心力衰竭大鼠肾脏α_1及β肾上腺素受体各亚型表达的改变

目的探讨大鼠心力衰竭时肾脏α_1肾上腺素受体(α_1-AR)和β肾上腺素受体(β-AR)各亚型表达水平的变化。方法选择雄性Wistar大鼠35只,随机分为对照组10只、假手术组10只,其余大鼠制作心肌梗死后心力衰竭模型,成功9只为模型组。取大鼠肾脏皮质,采用Western blot法分别测定各组大鼠α_1-AR亚型(α_(1)-AR、α_(1B)-AR、α_(1D)-AR)和β-AR亚型(β_1-AR、β_2-AR)表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01);各组大鼠α_(1B)-AR、α_(1D)-AR、β_2-AR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论心力衰竭时肾脏α_(1A)-AR和β_1-AR明显下调,可能与交感神经系统激活有关;而β_2-AR表达水平无明显变化,可能为代偿β_1-AR下调带来的不利影响,以维持肾脏有效灌注,保护肾脏功能。     

肾上腺素能β受体在去甲肾上腺素引起的心肌细胞离子泵损害中的作用研究

本文报告以去甲肾上腺素(NE)50μg/kg由家兔耳静脉注射,2分钟后致死。取左心室肌制备膜微粒体,测Na~+/K~+-ATP酶及Ca~(2+)-ATP酶活性,过氧化脂质(LPO)含量;取心尖部肌肉匀浆后提取及测定cAMP含量。结果,NE明显抑制二酶活性,P均<0.001,明显增加LPO及cAMP含量,P均<0.001。在注射NE前2分钟自耳静脉注射α受体阻滞剂酚妥拉明1mg/kg,或β受体阻滞剂心得静60μg/kg,或二者合用。结果示β受体阻滞剂明显阻抑NE效应,P<0.001或0.05;而α受体阻滞剂未显示阻抑作用,P均>0.05。结果提示,β受体在介导NE效应中占优势。     

老龄心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白变化的意义

无论是正常还是疾病状态,交感神经与心脏功能变化关系密切.老化过程(aging)改变交感神经系统(sympathetic nerve system,SNS)功能,并且心血管病发生率增高.SNS功能变化与心血管病间的关系一直是倍受关注的研究领域.心脏交感神经对心脏功能的调控作用--心脏的变时/变力调节是通过释放神经递质--去甲肾上腺素(norepinephrine,NE),NE与心脏β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)结合,并激活受体三个环节实现的.心脏交感神经突触前膜上的NE转运蛋白(norepinephrine transporter,NET)调控神经元释放到β-AR周围的NE浓度,对β-AR的表达和功能有重要影响[1～3],因此近年来逐渐受到关注.本文主要对老化过程心脏NET变化的有关研究结果作一简要综述.     

Dynamic changes of α-AR,β1-AR and β2-AR expression during hepatic fibrogenesis

Objective To investigate the dynamic changes of α-AR,β1-AR and β2-AR expression in hepatic fibrosis.Methotis Rat hepatic fibrosis model was established by bile duct ligation(BDL).HE and Masson staining were used to determine hepatic fibrosis levels.Immunohistochemistry was applied to detect α-sooth muscle actin(α-SMA),a marker of hepatic stellate cell(HSC)activation;Western blot and realtime RT-PCR were used to measure the dynamic changes of α-AR,β1-AR,β2-AR expression on protein and mRNA levels.respectively,during the development of hepatic fibrosis.Results(1)HE and Masson trichrome staining showed that the liver fibrosis modeIs were established successfully.(2)At 1,2,3,4 wk after BDL,α-SMA positive area density of the model group(10.58%±1.75%,24.1 4%±2.02%,29.74%±2.59%,34.28%±2.01%)was significantly higher than that of the sham operation group (4.12%±1.51%),P＜0.01.(3)The expression of α-AR,β1-AR,β2-AR protein and mRNA was increased with the development of the hepatic fibrosis(P＜0.05).(4)α-SMA expression Was positively associated with α-AR,β1-AR,β2-AR,r values were 0.564,0.753 and 0.606,respectively.Conclusions The expression of α-SMA is increased dramatically during the fibrosis,and is positively associated with the expression of α-AR,β1-AR and β2-AR.     

