肿瘤抗原NY-ESO-1研究进展

肿瘤抗原NY-ESO-1是肿瘤-睾丸(cancer-testis，CT)抗原，其编码基因是一基因家族，目前发现的主要包括NY-ESO-1、LAGE-1和ES03三个成员。NY-ESO-1是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原之一，可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和T细胞免疫反应，因此在抗原特异性肿瘤免疫治疗中具有广泛的应用前景。     

MAGE-A家族与NY-ESO-1在乳腺癌中的表达及免疫治疗前景

以肿瘤特异性抗原为基础的肿瘤免疫治疗已经成为乳腺癌的新的治疗模式,癌睾丸抗原(CTA)是肿瘤免疫治疗研究的热点.MAGE-A家族与NY-ESO-1作为癌睾丸抗原家族的重要成员,在乳腺癌的诊断、治疗、预后等各个方面发挥重要作用.MAGE-A家族不同成员在乳腺癌组织中有不同程度的阳性表达,其表达机制可能和DNA甲基化和组蛋白去乙酰化相关.目前MAGE-A的肿瘤疫苗研究尚处于起步阶段,而且其应用也有一定的局限性.有人认为通过去甲基化药物激活MAGE-A表达,可以增加MAGE-A的免疫原性,增强免疫治疗疗效.NY-ESO-1在不同类型肿瘤组织中均有阳性表达,它也是判断肿瘤预后的重要指标.基因甲基化可能是调控NY-ESO-1在肿瘤中表达的机制.以NY-ESO-1为基础的多种疫苗已相继进入临床研究阶段.综上,MAGE-A和NY-ESO-1可成为现在以及将来免疫治疗的理想靶标.     

黑色素瘤相关抗原MAGE-C2:肿瘤免疫治疗新靶点

癌睾丸抗原(Cancer testis antigen,CTA)是一类在多种肿瘤组织表达、而在睾丸或胎盘以外的正常组织几乎不表达的抗原。CTA其表达的独特性,被认为是一类能用于肿瘤免疫治疗的理想抗原。目前一些CTA疫苗已用于临床试验,并收到了一定的疗效,显示了良好的开发前景,如NY-ESO-1[1]、MAGE-A3[2]等。黑色素瘤相关抗原(Melanoma-as-     

肿瘤-睾丸抗原SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在胰腺癌中的表达及其生物学意义

目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在正常胰腺组织、慢性胰腺炎以及胰腺癌中的表达情况,寻找胰腺肿瘤中高表达的CTA.方法 应用免疫组织化学SP法检测8例正常胰腺组织、15例慢性胰腺炎组织、52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.Western blotting检测52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.结果 正常胰腺组织、慢性胰腺炎中SSX、MAGE-A1和NY-ESO-1均不表达,SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在52例胰腺癌的阳性表达率分别为48.08%(25/52)、7.69%(4/52)、5.77%(3/52);经相关分析,SSX、NY-ESO-1和MAGE-1的阳性表达与患者的年龄、性别、病变部位、分化程度均未见明显相关关系(P＞0.05); SSX的表达与肿瘤的浸润转移呈负相关(r=-0.306,P=0.028); 52例胰腺癌病例中55.77%(29/52)有1种以上的CTA表达.结论 不同种类的CTA在胰腺癌中的表达存在显著差异,SSX的阳性表达率最高;胰腺癌中SSX的高表达与肿瘤的转移呈明显的负相关关系;CTA在胰腺癌中的表达呈现簇生现象.     

