动态联合检测抗HCV与HCV—RNA诊断丙型肝炎的意义

自从发现并应用融合蛋白C_(100—3)诊断丙型肝炎以来,多种特异性诊断方法相继应用,但目前临床常用的方法仍为抗HCV及PCR方法检测HCV—RNA,由于丙型肝炎病毒(HCV)在体内复制的阶段性及抗HCV产生较晚,部分患者体内抗HCV水平较低,使上述两种方法的敏感性和特异性受到影响,本文对两种方法进行动态观察,以期阐明各自的变化,指导临床应用。     

化学发光法检测HCV核心抗原在丙型肝炎初期筛查中的应用研究

目的探讨采用化学发光法(CLIA)检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、抗体(HCV-Ab)及HCV-RNA在丙型肝炎初期筛查中的价值。方法应用CLIA分别检测HCV-cAg和HCV-Ab,以HCVRNA定量检测结果作为参照,分别对220例标本进行检测,并对结果进行统计分析。结果 75例疑似人群的筛查标本中HCV-Ab阳性15例(20%)、HCV-cAg阳性6例(8.0%)、HCV-RNA阳性7例(9.3%)。70例确诊组标本中HCV-Ab阳性66例(94.3%)、HCV-cAg阳性62例(88.6%)、HCV-RNA阳性60例(85.7%)。75例健康人群的筛查标本中HCV-Ab阳性5例(6.7%)、HCV-cAg阳性2例(2.7%)、HCV-RNA阳性0例。HCV-Ab和HCV-cAg联合检测与HCV-RNA检测阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论在使用CLIA进行丙型肝炎早期筛查时,建议进行HCV-cAg与HCV-Ab联合检测。若需要确诊建议结合临床表现和作进一步的HCV-RNA定量检测。     

HCV核心抗原酶联免疫检测与HCV—RNA定量检测敏感性的比较

[目的]比较ELISA法测定总HCV—cAg与荧光定量PCR法测定HCV—RNA两种检测方法对诊断HCV感染的敏感性,分析HCV—cAg ELISA法诊断试剂的重要意义。[方法]ELISA法测定血清样本中的HCV抗体,改进型ELISA法测定血清样本中的HCV—cAg,实时荧光定量PCR法测定血清样本中的HCV—RNA,阳性样本经重复实验确认。[结果]通过用HCV抗体检测试剂对门诊病人或献浆员进行筛查,获得HCV抗体阳性血清样本264例。对这些病例别进行ELISA法测定总HCV—cAg实验和荧光定量PCR法测定HCV—RNA实验,测到HCV—cAg阳性病例101例,HCV—RNA阳性病例115例。经统计学分析,两种检测方法的敏感性差别不太大（0．01〈P〈0．05）。[结论]HCV—cAgELISA法检测和HCV—RNA定量检测具有相近的敏感性,日存某种稗序上HCV—cAg ELISA法榆测可以作为HCV—RNA定量榆测的有效替代。     

丙型肝炎核心抗原检测的临床意义

目的应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙型肝炎病毒核心抗原检测的意义。方法采用HCV-cAg试剂盒及HCV-Ab试剂盒,对200例来自手术前筛查的血清样本和36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCV-RNA证实。结果 200例术前筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性3例,其中HCV-RNA阳性1例;36例丙型肝炎或疑似丙型肝炎患者HCV-Ab全部阳性,其中检出HCV-cAg阳性21例,HCV-RNA阳性24例。HCV-cAg与HCV-RNA符合率为87.5%(21/24)。结论 HCV-cAg检出时间早于HCV-Ab,对临床样本同时进行丙型肝炎病毒核心抗原和抗体的ELISA检测,能够明显提高丙型肝炎诊断符合率。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测在丙型肝炎筛检中的应用

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)对丙型肝炎(简称丙肝)筛查的意义。方法收集2014年10月至2015年10月8 000例门诊及住院患者,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCV-cAg、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab),并对HCVcAg或HCV-Ab阳性标本采用聚合酶链反应(PCR)法检测HCV-RNA进行确诊。结果以HCV-cAg或HCV-Ab阳性为标准,从8 000例血清样本中初步筛查出阳性样本82例,经HCV-RNA确证,其中HCV-RNA阳性73例,阴性9例,HCV-cAg的灵敏度及特异度分别为45.83%和99.98%,HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为94.44%和99.90%,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为100.00%和99.86%。结论在丙肝筛检工作中,HCV-cAg与HCV-Ab二者有互补性,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab有助于提高HCV筛查率。     

HCV-IgG、HCV-cAg与HCV-RNA对丙型肝炎诊断的评价

目的评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-IgG)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)3种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的意义。方法收集84例丙型肝炎疑似患者和87例健康对照者血清,采用ELISA法检测HCV-cAg和HCV-IgG,实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测HCV-RNA。结果 84例丙型肝炎疑似患者中HCVIgG阳性率为84.5%,HCV-cAg阳性率为13.1%,HCV-RNA阳性率为52.4%;71例HCV-IgG阳性患者中HCV-RNA阴性35例,假阳性率为49.3%,11例HCV-cAg阳性患者中HCV-RNA阴性5例,假阳性率为45.5%;44例HCV-RNA阳性的丙型肝炎确诊患者中HCV-IgG假阴性率为18.2%,HCV-cAg假阴性率为86.4%;HCV-cAg和HCV-IgG联合检测的假阴性率为13.6%,真阳性率为100.0%。结论 HCV-cAg和HCV-IgG在丙型肝炎的实验室诊断中均存在一定的假阴性和假阳性,将二者联合检测或在必要时与HCV-RNA三者联合检测可降低漏诊率。     

