酪氨酸氧化产物对大鼠心肌氧化还原状态的影响

目的探讨酪氨酸氧化产物(TOP)对大鼠心肌氧化还原状态的影响及其氧化损伤机制。方法 4周龄SD雄性大鼠,随机分为3组:空白对照组、TOP 440mg/kg组(TOP组)和TOP 440 mg/kg+硫辛酸(LA)5 mg/kg组(TOP+LA组),于实验6、12、24周测定大鼠血液及心肌氧化还原状态相关指标,RT-PCR法检测24周心肌Nrf2、Trx等mRNA表达。结果 TOP组血液及心肌中氧自由基(ROS)、羰基(PC)、丙二醛(MDA)、双酪氨酸(Dtyr)、三硝基酪氨酸(3-NT)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)含量均高于对照组(P<0.05);总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原性谷胱甘肽(GSH)/氧化性谷胱甘肽(GSSG)显著低于对照组(P<0.05)。RT-PCR结果显示,TOP组24周心肌Nrf2、Trx-1、NF-κB、AP-1显著上调(P<0.05)。结论酪氨酸氧化产物导致大鼠氧化还原状态失衡,心肌蛋白质氧化产物积累,心肌氧化损伤。机体可通过提高Nrf2及其相关基因mRNA的表达水平来抵抗酪氨酸氧化产物引起的心肌氧化损伤。     

维生素E对妊娠期糖尿病小鼠氧化应激及炎症因子的影响

目的研究维生素E对妊娠期糖尿病小鼠氧化应激反应及炎症因子的影响。方法将C57BL/6J孕鼠随机分为3组:空白对照组、妊娠期糖尿病(GDM)模型组、维生素E干预组,模型组和干预组腹腔注射0.25%链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg造模,随后干预组灌胃维生素E 5 mg/(kg·d),其余两组给予等量生理盐水,连续7天,定时监测体重及血糖,实验结束后处死小鼠,检测血清氧化应激指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8水平。结果维生素E可上调GDM小鼠胰岛素水平(P0.05),但未改善血糖水平,提高SOD和GSH-Px活性、降低MDA水平(P0.05),降低TNF-α、IL-6、IL-8水平(P0.05)。结论维生素E可通过改变GDM小鼠体内的氧化应激内环境和降低炎症水平来改善葡萄糖调节能力和胰岛素水平。     

已酮可可碱对SIRS大鼠核因子活性的影响

目的 探讨已酮可可碱(PTX)对全身炎症反应综合征(SIRS)大鼠核因子-κB(NF-κB)的调控.方法 腹腔注射内毒素建立SIRS大鼠实验模型,随机分为正常对照组、SIRS组、PTX组,实验0、1、2、3、4及6 h用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆NF-κB活性及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-10(IL-10)含量水平.结果 与正常对照组比较,SIRS组大鼠NF-κB活性和TNF-α、IL-10表达明显升高(P＜0.05);与SIRS组比较,PTX组大鼠NF-κB活性和TNF-α表达明显降低(P＜0.05);而IL-10表达明显升高(P＜0.05).在PTX组,NF-κB的活性与TNF-α呈显著正相关(r=0.77,P＜0.05),与IL-10无明显相关性(r=-0.13,P＞0.05).结论 PTX可明显抑制SIRS大鼠的促炎症介质,其作用机制可能是抑制NF-κB的活性.     

黄绿青霉素对肿瘤坏死因子α诱导的血管内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素的影响

目的观察黄绿青霉素(CIT)对血管内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-lβ)、IL-6和IL-8等细胞因子的影响,以及CIT上调肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的内皮细胞表达MCP-1、IL-lβ、IL-6和IL-8的作用。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),选择第5～6代进行试验,待细胞融合80%后随机分组,加入TNF-α(10μg/L)、CIT(2μmol/L)建立TNF-α组、CIT组、TNF-α+CIT联合处理组和空白对照组,处理时间24h。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液IL-lβ、IL-6、IL-8及MCP-1的含量;免疫荧光染色法测定细胞核转录因子κB(NF-κB)的激活表达;RT-PCR检测各组MCP-1 mRNA表达。结果在TNF-α组和TNF-α+CIT组,细胞上清液IL-lβ、IL-6、IL-8、MCP-1浓度,细胞MCP-1 mRNA表达量,NF-κB P65蛋白表达量均高于空白对照组(P<0.05);且TNF-α+CIT组均高于TNF-α组(P<0.05)。结论 CIT可明显上调TNF-α诱导的内皮细胞MCP-1、IL-lβ、IL-6、IL-8表达和NF-κB的激活。     

