灵芝孢子油对MPTP处理小鼠行为学及黑质区病理变化的影响

OBJECTIVE: To investigate the oil from the spores of ganoderma lucidum, a rare Chinese herb, on the behaviors and pathological changes in the substantia nigra pars compacta (SNpc) in mouse models of Parkinson's disease (PD) induced by MPTP. METHODS: C57BL mice were divided into 3 groups, and the ganoderma spores oil + MPTP group were treated with ganoderma spores oil for 8 days, together with subcutaneous injection of MPTP (30 mg/kg) starting on the third day for 6 days; MPTP group were pretreated with normal saline before subcutaneous MPTP injection, and the normal control group received pretreatment with normal saline before subcutaneous normal saline injection. The behavioral changes of the mice in different groups were observed by pole test, dopamine and its metabolic products in the striatum determined by HPLC, tyrosine hydroxylase (TH) positive cells detected by immunofluorescence method, and expression of TH protein by Western blotting. RESULTS: The mice in the ganoderma spores oil + MPTP group presented significantly less involuntary movement of the limbs in the pole test than the mice in MPTP group. The levels of dopamine and DOPAC in the striatum of ganoderma spores oil-treated mice were increased as compared with those in MPTP group. The number of surviving TH-positive neurons in SNpc of mice in ganoderma spores oil + MPTP group was significantly greater than that in MPTP group, with also significantly increased TH protein expression. CONCLUSION: Ganoderma spores oil has neuroprotective effect for preventing doparminergic neuron from impairment by MPTP.     

灵芝孢子油干预治疗6-羟多巴帕金森病大鼠模型的实验研究

[目的]研究灵芝孢子油对6-羟多巴(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型行为学及病理改变的影响,探讨该药对黑质多巴胺能神经元的保护作用.[方法]100只SD大鼠随机分为正常对照组20只、6-OHDA组40只、灵芝孢子油 6-OHDA组40只.通过脑部立体定向法将6-OHDA注射到SD大鼠一侧黑质致密部建立6-OHDA大鼠PD模型,灵芝孢子油 6-OHDA组在造模前3 d开始给灵芝孢子油每天500 mg/kg,连续10 d.6-OHDA组喂食生理盐水做对照.造模后每周给予阿朴吗啡观察大鼠旋转行为的变化,4周后用高效液相色谱法检测大鼠纹状体多巴胺及其代谢物含量,免疫组织化学法检测黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量,western blot法对TH蛋白进行半定量测定.[结果]①灵芝孢子油 6-OHDA组出现旋转行为的大鼠比例为10%,6-OHDA组为45%,两组比较有显著性差异.②纹状体多巴胺及其代谢物含量在两组间存在差异,多巴胺手术侧含量/手术对侧含量在灵芝孢子油 6-OHDA组为(60.12±7.5)%,在6-OHDA组为(38.58±7.26)%.③在黑质致密带区灵芝孢子油 6-OHDA组的TH免疫阳性细胞及TH蛋白表达量均较6-OHDA组显著增多.[结论]灵芝孢子油能明显改善6-OHDA大鼠模型行为学,增加纹状体多巴胺及其代谢物含量并提高黑质多巴胺能神经元的残存率,提示灵芝孢子油可能具有减缓PD病变进程的神经保护作用.     

灵芝孢子油软胶囊对小鼠免疫功能调节的研究

目的研究灵芝孢子油软胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法分别以125、250、500mg／kg BW剂量的灵芝孢子油软胶囊给小鼠连续灌胃30—45d，测定各项免疫指标。结果灵芝孢子油软胶囊能促进小鼠的脾淋巴细胞增值、转化作用，促进小鼠的迟发型变态反应，提高小鼠的抗体生成细胞数、血清溶血素水平，促进小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬能力，显著提高小鼠的NK细胞活性。结论灵芝孢子油软胶囊具有增强免疫力功能作用。     

灵芝孢子油的氧化稳定性

灵芝孢子粉中含有多糖、三萜类等特殊物质,具有抑制肿瘤细胞生长、抗癌、免疫、保肝、降血糖、抗缺氧等功能。灵芝孢子油是从灵芝孢子粉中萃取出的油脂质物质,集中了灵芝孢子中的诸多     

甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠多巴胺能神经元的影响

目的 观察甘草黄酮对MPTP帕金森病（PD）小鼠多巴胺（DA）能神经元的影响. 方法 制作MPTP小鼠PD模型,随机分为3组：模型组（每日一次腹腔注射给予25 mg/kg MPTP,连续5次）、空白组（每日一次腹腔注射给予等量生理盐水）和甘草黄酮处理组（除给予MPTP外,每日一次灌胃给予30 mg/kg甘草黄酮,连续7次）.采用行为学观察、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察模型小鼠的行为学表现、DA能神经元数量和腹侧中脑酪氨酸羟化酶（TH）蛋白表达水平.并观察甘草黄酮处理后对上述指标的影响. 结果 模型组小鼠出现PD典型行为学表现,黑质致密部DA能神经元数量（56.2 ±3.5vs152.4±8.6）和腹侧中脑TH含量（3.1 ±0.5 vs14.7±0.9）较对照组显著下降（P＜0.01）.甘草黄酮处理组小鼠行为表现较轻.与模型组相比,黑质致密部DA能神经元的丢失和腹侧中脑TH含量下降均明显改善（P＜0.01）. 结论 甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应.     

