几丁糖阿霉素缓释药粒治疗骨巨细胞瘤的临床初步观察

为了观察骨巨细胞瘤刮除术后局部应用几丁糖阿霉素缓释药粒的疗效及全身反应，对４例骨巨细胞瘤刮除术后残腔应用４倍于常规静脉阿霉素用量的几丁糖阿霉素缓释药粒，检测术后１，２及５天血浆中阿霉素含量，以及术后１周、１个月及６个月的肝肾功能。结果表明，术后１，２及５天血浆中阿霉素含量分别为（１４３．０５±２７．５５）ｎｇ／ｍｌ、（５２．１７±１１．２８）ｎｇ／ｍｌ及（４．２５±３．０７）ｎｇ／ｍｌ，术后１周、１个月及６个月的肝肾功能均正常。随访７个月～１９个月，无局部复发、全身反应及Ｘ线片复发表现。认为，几丁糖阿霉素缓释药粒用于骨巨细胞瘤刮除术后是安全、有效的。     

几丁糖万古霉素缓释放系统的制备

目的：研制几丁糖万古霉素缓释放系统。方法：几丁糖作为药物缓释载体是一种良好生物相容性的氨基多糖，通过分子间交联，溶剂蒸发，和模具分隔技术，制成药物的缓释放系统。同时测定几丁糖万古霉素DDS的抑菌作用。结果：制备的几丁糖万古霉素DDS有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠樾 菌10d。结论：几丁糖与万古霉素能有效结合，并能缓慢释放万古霉素，体外达到较持久的抑菌作用。     

几丁糖影响体外细胞生长的实验研究

用不同剂量的几丁糖溶液分别加入人成纤维细胞和表皮角化细胞于细胞培养液中,培养72小时,测定细胞数。结果:人成纤维细胞数随着几丁糖溶液剂量的增加而减少;人表皮角化细胞数随着几丁糖溶液剂量的增加,在一定范置内相应增加。从而肯定丁几丁糖溶液能抑制人成纤维细胞生长,促进人表皮角化细胞生长。     

几丁糖凝胶预防骨感染的实验研究

为了观察几丁糖凝胶对骨感染的影响，按Ｎｏｒｄｅｎ法制作兔金黄色葡萄球菌骨髓炎模型，随机分为几丁糖组、醋酸组及对照组，观察术后动物一般情况、Ｘ线片表现、骨培养及细菌计数。结果显示：几丁糖组骨感染率与其它两组无差别，但术后动物体重增加，Ｘ线片上病变程度减轻，细菌计数减少，明显优于其它两组。证明几丁糖对骨感染有一定的缓解作用。其原因可能与几丁糖具有抑菌作用、提高动物免疫机能及体内降解缓慢有关。     

几丁糖抑制细菌生长的实验研究

在表皮葡荡球菌、金黄色扼萄球菌、大肠艾希氏菌、绿脓假单胞菌、白色念珠菌培养液中，按倍比稀释法加入不同剂虽的几丁糖溶液，在３７℃恒温下培养１８小时。观察培养液中细菌生长，得到几丁糖最小抑菌浓度为：表皮葡荡球菌０．００８％，金黄色葡荡球菌０．０１６％，大肠艾希氏菌０．０３２％，绿脓假单胞菌０．０６４％，白色念珠菌１％。实验结果表明，几丁糖溶液具有广谱抗菌作用。     

几丁糖庆大霉素药物释放系统的研制及体外释放实验

目的：研制几丁糖庆大霉素药物释放系统（ｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ，ＤＤＳ）并为骨感染治疗提供新的简便方法。方法：在几丁糖胶体中加入庆大霉素，经化学修饰交联、模具分割、干燥等工艺形成ＤＤＳ棒。对ＤＤＳ药棒进行重量、大小、含药量、机械性能测试和抑菌实验、体外释放实验研究。结果：ＤＤＳ棒大小、重量及含药量差异小，浸泡无脆裂。庆大霉素具有生物活性，体外释放实验显示第１天释放量为９２６．７μｇ／颗，其后下降并以较低水平稳定释放，约４．０μｇ／颗／天，维持时间在２５天以上。结论：几丁糖ＤＤＳ具有工艺稳定、不易脆裂，庆大霉素生物活性无破坏及良好的体外缓释作用，可望为骨感染的治疗提供新的手段。     