HCVRNA定量及HCV核心抗原和丙氨酸氨基转移酶结果分析

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量检测结果与HCV核心抗原及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相关性。方法收集涪陵监狱卫生所94例住院和门诊患者血清,采用逆转录聚合酶链反应荧光探针法定量检测标本中的HCV RNA,同时采用酶联免疫吸附试验检测HCV核心抗原,采用全自动生化分析仪检测ALT水平。结果 94例样本中HCV RNA阳性率为56.4%(53/94),HCV核心抗原阳性率为53.2%(50/94),经统计学分析,两种方法的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),符合率为84.9%(45/53);ALT异常率为62.3%(33/53),随着HCV RNA含量的升高而增加。结论 HCV RNA定量检测结合HCV核心抗原及ALT检测,可帮助临床了解HCV在体内的复制水平及肝脏的炎性反应状态,以指导临床用药及疗效观察。     

丙型肝炎病原学不同检测方法的临床应用价值对比分析

目的探讨抗体、抗原及核酸检测在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法收集2012年1月到2013年12月珠海市香洲区人民医院筛查抗-HCV抗体阳性标本48份。用3种抗体试剂、2种抗原试剂及HCV-RNA复核检测结果。结果复核阳性丽珠37份,科华36份,新创36份,莱博21份,康润18份,HCV-RNA 28份。3种抗体试剂复核均阴性的10份标本中检出HCV-RNA阳性1份,莱博抗原阳性3份,康润抗原阳性1份。3种抗体灵敏度均为96.4%,阳性预测值为72.9%~75.0%;2种抗原试剂灵敏度分别为40.0%和83.3%,阳性预测值分别为57.0%和83.3%。结论丙型肝炎病毒抗体检测具有较高的诊断灵敏度,但诊断特异性较低,对抗-HCV抗体阳性标本采用抗体加抗原模式进行复核对丙型肝炎诊断具有重要的价值,对有疑问的标本再用HCV-RNA进行确证,可预防误诊、漏诊。     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCV RNA存在情况及其临床意义。方法 应用套式PCR检测46例急性丙型肝炎(丙型肝炎以下简称丙肝)和42例慢性丙肝患者血清和PBMC中HCV RNA.结果 慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于急性丙肝患者(P<0.001);急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于ALT正常的抗-HCV阳性者(P<0.001);2例患者血清中HCV RNA阴性,PBMC中可测及,12例患者血清抗-HCV阴性,而血清HCV RNA阳性。结论 血清HCV RNA检测有助于抗-HCV阴性丙肝的诊断和早期诊断;丙肝的肝损害可能与HCV RNA血症有关;PBMC中HCV感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用,PBMC中可贮存HCV RNA。     

HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA联合检测的临床价值

目的评价丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)以及HCV-RNA联合检测在HCV诊断中的应用价值。方法采用ELISA法对2 023例输血和手术前住院患者的血液标本进行HCV-Ab和HCV-cAg的测定,并对阳性标本采用RT-PCR法进行HCV-RNA的测定。结果 2 023例筛查标本中HCV-Ab(+)55例,其中HCV-cAg(+)30例,HCV-RNA(+)40例;1 968例HCV-Ab(-)的样本中检出HCV-cAg(+)9例,其中HCV-RNA(+)7例,HCV-cAg与HCVRNA符合率为83.0%(39/47)。结论 HCV-Ab检测结合HCV-cAg或者HCV-RNA检测可以有效缩短HCV的窗口期,降低漏检率。对于条件受限的基层医院HCV-cAg可以作为HCV-Ab常规检测的补充指标,提高检出率。     

丙型肝炎病毒载量与核心抗原及丙氨酸转氨酶检测的比较研究

目的研究实时荧光定量PCR定量检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA载量与HCV核心抗原和丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测的相关性及符合性。方法逆转录-PCR荧光探针法定量检测94例怀疑HCV感染患者的血清HCV RNA,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCV核心抗原,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果 94份样本中HCV RNA阳性率为56.4%(53/94),核心抗原阳性率为53.2%(50/94),经统计学分析,两种方法的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),符合率为84.9%(45/53);ALT异常率为62.3%(33/53),并随HCV RNA载量的升高而增加。结论 HCV RNA定量检测及HCV核心抗原检测结合ALT结果分析有助于临床了解HCV在体内的复制水平和肝脏的炎性反应状态,指导临床用药及观察疗效。     