灵芝孢子油抑制小鼠乳腺癌细胞生长作用研究

目的研究灵芝孢子油抑制肿瘤细胞增生的作用。方法通过"预防性"和"治疗性"喂食方法,观察并检测喂食过程中小鼠乳腺癌细胞生长速度及处死后的瘤重量。结果灵芝孢子油喂食组肿瘤生长速度较对照组慢,且预防性喂食组抑瘤效果好于"治疗性"喂食组。结论灵芝孢子油具有抑制小鼠乳腺癌生长的作用。     

MPTP对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及黑质多巴胺神经元的影响

目的:探讨1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)对SAMF8小鼠空间学习和记忆能力及黑质多巴胺神经元的影响.方法:采用雄性3个月龄SAMP8小鼠皮下注射MPTP(36 mg/kg),连续5 d.对照组皮下注射生理盐水(NS,36 ml/kg).用Morris水迷宫测试小鼠的寻找平台潜伏期及搜索策略.免疫组织化学观察黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性多巴胺能神经元变化.结果:MPTP小鼠黑质致密部TH免疫反应阳性神经元数目明显少于对照组(P<0.01).Morris水迷宫实验表明MPTP小鼠寻找平台潜伏期较对照组明显延长(P<0.01),在目标象限(第Ⅰ象限)游泳时间比对照组明显降低(P<0.01),在对侧象限(第Ⅳ象限)游泳时间比对照组明显升高(P<0.05),搜寻策略较对照组变差.结论:MPTP可造成SAMF8小鼠黑质多巴胺神经元损伤,并出现空间学习记忆能力下降.     

脂多糖联合MPTP诱导的小鼠慢性帕金森病模型的评价

目的 建立脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)联合1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)诱导的慢性小鼠帕金森病模型,探讨其行为学和黒质多巴胺能神经元细胞的变化情况。方法 将20只C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组每日腹腔注射LPS(0.25 mg/kg) 一次,连续3 d,最后一次注射LPS 4 h后,每日腹腔注射MPTP(25 mg/kg)一次,连续2 d,对照组腹腔注射相同量的生理盐水。8周后用步态分析和转棒实验评价小鼠的行为学能力,免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH) 阳性细胞变化情况。结果 模型组小鼠行为学变化较对照组差异有显著性(P<0.05),模型组小鼠中脑黒质区显示出严重的神经元细胞损伤。结论 LPS联合MPTP腹腔注射可成功诱导出慢性小鼠帕金森病模型,提示该模型可用于帕金森病的发病机制及药物治疗效果等相关研究。     

LPS联合MPTP诱导的小鼠慢性帕金森病模型的评价

[摘要] 目的：建立脂多糖(LPS)联合MPTP诱导的慢性小鼠帕金森病模型,探讨其行为学和黒质多巴胺能神经元细胞的变化情况。方法：将20只C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组腹腔注射LPS (0.25mg/kg) 一次,连续三天,最后一次注射LPS 4小时后,腹腔注射MPTP (25 mg/kg)一次,连续两天,对照组腹腔注射相同量的生理盐水。8周后用步态分析和转棒实验评价小鼠的行为学能力,免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶 (TH) 阳性细胞变化情况。结果：模型组小鼠行为学变化较对照组有显著性差异(P<0.05),模型组小鼠中脑黒质区显示出严重的神经元细胞损伤。结论：LPS联合MPTP腹腔注射可成功诱导出慢性小鼠帕金森病模型,提示该模型可用于帕金森病的发病机制及药物治疗效果等相关研究。     

MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺能神经元损伤及定量研究

目的建立正常小鼠黑质致密部部位-细胞数量标准曲线,并以之判定MPTP损伤的小鼠PD模型中多巴胺能神经元的损失.方法根据小鼠大脑解剖图谱观察小鼠黑质致密部的走向,酪氨酸羟化酶免疫组化染色显示正常小鼠大脑黑质致密部及多巴胺能神经元;观察计数MPTP处理小鼠的大脑黑质致密部多巴胺能神经元,与正常小鼠的相似部位进行比较.结果建立了正常小鼠黑质致密部部位-细胞数量分布图,利用曲线对MPTP处理小鼠所得到的切片进行分析,发现样本中多巴胺能神经元明显减少,证明判定方法可行而有效.结论本实验成功建立了MPTP致小鼠黑质致密部多巴胺神经元损伤模型,并对其损伤判定进行了标准化.     

