Mechanisms of the therapeutic effect of astragalus membranaceus on sodium and water retention in experimental heart failure.

OBJECTIVE: To investigate the therapeutic effect of Astragali on sodium and water retention in aortocaval fistula-caused experimental congestive heart failure and its involved mechanisms. METHODS: In aortocaval fistula-caused chronic (5 wk), heart failure rats treated with and without Astragali 1.0 g/day intraperitoneally, changes of cardiac and renal function, renal response to atrial natriuretic peptide (ANP) were examined. Dot blot analysis was used to determine the effect of Astragali on hypothalamic arginine vasopresin (AVP) mRNA expression, and mRNA expressions of aortic and renal AVP V1a receptor, renal AVP V2 receptor and aquaporin-2 (AQP2) were simultaneously detected by RT-PCR method. RESULTS: Rats with aortocaval fistula impaired cardiac and renal functions evidenced by higher right atrial pressure (RAP), left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP), lower + dP/dtmax of left ventricle, glomerular filtration rate (GFR), renal plasma flow (RPF), urine volume (UV), urinary sodium excretion (UNaV) and free water clearance (CH2O) compared with sham-operated control (P < 0.05). There was no change in serum sodium, hematocrit and plasma osmolality. Astragali could remarkably improve the cardiac and renal functions. Dot blot analysis demonstrated upregulated hypothalamic AVP mRNA expression in this experimental heart failure. The AVP V1a receptor mRNA level of aortic arch and renal medulla were reduced, while in renal cortex it was elevated. The mRNA expressions of AVP V2 receptor and AQP2 were increased in renal cortex while decreased in medulla. Astragali could partially or completely correct those abnormal mRNA expressions. Analysis on plasma atrial natriuretic peptide (ANP), urinary cyclic guanidino monophosphate excretion (UcGMP V), urinary cyclic guanidino monophosphate excretion/plasma atrial natriuretic peptide (UcGMP V/pANP), and further correlation and linear regression analysis between UcGMP V and plasma ANP showed that there was blunted renal response to ANP in heart failure rat, and astragali could improve the renal reaction to ANP significantly. CONCLUSION: Chinese herb, astragali have therapeutic effects on sodium and water retention in aortocaval fistula-induced heart failure, the mechanisms of which might be the improvement of cardiac and renal functions, partly correction of abnormal mRNA expressions of AVP system and AQP2, and amelioration of blunted renal response to ANP.     

缬沙坦对阿霉素肾病大鼠白细胞介素8的影响

目的：观察血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦对肾病综合征大鼠的干预保护作用。方法：建立大鼠阿霉素肾病模型，应用放射免疫分析法检测血浆及肾组织白细胞介素8含量。结果：阿霉素肾病大鼠血浆白细胞介素8含量有所增高，血管紧张素受体拮抗剂对肾病综合征大鼠血浆及肾组织白细胞介素8含量均无明显影响。结论：白细胞介素8通过细胞因子间的相互作用参与肾病的形成、发展；血管紧张素受体拈抗剂缬沙坦对肾病综合征大鼠的干预保护作用似与改变局部白细胞介素8含量无关。     

高脂饮食对阿霉素肾病大鼠肾小球系膜基质的影响

目的 探讨高脂饮食对阿霉素肾病大鼠肾小球硬化的影响。方法 应用病理、免疫组化及分子生物学方法结合图像分析技术,观察高脂饮食对大鼠血胆固醇、尿蛋白、肾脏病理形态学改变以及肾小球系膜基质产生的影响。结果 在非肾病组及肾病组,高脂饮食大鼠的血胆固醇较标准饮食大鼠明显升高,分别为（ 2.2± 0.3） g/L vs(0.9± 0.1)g/L(P     

Arginine Vasopressin-Aquaporin-2 Pathway-Mediated Dehydration Effects of Electroacupuncture in Guinea Pig Model of AVP-Induced Endolymphatic Hydrops

