SY及S—100蛋白对肠神经发育不良症诊断的价值

（１）目的 探讨SY,S-100蛋白对肠神经发育不良症（IND）的诊断价值。（2）方法 对45例慢性肠梗阻病儿结肠根治手术标本进行SY,S-100蛋白免疫组织化学观察。（3）结果 16例IND病儿肠黏膜下神经丛过度增生并有巨神经节,其中14例有异位神经节,10例固有层和黏膜肌的染色增强,与正常对照组比较差异有显著性（P=0.000-0.002)。（4）结论SY,S-100蛋白免疫组化可清晰显示肠壁神经丛发育,是诊断IND的可靠方法。     

神经母细胞瘤中NSE、S-100、CGA及p53、p21、C-erb-B_2蛋白表达与分化程度关系的研究

回顾性研究了４９例原诊断为神经母细胞瘤（ＮＢ），神经节神经母细胞瘤（ＧＮＢ）和神经节细胞瘤（ＧＮ）的病理资料。结果表明，这３种肿瘤为分化程度不同的同源性肿瘤，统称为神经母细胞瘤。应用免疫组化方法检测ＮＳＥ、Ｓ－１００、ＣＧＡ和ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２、ｐ２１在该肿瘤中的表达和分布，发现ＮＳＥ、Ｓ－１００和ＣＧＡ阳性率分别为８５％、７３％和５０％，在肿瘤的Ⅰ～Ⅳ级之间，分化越好者阳性率越高（Ｐ＜０．０５），可做为临床鉴别诊断的估计预后的指标；ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２和ｐ２１在肿瘤各级中均有表达，提示在该肿瘤发生中抑癌基因突变和原癌基因激活起一定的作用，其中低分化组ｐ５３蛋白的表达明显强于高分化组（Ｐ＜０．０５），亦可做为估计肿瘤预后的指标     

细胞外基质及凝集素受体在胃癌细胞株的表达

应用免疫酶ＳＰ法和凝集素亲和组化技术对４株不同分化程度的胃癌细胞进行细胞外基质和凝集素受体的初步研究。结果显示：（１）ＦＮ染色：ＦＧＣ８５＞ＭＧＣ８０－３＞ＳＧＣ－７９０１＞ＭＫＮ２８。（２）ＬＮ染色：ＦＧＣ８５＜ＭＧＣ８０－３＜ＳＧＣ－７９０１＜ＭＫＮ２８。（３）ＰＮＡ染色：ＦＧＣ８５＝ＭＧＣ８０－３＞ＳＧＣ－７９０１＞ＭＫＮ２８。（４）ＰＨＡ染色无差异。提示ＦＮ，ＬＮ及ＰＮＡ受体的表达与细胞的分化程度密切相关。     

N-乙酰半胱氨酸对肠系膜上动脉夹闭后肠和肺损伤的防治效应

Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）是体内游离巯基的组成部分,既可补充体内谷胱甘肽,又具有清除自由基,保护细胞的作用。本实验观察了ＮＡＣ在大鼠肠系膜上动脉夹闭（ＳＭＡＯ）造成的肠缺血再灌损伤的继发性的操作时对肠、肺的保护效应,ＳＭＡＯ４５ｍｉｎ松夹闭于松夹前、后５分钟尾静脉注射ＮＡＣ,测定松夹后２、４、６ｈ肠、肺组织总巯基（ＴＳＨ）和游离巯基（ＮＰＳＨ）以及丙二醛（ＭＤＡ）和髓过氧化物酶（ＭＰＯ）的改变。结     

幽门螺杆菌感染与增殖细胞核抗原及p53和p21蛋白表达的关系

目的 探讨胃粘膜病变中幽门螺杆菌感染与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ０及ｒａｓ癌基因表达产物ｐ２１蛋白和突变型ｐ５３蛋白表达的关系。方法 采用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶（ＳＰ）免疫组织化学染色方法及粘膜尿素酶试验,粘膜涂片染色检测３０例慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）,２５例胃粘膜不全结肠型肠化生（ＩＣＭ）,２９例异型增生,３７例胃腺癌活检标本。结果 ＩＣＭ组、异型增生组和胃腺癌组的Ｈｐ感染率明显高于ＣＳＧ组     

胃癌相关基因c-met表达和凋亡的研究

目的 研究ｃ－ｍｅｔ基因蛋白和细胞凋亡在胃黏膜病变演进的表达及关系,探讨ｃ－ｍｅｔ表达对胃癌（ＧＣ）预后的意义。方法 １４５例经病理证实不同胃黏膜病变,采用免疫组织化学法检测ｃ－ｍｅｔ基因表达,采用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测细胞凋亡,用Ｌｏｎｇ－ｒａｎｋ法检测胃癌生存率。结果 在浅表性胃炎（ＣＳＧ）、萎缩肠化生胃炎（ＣＡＧ＋ＩＭ）、异型增生（ＤＹＳ）、早期ＧＣ和进展期ＧＣ中,ｃ－ｍｅｔ基因表     

