黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移的影响

目的 筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位.方法 以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药.IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响.结果 50 mg·L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P＜0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol·L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P＜0.01),加入DFMO同时加入100 mg·L-1黄芪糖复合物或200 mg·L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平.结论 黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平.     

黄芪有效部位的复合型纯化工艺

目的:确定黄芪有效部位的复合型纯化工艺。方法:采用正交试验设计法,以多糖收率、多糖含量为指标,优选了多糖醇沉和除蛋白工艺;以单因素考察法优选了黄芪总皂苷的纯化工艺。结果:总多糖最佳醇沉工艺为醇沉前生药量与浓缩液体积比1∶1,醇沉温度40℃,加入3倍量95%的工业乙醇,醇沉静置18 h,粗多糖除蛋白的最佳工艺为配制质量浓度为15 g.L-1的粗多糖溶液,加入粗多糖溶液1/3体积的Sevage试剂,连续脱除2次;大孔树脂纯化黄芪总皂苷的最佳工艺为使用D101型树脂,树脂-药材比为5∶2,以4BV水洗除杂,再以4 BV 70%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,蒸干即可。结论:此法优选出的工艺可以实现黄芪总多糖、总皂苷的次序提取。工艺流程科学、经济,可有效节约资源,指导工业生产。     

白僵蚕体外抗病毒有效部位的筛选

目的:探索中药白僵蚕通过大孔吸附树脂洗脱不同部位的体外抗病毒作用,并进一步分离纯化,为分离抗病毒单体物质做准备。方法:先用不同极性的溶剂提取,观察其抗病毒效果。再用大孔吸附树脂的方法,以蒸馏水、25%的乙醇、50%的乙醇、75%的乙醇洗脱白僵蚕醇提水沉的上清液,收集洗脱液。分别采用EV-71-RD细胞和RSV、HSV-1-Vero细胞体外病毒感染模型,进行体外抗病毒作用评价,通过显微镜观察细胞病变效应(CPE),以酶标仪测定中性红染色A540值,计算治疗指数(TI)。结果:白僵蚕醇提水沉的上清液中水洗脱部位对RSV病毒有一定的抑制作用。结论:白僵蚕抑制RSV病毒的有效部位是醇提水沉后的上清液中水洗脱部位。     

桃红四物汤各分离部位对体外ADP诱导血小板聚集、凝血酶活性的影响及效应物质基础研究

评价桃红四物汤各分离部位对体外二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集及凝血酶活性的影响,探讨其效应物质基础。采用比浊法测定体外ADP诱导家兔血小板聚集率;采用改进凝血酶时间法测定抑制凝血酶活性;采用UPLC-Q-TOF-MS对各分离部位进行定性分析鉴定。桃红四物汤醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~30%醇洗脱部位对ADP诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用;水不溶部位、醇沉上清液部位及40%~70%醇洗脱部位具有显著的抑制凝血酶活性的作用;芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分是醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~40%醇洗脱部位的主要成分。桃红四物汤抑制ADP诱导家兔血小板聚集及抑制凝血酶活性的主要效应物质基础是芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分。该实验为进一步探讨活血化瘀方桃红四物汤治疗血瘀证的物质基础及作用机制提供了科学依据。     

党参、黄芪、白术、甘草提取部位对小肠上皮细胞增殖的影响

目的 :观察党参、黄芪、白术和甘草提取部位对IEC 6细胞增殖的作用。方法 :IEC 6细胞培养 2 4h后分别加入不同剂量的党参、黄芪、白术和甘草的各种提取部位 10 μl,2 4h后用MTT法观察细胞增殖。 结果 :不同提取部位对小肠上皮细胞增殖的作用各异 ,有些部位促进细胞增殖 ,有些部位抑制细胞增殖 ,有些部位无明显影响。同一部位剂量不同其作用方向也不同。结论 :益气健脾药物通过调节小肠上皮细胞增殖发挥其粘膜保护和修复作用。     

巴戟天多糖提取工艺比较

目的:采用不同多糖提取方法提取巴戟天多糖,对比分析巴戟天多糖提取的优良方法.方法:采用水提醇沉法、水提取树脂分离法、超声提取法提取巴戟多糖,比较三种工艺提取巴戟天多糖提取率.结果:水提醇沉法的巴戟天多糖提取率为5.28%,水提取树脂分离法的巴戟天多糖提取率为4.62%,超声提取法的巴戟天多糖提取率为4.06%,水提醇法巴戟天多糖提取率高于其它方法.结论:水提醇沉法提取巴戟天多糖具有较高的的率,是巴戟天多糖提取的理想方法.     