Objective: To investigate the effects of electroacupuncture (EA) on endolymphatic hydrops (EH) and the regulation of arginine vasopressin (AVP)-aquaporin-2 (AQP2) pathway in guinea pigs. Methods: EH was induced in male guinea pigs by an intraperitoneal injection of AVP. For the treatment, EA was delivered to Baihui (GV 20) and Tinggong (SI 19) acupoints, once per day for 10 consecutive days. In histomorphological studies, cochlear hydrops degree was evaluated by hematoxylin-eosin (HE) staining, and then the ratio of scala media (SM) area to SM + scala vestibuli (SV) area (R value) was calculated. In mechanical studies, a comparison of plasma AVP (p-AVP) concentrations, cyclic adenosine monophosphate (cAMP) levels, vasopressin type 2 receptor (V2R) and AQP2 mRNA expressions in the cochlea were compared among groups. Results: EA significantly reduced cochlear hydrops in guinea pigs (P=0.001). EA significantly attenuated the AVP induced up-regulation of p-AVP concentrations (P=0.006), cochlear cAMP levels (P=0.003) and AQP2 mRNA expression (P=0.016), and up-regulated the expression of V2R mRNA (P=0.004) in the cochlea. Conclusion: The dehydrating effect of EA might be associated with its inhibition of AVP-AQP2 pathway activation.     

海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA表达的影响

目的:研究海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白及mRNA表达的影响。方法:将54只阿霉素肾病模型大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、海昆肾喜低剂量组及高剂量组。实验第10周观察各组大鼠24 h尿蛋白定量,肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平及肾组织形态学变化;应用免疫组化及原位杂交方法分别观察PDGF-BB蛋白及mRNA在肾组织中的表达。结果:海昆肾喜低剂量组及高剂量组24 h尿蛋白定量和SCr、BUN水平较模型组均明显降低。PDGF-BB蛋白及mRNA的表达见于肾小管上皮细胞胞浆及肾小球系膜细胞,其表达较模型组显著减少。结论:海昆肾喜能抑制阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA的表达,这可能是该药物防治肾小球硬化的作用机制之一。     

姜黄素对阿霉素肾病大鼠NADPH氧化酶和nephrin表达的影响

目的通过观察姜黄素对阿霉素肾病大鼠肾组织中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）．氧化酶与肾小球裂隙膜分子nephrin表达的影响,探讨姜黄素治疗肾病综合征的作用机制。方法将Sprague．Dawley大鼠50只随机分为5组（正常对照组、模型组、姜黄素低剂量干预组、姜黄素高剂量干预组和波尼松干预组）。除正常组大鼠外,各组大鼠尾静脉一次性注射阿霉素（5mg／kg）造模。分别在建模后第28天收集24h尿液,第29天处死所有大鼠,取肾脏组织,应用化学比色法检测肾组织氧化应激指标丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）,实时荧光定量聚合酶链式反应法和蛋白质印迹法检测肾组织NADPH氧化酶活性的关键亚基p47phox和neprhinmRNA与蛋白的表达变化。结果与正常对照组相比,模型组大鼠24h尿蛋白量、肾组织MDA含量明显增加,肾组织p47phoxmRNA和蛋白表达明显增加,SOD活性明显下降;肾组织中nephrinmRNA和蛋白表达均明显减少。与模型组比较,姜黄素干预组尿蛋白、肾组织MDA明显减少,SOD活性明显增加。姜黄素干预组可显著下调p47phoxmRNA和蛋白表达;姜黄素干预组nephrinmRNA和蛋白表达均明显增加。结论姜黄素能减轻肾小球滤过屏障损伤,降低尿蛋白,抑制肾组织p47ph“表达和增加nephrin表达可能是其作用机制之一。     

卡托普利和洛沙坦对大鼠肾脏水通道蛋白-2mRNA和尿液水通道蛋白-2的影响

目的 探讨卡托普利和洛沙坦对正常大鼠肾脏水通道蛋白-2(AQP2)mRNA表达的影响及尿液水通道蛋白-2浓度的改变。方法 30只健康大鼠随机分成3组:正常对照组,卡托普利组,洛沙坦组。经用药后观察血Na⁺、尿量以及尿渗量水平,用RT-PCR半定量检测肾内髓质AQP2及血管加压素2型(V₂)受体mRNA水平,用酶联免疫吸附测定法检测尿液AQP2浓度。结果 卡托普利组与洛沙坦组大鼠尿量均较正常组显著增多,卡托普利组尿渗量低于洛沙坦组和正常组,但尿液中AQP2浓度却高于洛沙坦组和正常组。RT-PCR半定量显示卡托普利组AQP2mRNA较正常组显著降低(P<0.05),V₂受体mRNA没有显著差别。结论 卡托普利可以抑制正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA的表达,同时促进肾内AQP2经尿液排出。     

