2A、CYP2D和CYP2E1有显著的诱导,对CYP2B和CYP2C蛋白表达产生抑制作用.结论 丁香酸和柠檬苦素对细胞色素P450主要亚型均具有不同程度的诱导和抑制作用.     

三种茶饮料对小鼠肠道首过效应及肝脏Cyp3a、Cyp2e1的影响

目的:研究市售罐装绿茶、冰红茶及茉莉清茶饮料对小鼠肠道首过效应和肝脏细胞色素氧化酶(cytochrome P450,CYP)Cyp3a、Cyp2e1的影响。方法:SPF级小鼠随机分为6组,其中绿茶组、冰红茶组、茉莉清茶组小鼠分别自由饮用绿茶、冰红茶、茉莉清茶7 d。用血中扑热息痛(ac-etaminophen,APAP)的浓度推断肠道首过效应。采用差速离心法分离肝/肠微粒体,以Bradford法定量蛋白,紫外分光光度法定量Cyp3a、Cyp2e1及血中APAP浓度。结果:绿茶组血中APAP浓度较空白组明显升高(P<0.01),而冰红茶组与空白组相比则显著降低(P<0.01);绿茶组和冰红茶组小肠Cyp3a酶活性较空白组显著升高(P<0.05或P<0.01)。各供试物组肝脏Cyp3a酶活性较空白组明显升高(P<0.01),各供试物组肝脏Cyp2e1酶活性较空白组显著降低(P<0.01)。结论:绿茶、冰红茶能显著改变肠道首过效应(绿茶抑制肠道P-gp,诱导肠道Cyp3a;冰红茶则诱导肠道P-gp及肠道Cyp3a;而茉莉清茶对肠道首过效应无影响)。各供试物均诱导肝脏Cyp3a的酶活性,抑制肝脏Cyp2e1的酶活性。故在服用经CYP3A、CYP2E1和P-gp代谢/转运的药物期间,大量或经常饮用上述茶可能影响这些药物的临床疗效和/或不良反应。     

补骨脂素对大小鼠肝CYP450酶4种亚型表达的影响

目的研究补骨脂素对大鼠、小鼠肝CYP1A2,CYP2A6,CYP2D6和CYP2E1酶表达的影响。方法 SD大鼠、ICR小鼠分别随机分为空白组和补骨脂素给药组,大鼠灌胃给予60 mg·kg~(-1)补骨脂素,小鼠灌胃给予60 mg·kg~(-1)补骨脂素,连续灌胃给药14 d后处死,取肝组织,采用实时荧光定量PCR技术和Western印迹法检测大鼠、小鼠肝中CYP1A2,CYP2A6,CYP2D1及CYP2E1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照相比,补骨脂素给药14天后,雌、雄大鼠CYP1A2 mRNA表达分别升高了412.85%和655.90%,同时蛋白表达分别升高了4081.50%和686.76%;雌性大鼠CYP2D6和CYP2E1 mRNA表达分别降低了50.79%和61.93%,雌性大鼠CYP2E1蛋白表达降低了53.35%。ICR小鼠给药14 d后,雌性小鼠CYP1A2mRNA表达显著降低(P<0.01),而CYP1A2蛋白表达显著升高(P<0.05);雌性小鼠CYP2A6 mRNA表达显著升高(P<0.05),其他未见显著差异。结论补骨脂素给药影响肝脏CYP1A2,CYP2A6,CYP2D1及CYP2E1的表达,并且这种影响存在性别和种属差异。     

大青叶对小鼠肝脏CYP2E1酶活性及信使核糖核酸表达的影响

目的了解大青叶对细胞色素P450 2E1(CYP2E1)酶活性及其信使核糖核酸(mRNA)表达的影响.方法以小鼠为研究对象,实验组按每天7.8 g·kg-1·d-1和0.78 g·kg-1·d-1大青叶提取液灌胃,对照组给予生理盐水.于3,6,9 d后处死,提取肝微粒体,通过测定苯胺羟化酶反映CYP2E1酶活性;运用反转录FCR(RT-PCR)技术检测CYP2E1转录水平.结果实验组小鼠肝微粒体CYP2E1酶活性增加,于第3天达高峰,诱导率在4.96%～84.27%之间;各组CYP2E1与β-Actin RT-PCR扩增条带像素灰度的比值差异无显著性.结论大青叶提取液能使小鼠微粒体CYP2E1酶活性增加,但对其转录水平无影响.     

