小鼠β-防御素研究进展

β-防御素已从起初的几个防御素家族类别细化为以物种、特性、作用等为主的防御素多肽.近年来,对小鼠β-防御素的研究日益增多,已发现了十余种不同亚型的β-防御素.它除了具有良好的抗菌、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤等生物学活性外,还具备诱导机体免疫应答的能力,其医学作用不容忽视.β-防御素不仅分布广泛,在物种中也存在高度的同源性,...     

β防御素2转基因小鼠抗金黄色葡萄球菌感染的研究

目的探讨转基因小鼠抗金黄色葡萄球菌作用。方法用分子克隆方法构建β防御素2（HBD-2）全长cDNA重组质粒,通过显微注射技术,将重组片段注射入小鼠雌原核细胞,聚合酶链反应（PCR）方法检测小鼠HBD2基因整合情况,免疫组化检测转基因小鼠HBD2表达和组织分布。用金黄色葡萄球菌腹腔攻击转基因阳性小鼠观测全身情况和死亡数。结果DNA序列测定证明重组质粒插入HBD-2cDNA片段无误,PCR显示7只小鼠已整合HBD-2基因,PCR阳性小鼠免疫组化显示HBD2基因在肺、肠道、肝、肾、睾丸、小脑等组织广泛表达。腹腔攻击实验显示7只转基因小鼠4只存活,而野生小鼠10只全部死亡。结论HBD-2在体内具有显著抗金色葡萄球菌感染能力。     

人β防御素-2研究进展

内源性抗生素肽(endogenous antibiotic peptides)是动、植物天然免疫的重要介质,在哺乳动物(包括人)中,由于对革兰氏阳性菌、阴性菌、真菌、螺旋体、分枝杆菌及某些包膜病毒等均有很强杀伤活性,故将其命名为防御素(defensin).迄今为止,在人体中已发现的防御素共有两类(α、β)10种.其中β防御素家族共发现3种,分子量为4～5kD,含38～47个氨基酸残基阳离子,分别为人β防御素-1,2,3(human β-defensin-1,2,3. hBD-1,2,3).德国Harder J等[1]于1997年首先发现hBD-2,他们用大肠杆菌亲和柱结合高压液相层析法在牛皮癣病人皮肤中分离并纯化到约4.3kD的多肽,经氨基酸序列分析表明与牛的TAP(气管抗菌肽)、LAP(舌抗菌肽)及hBD-1同源,属于人β抗菌肽成员之一,命名hBD-2.已证实hBD-2是黏膜和上皮细胞抵抗微生物入侵的重要介质,在持续暴露在病原微生物的器官表面发挥重要的抗菌作用.     

三磷酸腺苷的不良反应

<正> 三磷酸腺苷(ATP)是一种辅酶,治疗中常作为补充机体能量的主要来源,目前在临床上的应用日趋广泛。近年来,国内文献陆续报道其引起的一些不良反应,严重者甚至休克、致死,本文综述如下,以引起临床的高度重视。     

β-防御素2研究进展

防御素是一类分子量约为4．0～5．0kMr、含有6个半胱氨酸残基、三对二硫键的阳离子多肽。防御素不仅通过直接杀菌作用抵御入侵机体的病原微生物，还在介导获得性免疫反应、调节机体的免疫炎症反应和创伤修复过程中起着重要作用。β-防御素2是人体中第一个被发现的可诱导性防御素，因此，β-防御素2的基因表达调控、生物学活性、与皮肤／肺部疾病发生发展相关性等方面的研究较为深入。采用重组DNA技术从原核表达体系、真核表达体系中获取具有生物学活性的β-防御素2多肽，并研究其在呼吸道细菌感染、脓毒症所致肺损伤／肺功能障碍发生发展中的保护作用，将有助于阐明β-防御素2在免疫相关疾病中的作用，有助于阐述肺损伤／呼吸功能障碍发生发展的机制与防治。     

β防御素-2和γ干扰素在尖锐湿疣皮损中表达的研究

目的:研究和探讨β防御素-2(HBD-2)和γ干扰素(IFN-γ)在尖锐湿疣发病和预后中的作用.方法:用免疫组化法检测HBD-2和IFN-γ在25例尖锐湿疣(CA)(初发患者)皮损、20例寻常性银屑病皮损以及25例健康人皮肤石蜡切片中的表达.SPSS 16.0统计软件进行数据分析,组间行Wilcoxon秩和检验,并进行相关性分析.结果:HBD-2、IFN-γ在尖锐湿疣皮损的表达主要见于基底层, HBD-2、IFN-γ水平明显低于银屑病阳性对照组(Z=-7.174,-7.230;P<0.O1),HBD-2的水平较正常皮肤为高表达(Z=-5.147,P<0.01), IFN-γ的水平较正常皮肤为低表达(Z=-6.311,P<0.05),且HBD和IFN无相关性(r=0.123,P=0.467>0.01).结论:推测HBD-2、IFN-γ可能通过不同的途径共同参与了尖锐湿疣的免疫反应过程并发挥了一定的作用.     