缬沙坦对实验性肾病肾组织内皮素及其受体基因表达的影响

目的 观察血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦(valsartan)对阿霉素肾病大鼠血浆及肾组织内皮素含量以及肾组织内皮素受体基因表达的影响。方法 SD大鼠经阿霉素诱导建立肾病综合征模型，设肾病模型组、valsartan治疗组、苯那普利(benazepril)治疗组及正常对照组。28天后比较各组大鼠间血浆及肾组织内皮素含量；应用RT-PCR技术检测大鼠肾组织内皮素-1(ET-1)及其A、B两型受体基因表达情况。结果 肾病综合征大鼠ET-1水平明显增加，肾脏内皮素A型受体表达显著增多；valsartan及benazepril治疗可使ET-A型受体表达明显下降，4组ET-B型受体mRNA表达无显著差异。结论 在肾病综合征状态下内皮素系统活性明显增强，血管紧张素受体拮抗剂valsaxtan可下调ET-A型受体mRNA表达，减轻ET-1在肾病综合征发生、发展中的作用。     

卡托普利和洛沙坦对大鼠肾脏水通道蛋白-2 mRNA和尿液水通道蛋白-2的影响

目的 探讨卡托普利和洛沙坦对正常大鼠肾脏水通道蛋白-2(AOP2)mRNA表达的影响及尿液水通道蛋白-2浓度的改变。方法 30只健康大鼠随机分成3组；正常对照组，卡托普利组．洛沙坦组。经用药后观察血Na^+、尿量以及尿渗量水平，用RT-PCR半定量检测肾内髓质AOP2及血管加压素2型(V2)受体mRNA水平，用酶联免疫吸附测定法检测尿液AOP2浓度。结果 卡托普利组与洛沙坦组大鼠尿量均较正常组显著增多，卡托普利组尿渗量低于洛沙坦组和正常组，但尿液中AQP2浓度却高于洛沙坦组和正常组。RT-PCR半定量显示卡托普利组AOP2 mRNA较正常组显著降低(P<0．05)，V2受体mRNA没有显著差别。结论 卡托普利可以抑制正常大鼠肾内髓质AOP2 mRNA的表达，同时促进肾内AOP2经尿液排出。     

温阳利湿通络方对阿霉素肾病大鼠肾组织ET-1 VEGF及TGF-β1的影响

目的：基于＂肾脾阳虚,湿瘀阻络＂是肾病综合征（Nephrotic syndrome,NS）基本病机的认识,以＂温阳利湿通络方＂治疗NS,是临床实践有效的方法,通过观察该方改善阿霉素肾病（Adriamycin nephropathy,AN）大鼠蛋白尿、血脂的作用,并检测内皮素1（Endothelin-1,ET-1）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）、转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）的水平,初步探讨其作用机理。方法：采用阿霉素肾病大鼠模型,分别用＂温阳利湿通络方＂和盐酸贝那普利干预治疗4周。生化法测定用药后各组动物24h尿蛋白定量（24h UPQ）、血浆胆固醇、甘油三酯。免疫组化法检测肾组织的ET-1、VEGF及TGF-β1的水平。结果：＂温阳利湿通络方＂组可明显降低AN大鼠24h尿蛋白定量、血浆胆固醇、甘油三酯（与模型组比较,P〈0.05）,并使肾组织的ET-1、VEGF及TGF-β1水平下降（与模型组比较,P〈0.05）。结论：温阳利湿通络方可降低AN大鼠的血脂和蛋白尿水平,其机理与下调了肾组织ET-1、VEGF及TGF-β1的水平有关。     