食品添加剂亚硫酸钠对肝细胞蛋白合成功能的影响

目的探讨食品添加剂亚硫酸钠对肝脏蛋白合成功能的可能影响。方法以不同浓度的亚硫酸钠(Na2SO3)作用于正常人二倍体肝细胞株HL-7702(简称L-02)细胞,终浓度分别为0.039、0.156、0.625和2.5 mmol/L,并设阴性对照组和阳性对照组(体积分数为0.3%的乙醇)。采用生化分析法检测不同接触时间后各染毒组肝细胞培养上清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总蛋白和白蛋白含量。结果①Na2SO3染毒24 h,随着染毒浓度的增加,各组肝细胞培养上清中AST活性逐渐升高,0.625和2.5 mmol/L组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。而在染毒48和72 h后,各染毒组与对照组比较,无统计学差异;当作用24和48 h后,随Na2 SO3浓度增加,各组肝细胞培养上清中ALT活性逐渐升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);染毒72 h后,各染毒组与对照组之间的ALT活性无差异。②Na2SO3染毒24、48和72 h后,各染毒组肝细胞培养上清中白蛋白和总蛋白的含量与阴性对照组比较无统计学差异(P0.05)。结论亚硫酸钠染毒不同时间后可能对肝细胞膜结构造成一定影响使培养上清中转氨酶活性明显增加,但对肝细胞的蛋白合成功能无明显影响。     

三甲基氯化锡染毒致小鼠过氧化损伤分析

目的分析三甲基氯化锡(TMT)低剂量染毒小鼠血清、肝脏和脑的氧化损伤情况方法将56只雄性昆明种小鼠分为7组,每组8只。2个实验组分别腹腔注射TMT 1.0和2.15 mg/kg,对照组给予无菌生理盐水,在染毒后24h处死,测定血清、肝脏和脑组织中的SOD和MDA水平;另外2个实验组腹腔注射TMT 2.15 mg/kg,2个对照组给予无菌生理盐水,分别于染毒后3和7 d处死,测定血清、肝脏和脑中的SOD和MDA水平。结果 2.15 mg/kg TMT染毒组动物在20 h后开始出现神经毒性症状,2.15 mg/kg TMT组动物染毒后24h,血清、肝脏和脑组织中MDA水平较对照组明显增加,肝脏SOD明显下降(P0.01或P0.05),1.0 mg/kg TMT染毒后24 h,血清和脑组织中MDA较对照组明显增加(P0.01或P0.05),2.15 mg/kg TMT染毒后3 d肝脏、脑组织SOD较对照组明显下降(P0.01),染毒7 d,血清MDA增高,肝脏SOD水平明显下降(P0.05)。结论给予小鼠低剂量TMT染毒小鼠24 h后,血清、肝脏和脑组织均会造成一定程度的过氧化损伤,而在染毒后3和7 d肝脏和脑中SOD会发生损耗,而小鼠过氧化损伤程度进一步缓解。     

黄药子配伍甘草对大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达影响的实验研究

目的:研究黄药子和黄药子配伍甘草后对大鼠肝脏组织CYP1A2、CYP2E1蛋白表达的影响。方法:将24只雄性SD大鼠分为3组,分别给药28天,采用HE染色观察肝组织病理损伤,免疫组化法检测大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达的情况。结果:黄药子与甘草配伍能够改善大鼠肝脏组织病变;与对照组比较,黄药子组肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白的阳性表达指数明显升高(P0.01);与黄药子组比较,配伍组肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白的阳性表达指数降低(P0.05或P0.01)。结论:甘草能对抗黄药子导致的肝损伤,其减毒机理可能与抑制肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达有关。     