去甲肾上腺素对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨交感神经递质去甲肾上腺素（NE）对HSC细胞株（CSFC）增殖和凋亡的影响。方法体外培养CFSC,分为以下6组：（1）空白对照组,为单纯CFSC培养;（2）交感兴奋（NE）组;（3）交感抑制（酚妥拉明＋普萘洛尔）组;（4）α肾上腺素受体（AR）阻滞（酚妥拉明）组;（5）β1AR阻滞（CGP20712A）组;（6）β2AR阻滞（ICI118551）组。MTT法测定细胞增殖;TUNEL法观察CFSC凋亡状况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化。结果MTT法显示,NE对CFSC具有明显的促增殖作用,加入α-AR、β1AR、β2AR阻滞剂后细胞增殖均受到明显抑制。NE作用于CFSC 24h,TUNEL法显示CFSC的凋亡率显著低于对照组（6.60%±3.05%与12.60%±4.76%,P〈0.05）;加入AR阻滞剂后CFSC凋亡率升高,其中α-AR和β2AR阻滞剂作用最显著。同时,流式细胞仪显示加入NE后CFSC凋亡率也显著降低（2.29%±0.22%与3.06%±0.57%,P〈0.05）;与TUNEL结果一致。NE对细胞形态没有明显影响。结论交感神经递质NE对体外活化的CFSC具有促增殖作用,并且可以抑制CFSC的凋亡,可能主要通过α受体和β2体起作用。     

肝炎平对肝纤维化大鼠肝组织中M1型胆碱能受体和β2型肾上腺素能受体表达的影响

[目的]研究肝炎平对肝纤维化大鼠肝细胞神经递质受体的作用，探讨其抗肝纤维化的可能机制。[方法]将38只Wistar大鼠分为3组：正常对照（N）组8只、肝炎平（G）组15只及模型（M）组15只。采用光镜及电镜观察肝组织病理学改变；免疫组织化学SP法检测各组肝组织M1型胆碱能受体（M1-AChR）和β2肾上腺素能受体（β2-AR）的表达水平。[结果]G组病理改变较M组明显改善，G组M1-AChR的表达较M组降低而β2-AR的表达较M组显著升高（P〈0．05）。[结论]肝炎平能通过抑制肝组织M1-AChR的表达同时增加β2-AR的表达，从而调节神经递质在肝纤维化中的作用。     

人肝窦内皮细胞中α1肾上腺素能受体亚型表达的初步实验研究

目的 探究α₁肾上腺素能受体(α₁AR)各亚型在肝窦内皮细胞(LSEC)中的表达情况。方法 体外培养人原代LSEC,蛋白质印迹法验证α₁AR激动剂去氧肾上腺素和α₁AR阻滞剂多沙唑嗪对LSEC表达血管生成相关指标CD31和vWF的影响,并验证LSEC中α₁AR各亚型的表达情况。免疫组化染色验证小鼠肝脏α₁AR各亚型的表达情况。结果 α₁AR激动剂去氧肾上腺素可增加LSEC中CD31和v WF的表达,而α₁AR阻滞剂多沙唑嗪可拮抗此作用。体内和体外实验均在LSEC中检测到α₁aAR与α₁bAR的表达,未检测到α₁dAR的表达。结论 α₁AR参与LSEC表型的调控,且通过α₁aAR与α₁bAR两亚型实现此功能,因此α₁AR可能成为肝纤维化新的调控靶点。     

大鼠门静脉α肾上腺素受体亚型的分布及功能

目的:探讨门静脉α肾上腺素受体及亚型的分布及其对门脉循环的调控机制。方法:采用药理受体分析方法,结合离体和整体实验,测定α肾上腺素受体拮抗剂和激动剂应用前后;ｐＡ２,ｐＤ２,ＥＣ５０,Ｒｍａｘ和门静脉压力（ＰＶＰ）。结果:①ＮＥ浓度－收缩曲线均右移,程度为哌唑嗪（Ｐｒａ）４０倍,硝苯吡啶（Ｎｉｆ）２３１．８倍,育亨宾（Ｙｏｈ）４．２倍。②对Ｒｍａｘ的抑制率:Ｎｉｆ８９．１％,Ｐｒａ７１．２％,Ｙｏｈ４１．９％。③与门静脉α受体亲和力（ｐＡ２）:Ｐｒａ８．１９,Ｙｏｈ６．０９,Ｎｉｆ６．０２。④对ＰＶＰ影响:苯福林（Ｐｈｅ）显著升高ＰＶＰ（Ｐ＜０．０５）,Ｐｒａ和Ｎｉｆ显著降低ＰＶＰ（Ｐ＜０．０１）。结论:大鼠静脉α受体亚型分布α１亚型,而α１受体亚型构成中主要以α１ａ为主。它们介导门静脉的收缩效应,调节门脉循环。     