肾上腺髓质肽在大鼠足细胞损伤模型中调控肾小球壁层上皮细胞分化

 目的  探讨肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)是否通过调控肾小球壁层上皮细胞(parietal epithelial cells,PECs)分化参与对大鼠足细胞损伤模型的保护作用及可能的分子机制。方法  雄性SD大鼠经一次性腹腔注射嘌呤霉素氨基核苷(puromycinaminonucleoside,PAN) (15 mg/100 g体重)建立足细胞损伤模型,随机分为模型组和治疗组,治疗组每天经尾静脉注射AM 蛋白质(6.6 μg/100 g体重)。分别在首次注射PAN后7、14 和21 天,观察大鼠尿蛋白水平及肾组织形态改变,并经免疫组化染色、双重或三重免疫荧光染色,检测足细胞数量、肾小球AM的表达、PECs分化以及Notch3表达变化。结果  大鼠 PAN肾病模型表现为大量蛋白尿、肾小球节段性损伤、足细胞计数显著减少。AM/claudin-1双重荧光染色显示PECs中AM表达显著增强且出现于毛细血管袢内。AM治疗可改善大鼠尿蛋白及肾组织形态,减少足细胞丢失,14天时显著增加共表达PECs(claudin-1)及足细胞特异性标志蛋白(WT-1和synaptopodin)的细胞数。Ki67与claudin-1共定位表达于PECs,但未与WT-1共表达。AM显著抑制由PAN所致的Notch3表达。结论  在大鼠PAN足细胞损伤模型中,PECs中AM表达上调提示机体的一种代偿性保护机制,AM可能通过下调Notch3信号通路而促进PECs分化,参与其促进损伤后修复的作用。     

健脾清化方对阿霉素肾病大鼠免疫炎症损伤的作用机制

目的 从细胞免疫介导的炎症损伤角度,探讨健脾清化方对阿霉素致局灶节段硬化（focal segmental glomurular sclerosis,FSGS）模型大鼠FSGS的影响。方法 左侧肾切除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质纤维连接蛋白（FN）mRNA、Ⅲ型胶原（Col Ⅲ）mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）6表达的影响。结果 健脾清化方能明显降低模型鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质FN mRNA、Col Ⅲ mRNA、TNF-α、IL6水平。结论 健脾清化方对阿霉素肾病模型大鼠肾脏FSGS有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方抑制细胞免疫介导的炎症损伤有关。     

大鼠睾丸AQP7、AQP8表达随龄变化及人参二醇皂苷对其表达的影响

目的：探讨水通道蛋白7和8（aquaporin 7,AQP7;aquaporin 8, AQP8）的表达与睾丸生精功能的关系,以及人参二醇皂苷（PDS）对睾丸水通道蛋白表达的影响。 方法：4、12周龄Wistar大鼠分为盐水对照组(Con组)（n=6）和PDS腹腔注射组(PDS组)(n=6)。PDS组每日给予PDS腹腔注射（25 mg•kg^-1•d^-1,1　mL）,Con组注射等体积生理盐水,给药2周。采用半定量RT-PCR和Western blotting比较睾丸AQP7与AQP8的mRNA和蛋白质表达水平。 结果：随增龄睾丸AQP7和AQP8 mRNA和蛋白表达明显增高;4周龄大鼠PDS腹腔注射2周后睾丸AQP7和AQP8表达增强,PDS对4周龄大鼠睾丸AQP7蛋白质表达有明显的上调作用,12周龄大鼠接受14 d PDS腹腔注射后其AQP8蛋白质表达水平略有下降。 结论：睾丸AQP7和AQP8的表达随性成熟明显增高;PDS对睾丸水通道表达有明显的调节作用。     

脂肪炎症因子在肾病综合征大鼠肾组织的变化及意义

目的: 观察脂肪炎症因子(Apelin)在阿霉素肾病大鼠模型肾组织中的表达,探讨Apelin与肾病综合征中蛋白尿及高脂血症之间的关系。方法: Wistar大鼠40只,随机分为肾病组32只和正常对照组8只,尾静脉单次注射阿霉素5 mg/kg建立肾病模型,测定24 h尿蛋白排泄量、血清中胆固醇含量,应用免疫组织化学法观察肾皮质中Apelin表达变化,并对Apelin表达与尿蛋白、胆固醇水平进行相关性分析。结果: 肾病组大鼠24 h尿蛋白排泄量、胆固醇含量、肾组织中Apelin蛋白表达量与正常对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01),肾病组大鼠肾小球系膜基质增生明显,且Apelin蛋白表达与24h尿蛋白排泄量、血清胆固醇含量呈正相关关系(P < 0.05)。结论: Apelin在肾组织中的表达主要位于肾小球血管袢,随着尿蛋白量、胆固醇水平的增加,肾组织中Apelin蛋白水平亦增加。尿蛋白量及血脂水平与Apelin表达密切相关。     