二甲基甲酰胺短期重复染毒对雄性小鼠肝脏的影响

目的研究二甲基甲酰胺(DMF)短期重复染毒对雄性小鼠肝损伤的特点,为今后开展DMF慢性毒性研究提供实验依据。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠100只,随机分成空白对照组和染毒组(150 mg/kg·bw),每组50只。分别于染毒1、3、7、14和28 d 5个时间点处死10只对照组和10只染毒组动物。采尾静脉血检测血常规指标,摘眼球取血检测血生化指标和生物标志物N-甲基氨基甲酰加合物(NMHb)的含量。解剖取肝,记录肝重,计算脏器系数,苏木素-伊红(HE)染色进行肝组织病理学检查。结果与对照组相比,DMF连续染毒可抑制小鼠体重增长,1、3、14和28 d肝脏系数明显增大(P0.05)。28 d白细胞计数明显升高(P0.05)。14和28 d丙氨酸转氨酶(ALT)含量明显升高(P0.05),7和28 d天冬氨酸转氨酶(AST)含量升高(P0.05)。肝病理切片显示,染毒组出现不同程度的肝细胞水样变,局灶性细胞坏死伴有炎细胞浸润,严重程度随染毒时间延长逐渐加重。染毒28 d出现严重细胞水肿,肝小叶结构破坏,细胞核固缩或溶解。NMHb含量随染毒时间逐渐升高,对照组未检出。结论 DMF短期重复染毒可导致小鼠生长缓慢,肝损伤特点主要表现为肝肿大,从第7天开始,血清转氨酶明显升高,染毒前期(3 d)病理表现为肝细胞轻度水肿伴炎细胞浸润,后期主要以严重肝细胞水样变性为主,肝小叶结构受损,损伤程度随染毒时间逐渐加重。     

赛庚啶对大鼠下丘脑-腺垂体-性腺轴和钙调蛋白基因表达的影响(英文)

目的　研究赛庚啶 (Cyp)对SD大鼠生殖系统内分泌功能的影响是否有性别差异。方法　 60只SD大鼠依性别各分为 3组 ,每组 1 0只 ;分别灌胃给予生理盐水 ( 5mL·kg-1·d-1) ,Cyp( 2 .4,4.8mg·kg-1·d-1) ,共 1 4d或 2 1d。放免法测定血清黄体生成素 (LH)、促卵泡激素 (FSH)、雌二醇 (E2 )、孕酮(P)、睾酮 (T)的含量。光电镜观察促性腺激素释放激素细胞、促性腺激素细胞、间质细胞、支持细胞、黄体细胞、颗粒细胞等显微、超微结构的变化。用实时荧光定量PCR技术进行逆转录聚合酶链反应 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增产物。结果　Cyp可升高雄性大鼠血清LH、T的含量 ,而对FSH含量无明显影响。Cyp可升高雌性大鼠血清LH的水平 ,降低其FSH ,P ,E2 的含量。电镜发现 ,Cyp促进雄性大鼠分泌功能 ,使雌性大鼠内分泌细胞发生退行性改变。结论Cyp对雌性大鼠下丘脑 腺垂体 卵巢轴内分泌功能有抑制作用 ,而对雄性大鼠下丘脑 腺垂体 睾丸轴内分泌功能有促进作用 ,且使终末靶腺的内分泌细胞超微结构出现相应的变化。Cyp促进雄性大鼠睾丸钙调蛋白mRNA的表达可能与Cyp促进下丘脑 垂体 睾丸轴的内分泌功能有关     

细胞色素P450 2E1在依达拉奉减轻免疫性肝损伤氧化应激中的作用

目的观察细胞色素P450 2E1(CYP 2E1)在依达拉奉作用于刀豆蛋白A(Con A)致小鼠免疫性肝损伤模型中的变化。方法先期给予依达拉奉,之后用Con A腹腔注射致敏小鼠产生急性免疫性肝损伤,观察肝脏病理变化,分光光度法测血清AST和ALT浓度,肝匀浆中SOD、MDA、GSH含量,RT-PCR技术检测肝脏组织CYP 2E1 mRNA水平,Westernblot技术检测肝脏组织CYP 2E1蛋白表达水平。结果与模型组比较,依达拉奉能降低免疫性肝损伤小鼠血清中升高的ALT、AST含量;降低肝匀浆中的MDA水平,升高其降低的SOD、GSH水平;CYP 2E1 mRNA水平明显降低,CYP 2E1蛋白表达水平明显下调。结论依达拉奉对小鼠急性免疫性肝损伤具有一定的保护作用,这可能与它降低CYP 2E1的表达,清除自由基,增强机体抗脂质过氧化能力有关。     