去甲肾上腺素及其受体在痛性糖尿病神经病变中的作用

去甲肾上腺素(NE)作为中枢神经系统和交感神经系统中广泛分布的一种单胺类神经递质,其在疼痛方面的调节作用不容忽视.NE及其受体系统与痛性糖尿病神经病变的发生密切相关,外周NE递质受体系统主要起促痛作用,中枢NE递质受体系统则主要起镇痛作用,有关NE及其受体系统的研究对痛性糖尿病神经病变的防治有重要意义.     

长效硝酸酯对心力衰竭大鼠肺α1、β肾上腺素受体各亚型表达水平的影响

目的 探讨长效硝酸酯对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能和肺α1、β肾上腺素受体（AR）各亚型表达水平的影响。方法 选用雄性Wistar大鼠90只,分为正常对照组（N组,n＝9）、假手术组（SH组,n＝8）,其余73只大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死后心力衰竭模型,成功44只,分为心力衰竭模型组（HF组,n＝9）、硝酸酯小剂量组（LN组,n＝9）、硝酸酯大剂量组（HN组,n＝9）、阳性药物对照组（奥美沙坦酯,OL组,n＝9）及硝酸酯大剂量联合阳性药物组（HN＋OL组,n＝8）,灌胃法给药6周。超声心动图检测用药前后心功能,逆转录?聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹法（Western blot）检测各组肺β1-AR、β2-AR、β3-AR、α1A-AR、α1B-AR及α1D-AR的表达水平。结果 用药后,与HF组比较,HN组、OL组及HN＋OL组左室射血分数（LVEF）显著升高（P＜0.05）。与SH组相比,HF组β1-AR和β3-AR表达水平明显下降（P＜0.05）,α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表达水平明显升高（P＜0.05）;与HF组相比,HN组、OL组和HN＋OL组β1-AR、β3-AR表达水平明显升高（P＜0.05）,α1A-AR、α1B-AR及β2-AR表达水平明显降低（P＜0.05）。与OL组相比,HN＋OL组各受体表达水平差异更显著（P＜0.05）。各组大鼠α1D-AR表达水平间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 应用长效硝酸酯药物可显著提高心肌梗死后心力衰竭大鼠LVEF,使心力衰竭大鼠肺α1、β-AR各亚型表达水平反向调节趋于正常,对保护肺功能起到了有益的治疗作用。     

肾上腺素、去甲肾上腺素刺激培养的大鼠心肌细胞凋亡

目的 :观察肾上腺素 （ AD）或去甲肾上腺素 （ NA）刺激体外培养的大鼠心肌细胞凋亡 ,探讨其作用机制。方法 :大鼠心肌细胞分别暴露于 10 - 7mol/L 的 NA,10 - 7m ol/L 的 AD,NA+酚妥拉明 （ 10 - 7m ol/L） ,NA+艾司洛尔 （ 10 - 7mol/L） ,AD+酚妥拉明 （ 10 - 7m ol/L）或 AD+艾司洛尔 （ 10 - 7mol/L） 2 4 h。流式细胞仪检测凋亡水平。结果 :NA使凋亡细胞百分率由 （ 4 .2± 1.6） %增加到 （ 10 .0± 5 .0 ） % （ P<0 .0 1;n=8） ,此作用可被艾司洛尔完全抑制 ,而不受酚妥拉明影响。AD与 NA的作用相仿 ,使凋亡细胞百分率增加到 （ 12 .8± 7.9） % ,且 AD诱导的凋亡同样被艾司洛尔完全抑制但不受酚妥拉明的影响。结论 :AD和 NA可能通过激活 β肾上腺素能通路 ,促进体外培养的大鼠心肌细胞凋亡     

心血管的肾上腺素受体及β-肾上腺受体阻滞剂应用的新观念

受体是细胞膜或细胞内一些能与生物活性物质(神经递质、激素、药物、毒素等)相互作用的蛋白质,具有特定的结构域,能特异地识别和结合那些与自己有一定互补性的相应的活性物质,且其结合能力具有高亲和性,结合后形成的复合物可将生物活性物质携带的信号传递给效应器,进而引起生物     