几丁糖预防兔屈肌腱粘连的实验研究

以兔为实验模型，将后肢第二、三足趾ＩＩ区屈肌腱造成实验性损伤。实验组鞘内滴入２％几丁糖溶液０．２ｍｌ，对照组不放。下肢石膏管形固定。分别于３、６周后处死，行大体标本粘连等级分级，肌腱滑动距离，末节趾间关节活动角度和完成上述两项所耗的功生物力学测试，光镜和透射电镜观察。结果证明几了糖能促进组织正常修复，抑制成纤维细胞活动，具有预防肌腱粘连的作用。     

几丁糖作为软骨细胞培养支架的实验研究

目的：探讨几丁糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。方法：采用几丁糖无纺网作为细胞培养支架,使用前首先用10%多聚赖氨酸包埋以增加其对软骨细胞的吸附性,然后把几丁糖支架与软骨细胞一起进行体外培养,在倒置显微镜下观察几丁糖对软骨细胞生长的影响。结果：包埋后的几丁糖支架与软骨细胞一起进行体外培养,在倒置显微镜下观察几丁糖对软骨细胞生长的影响。结果：包埋后的几丁糖支架与软骨细胞一起体外培养10d,软骨细胞数目增加约6倍,并且与几丁糖支架牢固结合不易丢失。结论：几个糖无纺网经10%多聚赖氨酸包埋后,对软骨细胞吸附性增强,并且几丁糖具有良好的生物学特性,因此几丁糖符合组织工程对细胞培养支架的要求。有可能成为组织工程中一种良好的细胞培养支架。     

几丁糖预防肌腱粘连的临床研究

目的　观察医用几丁糖预防肌腱粘连的临床作用。方法　对 2 6例 34条粘连肌腱进行手术松解 ,其中 13例 19条肌腱在粘连松解术后用 2 %的几丁糖涂布在松解肌腱上作为应用组 ;另外 13例 15条松解后肌腱不用几丁糖作为对照组。结果　两组病例术后经过平均 5个月的随访 ,按 TAM法评定疗效 ,应用组 19条肌腱中 ,疗效优良者 17条 ,优良率 89.5 % ;显著高于对照组的 6 0 % (x2 =4.0 5 ,P<0 .0 5 )。结论　医用几丁糖具有预防或减轻肌腱粘连的作用。     

几丁糖薄膜对肌腱粘连及愈合影响的实验研究

目的　研究几丁糖薄膜对肌腱粘连和愈合的影响,为临床应用几丁糖薄膜预防肌腱术后粘连提供实验依据。方法　以55 只6～8 个月来亨鸡的趾深屈肌腱为实验模型,将切断的趾深屈肌腱周围包裹几丁糖薄膜,术后2、4、6、8和10 周分别测量肌腱的活动或抗张强度,肉眼及病理切片观察肌腱的粘连、愈合情况。结果　几丁糖薄膜能有效预防肌腱粘连,早期(即4 周内)可以影响肌腱愈合,4 周后可加快肌腱愈合和增加肌腱抗张强度。结论　几丁糖薄膜具有无毒副作用、生物通透性好及生物降解、吸收好,并可以选择性抑制成纤维细胞生长等优点,能有效预防肌腱粘连,晚期(4 周后)可加快肌腱愈合,是一种较为理想的预防肌腱粘连的生物材料     

几丁糖庆大霉素局部药物释放系统的临床应用研究

对几丁糖庆大霉素局部药物释放系统治疗慢性骨髓炎的疗效及体内动力学行为进行研究，为其临床推广应用提供理论依据。采用外科病灶清除术后残腔内置入几丁糖庆大霉素缓释药治疗慢性骨髓炎１８例。监测术后不同时间庆大霉素血药浓度，血尿素氮（ＢＵＮ）和肌酐（Ｃｒ）值，局部引流液中庆大霉素浓度。以术后切口愈合情况、临床表现和Ｘ线片评定疗效。结果，血药浓度峰值（０．８３μｇ／ｍｌ）在２４小时出现，维持时间为４天；术后ＢＵＮ和Ｃｒ值无增加；术后局部引流液中庆大霉素浓度为金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度数百倍。１８例患者均获随访，随访时间６个月～３４个月，平均２４．８个月。初期愈合１６例，无一例复发。认为，几丁糖庆大霉素缓释药是临床治疗慢性骨髓炎的有效方法，具有简便安全，且无需二期取出载体的优点，为临床推广应用提供了理论依据。     