转染NY-ESO-1特异性TCR增强人PBMC对NY-ESO-1阳性肿瘤细胞的特异性细胞毒性

 目的：将具有肿瘤抗原NY-ESO-1特异性的T细胞受体(T Cell Receptor,TCR)转导至人外周血淋巴细胞(Peripheral Blood Lymphocytes,PBLs)中,提高转导后细胞表面特异性TCR表达效率,特异性增强转导后细胞识别肿瘤抗原及分泌IFN-γ的能力, 为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。方法：将实验室保存的NY-ESO-1特异性T细胞受体质粒（pCDNA3.1-ESO-TCR）体外电转入新分离的正常人PBLs中,RT-PCR法鉴定转导是否成功;通过流式细胞仪对转导后的PBLs细胞进行表型分析;用特异性NY-ESO-1b抗原肽 (p157-165) 刺激转导阳性的PBLs,ELISPOT法检测转导后PBLs细胞分泌IFN-γ的能力。结果：RT-PCR检测到电转后PBLs能够扩增出特异性TCR片段;流式检测结果显示电转pCDNA3.1-ESO-TCR质粒的PBLs细胞表面特异性TCR表达率高于未电转质粒的PBLs的表达率(P<0.05);经多肽刺激后,与未电转质粒的PBLs相比,电转质粒的PBLs分泌IFN-γ的斑点数明显增多(P<0.05)。结论：通过体外转导的方式提高NY-ESO-1特异性TCR 在PBLs表面的表达,能够特异性增强PBLs分泌IFN-γ的效率,为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。     

NY-ESO-1/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定

目的:构建肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白NY-ESO-1/GST进行纯化和初步鉴定。方法:设计针对NY-ESO-1的特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)从睾丸组织的cDNA文库扩增NY-ESO-1基因片段,经上下游引物所引入的EcoR I和Xho I双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游,构建重组表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST融合蛋白,经不同浓度尿素洗脱纯化后,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定。结果:重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量(Mr)为44 000,与理论值相符,并主要以包涵体形式存在,灰度扫描分析显示融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的90%,Western blot结果证实该NY-ESO-1/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,提示为融合蛋白。结论:成功构建了NY-ESO-1基因原核表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的包涵体形式NY-ESO-1/GST融合蛋白。     

肿瘤免疫——在确立人类肿瘤抗原的基础上面临新的飞跃

1　人类肿瘤抗原的确立1991年比利时科学家Ｂｏｏｎ和同事们经过 2 0年的不懈努力 ,首次报道分离人类恶性黑色素瘤抗原ＭＡＧＥ 1成功 ,是肿瘤免疫学研究的划时代转折。从此 ,一个个肿瘤抗原相继被确定。如今已知ＭＡＧＥ 1属于至少有 17个相关成员的基因家族 ,包括ＭＡＧＥ Ａ1～Ａ12、ＭＡＧＥ Ｂ1～Ｂ4、ＭＡＧＥ 1。之后 ,美国国立癌症研究所Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ也从黑色素瘤分离到ＭＡＲＴ 1、ｇｐ10 0等肿瘤抗原。ＭＡＧＥ系列肿瘤抗原虽是从黑色素瘤分离到的 ,其成员在其他肿瘤也有一定的表达阳性率 ,因而可以认为是肿瘤共同抗原。除…     

肿瘤免疫与肿瘤免疫治疗中一些新的思考

随着免疫学、分子生物学与基因工程技术发展 ,以肿瘤免疫治疗为代表的肿瘤生物治疗已成为继手术治疗、化疗和放疗后肿瘤治疗的第四种模式[1] 。本文欲对肿瘤免疫及肿瘤免疫治疗 ,特别是其中一些新的思路和进展作一简要探讨和评述。1　肿瘤免疫从免疫学的角度看 ,肿瘤细胞就是一种能不断表达“正常”抗原 (基因过度表达 )和 /或“异常”抗原 (基因修饰、突变或缺失 )的宿主体内自身组织细胞。因此肿瘤可以被视为一种特殊的自体抗原。在正常情况下 ,机体对自体抗原不产生免疫应答 ,即呈现出免疫耐受。因此 ,肿瘤抗原与肿瘤免疫耐受就构成了肿…     