妊娠期糖尿病患者外周血甘露糖结合凝集素变化及作用机制研究

目的探讨妊娠期糖尿病患者外周血甘露糖结合凝集素(MBL)变化及作用机制。方法选取2017年6月-2018年10月医院收治的妊娠期糖尿病患者156例为妊娠期糖尿病组,另选正常孕妇100例为正常对照组;酶联免疫吸附法检测血浆MBL、白细胞介素-6 (IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平; Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,RT-PCR和Western blot检测Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白表达;使用不同浓度的重组MBL处理妊娠期糖尿病患者外周血单个核细胞分为4个亚组,检测细胞培养上清液中MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平以及细胞中Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白表达。结果妊娠期糖尿病组患者血浆MBL水平明显低于正常对照组,IL-6、IL-8、TNF-α水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。妊娠期糖尿病组Tlr4、NF-κB mRNA相对表达量明显高于正常对照组,Tlr4、NF-κB蛋白相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。细胞培养上清液中MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平在4个亚组间差异有统计学意义(P0.01); MBL 0.5μg/ml组、MBL 1μg/ml组MBL水平明显高于空白对照组,IL-6、IL-8、TNF-α水平明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.01); MBL 0.1μg/ml组MBL、IL-6、IL-8、TNF-α水平与空白对照组差异无统计学意义(P0.05)。Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量在4个亚组间差异有统计学意义(P0.01); MBL 0.5μg/ml组、MBL 1μg/ml组Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P 0.01); MBL 0.1μg/ml组Tlr4、NF-κB mRNA和蛋白相对表达量与空白对照组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论妊娠期糖尿病发生可能与MBL低表达降低了对Tlr4/NF-κB信号通路及炎症反应的抑制作用有关。     

黄芪多糖对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化炎症因子的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)对小鼠动脉硬化炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的影响。方法 2018年3月选取30只雄性8周龄ApoE~(-/-)小鼠适应后喂养1周后,随机分为空白对照组、模型组和APS组,每组10只。模型组和APS组高脂喂养20周,构建动脉粥样硬化斑块模型。随后,APS组给于APS 2g/kg·d灌胃,模型组和空白对照组给予等剂量生理盐水灌胃。干预7周后,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量。结果 APS组TNF-α、IL-6、IL-1β水平较动脉硬化模型组均减少,分别为(2.73±0.48)比(4.25±0.51)μg/L、(67.41±12.39)比(82.62±16.23)μg/L、(177.87±22.16)比(242.78±11.49ng/L)(P0.05)。结论 APS可能通过减少TNF-α、IL-6与IL-1β炎症因子水平,起到稳定AS斑块的作用。     

大豆异黄酮对环磷酰胺所诱导的小鼠肝损伤的防治作用及其机制

目的研究大豆异黄酮对环磷酰胺所致小鼠肝损伤的影响,并探讨其作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常组、模型组、大豆异黄酮低剂量组(100 mg/kg)、大豆异黄酮中剂量组(200 mg/kg)和大豆异黄酮高剂量组(400 mg/kg)。除空白组外,其他各组按环磷酰胺50 mg/kg进行腹腔注射,共5 d,正常组给予等量生理盐水。造模D2开始,大豆异黄酮各剂量组分别灌胃给药,其余两组灌胃等体积羧甲基纤维素钠溶液,连续30d。末次给药24h后,取血和肝组织。分光光度法测定小鼠血清中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的活性及肝组织中的丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)的含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、核因子(NF-κB)表达水平;取肝左叶进行HE染色行病理学观察。结果与正常组相比,模型组小鼠血清中AST、ALT活性增强(P0.05,P0.01),肝组织中GSH含量降低(P0.01),MDA、NO、TNF-α、IL-1β、NF-κB水平均升高(P0.01);与模型组相比,大豆异黄酮中、高剂量组小鼠血清中ALT活性及肝组织NF-κB含量降低(P0.05, P0.01),大豆异黄酮各剂量组血清中AST及肝组织MDA、NO、TNF-α、IL-1β水平均降低(P0.05, P0.01),GSH含量均升高(P0.05, P0.01);HE染色显示肝组织形态改变明显减轻。结论大豆异黄酮对环磷酰胺所诱导的小鼠肝损伤有明显改善作用,此作用的主要机制可能与抗氧化、清除自由基和抗炎作用有关。[营养学报,2021,43(3):260-264]     