柴胡总皂苷对小鼠肠道首过效应和肝脏Cyp3a、Cyp2e1的影响

目的:研究柴胡总皂苷对小鼠肠道首过效应(Cyp3a,P-糖蛋白)和肝脏细胞色素氧化酶(Cyp3a,Cyp2e1)的影响。方法:供试物灌胃给小鼠2次/d,连续3 d。实验当日,对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP;P-gp底物)以50 mg/kg经口投予后60 min断头采血,并摘取肝脏和全段小肠。以分光光度法测定血中APAP浓度;用梯度离心法分离小鼠肝/肠微粒体;以分光光度法检测微粒体中Cyp3a/Cyp2e1活性;以实时荧光定量法测定Cyp3a11/Cyp2e1 mRNA在小鼠肝脏中的表达。结果:血中APAP浓度测定结果和P-糖蛋白偶联的ATP酶活性测定结果显示,柴胡总皂苷各剂量组与对照组之间均无统计学差异(P>0.05);在肝脏和肠道微粒体实验中不论以氨基吡啉还是以红霉素为底物测定Cyp3a,仅有柴胡总皂苷高剂量组(150 mg/kg)的Cyp3a活性显著高于对照组(P<0.05);仅有柴胡总皂苷中剂量组(75 mg/kg)的Cyp2e1活性显著低于对照组(P<0.05);RT-PCR结果显示,仅有柴胡总皂苷高剂量(150 mg/kg)时能够诱导Cyp3a11在肝脏中的表达。结论:柴胡总皂苷对小鼠肝脏和肠道中的Cyp3a具有一定的诱导作用,对肝脏中的Cyp2e1具有一定的抑制作用,对小鼠肠道P-糖蛋白的转运活性无影响。     

全氟辛烷磺酸对SD大鼠肝毒性及其肝脏细胞色素P450 mRNA表达的影响

目的研究全氟辛烷磺酸盐(PFOS)染毒SD大鼠后,其对大鼠肝脏毒性及细胞色素P450(CYP450)亚型mRNA表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠,随机分为5组:4个PFOS染毒组,染毒剂量分别为0.5、1.0、3.0和10.0mg/(kg.d),1个对照组。连续灌胃染毒28 d后,分析血清生化指标和观察肝脏病理变化,并检测肝脏CYP450各亚型mRNA的表达水平。结果与对照组相比,大鼠染毒PFOS 28 d后,各染毒组大鼠的体重明显降低,10.0 mg/kg染毒组大鼠的肝脏重量显著增加。各染毒组大鼠的血清谷丙转氨酶、胆汁酸等水平显著升高,三酰甘油、总胆固醇含量降低。病理检查发现,各染毒组大鼠的肝脏细胞出现浊肿、变性,甚至坏死。此外,3.0和10.0 mg/kg组大鼠肝脏的CYP1A2mRNA水平降低,而CYP17A1 mRNA水平升高。各染毒组CYP2B1 mRNA水平均升高,呈剂量效应关系。结论 PFOS的肝毒性呈剂量效应关系,并对CYP450的各个亚型有不同影响。     

亚慢性氯乙烯染毒联合高脂饮食对小鼠肝脂肪变性的研究

目的探讨低浓度氯乙烯、高脂饮食以及二者联合对小鼠肝脂肪变性的影响。方法 40只健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为氯乙烯暴露组(800 mg/m~3)、高脂饮食组、高脂饮食与氯乙烯联合暴露组(800 mg/m~3)和阴性对照组,每组10只,静式吸入染毒13周。观察记录小鼠体重变化,进行肝组织病理学检查[油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色],测定小鼠肝脏系数、血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和极低密度脂蛋白(VLDL)的浓度、血清与肝中甘油三酯(TG)及胆固醇(CHO)含量。检测肝中CYP2E1的活性,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。结果氯乙烯暴露组出现了轻微散在的脂肪空泡样变性,高脂组、高脂氯乙烯联合暴露组肝细胞脂肪变性更为严重。氯乙烯暴露组ALT和AST水平均高于对照组,联合组AST和ALT水平高于高脂组与对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,各组小鼠血清及肝组织CHO含量增加,联合组肝组织CHO高于高脂组与氯乙烯组,差异具有统计学意义(P0.05)。联合组血清及肝组织TG水平高于对照组、高脂组和氯乙烯组,差异具有统计学意义(P0.05)。各组小鼠CYP2E1水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,联合组MDA含量升高, SOD和GSH活性下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论低浓度氯乙烯与高脂饮食共暴露能增强小鼠的肝脂肪变性。     