卵巢上皮癌相关肿瘤抗原新基因的研究

目的探讨卵巢癌相关肿瘤抗原新基因在卵巢癌诊断和免疫治疗中的应用价值。方法利用网上生物信息学分析软件对筛选到的55个克隆的核苷酸序列进行分析,并检测其中8个新基因在卵巢癌患者和正常女性血清中的抗体。结果55个克隆的核苷酸序列代表45个卵巢癌抗原基因,其中8个是国内外首次发现的在GeneBank中尚未登记的新基因,是具有免疫原性的功能基因。其中OCY-142新基因是抑癌基因BARD1的可剪切变异体,可被CD4+和CD8+T细胞识别。8个卵巢癌肿瘤抗原新基因中7个在卵巢癌患者血清中的阳性率显著高于正常人,7个卵巢癌肿瘤抗原新基因对卵巢癌患者和正常女性进行联合检测,其敏感性和特异性达到96.9%和95.2%。CAl25异常的卵巢癌41例患者中,OCY-142单独检测的阳性率为95.12%,而CA125正常的卵巢癌57例患者中,OCY-142检测发现21例(36.9%)阳性。结论这些卵巢癌相关肿瘤抗原新基因在卵巢癌患者血清中产生的相应抗体可能成为卵巢癌的新的血清学标志物,可能是卵巢癌免疫治疗理想的新靶点。     

多种肿瘤相关自身抗体在非小细胞肺癌中的联合诊断价值

目的探讨肿瘤-睾丸抗原(NY-ESO-1)、肿瘤蛋白P53(P53)、细胞周期素依赖性蛋白激酶2(CDK2)、膜联蛋白A2(annexin A2)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IMP1)、泛素1(ubiquilin1)以及磷酸甘油酸变位酶(PGAM1)共7种自身抗体在非小细胞肺癌(NSCLC)中独立及联合诊断的应用价值。方法应用Luminex BioPlex200检测48例NSCLC和45例健康对照血清中NY-ESO-1、P53、CDK2、annexin A2、IMP1、ubiquilin1及PGAM1的表达水平,并用受试者工作特征(ROC)曲线分析其诊断的准确性。结果 1)7种自身抗体在NSCLC中的表达均显著高于健康对照组(P0.05);2)ROC分析显示,NY-ESO-1和P53的AUC均≥0.7,annexin A2的检测特异性为88.89%;3)7种自身抗体联合检测时,AUC为0.812,敏感性为68.75%,特异性为91.11%。结论 7种自身抗体在NSCLC的诊断中均有一定意义,特别是7指标联合检测可有效提高诊断的准确性。     

肿瘤抗原鉴定研究进展

肿瘤抗原的鉴定是设计肿瘤疫苗用于肿瘤免疫治疗的前提。随着对机体抗肿瘤免疫机制的深入了解,发现CD8+、CD4+T细胞识别肿瘤抗原具有MHC分子约束性,CD8+、CD4+T细胞协同作用以清除肿瘤细胞。本文就CD8+、CD4+T细胞识别的肿瘤抗原鉴定方法以及肿瘤抗原特性作一综述。     

非自身肿瘤热休克蛋白可用作抗肿瘤疫苗

科学研究业已证明。免疫系统能识别和破坏癌细胞是毋庸置疑的。事实上，大量肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原都已经得到了鉴定，通常是在通过癌症患者T细胞的识别基础上得出结论的。细胞毒性T淋巴细胞(CIL)杀灭肿瘤细胞的能力被人们认为是肿瘤免疫疗法中最重要的发现之一。     

血清WLA-Ag_1抗原水平在肺癌监测中的意义初探

用抗肺癌单克隆抗体WLA-2C_4、SABC-ELISA免疫结合抑制法,检测了100例正常人、93例肺癌患者和56例非肿瘤性疾病患者血清中WLA-Ag_1抗原水平。结果发现54％肺癌患者该抗原水平升高,其中与肺低分化腺癌(94％)呈现明显的相关性;而在健康成人和良性疾病患者,仅45％有该抗原水平升高。提示血清WLA-Ag_1抗原水平的升高可能有助干肺癌的临床监测。     

SEREX在肿瘤抗原分析中的研究进展

重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)为一种新的寻找抗原的方法,即利用患者自体血清对重组表达的cDNA克隆进行筛选,以获得相关抗原基因.这类抗原在荷瘤患者体内能诱导出多重免疫反应,且其核苷酸序列和蛋白质结构较易在分子水平确定,这一方法的运用,为发现新的肿瘤抗原开辟了一个崭新的领域,为肿瘤的免疫治疗的发展提供了一个现实的基础.     