神经生长因子对糖尿病大鼠背根神经节神经细丝蛋白变化的影响

目的：观察神经生长因子（ＮＧＦ）对糖尿病神经病变的治疗作用。方法：采用免疫组织化学染色结合电子计算机图像分析技术，测定糖尿病大鼠背根神经节的结构蛋白－神经细丝蛋白（ＮＦ）的相对含量。结果：糖尿病成模后三个月，背根神经节ＮＦ的平均灰度值，糖尿病组（ＤＭ组）明显低于正常对照组（ＮＣ组），ＮＧＦ组（ＮＧＦ２００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１肌肉注射，３０ｄ）虽低于ＮＣ组，但却高于ＤＭ组，Ｐ均＜０．０１。结论：ＮＧＦ可促进感觉神经结构蛋白的表达，有益于糖尿病周围神经病变的恢复     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

外周神经损伤后对大鼠脊髓运动神经元及背根节感觉神经元 …

大鼠左腓总神经离断后与胫神经端侧吻合,于术后第１至８周取Ｌ４～５脊髓和背根节（ＤＲＧ）做冰冻切片,湔角运动神经元（ＳＭＮ）ＡＣｈＥ活性和ＤＲＧ神经ＮＯＳ活笥。结果发现：（１）正常鼠ＳＭＮ－ＡＣｈＥ活性中－强度阳性反应。实验组外侧核ＳＭＮ０ＡＣｈＥ活性和阳性细胞数,于术后２～３周比正常者明显减低,有的ＳＭＮ－核周体者明显减低,有的ＳＭＮ－核周体出现空泡样变性;术后４～８周,ＳＭＮ酶活性和阳性细胞数渐     

小鼠造血干细胞因子基因克隆及在 C H O 细胞中的表达

目的： 克隆造血干细胞因子（ Ｓ Ｃ Ｆ）并在 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞中表达。方法： 采用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法从ｐ Ｒ Ｃ／ Ｃ Ｍ Ｖ（含 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ）中钓取 Ｓ Ｃ Ｆ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 膜外段活性区,克隆入真核表达载体ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３,转染入 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞;用 Ｒ Ｔ－ Ｐ Ｃ Ｒ 方法检测 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 水平表达及通过协同刺激骨髓细胞集落形成来检测转染细胞上清的生物活性。结果：转染 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 的 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞可表达 Ｓ Ｃ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ,其细胞培养上清可协同 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ刺激骨髓细胞形成集落数比 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ 单独作用高 ２ 倍,转染外源基因对细胞周期没有明显影响。结论：转染 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 在 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞中表达,转染细胞上清协同 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ 刺激骨髓细胞集落的形成,而本身对集落的形成没有影响。     

先天性小肠闭锁Cajal间质细胞和突触素的分布

目的探讨Cajal间质细胞(ICCs)及突触素(SY)在先天性小肠闭锁(IA)发病中的作用。方法应用免疫组化PV法对5例对照者和16例IA患儿肠标本进行ICCs、SY检测。结果在对照组,ICCs大量分布在肌层内及肌间神经丛周围,并形成网络结构,肌间神经丛、纵肌层、环肌层、黏膜肌层均可见大量SY免疫反应阳性产物。在IA组,ICCs和SY在盲端近、远端的分布与正常对照组相比显著减少,ICCs网络被破坏。结论CajalICCs、SY分布异常是IA病理改变之一,可能是该病重要的发病机制,参与肠运动障碍的发生。     

Hirschsprung病肠壁中葡萄糖转运体-1和一氧化氮合酶阳性神经的变化憊

目的　观察葡萄糖转运体 1(GLUT 1)和一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经在Hirschsprung病 (HD)肠壁中的变化并探讨二者与HD发病的关系。方法　应用还原型辅酶Ⅱ 黄递酶组织化学和免疫组织化学染色观察 9例HD及 5例对照组患儿结肠。结果　在正常结肠的肌层和粘膜下层内偶见细小的GLUT 1免疫反应性神经纤维 ,肠壁外的外源性神经纤维呈阳性染色 ;而在无神经节细胞肠段的相应区域内GLUT 1免疫反应性神经纤维数量明显增多、增粗。在正常结肠肠壁内有大量NOS阳性神经节细胞 ,环肌层内含有丰富的阳性神经纤维 ;而在无神经节细胞肠段的肠壁内缺乏NOS阳性神经元 ,肌层内阳性神经纤维明显减少。结论　肠壁内GLUT 1阳性神经可能为外源性神经 ,GLUT 1免疫组织化学染色可能对HD具有诊断价值。NOS阳性神经在病变肠壁中的分布异常可能与HD的病理生理机制有关。     