紫薯花青素减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎

目的探讨紫薯花青素通过核因子κB(NF-κB)通路减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎机制。方法将70只雄性大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饲料组(60只),对照组喂饲普通饲料,高脂组喂饲高脂饲料同时每周2次腹腔注射四氯化碳-橄榄油制剂(50:50)2 mL/kg,对照组注射等量橄榄油,共10周,每周称体重并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)浓度。从造模成功的58只大鼠中随机选取50只再分为模型组,紫薯花青素低、中、高剂量组(60、120、240 mg/kg)和阳性药物组(水飞蓟素150 mg/kg),每组10只,每天1次等体积(20 mL)灌胃给药,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,8周后,检测大鼠血清ALT、AST、TC、TG、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)浓度和血清促炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和抗炎症因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)浓度;实时定量荧光聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肝脏内TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-13、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)和高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)的mRNA表达;Western blotting检测肝组织核因子κB抑制蛋白(IκB)磷酸化程度及PPAR-γ和HMGB-1蛋白表达。结果与对照组比较,造模后大鼠体重增加(P0.05),血清AST、ALT、TG、TC和LDL浓度均显著升高(P0.05),HDL浓度明显下降(P0.05);与对照组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-1β和HMGB-1的表达显著升高(P0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的表达显著降低(P0.05),磷酸化IκB(p-IκB)和NF-κB表达量明显增高(P0.05);与模型组比较,高剂量紫薯花青素组NF-κB的表达水平明显降低,IκB磷酸化程度下降(P0.05),肝组织内TNF-α、IL-1β和HMGB-1 mRNA表达量显著降低(P0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的mRNA表达显著升高(P0.05)。紫薯花青素低、中、高剂量组及阳性药物组上述指标均有所改善,高剂量组作用优于低、中剂量组,与阳性药物组效果接近。结论紫薯花青素可通过NF-κB通路起到减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎的作用。     

儿童肥胖症合并肺炎支原体感染TLR4/NF-κB信号通路与致炎细胞因子水平的关系

目的探讨肥胖症合并肺炎支原体(MP)感染患儿Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路与致炎细胞因子水平的相关性。方法选取2018年5月-2020年8月淮安市第二人民医院收治的68例肥胖症合并MP感染患儿作为研究组;另收集同期收治的肥胖症患儿60例为肥胖组,以及健康体检的健康儿童60名为健康组,检测和比较三组外周血TLR4、NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)mRNA相对表达量和血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,分析TLR4、NF-κB、IκB与血清致炎细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α之间的关系;并采用单因素、多因素Logisitic回归分析肥胖症患儿发生MP感染的危险因素。结果三组TLR4、NF-κB、IκB mRNA相对表达量和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均有统计学差异(P0.05),研究组和肥胖组TLR4、NF-κB mRNA相对表达量及血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于健康组,IκB mRNA低于健康组(P0.05),且研究组TLR4、NF-κB mRNA相对表达量高于肥胖组,IκB mRNA低于肥胖组;相关性分析结果显示,肥胖症合并MP感染患儿TLR4、NF-κB表达分别与IL-6、IL-8和TNF-α呈正相关性(P0.05),IκB与IL-6、IL-8、TNF-α均呈负相关性(P0.05)。多因素分析结果显示,年龄3～7岁、处于低补体状态和有流行接触史是肥胖症患儿发生MP感染的独立危险因素(P0.05)。结论肥胖症合并MP感染患儿TLR4/NF-κB信号通路处于过度活化状态,并可能通过该途径促进IL-6、IL-8、TNF-α等致炎细胞因子释放,诱导发生肺部炎症反应。     