阿霉素—多孔磷酸三钙陶瓷缓释体的研制及体内释药试验

目的 研制阿霉素－多孔磷酸三钙（A－PTCP）陶瓷缓释体,为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损的修复提供新方法。方法 制备多孔磷酸三钙（PTCP）陶瓷,将阿霉素载入其中制得A－PTCP。将30只大白兔随机分成A组（24只）、B组（6只）,A组右股骨粗隆中植入A－PTCP,B组静脉注射阿霉素。不同时期取粗隆部位的肌肉及血浆标本。用高效液相色谱法测定肌肉及血浆中阿霉素的浓度。结果 体内植入A－PTCP后,阿霉素能在局部缓慢释放达10周以上,局部组织药物浓度较高,全身药物浓度较低。结论 A－PTCT缓释体可望成为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损修复的一种新方法。     

多孔微晶玻璃作为缓释药物载体的体外实验研究

目的　　探讨多孔微晶玻璃材料作为载体 ,对利福平药物进行包裹。通过体外释放实验 ,分析影响载体释药速率的主要因素。方法　将玻璃结晶制备得到的各种短纤维状磷酸钙晶体压制成中空圆柱状的多孔材料 ,封装一定量的利福平后浸泡在生理模拟液中 ,检测浸泡液中的药物浓度。结果　利福平能以恒定的速度、较长时间内自多孔微晶玻璃制成的缓释药物载体中释放 ,并且释放速度取决于微晶玻璃纤维的大小和载体的厚度。结论　多孔微晶玻璃基材料将有可能成为骨科术后持续治疗的药物载体     

几丁质及几丁糖与雪旺氏细胞相容性的实验研究

为了观察几丁质及几丁糖对雪旺氏细胞生长的影响，用新生Ｗｉｓｔｅｒ鼠坐骨神经及臂丛神经的雪旺氏细胞接种于几丁质膜片及几丁糖液上，在培养１，３，７天时用光镜及扫描电镜进行观察。发现，几丁质及几丁糖上生长的雪旺氏细胞占９４％，成纤维细胞占６％；对照组雪旺氏细胞占７１％，成纤维细胞占２９％。几丁糖内的细胞数多于几丁质膜片上的细胞数。认为，几丁质及几丁糖与雪旺氏细胞有着良好的组织相容性，几丁糖液优于几丁质膜片，两者均可抑制成纤维细胞的生长。     

壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯丝裂霉素C释药系统的研制与体外释放实验

目的研制壳聚糖／聚乙二醇琥珀酸酯（chitosan／polyethylene glycols-succinate，CH／PEG-SA）丝裂霉素C（mitomycin C，MMC）局部药物释放系统，观察其体外释药效果。方法将透析后的CH／PEG-SA及MMC共混后置入冻干机，冻干制得CH／PEG-SA／MMC膜片，将膜片置于10mL 37℃生理盐水中浸泡，静置3个月观察其脆性。绘制100、50、25、12．5、6．25、1μg／mLMMC液与吸光度（A）值的标准曲线。将CH／PEG-SA／MMC膜片20mg浸泡于PBS液中，第1、3、5、8、12、16、18、22、26、30、32、39、60和88天取浸出液，测定药物释放浓度与时间的变化曲线，探讨膜片结构与释药的关联性。结果脆性观察：膜片浸泡3个月后不脆裂。MMC液标准曲线回归方程为：y=0．593x^3-2．563x^2＋25．944x-0．236（R^2=1．000）。药物缓释膜片中MMC均能从膜片向PBS液扩散，释放量逐渐增加，第12天释放量达最大，为14．9616μg／mL，第18、32天又出现两次释放高峰，分别为14．4824μg／mL和11．4092μg／mL，明显高于成纤维细胞50％抑制率质量浓度（ID50，10．4713μg／L）；其余时间以较低浓度间断释放，且释放量逐渐减少，第60天累积释放量为0．1793μg／mL，直至药物释放完全。不同时间点浓度差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CH-PEG-SA／MMC膜片柔韧性提高，又改善复合材料的力学性能，且成膜性更好，能更有效地避免药物突释，保持一定时间药物释放。     