吴茱萸水煎液对大、小鼠肝药酶亚型影响的比较研究

目的比较吴茱萸水煎液对大鼠、小鼠肝药酶亚型的影响。方法取KM小鼠随机分为吴茱萸高剂量组(56 mg生药·g-1)、低剂量组(28 mg生药·g-1)和正常组,另取Wistar大鼠随机分为吴茱萸高剂量组(40 mg生药·g-1)、低剂量组(20 mg生药·g-1)和正常组,连续灌胃给予吴茱萸水煎液或等容量蒸馏水21 d后,采用药物探针法测定动物肝药酶亚型CYP1A、CYP2C、CYP2D、CYP2E1、CYP3A的活性。结果①小鼠实验结果显示,与正常组比较,吴茱萸高、低剂量组均诱导肝药酶亚型CYP1A、CYP2E1和CYP3A的活性(P<0.01),低剂量组诱导CYP2C活性(P<0.05);吴茱萸高、低剂量组对CYP2D活性无明显影响。②大鼠实验结果显示,与正常组比较,吴茱萸高、低剂量组均诱导肝药酶亚型CYP1A活性(P<0.01)。高剂量组诱导CYP2C和CYP2E1活性(P<0.05或0.01);吴茱萸高、低剂量组对CYP3A活性无明显影响;吴茱萸高、低剂量组均抑制CYP2D活性(P<0.01)。③实验结果对比显示,吴茱萸水煎液对大、小鼠肝药酶亚型的影响相同点是诱导了CYP1A、CYP2C及CYP2E1活性,尤其对CYP1A活性诱导更为明显。不同点是吴茱萸诱导了小鼠CYP3A活性,而对大鼠CYP3A活性无明显影响;吴茱萸对小鼠CYP2D活性无明显影响,而对大鼠CYP2D活性有明显抑制作用。结论吴茱萸水煎液对大、小鼠部分肝药酶亚型活性的影响有一定的差异性。     

人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制研究

目的探讨人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制。方法小鼠分为正常对照组(NC)和模型组。喂高脂饲料复制脂肪肝模型,12 wk后证实造模成功后,模型组小鼠随机分为高脂组(HF);正常饮食治疗组(NT);人参茎叶皂苷小剂量组(GSL1);人参茎叶皂苷大剂量组(GSL2)。除HF组饲高脂饲料外,其余各组饲基础饲料。GSL1组给予GSL50 mg.kg-1.d-1灌胃,GSL2组给予GSL 100 mg.kg-1.d-1灌胃,其余各组以同等容积蒸馏水灌胃。灌胃2wk后处死所有动物,检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT含量;并观察肝指数和肝组织TC、TG、SOD、MDA含量,肝脏病理形态学改变及氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、细胞色素P450 2E1(CYP2E1)的表达。结果GSL2组可以明显降低肝指数、血脂、肝脂和MDA含量,增加SOD活性,改善小鼠肝脏病理形态学改变,增加肝组织PPARαmRNA水平、降低CYP2E1 mRNA水平。NT组脂肪肝有一定的改善作用,但效果不理想;GSL1组各项指标与NT组相比差异无显著性。结论人参茎叶皂苷可能通过增加肝组织PPARαmRNA表达,降低血脂和肝脂水平;并且通过降低CYP2E1 mRNA表达,抑制脂质过氧化反应,发挥治疗脂肪肝的作用。     