肾康灵干预阿霉素肾病大鼠NF-kB的实验研究

观察益肾活血中药肾康灵对阿霉素肾病大鼠（AN）的干预作用及与核因子（NF-kB）的关系，探讨小儿原发性肾病综合征（PNS）的发病机理及益肾活血中药干预治疗的可能机制。用阿霉素（hDR）诱导大鼠类似于人类微小病变型肾病（MCD）模型，用强的松加中药肾康灵治疗，并设对照组。结果：AN鼠治疗前NF-kB活性显著增强（P〈0．01），尿蛋白显著增多，Alb显著下降，Ch和TG显著升高，肾脏病理损害明显加重；治疗组AN鼠在中药肾康灵加强的松干预下，上述指标都明显改善（P〈0．05或P〈0．01），肾脏病理损害明显减轻。结论：益肾活血中药肾康灵加强的松能显著改善AN鼠的肾虚血瘀证表现，降低NF—kB活性。NF—kB可作为中医肾虚血瘀证诊断和病情预后转归判断的客观指标。     

产前使用地塞米松对坏死性小肠结肠炎新生鼠Toll样受体4表达的影响

目的观察产前使用地塞米松(dexamethasone,DEX)对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocoli-tis,NEC)发生率及肠道Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)表达的影响,探讨其对NEC的保护作用及可能的机制。方法实验分为正常对照组、产前地塞米松干预组(DEX组)、产前生理盐水干预组(normal saline,NS组)3组,于孕16、17、18 d时DEX组孕鼠肌肉注射DEX 0.5 mg/(kg.d),NS组每天注射NS 0.3 ml。DEX组及NS组所生新生鼠建立NEC动物模型。正常对照组不予处理。于第5天处死新生鼠,观察近回盲部肠组织病理变化并做评分;免疫组化法检测TLR4蛋白的表达;其余小肠部分Q-PCR法检测TLR4 mRNA的表达。结果与NS组相比,DEX组新生鼠NEC发生率明显降低(P<0.01)。正常对照组未出现NEC症状,NS组新生鼠出现典型的NEC症状,DEX组NEC症状比NS组出现得更晚、更轻;与正常对照组相比,DEX组和NS组肠组织病理学评分及TLR4表达显著增高(P<0.05);与NS组相比,DEX组肠组织病理学评分及TLR4表达显著降低(P<0.05)。结论产前使用DEX对NEC大鼠具有保护作用,其机制可能是通过降低TLR4的表达从而发挥抗炎效应。     

充血生心力衰竭大鼠肾脏Aquaporin2水通道蛋白基因的表达

目的 探讨Ａｑｕａｐｏｒｉｎ２水通道蛋白（ＡＱＰ２）基因与心力衰竭时水潴留的关系。方法 雄性ＳＤ大鼠（２００－２５０ｇ）分别行左冠状动脉结扎术。５周后分别进行颈动脉静脉插管。测量平均动脉压和心排血量。根据左心室心肌梗塞面积（ＬＶＭＩ）的不同,将冠状动脉结扎大鼠分为两组,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ测定肾脏ＡＱＰ２基因的ｍＲＮＡ和蛋白质表达的１．３８５０．０２３,１．５２     

鲫鱼汤治疗大鼠阿霉素肾病的疗效观察

目的观察鲫鱼汤对阿霉素肾病的治疗效果。方法用阿霉素尾静脉注射法制造大鼠肾病模型,用鲫鱼汤对该疾病模型进行治疗观察。结果鲫鱼汤对降低大鼠阿霉素肾病的尿蛋白、血肌酐和尿素氮均有明显作用。结论鲫鱼汤对大鼠阿霉素肾病有较好的疗效。     

EFFECT OF HIGH—LIPID DIET ON GLOMERULAR MESANGIAL MATRIX IN ADRIAMYCIN—INDUCED NEPHROTIC RATS

INTRODUCTIONSince１９８０＇s，increasingexperimentalandclinicalevidencehassuggestedthatlipidsareimportantmodula－torsinprogressivekidneydisease．Bothqualitativeandequantitativeabnormalitiesinlipidprofileshavebeennotedinpatientswithprimaryandsecondaryrenal