树突状细胞疫苗在妇科肿瘤免疫治疗中的研究进展

树突状细胞(DC)具有摄取、加工、处理和呈递抗原以及激活初始T淋巴细胞的功能,是体内功能最强的专职抗原递呈细胞,也是免疫应答的关键细胞.近年来研究发现,体外经肿瘤抗原刺激的DC回输到病人体内,能诱导机体产生细胞毒性T淋巴细胞,从而发挥特异性肿瘤杀伤作用.根据这一发现研制的DC疫苗目前在妇科肿瘤免疫治疗中已取得重要进展,...     

针对MUC1黏蛋白DC疫苗的研究进展

树突状细胞(DC)作为抗原递呈细胞在激活肿瘤特异性免疫中发挥重要作用,DC疫苗为肿瘤免疫治疗提供了一种有效手段.MUC1是一种高分子量糖蛋白,属于粘蛋白家族成员,在多种上皮性肿瘤中异常表达,是肿瘤免疫治疗的理想靶抗原.本文综述了MUC1的生物学特征、DC对MUC1的递呈和以MUC1为靶点DC疫苗的抗肿瘤效果.     

重组cDNA表达文库血清学分析技术筛选肿瘤抗原的研究进展

1995年Sahin等首先建立了重组cDNA表达文库血清学分析法（SEREX）以来,大量的人类肿瘤抗原被发现和鉴定,并建立了SEREX技术合作组及相应的数据库。本文对SEREX技术的基本原理和流程及其在肿瘤抗原筛选中的应用和存在问题作一综述。     

21世纪肿瘤免疫学面临的挑战与展望

肿瘤免疫学已有近百年的历史,经历了(1)盲目尝试(20世纪初中叶)、(2)曲折进展(中叶1990)、终于从1991年起进入了(3)突破待飞阶段。人类肿瘤抗原的确立、抗原提呈与免疫识别理论的突破、树突状细胞(ＤＣ)免疫生物学的进展[1,2]和人类基因组ＭＨＣ测序的完成[3]为肿瘤免疫学的腾飞准备了条件。在世纪之交,对其作一评估与展望,可能是有益的;但对本人来说实属艰难的尝试;抛砖引玉,批评指正,均所期焉。1　面临的挑战11　人类肿瘤的抗原性问题还远未解决　人类肿瘤抗原首先是在恶性黑色素瘤(黑瘤)上确立的(ｖａｎｄｅｒＢｒｕｇｇｅｎ等,1991)。目…     

NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的研究进展

神经-肿瘤腹侧抗原1(neuro-oncological ventral antigen 1, NOVA1)是神经特异性剪接因子,在神经系统发育、功能维持中具有重要作用。近年,多项研究发现,在肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中,NOVA1可促进癌细胞增殖、迁移、侵袭,与预后密切相关。该文就NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的最新研究进展进行综述,探讨其调控机制和临床价值。     

肿瘤新抗原预测与鉴定的研究进展

<正>肿瘤新抗原是肿瘤免疫治疗的特异性靶标,具有高度异质性。如何准确且快速地鉴定肿瘤新抗原是其应用于临床肿瘤免疫治疗的关键,目前仍处于早期开发阶段且具有挑战性^[1]。根据基因组测序、转录组测序或表位肽质谱数据、并结合计算工具评估免疫原性是肿瘤新抗原预测和鉴定的基本方法。