白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控

目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节。方法分别用1mg/LLPS或25mmol/LRes+1mg/LLPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005)。结论LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

miR-216a-5p在HMGB1介导的表皮葡萄球菌感染致腹膜透析相关腹膜炎中的作用

目的探讨miR-216a-5p在高迁移率蛋白B1(HMGB1)介导的表皮葡萄球菌感染致小鼠腹膜透析相关腹膜炎(PDAP)中的作用及机制。方法选取健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、感染组、感染+HMGB1抑制剂组,收集腹腔积液及腹膜组织分别进行白细胞计数、HE和免疫组织染色;Real-time PCR和Western Blot检测白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因素-α(TNF-α)、HMGB1、核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子抑制蛋白(I-κB)的mRNA和蛋白表达水平;生信预测发现,miR-216a-5p可能与HMGB1结合,参与其诱导的PDAP的发生,并构建感染+miR-216a-5p mimics组小鼠,通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216a-5p和HMGB1的关系,采用Real-time PCR、Western Blot、免疫组织染色检测HMGB1的表达变化。结果与对照组相比,感染组小鼠腹腔积液白细胞计数增多,炎性浸润明显,IL-1α、IL-6、TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均升高(均P0.05);HMGB1抑制剂(甘草素)干预后,小鼠腹腔积液白细胞计数下降,炎性浸润改善,IL-1α、IL-6、 TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。感染组小鼠NF-κB表达高于对照组,I-κB表达低于对照组;HMGB1抑制剂干预后NF-κB表达降低,I-κB表达升高(均P0.05)。Real-time PCR结果证实,与对照组相比,miR-216a-5p的含量在感染组中显著减少;双荧光素酶报告基因检测提示,miR-216a-5p可直接作用于HMGB1的3’UTR区;与感染组相比,感染+miR-216a-5p mimics组小鼠中HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。结论 HMGB1在表皮葡萄球菌感染致小鼠PDAP中发挥重要作用,抑制HMGB1可改善小鼠炎症反应,miR-216a-5p可通过靶向HMGB1参与表皮葡萄球菌感染致PDAP的发生。     

褪黑素对肺炎克雷伯菌感染大鼠炎症因子和NF-κB表达的影响

目的分析褪黑素对肺炎克雷伯菌感染大鼠炎症因子和核因子-Kappa B(NF-κB)表达的影响。方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,各8只。对照组为健康大鼠,模型组采用气管滴入方法建立克雷伯杆菌感染肺炎大鼠模型,褪黑素组造模后给予2 mg/kg褪黑素灌胃,阳性对照组造模后予以10 mg/kg左氧氟沙星灌胃,统计各组大鼠一般情况、肺组织病理组织学变化、外周血检测白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)计数、肺组织炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、NF-κB mRNA、NF-κB抑制蛋白α(IκBα) mRNA。结果肺炎克雷伯菌接种后模型组出现呼吸喘鸣音明显,呼吸急促,面部四肢紫绀等肺炎症状,褪黑素组、阳性对照组症状较模型组轻,对照组试验过程进食、活动度无明显变化;肺组织组间表现比较相似,对照组未见明显异常,模型组肺泡上皮见退行性变化,肺泡管扩张,各级支气管周围、肺泡间隔结缔组织血管周围、小叶间炎性细胞大量浸润,病变严重区域连成片,肺泡壁血管充血,褪黑素组、阳性对照组较模型组明显减轻;模型组WBC、PMN计数高于对照组(P0.05),褪黑素组和阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05);模型组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于对照组(P0.05),褪黑素组、阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05);模型组NF-κB、IκBαmRNA高于对照组(P0.05),褪黑素组、阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05)。结论褪黑素可通过抑制NF-κB信号通路发挥降低肺组织炎症因子水平,改善肺部炎症反应的作用,其效果与左氧氟沙星相似,可能为肺炎克雷伯菌感染的治疗提供了一个新思路。     