灵芝孢子粉对小鼠的免疫调节及抑瘤作用研究

目的 研究灵芝孢子粉对小鼠免疫系统和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响.方法 将小鼠按体重随机区组分组,根据小鼠体重的2%分别经口灌胃蒸馏水和不同剂量的灵芝孢子粉溶液,每日1次,连续30日,观察各组小鼠的瘤重、迟发型变态反应(DTH)、自然杀伤(NK)细胞的活性和用以测定单核-巨噬细胞功能的吞噬指数.结果 75 mg/kg灵芝孢子粉组小鼠的瘤重、DTH、NK细胞的活性和单核-巨噬细胞的功能与阴性对照组比较有显著性差异(P<0 05).结论 一定剂量的灵芝孢子粉增强了小鼠的免疫功能,对肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用.     

磷酸化ERK1/2对MPTP帕金森病小鼠黑质iNOS表达的影响

目的 研究磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)小鼠模型黑质诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达调控作用,探讨PD中脑黑质多巴胺(DA)能神经元丢失的可能机制.方法 建立PD小鼠模型,观察小鼠行为学变化;免疫组化和免疫印迹法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、iNOS和P-ERK1/2的阳性细胞数和蛋白表达水平的变化,并观察给予人参皂甙Rg1(Rg1)对上述变化的影响.结果 模型组小鼠出现典型PD行为学症状.在MPTP第5次注射后7 d,与对照组相比黑质区TH阳性神经元数量显著丢失77%(P<0.01),中脑黑质TH蛋白印记表达水平显著降低约75%(P<0.01);Rg1预处理后,PD小鼠行为学症状减轻,与对照组相比TH上述指标分别下降约44%和41%(P<0.01).MPTP第3次注射后1.5 h P-ERK1/2核内始见,至6 h iNOS有较高表达.Rg1预处理可显著阻抑P-ERK1/2和iNOS的表达(P<0.01).Spearman相关性分析,P-ERK1/2和iNOS的表达呈显著正相关(P<0.01).结论 P-ERK1/2可能通过捌控iNOS表达进而导致PD黑质DA能神经元丢失,Rg1可能阻抑此通路以保护DA能神经元.     

2,3-吲哚醌对小鼠PD模型黑质BAX基因表达影响

目的探讨2,3吲哚醌（isatin,ISA）对MPTP制备的C57BL/6J小鼠帕金森病（PD）模型黑质中BAX基因表达影响。方法 C57BL/6J小鼠随机分为五组,空白对照组,MPTP损伤组,ISA低（50 mg/kg,ig）、中（100 mg/kg,ig）、高剂量（200 mg/kg,ig）预处理＋MPTP组。结果与对照组相比,MPTP损伤的小鼠黑质中BAX免疫反应阳性表达增加（P〈0.01）;在ISA 100 mg/kg和200 mg/kg预处理组与MPTP损伤组相比,黑质中BAX免疫反应阳性表达显著降低（P〈0.05）。结论表明ISA对MPTP造成的PD小鼠有明显的保护作用。     

灵芝孢子油对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤的保护作用

[目的]探讨长白山地产灵芝孢子油对四氯化碳所致化学性肝损伤模型小鼠肝脏的保护作用.[方法]取18～22 g昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为5个组,即空白对照组、模型对照组、灵芝孢子油大(1.00 g/kg)、中(0.33 g/kg)、小(0.17 g/kg)剂量组,连续灌胃给药2周.第14天隔夜禁食16h后,腹腔注射给予...     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑NF-κB免疫反应性影响及行为学观测

目的观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑核转录因子-κB(NF-κB)免疫反应性的影响并进行行为学观测。方法用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的潜伏期及持续时间,采用免疫组织化学法检测脑NF-κB/P65的蛋白表达。结果大鼠海马和皮质区每高倍视野(×400)下NF-κB/65蛋白表达模型组明显高于对照组(P<0.01);在造模第17、21、25天时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长(P<0.05或P<0.01),海马和皮质区NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论NF-κB可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白表达,抑制免疫炎症反应,降低神经系统兴奋性,对神经细胞具有保护作用。     

黑质自身抗体在MPTP致小鼠帕金森病发病中的作用

目的探讨MPTP致小鼠帕金森病PD发病中自身抗体是否存在及可能的作用。方法使用MPTP亚急性模型建立PD模型。采集建模后小鼠血清与自身黑质蛋白质相互作用,通过免疫组织化学、酶链免疫吸附测定（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）等方法探讨该PD模型有无自身抗体的存在,并初步推断自身抗体是否参与PD发病过程。结果 MPTP致PD模型中,血清和自身黑质的结合性增加。结论 MPTP致PD模型中,血清中可能存在针对黑质的自身抗体,参与了PD的发病过程。     