几丁聚糖和透明质酸钠抑菌作用的研究

目的　比较几丁聚糖和透明质酸钠的抑菌作用及抑菌范围。方法　对奇异变形杆菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌进行培养。每种细菌培养 33管 ,其中 30管分为 A、B及 C组 ,按倍比稀释法在 A组加入高相对分子量 (Mr)几丁聚糖 ,B组加入低 Mr几丁聚糖 ,C组加入透明质酸钠 ;另 3管为对照组 (D组 )。37℃恒温下培养 18小时 ,观察细菌的生长情况。结果　 A组最小抑菌浓度 (MIC)为 :奇异变形杆菌 0 .0 31% ,大肠埃希氏菌 0 .0 6 3% ,白色念珠菌 0 .0 6 3% ,铜绿假单胞菌 0 .0 6 3% ,金黄色葡萄球菌 0 .0 6 3% ;B组 MIC为 :奇异变形杆菌0 .12 5 % ,大肠埃希氏菌 0 .2 5 % ,白色念珠菌 0 .2 5 % ,铜绿假单胞菌 0 .2 5 % ,金黄色葡萄球菌 0 .12 5 %。 C组和 D组各管都有细菌生长。结论　透明质酸钠无抑菌作用 ;几丁聚糖有广谱抑菌作用 ,而高相对分子量几丁聚糖抑菌能力较强。     

几丁糖抑制人成纤维细胞增殖的实验研究

目的通过研究几丁糖对人成纤维细胞的细胞周期和Ki-67蛋白表达的影响,探讨几丁糖预防手术后组织粘连的机制。方法分别用含0、0.01、0.1、1.0、10.0mg/ml几丁糖的培养液作用于人成纤维细胞48h后,用流式细胞仪检测细胞周期。制作成纤维细胞的细胞爬片,用以上各浓度的含几丁糖培养液作用24h后,行细胞核的Ki-67蛋白免疫组织化学染色,观察细胞核中Ki-67蛋白的表达情况。结果在几丁糖作用下,成纤维细胞的生长在形态上受到明显抑制。几丁糖浓度为1.0、10.0mg/ml时,处于增殖期的成纤维细胞百分率分别为32.3%±5.2%、14.7%±2.9%,均显著低于几丁糖浓度为0时的百分率41.9%±5.8%,具有统计学意义(P<0.05);几丁糖浓度为0.01、0.1mg/ml时,处于增殖期的成纤维细胞百分率分别为39.0%±6.0%、35.5%±3.4%,虽低于几丁糖浓度为0时,但差异无统计学意义(P>0.05)。几丁糖浓度为0.1、1.0、10.0mg/ml时,Ki-67阳性细胞百分率分别为37.3%±3.4%、30.5%±6.2%、17.8%±3.0%,均显著低于几丁糖浓度为0时的57.6%±8.9%,具有统计学意义(P<0.05);几丁糖浓度为0.01mg/ml时,Ki-67阳性细胞百分率为54.1%±8.0%,低于几丁糖浓度为0时,无统计学意义(P>0.05)。结论几丁糖能抑制人成纤维细胞增殖,使处于静止期细胞数量增多,这可能是其预防手术后组织粘连的机制之一。     

壳聚糖与重组人骨形成蛋白2复合物体外成骨作用的研究

目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用。方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,以及无rhBMP-2复合的对照材料上。A组(2T3成骨细胞接种组),其中实验A组复合有rhBMP-2的材料14块,分别于接种培养第3、7、14和21天各取3块,以管家基因β-tubulin为内参照,RT-PCR行半定量分析,测定骨钙素基因表达水平,余2块于第14天终止培养,茜素红-S染色观察钙盐沉积情况;对照A组未复合rhBMP-2的材料5块,接种培养至14d终止,其中3块用于测定骨钙素基因表达,2块测定钙盐沉积。B组(C2C12成肌细胞接种组),实验组及对照组情况、培养时间及检测指标同A组。另取接种有rhBMP-2的材料2块接种2T3成骨细胞,培养3d后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况。结果A组培养3d,扫描电镜可见成骨细胞紧密黏附于多孔材料网表面,生长状态良好。实验A组成骨细胞中骨钙素基因的表达为1.28±0.17,对照A组14d为0.56±0.09,表明复合rhBMP-2可促进材料中骨钙素基因表达,两者差异有统计学意义(P<0.01);rhBMP-2还可诱导不表达骨钙素基因的C2C12成肌细胞出现基因表达,B组培养21d,实验B组为0.58±0.13,对照B组为0,差异有统计学意义(P<0.01)。茜素红-S染色可见,A组材料网络内均有不同程度的钙盐沉积。接种相同的细胞时,复合有rhBMP-2的材料中有更多的钙盐沉积。结论复合有rhBMP-2的壳聚糖-明胶人工骨支架材料在体外具有良好的诱导成骨能力。