心通颗粒对病毒性心肌炎小鼠炎症反应及心肌损伤的保护作用

目的探讨心通颗粒对柯萨奇病毒诱导的病毒性心肌炎小鼠炎症反应及心肌损伤的保护作用。方法健康雄性BALB/c小鼠150只按照随机数表分为对照组、心肌炎组、利巴韦林组、心通颗粒高、低剂量组,每组30只。利巴韦林组、心通颗粒高、低剂量组分别进行灌胃,其余两组给予生理盐水。第7天除对照组外,其余各组注射柯萨奇B组3型(CVB3)病毒,建立病毒性心肌炎小鼠模型;7～21 d,各组再次同前给药。使用酶联免疫吸附试验测定小鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-10以及心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量以及CVB3 mRNA的表达量。结果与对照组相比,心肌炎组cTnT、CK、CK-MB、MDA、TNF-α、IFN-γ以及CVB3 mRNA增加(P0.05);SOD、GSH-Px、IL-4以及IL-10降低(P0.05)。与心肌炎组相比,心通颗粒高剂量和低剂量组cTnT、CK、CK-MB、MDA、TNF-α、IFN-γ以及CVB3 mRNA降低(P0.05);SOD、GSH-Px、IL-4以及IL-10升高(P0.05),且高剂量组变化更加明显(P0.05)。结论注射CVB3病毒成功建立小鼠心肌炎模型,通过心通颗粒(尤其高剂量)干预,检测到小鼠心肌各项生化指标以及炎症反应明显减轻,可能与炎症反应被抑制相关。     

参苓白术散对感染鼠伤寒沙门菌小鼠的免疫调节作用

目的探讨参苓白术散对感染鼠伤寒沙门菌小鼠的抑菌作用及免疫调节机制。方法用鼠伤寒沙门菌标准菌株(STM,50115)制备STM小鼠模型,造模后给予小鼠参苓白术散(1 g/ml)或庆大霉素(2 mg/ml)连续灌胃10 d,观察小鼠盲肠病理改变,检测盲肠中TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平及TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量,测定淋巴结中CD4~+T、CD8~+T及CD4~+IFN-γ和CD8~+IFN-γ细胞比例。结果与对照组比较,STM模型组TNF-α、IL-1β、IL-6及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平升高(P0.01),参苓白术散组和庆大霉素组较比STM模型组呈下降趋势(P0.05);STM模型组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量高于对照组(P0.01),参苓白术散组和庆大霉素组低于STM模型组(P0.05);STM模型组CD4~+T、CD8~+T及CD4~+IFN-γ和CD8~+IFN-γ细胞比例均高于对照组(P0.05),参苓白术散组高于STM模型组(P0.05),庆大霉素组较STM模型组有下降趋势(P0.05)。结论参苓白术散对STM感染具有一定治疗效果,治疗机制可能与下调TLR4-MyD88-NF-κB信号诱导的炎性细胞因子分泌及上调CD4~+T、CD8~+T比例及功能有关。     

细胞因子IL-12在哮喘小鼠发病机制中的作用

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)在哮喘小鼠发病机制中的作用及对气道炎症的影响。方法 65只小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、重组白细胞介素-12(rm IL-12)组(C组)和IL-12基因敲除组(D组),以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘模型。C组在每次激发前30 min给予rm IL-12腹腔注射,D组在激发前1 d给小鼠植入含有抗IL-12多克隆抗体的缓释泵,A组小鼠在末次激发后24 h处死,其余三组小鼠在末次激发后的1 d、2 d、4 d、7 d分别处死。摘眼球取血进行血浆一氧化氮(NO)和免疫球蛋白E(Ig E)的检测。收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测其上清中白细胞介素-10(IL-10)、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。离心后的细胞沉淀行白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数;剪下结扎右肺下叶用于HE染色。结果(1)细胞计数:小鼠BALF中的细胞总数和EOS百分比,B组明显高于A组(P0.05),C组明显低于B组(P0.05),D组较B组明显升高(P0.05)。(2)ELISA检测:与A组相比,B组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显降低(P0.05),TNF-α、NO、Ig E水平明显升高(P0.05)。与B组相比,C组小鼠BALF中IL-10、IL-12水平明显升高,TNF-α、NO、Ig E水平明显降低;D组小鼠TNF-α、NO、Ig E水平明显升高,IL-10、IL-12水平明显降低;于1 d、2 d、4 d、7 d差异均有统计学意义(P0.05)。(3)肺组织病理改变:A组小鼠HE染色未见异常;B组小鼠肺泡间隔及小血管周围可见大量炎性细胞浸润;C组小鼠的炎性细胞浸润较B组缓解;D组小鼠部分可见小气道管腔完全闭塞,炎性细胞浸润较B组明显加重。结论 rm IL-12能够明显抑制哮喘小鼠炎症细胞的浸润,同时降低炎症因子TNF-α、NO和Ig E的表达,促进抑炎因子IL-10的表达,从而在哮喘发病过程中起到保护作用。     