牙龈上皮β-防御素-2诱导表达的中药筛选

目的 筛选出对大鼠牙龈上皮β-防御素-2具有诱导表达作用的中药。方法 2019年2月至2020年4月选取90只大鼠作为研究对象。将90只健康成年Wistar大鼠随机分为固有表达组(10只)、阴性对照组及阳性对照组(各10只);实验组分别给予药物(黄芪组、板蓝根组、丹参组、柴胡组、鱼腥草组、穿心莲内酯组,每组10只,共60只),连续给药7 d后将大鼠处死,切取大鼠牙龈上皮,采用免疫组织化学方法检测大鼠牙龈上皮β-防御素-2蛋白的表达情况。结果 黄芪组和板蓝根组大鼠牙龈上皮β-防御素-2蛋白的表达明显高于固有表达组,差异有统计学意义(P0.05),但与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 中药黄芪和板蓝根能够诱导大鼠牙龈上皮β-防御素-2的表达增高,黄芪和板蓝根具有调节大鼠口腔黏膜天然免疫的作用。     

阿霉素中毒大鼠肺组织中β-防御素-2的基因表达

目的:探讨阿霉素(adriamycin,ADM)所致大鼠急性肺损伤对肺组织β-防御素-2(BD-2)基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成ADM低剂量组(10 mg/kg)、中剂量组(20 mg/kg)、高剂量组(40 mg/kg)及对照组,每组10只。模型组分别一次性腹腔注射不同剂量ADM制备急性肺损伤模型;对照组用生理盐水腹腔注射。3天后剖胸取肺,采用半定量RT-PCR技术检测肺组织BD-2 mRNA表达的变化。结果:ADM中、高剂量组大鼠BD-2基因表达均较对照组明显上调(P<0.01),低剂量组与对照组无统计学意义(P>0.05)。结论:ADM所致大鼠急性肺损伤中,肺组织BD-2的mRNA表达水平上调。     

三磷酸腺苷的临床新用途

<正> 三磷酸腺苷(ATP)为一种辅酶,在机体代谢中占有重要地位,临床多用来辅助治疗心、肝、肾等实质性损害。近年来文献报道有许多新用途,现概述如下。一、治疗阵发性室上性心动过速(PSVT) 细胞电生理研究表明,ATP对房室结有负性传导作用,并有强烈的拟迷走神经作用,因此对房室结折返性心动过速和反复性心动过速(正向传导型)均具有良好的效果。Grec0报道ATP纠治PSVT的有效率为90%。宋有城用ATP20mg不稀释或以葡萄糖液稀释至5ml,于5～20秒内快速静注,治疗PSVT45例,成功42例,总有效率     

双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素-2 mRNA的表达

目的 检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞β-防御素-2(hBD-2)基因的激活作用及其活性组分．方法 应用遵转录聚合膏链反应(RT—PCR)法和Northern杂交检测HT-29细胞hBD-2mRNA的表达；采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取等方法分离双歧杆菌胞璧蛋白质成分．结果 RT—PCR和Northern杂交分析显示，在正常培养条件下HT-29细胞无可见的hBD-2mRNA表达信号，但在双歧杆菌菌体、细胞璧和胞璧蛋白刺激下均检测出显著的hBD-2mRNA表达．结论 双歧杆菌能诱导人肠腺上皮细胞hBD-2基因的表达。双歧杆菌胞壁蛋白可能是其诱导作用的活性成分。     

大鼠β—防御素rBD—2的分子克隆及其在皮肤组织的诱导表达

从大鼠皮肤提取总ＲＮＡ,以Ｐ１５′→３′ＴＴＣＡＧＴＣＡＴＧＡＧＧＡＴＣＣＡＴＴＡＣ和Ｐ２５′→３′ＧＧＴＴＣＴＴＧＧＴＣＴＴＴＴＴＡＴＣＴＡＣ引物,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增得到一ｃＤＮＡ片段,经核苷酸序列测定,并根据其推导的氨基酸序列与人β－防御素－２和大鼠β－防御素－１进行同源性比较,结果显示,该ｃＤＮＡ片段编码的氨基酸序列具高度同源性（其成熟肽与ｈＢＤ－２的同一性为５０％,相似性为３２％）,均含６个典型的半胱氨酸,这表明所克隆的ｃＤＮＡ为大鼠β－防御素－２亚类,因此命名为ｒＢＤ－２。大鼠β－防御素－２基因在大肠杆菌感染性损伤皮肤组织中的表达明显增强,与人ｈＢＤ－２的表达相似,能够被诱导表达。以上结果提示,β－防御素－２可能是皮肤组织对感染性损伤的防御反应所产生的重要免疫介质。     