MPTP对快速老化小鼠黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞的激活

目的:探讨MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone8,SAMP-8)黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞激活与损害的关系。方法:57只健康雄性12周龄SAMP8小鼠,随机分为生理盐水对照组和MPTP组,每组再分别于第1次给药后6 h、24 h、3 d和8 d四个时间点处死小鼠,每个时间点6~9只。SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20 mg·kg-1,1次/2 h,注射4次,观察各时间点小鼠的自主活动;免疫组织化学染色检测各时间点黑质TH+神经元数量、纹状体TH免疫反应性及小胶质细胞的状态;HPLC技术检测纹状体DA含量。结果:第3次注射后小鼠出现明显活动减少,并于第1次给药后48 h恢复近正常水平。与对照组相比:MPTP组黑质TH+神经元数目于第1次注射后6 h、24 h、3 d、8 d分别减少7.06%(P=0.235)、12.79%(P<0.05)、22.49%(P<0.01)、42.39%(P<0.001),两个时间点之间比较3 d与8 d有统计学差异(P<0.05);与对照组相比,MPTP组纹状体TH免疫反应性(COD值)减低,6 h (P<0.05)、24 h (P<0.01)、3 d (P<0.001)、8 d (P<0.001),两个时间点之间比较24 h与3 d比较差异有统计学意义(P<0.05);纹状体多巴胺含量6 h降低79.09% (P<0.001),24 h降低80.3% (P<0.001),3 d降低86.6% (P<0.001),8 d降低81.0% (P<0.001),但24 h、3 d、8 d比较无统计学差异。纹状体小胶质细胞于给药后24 h免疫反应性明显增强,3 d明显激活,8 d激活现象明显回落。结论:MPTP可导致SAMP8小鼠黑质纹状体系统的急性损害,出现自主活动减少、黑质多巴胺能神经元减少及纹状体多巴胺能纤维脱失,多巴胺含量降低;小胶质细胞激活可能与MPTP-SAMP8小鼠的黑质纹状体系统损伤有关。     

人参皂苷Rg1拮抗MPTP诱导小鼠黑质中铁增高的作用

目的研究人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,Rg1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元变性的保护作用及其可能机制。方法 C57BL6小鼠随机分为正常对照组(NS,i.p.)、MPTP组(30 mg/kg×5 d,i.p.)及Rg1(5 mg/kg×8 d,i.p.)预处理组。应用免疫组织化学法、Perls’铁染色、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以及图像分析等技术观察黑质内多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)免疫反应活性变化、铁染色阳性细胞数的变化和DAT mRNA的表达水平的变化,用高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠纹状体内DA及其代谢物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(homovanillic acid,HVA)含量。结果与正常对照组相比,MPTP组黑质内铁染色阳性细胞数增高以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显减少;与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内铁染色阳性细胞数降低以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显增加(P<0.01)。与正常对照组相比,MPTP组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达明显降低(P<0.01);与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达有所增高(P<0.05)。结论 Rg1对MPTP致PD小鼠黑质DA能神经元的损伤具有一定的保护作用,其机制可能与Rg1能通过降低MPTP诱导的铁过多聚积从而拮抗氧化应激反应有关。     

C57 BL/6 J小鼠黑质小胶质细胞的增龄性变化

目的 观察C57BL/6J小鼠相关代谢指标和黑质小胶质细胞增龄性变化规律,探讨帕金森病临床前期老化和炎症的相互关系.方法 40只健康雄性C57/6J小鼠,分为青年组(3个月)、中年组(9个月)、老年组(16个月)和造模组(16个月),每组10只.造模组采用慢性给药(MPTP)5周.测量小鼠体质量、饮食、饮水等代谢指标.通过免疫组织化学方法检测黑质区酪氨酸羟化酶(TH)和小胶质细胞的表达,光镜下分析比较4组小鼠黑质区激活型小胶质细胞数量及其占小胶质细胞总量的比例.结果 造模组的饮食、饮水量和体质量相比于其他组明显降低(P<0.05).小鼠黑质激活型小胶质细胞计数和所占小胶质细胞总量的百分比分别为8.12±3.54和(9.3±1.21)%(青年组);13.19±3.86和(15.5±1.47)%(中年组);19.32±3.07和(20.3±1.53)%(老年组);28.16±3.33和(29.5±1.29)%(造模组),差异有统计学意义(P<0.05).结论 小鼠的代谢指标增龄性衰退,黑质区激活型小胶质细胞数增龄性增多,造模组激活型小胶质细胞数占小胶质细胞总量比例最高.