西红花提取物对病毒性心肌炎小鼠的保护作用

目的探究西红花提取物对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌炎小鼠模型心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响。方法采用CVB3感染小鼠构建病毒性心肌炎模型,西红花提取物组以3 mg/kg西红花提取物灌胃处理,1次/d,连续处理7 d,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。药物处理7 d后,采用超声评价小鼠心功能情况,观察血清心肌损伤标记物[心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]和炎性因子[白细胞介素(IL)-6、-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,心肌组织苏木素-伊红(HE)染色评价病理变化、原位末端转移酶标记(TUNEL)染色检测心肌凋亡情况及马松(MASSON)染色评价纤维化水平,蛋白印迹(WB)法检测心肌组织中半胱天冬酶(caspase-3、-9)、凋亡基因Fas、转化生长因子(TGF-β1)、Smad2/3表达情况。结果与对照组比较,病毒性心肌炎小鼠血清cTnT、CK-MB水平升高(P0.05),心率(HR)和左心室射血分数(LVEF)降低(P0.05);与病毒性心肌炎组比较,西红花提取物组cTnT、CK-MB水平降低(P0.05),HR、LVEF升高(P0.05);与对照组比较,病毒性心肌炎组血清IL-6、-1β、TNF-α表达增加(P0.05),与病毒性心肌炎组比较,西红花提取物组IL-6、-1β、TNF-α表达减少(P0.05);与对照组比较,病毒性心肌炎组凋亡细胞数、caspase-3、caspase-9、Fas表达增加(P0.05);与病毒性心肌炎组比较,西红花提取物组凋亡细胞数、caspase-3、caspase-9、Fas表达减少(P0.05);与对照组比较,病毒性心肌炎组心肌组织纤维化、TGF-β1、Smad2/3磷酸化水平升高(P0.05),与病毒性心肌炎组比较,西红花提取物组心肌组织纤维化、TGF-β1、Smad2/3磷酸化水平降低(P0.05)。结论西红花提取物通过减轻炎症反应、抑制心肌细胞凋亡和纤维化,保护CVB3感染引起的病毒性心肌炎,可能与调控心肌组织中caspase-3、caspase-9、Fas及TGF-β/Smad通路表达有关。     

肺炎支原体感染对慢性心力衰竭TLR4/NF-κB信号通路表达的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对慢性心力衰竭(CHF)患者Toll-样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路表达的影响。方法选择2015年9月-2020年9月在南阳医学高等专科学校第一附属医院确诊的41例CHF合并MP感染患者为CHF合并MP组,以同期医院收治的41例单纯CHF患者为CHF组。入组第2天,采用彩色多普勒超声仪检测所有患者的心功能;检测血白细胞(WBC)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、氨基N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)水平;荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(western blot)检测TLR4/NF-κB信号通路表达。结果 CHF合并MP组患者的左心室射血分数(LVEF)低于CHF组(P0.05),血清心功能相关指标CK-MB、LDH、cTnI和NT-proBNP水平高于CHF组(P0.05),免疫炎症相关指标WBC、IL-6、TNF-α、CRP和PCT水平高于CHF组(P0.05);TLR4、NF-κB和TNF-αmRNA高于CHF组(P0.05),TLR4、NF-κB和p-IκB蛋白水平高于CHF组(P0.05)。结论 MP感染可以激活TLR4/NF-кB信号通路表达,促进炎症因子释放,加重CHF患者的心脏结构和功能损伤。     