β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及意义

目的 研究β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及其与病情严重程度的相关性,探讨β-防御素2在溃疡性结肠炎的诊断及严重程度判断中的临床意义.方法 应用免疫组织化学的方法检测60例溃疡性结肠炎粘膜组织标本,并根据病情严重程度分为3组,轻度26例、中度20例、重度14例,以及15例正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2的表达.结果 正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2表达较弱;β-防御素2在轻、中、重度溃疡性结肠炎粘膜组织中的阳性表达率分别为38.46%(10/26)、75.00%(15/20)及92.85%(13/14),并随病情严重程度增高而增高(P<0.05).结论 β-防御素2在溃疡性结肠炎中具有重要的意义.     

β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及意义

目的 研究β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及其与病情严重程度的相关性,探讨β-防御素2在溃疡性结肠炎的诊断及严重程度判断中的临床意义.方法 应用免疫组织化学的方法检测60例溃疡性结肠炎粘膜组织标本,并根据病情严重程度分为3组,轻度26例、中度20例、重度14例,以及15例正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2的表达.结果 正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2表达较弱;β-防御素2在轻、中、重度溃疡性结肠炎粘膜组织中的阳性表达率分别为38.46% (10/26)、75.00% (15/20)及92.85% (13/14),并随病情严重程度增高而增高(P<0.05).结论 β-防御素2在溃疡性结肠炎中具有重要的意义.     

三磷酸腺苷对低氧性肺动脉高压的治疗

三磷酸腺苷对低氧性肺动脉高压的治疗许辉邓静敏施焕中梁国荣（广西医科大学第一附属医院呼吸内科南宁５３００２１）三磷酸腺苷（ＡＴＰ）为一种能源物质，主要在细胞线粒体中合成，是能量代谢转化的中心，为机体各种生理活动供能，并作为辅酶参与多种代谢反应。ＡＴＰ制...     

人β-防御素-2在慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中的表达

目的测定慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者诱导痰中人β-防御素-2（hBD-2）的表达水平，来探讨hBD-2在COPD中的可能作用。方法收集COPD急性加重期、稳定期患者及正常人的诱导痰各10例，处理后分别进行痰细胞的计数和分类，Western blotting analysis法检测诱导痰中hBD-2的表达水平，并以图文分析系统进行灰度的半定量对比，同时用ELISA法测定诱导痰中白细胞介素-1β（IL-1β）的表达水平，并与hBD-2的表达进行相关分析。结果与正常组比较，COPD急性加重期组和稳定期组的中性粒细胞比例明显增多（P〈0．01），而COPD急性加重期组和稳定期组的hBD-2蛋白表达灰度值明显降低，差异有显著性（P〈0．001）；与稳定期组比较，COPD急性加重期组hBD-2蛋白表达灰度值也明显降低，差异有显著性（P〈0．01）。COPD稳定期组的IL-1β表达与正常组比较升高，差异有显著性（P〈0．001）；与COPD稳定期组比较。COPD急性加重期组IL-1β表达明显升高，差异有显著性（P〈0．01）。hBD-2的蛋白印迹的灰度值与IL-1β的浓度呈显著负相关（r=-0．689，P〈0．01）。结论COPD患者诱导痰中hBD-2表达增高，并与IL-1β有相关性，提示hBD-2可能参与了COPD的炎性过程。     

三磷酸腺苷试验诊断冠心病的探讨

对85例患者进行三磷酸腺苷试验,其中冠心病45例,可疑冠心病20例,对照组20例。结果表明,本试验对冠心病的诊断敏感性为93.3％,特异性100％。该试验安全、简单、操作易掌握,阳性反应出现早、明显,便于观察,可作为对冠心病的一种非创伤性诊断方法。     

寻常痤疮皮肤人β防御素-2的表达及意义

目的：研究寻常痤疮患者皮肤B防御素-2（hBD-2）的表达情况及丹参酮治疗对其的影响。方法：用免疫组化方法检测40例寻常痤疮患者皮损及非皮损部位hBD-2的表达水平,观察其在丹参酮治疗前、后的变化,同时记录皮损情况及不良反应等,并与正常对照组进行比较。结果：丹参酮治疗寻常痤疮效果良好,副作用少。在寻常痤疮患者皮损处hBD-2的表达显著增强,与非皮损部位及正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;丹参酮治疗后皮损好转,局部hBD-2表达减弱,但仍明显高于非皮损部位（P〈0．05）;治疗前、后非皮损部位hBD-2的表达水平没有明显变化,与正常对照组比较差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论：hBD-2在寻常痤疮皮损部位的表达显著增加,并随着炎症的减轻而下调,提示其参与痤疮的发病过程。