小鼠皮肤硫芥染毒后miRNA表达的变化

目的 通过miRNA芯片分析方法,观察硫芥致小鼠皮肤损伤后miRNA的改变,筛选参与硫芥致伤过程的miRNA,探讨硫芥致皮肤损伤机制及miRNA在硫芥损伤过程中的作用。方法 5周龄雄性BALB/c小鼠外耳部腹侧皮肤局部染毒硫芥,于染毒后6, 24和72 h取材, 未染毒的小鼠为空白对照。用miRNA芯片分别检测各组miRNA表达的动态变化,筛选与对照组相比表达上调或下调2倍以上的miRNA进行重点分析。结果 与对照组相比,miR-376b在6, 24和72 h后分别上升3.215, 2.817和3.945倍(P<0.01),miR-883b-3p在各时间点分别上调2.617, 2.217和2.045 倍(P<0.01),miR-467e-star在损伤6和72 h后较对照组表达上调2.415和2.11倍(P<0.01),但24 h时未见明显变化,miR-181a-1-star在损伤24和72 h后表达上调2.096和3.423倍(P<0.01),与其他组相比,损伤72 h后miR-182表达下调(P<0.01)。结论 硫芥染毒后,皮肤有多个miRNA参与损伤和修复调节,修复过程主要包括促进干细胞分化、细胞移行和凋亡、抑制癌变。     

苯并(a)芘对H1299细胞CYP1A1酶活力和相关基因表达的影响

目的研究BaP对人肺腺癌细胞(H1299)CYP1A1酶活力和CYP1A1及其相关基因表达的影响。方法用不同浓度BaP(8、16、32、64和128μmol/L)处理H1299细胞24 h。实时荧光定量PCR方法检测H1299细胞中CYP1A1、HSP90、AhR和ARNT基因的mRNA表达水平;表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)检测CYP1A1和HSP90蛋白表达水平;荧光分光光度法测定CYP1A1酶活力(7-ethoxyresorufin-o-deethylase,EROD)。结果与溶剂对照组相比,CYP1A1和ARNT基因mRNA水平在BaP为16和64μmol/L时有统计学意义(P0.01),AhR和HSP90在各染毒组中均有统计学意义(P0.05)。在16、32和64μmol/L的BaP染毒组中,CYP1A1和HSP90蛋白水平高于对照组。在16、32、64和128μmol/L的BaP染毒组中均可诱导CYP1A1酶活力显著性增强(P0.01)。结论该试验条件下,在H1299细胞,BaP可通过诱导CYP1A1与其上游转录因子AhR和ARNT的mRNA以及蛋白表达而增强CYP1A1酶活力。     

热休克预处理对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法40℃分别热休克(HS)处理小鼠10min(HS10组)、20min(HS20组)和30min(HS30组),室温恢复8h后,小鼠ip给予AAP 550mg·kg-1诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,24,42和72h进行相关指标检测。赖氏法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,HE染色进行病理学分析,免疫组化法检测给予AAP后0 h,小鼠肝热休克蛋白70(HSP70),细胞色素P4501A2(CYP1A2)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western印迹法检测给予AAP后0,6,24,42和72h时小鼠PCNA的表达。结果与AAP对照组相比,HS20组小鼠血清中AST和ALT酶活水平显著降低(P<0.05),而HS10组和HS30组小鼠无显著差异。与AAP对照组相比,HS20显著降低了AAP诱导的小鼠肝损伤程度(P<0.05),而HS10和HS30未显著降低肝损伤的程度。HS20显著诱导了小鼠肝HSP70(P<0.01),CYP1A2(P<0.01)和PCNA(P<0.05)的表达,而HS10和HS30显著诱导了小鼠肝HSP70和CYP1A2(P<0.05)的表达,但未明显诱导PCNA的表达。与HS10和HS30相比,HS20更加显著地诱导了HSP70和CYP1A2的表达(P<0.05)。HS20组小鼠在注射AAP后0,6,24,42和72h,小鼠肝PCNA的表达均显著高于AAP对照组(P<0.05)、HS10和HS30组(P<0.05)。结论 40℃热休克预处理20min可以有效降低AAP诱导的小鼠急性肝损伤程度,加速肝损伤后的修复。     

二硫化碳对雌性小鼠性腺影响的研究

研究结果表明,当雌性小鼠接触CS_2浓度达到97mg/m~3 时,染毒31天(约小鼠的6个动情周期)后,与正常雄性小鼠交配,染毒小鼠受孕率下降,仔代(F_1代)4日存活率、7日存活率及哺育存活率均下降,但与对照组比较无显著差异。F_1代雌性仔鼠性器官发育延迟,且行为发育亦有明显改变。F_1代仔鼠受孕率(25.0％)较对照组(70.0％)明显降低(P<0.01),F_2代仔鼠活胎率(87.5％)显著低于对照组(96.8％,P<0.05),认为CS_2的性腺毒性具有远期效应。