纳米氧化石墨烯对小鼠心肌氧化损伤作用

目的观察纳米氧化石墨烯对小鼠心肌的氧化损伤作用。方法选择80只健康ICR小鼠,雌雄各半,随机分成4组,将纳米氧化石墨烯在无菌条件下溶于灭菌高纯水中,分别以剂量为0、0.35、0.7和1.40 mg/kg的纳米氧化石墨烯进行尾静脉注射1次。于注射后3 d和15 d分别处死40只小鼠,取心肌,测定心肌组织匀浆中丙二醛(MDA)的水平、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果注射后3 d,雌、雄各剂量组MDA含量高于对照(P0.05);雄性高剂量组T-AOC显著低于其他组(P0.05);雌、雄小鼠各剂量组SOD活性均显著高于对照组(P0.05),雌性小鼠具有剂量—效应关系;雌、雄小鼠GSH-Px各剂量组均低于对照组(P0.05)。染毒后15 d,雌性和雄性小鼠中、高剂量组MDA仍明显高于对照组(P0.05);雄性中、高剂量组T-AOC显著低于对照组和低剂量组(P0.05),雌性各剂量明显低于对照组(P0.05);雌、雄小鼠SOD活性随剂量而增高(P0.05),雌性各剂量组均明显高于对照组(P0.05);雌、雄小鼠各剂量组GSH-Px活性显著低于对照组(P0.05)。结论未经修饰的纳米氧化石墨烯经尾静脉注射后可能对心肌产生脂质过氧化损伤作用。     

番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导的脉络丛上皮细胞炎症损伤及TLR4信号通路的作用

目的探讨番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导脉络丛上皮细胞炎症损伤的保护作用及可能机制。方法成年健康清洁级雄性SD大鼠40只,体质量(250±18.7g),随机分为空白对照、阿尔茨海默病(AD)模型、阿尔茨渊默病(AD)+番茄红素Ⅰ[ig.5 mg/(kg·d)]、AD+番茄红素Ⅱ[ig.10mg/(kg·d)]、番茄红素[ig.10mg/(kg·d)]共5组,每组8只。适应性饲养1w后,采用脑立体定位仪将8μg凝聚态Aβ1-42注入双侧大鼠海马区,建立AD动物模型。三个干预组连续灌胃番茄红素40 d,1/d。在造模后的第2、3、4、5w末进行水迷宫实验,评估大鼠学习记忆力。实验结束后,处死动物取血离心,ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1β及IL-6β含量。RT-q PCR、Western blot法检测脉络丛上皮TLR4、NF-κB p65 mRNA、蛋白表达及海马神经元PS-1、β-APP mRNA、蛋白表达。结果神经行为结果显示,AD组大鼠平均逃逸时间及靶象限活动时间显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后,显著低于AD组(P0.05)。血清中TNF-α、IL-1β及IL-6β含量结果显示,AD组大鼠TNF-α、IL-1β及IL-6β含量显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后,TNF-α、IL-1β及IL-6β含量显著降低(P0.05)。脉络丛上皮TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达结果显示,AD组大鼠TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达显著低于AD组(P0.05)。海马神经元PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达结果显示,AD组海马神经元PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达显著高于空白对照组(P0.05),而番茄红素干预后海马PS-1、β-APP mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:番茄红素对β-淀粉样蛋白诱导脉络丛上皮炎症损伤有一定的保护作用,其作用机制可能通过脉络丛上皮TLR4信号通路,抑制炎症介质的产生,缓解AD的病理进程。     

牛磺酸对锌中毒小鼠免疫功能影响

目的 了解牛磺酸对锌中毒小鼠免疫因子及T淋巴细胞增殖功能影响.方法 以不同浓度牛磺酸作用于锌中毒模型小鼠后,计算脏器指数,噻唑蓝(MTT)比色法测定T淋巴细胞增殖功能,酶联免疫吸附(ELISA)法测定白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(FNF-α)浓度.结果 锌中毒模型组TNF-α、IL-2浓度分别为(9.02±1.34)、(1.411±0.082)pg/mL,T淋巴细胞增殖活性为(0.0561±0.006),明显低于空白对照组(P＜0.05),低剂量(200mg/kg)牛磺酸组TNF-α、IL-2分别为(15.92±2.32)、(1.928±0.103)pg/mL,T淋巴细胞增殖活性为(0.1201±0.012),明显高于锌中毒模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 牛磺酸可提高锌中毒小鼠外周血TNF-a、IL-2水平及促进T淋巴细胞增殖,对锌中毒小鼠免疫功能损伤有一定保护作用.