Cajal间质细胞和缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠中的表达

目的本研究通过观察Cajal间质细胞（ICCs）和缝隙连接蛋白43（connexin43）在先天性巨结肠（HD）肠管中的分布情况，探讨HD的发病机制。方法采用兔抗人多克隆c-kit抗体和connexin 43抗体，通过SABC双标免疫组化染色方法观察35例HD患儿肠管c-kit^＋ICCs和connexin 43的分布情况。结果ICCs分布在环肌内和肌间神经丛周围，ICCs彼此及与平滑肌细胞形成缝隙连接。在HD病变肠管ICCs数目明显减少甚至消失，与HD正常肠管相比，差异十分显著（P〈0．01）。在HD病变肠管connexin 43表达明显减弱。结论ICCs和connexin 43分布异常导致了HD病变肠管慢波节律和兴奋传导异常，从而引起或加重HD发病。     

神经激肽A在大鼠食管发育中的表达变化

目的 探讨神经激肽A(NKA)在大鼠食管发育中的表达及变化。方法 应用免疫组织化学PAP法和图象分析术系统研究大鼠胚胎13d至成年食管中NKA的表达情况。结果 胚胎21d食管粘膜肌层和环肌层内可观察到NKA免疫反应(NKA-IR)阳性膨体纤维,出生后,随幼鼠的生长发育,相继在上皮,粘膜下层,纵肌层、肌间丛和粘膜下丛出现NKA-IR表达,30d时已和成年鼠相似;定量分析的结果与NKA-IR在食管各层的变化一致。结论 NKA在食管中的发生发育主要在临出生前至生后4周内;NKA对大鼠食管的发育可能具有重要的作用。     

溃疡型肠结核穿孔手术方式探讨

肠结核可分为溃疡型、增殖型、纤维硬化型及溃疡增生型[1],可累及肠道任何部位,以回盲部最多见。肠穿孔主要并发于溃疡型肠结核,此型病变活跃,当溃疡浸及粘膜下层后,可进而浸蚀肌层及浆膜层而穿孔。溃疡型肠结核穿孔病情凶险,不仅术前诊断困难,因病人往往长期腹痛,肠穿孔引起的腹膜炎表现易被忽略,且手术中溃疡性病变较为广泛,手术困难。现收集10例溃疡型肠结核穿孔病例对其手术方式作一探讨。①对于溃疡型肠结核较为局限,我们采取病变肠段切除的手术方式;②对于溃疡型肠结核病变范围较为广泛,我们采取切除病变较为严重肠管,对于病变较为分散的肠管,我们没有采取分段切除,而采取纵切横缝肠管整形的方法予以处理,尽可能保留肠管;③对于肠结核穿孔,我们不推荐行肠修补术,而建议采取纵切横缝肠管整形的方法或病变肠管切除的方法。④对于慢性穿孔引起的腹腔脓肿,建议行切开引流术后,二期再行病变肠管切除术;⑤慢性穿孔引起的肠瘘,先行腹壁瘘口清创引流,二期再行病变肠管切除术。     

益气化瘀方对腰神经根损伤大鼠神经细胞黏附分子的作用

目的:探讨益气化瘀方对大鼠神经再生修复过程中神经肌肉接头部神经细胞黏附分子(neuralcelladhesionmolecule,NCAM)的作用。方法:大鼠L5神经根损伤后,予以益气化瘀方分别治疗10、20和30d。采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术,观察大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部NCAM的分布变化。采用α金环蛇毒萤光结合剂显示乙酰胆碱受体(acetylcholinereceptor,AChR),NIH图像分析系统定量测定NCAM与AChR的重叠面积。结果:益气化瘀方组NCAM在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸以及与AChR的重叠面积均明显优于模型组。结论:NCAM的表达与AChR的神经支配情况密切相关。益气化瘀方可促进神经的再生修复。     

Cx43和Pax3在人胚胎早期小肠肌层中的表达及其意义

目的 探讨Cx43和Pax3蛋白在人胚胎早期小肠肌层组织中的表达规律.方法 应用免疫组织化学SABC法检测第2、3、4三个月龄段,Cx43和Pax3蛋白在人胚胎小肠肌层组织中的表达.结果 第2月胚龄时,Cx43和Pax3在小肠肌层组织中均呈阴性表达.第3个月胎龄段,Cx43和Pax3在小肠内环肌层细胞呈阴性表达,外纵肌层部分细胞呈阳性表达.肌间神经丛部分细胞呈阳性表达.第4个月胎龄段,Cx43和Pax3在小肠内环肌、外纵肌层和肌间神经丛均有细胞呈阳性表达.结论 Cx43和Pax3蛋白与人胚胎早期小肠肌层组织细胞的生长发育关系密切.     

经肛门Ⅰ期巨结肠根治术后排便功能随访

目的 评价经肛门Ⅰ期巨结肠根治术后患儿排便功能控制。方法 对27例先天性巨结肠行肛门Ⅰ期巨结肠根治。术后随访患儿6mo～3a，对大便控制能力、便秘等并发症的发生率进行评价。结果 获访20例，大便控制评分正常12例，好6例，欠佳2例；发生便秘3例；未发生结肠炎。结论 经肛门Ⅰ期巨结肠根治术后可获得良好的排便控制功能。切除部分无神经节直肠肌鞘组织。可减少术后便秘等并发症。