丙型肝炎核心抗原与丙型肝炎抗体联合检测在丙型肝炎诊疗中的作用

目的了解丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)检测在丙型肝炎(简称丙肝)诊疗中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对400例健康体检者和600例邢台市人民医院住院患者进行HCV-cAg和丙肝抗体(抗-HCV)联合检测,HCV-cAg阳性标本用PCR荧光定量法检测HCV-RNA确认。结果 400例健康体检者6例(1.5%)抗-HCV阳性,0例HCV-cAg阳性;600例住院患者12例(2%)抗-HCV阳性,4例(0.67%)HCV-cAg阳性(含1例抗-HCV阳性),HCV-RNA确认3例,二者符合率为75%。结论 HCV-cAg较抗-HCV的检测将丙肝病毒感染的"窗口期"提前了,是HCV的早期诊断指标,HCV-cAg与抗-HCV联合检测有助于提高HCV的诊断率,对于HCV筛查有重要意义,是有效防范丙肝传播的重要手段,值得推广。     

HBV RNA检测在慢性乙型肝炎中的临床价值

目的对检测乙型肝炎病毒(HBV)RNA的方法进行评估,比较不同乙型肝炎血清标志物模式患者血清HBV RNA水平及其与HBV DNA之间的相关性。方法对HBV RNA检测方法的精度密、灵敏度及线性范围进行评估。收集81例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性慢性乙型肝炎患者的血清,同时检测HBV RNA、HBV DNA及乙型肝炎血清学标志物。按乙型肝炎e抗原(HBeAg)是否阳性、不同乙型肝炎血清标志物模式及是否接受抗病毒药物治疗分别分组。结果 HBV RNA高值、低值样本的批内精密度分别为0.56%、2.30%,批间精密度分别为3.13%、6.03%,均符合临床要求;对接近厂商声明的检测下限的样本重复检测20次,检出率为100%,灵敏度符合要求;在HBV RNA 1.0×10²～1.0×10⁷拷贝/mL范围内成线性。HBeAg阳性组血清HBV RNA和HBV DNA载量均高于HBeAg阴性组(P<0.01、P<0.05)。在不同乙型肝炎血清标志物模式中,HBeAg阳性且乙型肝炎e抗体(HBeAb)阴性患者血清HBV RNA载量最高(P...     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及初步应用

目的　研制丙型肝炎病毒核心抗原 (HCV cAg)ELISA检测试剂 ,用于诊断早期丙型肝炎。方法　用基因工程表达的HCV cAg ,免疫Balb/c小鼠 ,制备抗HCV cAg单克隆抗体 ,建立检测HCV cAg双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA) ;以此检测 12 5份抗 HCV、抗 HIV、抗 TP阴性 ,但单项ALT高的献血者血浆。结果　 12 5份单项ALT高的献血者血浆中检出 9份HCV cAg阳性。结论　HCV cAg双抗体夹心ELISA试剂 ,有望用于早期丙型肝炎诊断。     

Application of a new enzyme-linked immunosorbent assay for detection of total hepatitis C virus core antigen in blood donors

Recent studies have shown that total hepatitis C virus (HCV) core antigen, both free and antibody bound, is an accurate indirect marker of viral replication that can be used in clinical practice. The aim of the present study was to evaluate the performance of a new total HCV core antigen enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection and quantification of total core antigen in blood donors, testing positive for anti-HCV antibodies and for prospective low-risk population screening. A population comprising 257 samples, from blood donors detected reactive for anti-HCV antibodies [137 recombinant immunoblot assay (RIBA) positive and 120 RIBA indeterminate], were tested by using a new total HCV core antigen ELISA. HCV-RNA was quantified by using quantitative polymerase chain reaction (PCR) assays in all RIBA-positive samples and RIBA-indeterminate samples that were positive for the total core antigen. Specificity of the assay was studied in 1070 healthy blood donors negative for anti-HCV antibodies. Compared with quantitative PCR assays, the total HCV core antigen assay showed 97.37% sensitivity. The three HCV-RNA-positive samples, which tested negative for the total core antigen, had a low viral load (< 1.4 x 10(4) IU mL(-1)). All samples with more than 1.4 x 10(4) IU mL(-1) of viral RNA were positive for total core antigen, independent of the HCV genotype. Concentration of total core antigen correlated significantly with those of HCV-RNA (r = 0.614, P < 0.0001). Overall specificity in freshly collected blood donor specimens was 99.63%. Our data indicate that the total HCV core antigen ELISA has a sensitivity close to PCR assays in diagnosing HCV infection in blood donors with anti-HCV antibodies and shows an excellent specificity in volunteer donors. This assay, in combination with anti-HCV antibodies screening tests, could be an alternative to molecular assays for HCV infection screening in blood donors.     

血清转换样本丙型肝炎病毒核酸、核心抗原及抗体检测对比研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫诊断试剂检测早期HCV感染“窗口期”样本的可行性。方法用新研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫诊断试剂检测11份系列血浆转换样本的抗-HCV、HCV-cAg、HCV RNA,并与病毒核酸及抗体检测方法做对比研究。结果HCV-cAg较抗-HCV检出提前14~51d,平均32.7d;HCV RNA较抗-HCV检出提前19~51d,平均36.0d。结论HCV-cAg酶联免疫诊断试剂可用于HCV早期感染“窗口期”样本的检测,降低输血风险度。