大鼠脾脏收缩功能与α肾上腺素受体亚型的调节

目的:探讨脾脏收缩功能与α肾上腺素受体（α－ＡＲ）及亚型分布的关系。方法:采用药物受体分析方法，测定应用拮抗剂前后，ｐＡ２，ｐＤ２，ＥＣ５０，Ｒｍａｘ的值。结果:①对Ｒｍａｘ的抑制:硝苯吡啶（Ｎｉｆ）＋育亨宾（Ｙｏｈ，４３％）＞哌唑嗪（Ｐｒａｚ，３９％）＞酚妥拉明（Ｐｈｅｎ，２７％）＞Ｙｏｈ（１９％）；②脾脏ＮＥ累积浓度收缩曲线右移程度（在ＥＣ５０水平），Ｐｒａｚ＝Ｎｉｆ＋Ｙｏｈ（３．４倍）＞Ｐｈｅｎ（３．０倍）＞Ｙｏｈ（１．７倍）；③各组均能显著降低ｐＤ２；④ｐＡ２:Ｐｒａｚ，Ｐｈｅｎ，Ｙｏｈ三者间无差异，但它们均显著高于Ｎｉｆ＋Ｙｏｈ组。结论:①大鼠脾脏α受体亚型为α１，α２，且α１略多于α２亚型。②大鼠脾脏α１受体亚型介导收缩效应并不依赖于细胞外Ｃａ２＋的存在。可能α１亚型为α１Ｂ亚型。     

去甲肾上腺素对肝星状细胞表达瘦素以及瘦素受体的影响

目的:探讨交感神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对体外培养肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)系表达瘦素以及瘦素受体的影响.方法:用不同浓度的NE作用于HSC,分别于24、48及72 h收集细胞,免疫组织化学方法检测活化HSC表达α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)情况;Western blot法检测其表达瘦素以及瘦素受体蛋白的影响;real-time PCR检测NE对HSC瘦素以及瘦素受体m RNA的影响.结果:(1)免疫组织化学结果显示,1、10、100μm o l/L浓度N E作用于H S C 24 h,α-SMA表达明显增加(14.1±4.4,17.5±5.2,19.8±4.1 vs 11.3±4.5;P0.05);提示NE可以活化HSC,并促进HSC增殖.10μmol/L N E作用H S C 24、48、72 h后,α-S M A表达逐渐增强(17.5±5.2;18.5±5.4;19.2±6.2,P0.05);提示N E对H S C的促增殖作用具有时间依赖性;(2)Western blot结果显示,1、10、100μmol/L NE作用于HSC 24 h后,瘦素蛋白表达明显高于对照组(1.54±0.08,2.72±0.09,2.84±0.18 vs 0.85±0.12,P0.05);瘦素受体蛋白表达亦明显高于对照组(1.57±0.18,2.51±0.17,2.89±0.19 vs0.98±0.15,P0.05);(3)Real-time PCR检测HSC瘦素以及瘦素受体m RNA的表达增加,1、10、100μmol/L NE作用于HSC 24 h后,瘦素m RNA表达明显高于对照组(1.51±0.08,2.58±0.09,3.63±0.12 vs 1.00±0.07,P0.05);瘦素受体m RNA表达亦明显高于对照组(1.71±0.08,2.87±0.10,4.01±0.14 vs1.00±0.08,P0.05).结论:交感神经递质NE对体外活化的HSC瘦素以及瘦素受体的表达均有促进作用,从而参与了肝纤维化的进程.     

肾上腺素受体在心肌细胞肥大中的作用

目的 :观察 α受体阻滞剂酚妥拉明和 β受体阻滞剂心得安对肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的作用。方法 :用培养的新生大鼠心肌细胞 ,测量其表面积和 [3H]-亮氨酸 （[3H]- L eu）的掺入量来判断心肌细胞肥大。结果 :肾上腺素可明显增加心肌细胞表面积和 [3H]- L eu的掺入量 ,α,β受体阻滞剂能阻断肾上腺素增加心肌细胞表面积和 [3H]-L eu掺入量。结论 :α,β受体阻滞剂有减轻肾上腺素诱导心肌细胞肥大的作用。