黄芪提取液纳滤浓缩的实验研究

黄芪(Radix astragali)是一种常用的中药,药典规定黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membra-naceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1]。黄芪具有增强机体免疫功能,强心降压、降血糖、利尿、抗衰老、抗肿瘤等作用[2]。黄芪的主要有效成分为黄芪皂苷和黄芪多糖。目前,黄芪有效成分的提取多以水煮醇沉,取上清液部分或取醇沉部分再进行精制。水煮醇沉提取法操作简单,但提取过程要耗费大量的乙醇,为了减少乙醇用量,水煮提取液在醇沉前要进行蒸发浓缩去除大量水分,这一过程能…     

正交试验优选黄芪多糖的提取工艺

目的:优选出黄芪多糖的较佳提取工艺。方法:以多糖含量和收率为综合评价指标,用水提醇沉法,采用正交试验设计优选出黄芪多糖的提取工艺。结果:黄芪多糖的较佳提取工艺为:加药材12倍量水,回流提取3次,每次1h。结论:建立了黄芪多糖的紫外分光光度含量测定方法,验证试验表明优选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

白术多糖对IEC-6细胞迁移及细胞生长的影响

目的:观察3种白术多糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及生长的影响,为研究调节细胞迁移药效物质基础提供参考。方法:从白术药材提取得到白术水提醇沉部位("白术多糖1"),去蛋白并经DEAE-纤维素柱层析得到"白术多糖2",再以Sephadex LH-20凝胶柱层析得到"白术多糖6"。在细胞迁移模型观察此3种样品调节IEC-6细胞迁移的活性;在实时细胞分析仪观察3种样品对IEC-6细胞生长的影响。结果:3种白术多糖样品(50μg/ml或100μg/ml或200μg/ml)能逆转DFMO(二氟甲基鸟氨酸)所致细胞迁移抑制,药效以"白术多糖6"最优。3种白术多糖样品需要更高剂量(200μg/ml或300μg/ml或400μg/ml)才有促进IEC-6细胞生长的作用。结论:调节细胞迁移是白术多糖的主要药效作用,其促进细胞生长的作用则相对较弱,实验结果为后续选择"白术多糖6"研究其结构表征提供了参考。     

薏苡仁多糖提取及纯化工艺的研究

目的：优选薏苡仁多糖提取、分离及纯化的最佳工艺。方法：通过正交试验法确定薏苡仁多糖的最佳提取工艺;采用单因素优选法考察醇沉浓度及醇沉时间对多糖得率的影响;用Sevag法（正丁醇一氯仿混合液1：5）和三氯乙酸法（TCA）脱蛋白。结果：薏苡仁多糖最佳提取工艺条件为10倍量水提取2次,每次1h;醇沉时多糖含量与乙醇浓度呈正比,且当乙醇浓度为90％时,多糖含量达到最大,醇沉时间为9小时。结论：该工艺稳定、简便易行、提取物中多糖含量及纯度均较高。     

夹竹桃叶提取液的抑菌作用研究

目的研究夹竹桃叶提取液的抑菌作用。方法采用不同提取方法制备夹竹桃叶提取液,用二倍稀释法确定最低抑菌浓度。结果夹竹桃叶不同提取液对6种供试菌种的生长均有不同程度的抑制作用,其中醇提液的抑菌效果好于水提液和醚提液,且以70%乙醇提取液的抑菌作用效果最佳。结论夹竹桃叶的醇提液具有很好的抑菌效果。     

银杏酸单体化合物的制备

 目的研究银杏酸单体化合物的制备方法，为银杏酸的应用研究提供参考，为银杏提取物中银杏酸的定量分析提供单体对照品。方法银杏外种皮用石油醚回流提取，提取物通过硅胶柱色谱分离，得银杏酸混合物，再经制备柱反复分离，得银杏酸单体。结果石油醚回流提取法所得银杏酸得率为4.06%，纯度84.59%,提取率达62.9%。银杏酸混合物经制备色谱多次分离后，得到6种银杏酸单体，其中一种为新发现的化合物，纯度均达95%以上。结论单体制备方法较为简便，可用于高纯度银杏酸单体的制备。     

海南黄灯笼辣椒不同提取物化学成分GC-MS分析

目的:研究海南黄灯笼辣椒不同提取物中的化学成分,确定不同类型化学成分的合适提取溶剂.方法:海南黄灯笼辣椒分别用石油醚、乙酸乙酯和95％乙醇提取,提取物经GC-MS分析,比较不同提取物中所含化学成分的差异.结果:海南黄灯笼辣椒石油醚、乙酸乙酯和95％乙醇提取物中主要包含脂肪酸类、酰胺类(辣椒素和二氢辣椒素)、烃类、甾醇类和维生素类等几大类化合物.其中脂肪酸的含量在3种提取物中分别为63.40％,60.66％,16.16％,酰胺类(辣椒素和二氢辣椒素)为16.82％,27.64％,42.05％.结论:提取海南黄灯笼辣椒中的脂肪酸类以及一些小极性的烃类化合物宜用石油醚,提取酰胺类宜用选用95％乙醇.     

三九胃泰方抗胃溃疡有效部位的研究

目的: 对三九胃泰方抗胃溃疡的有效部位进行筛选。方法: 将SD大鼠分为正常对照组、模型组、阳性对照(西米替丁(0.1 g·kg^-1)与三九胃泰颗粒剂(2 g·kg^-1)组、石油醚萃取物组、醋酸乙酯萃取物组、正丁醇萃取组及水萃取组,按生药剂量均为2 g·kg^-1ig给药7 d,采用乙醇造大鼠胃黏膜损伤模型,以胃溃疡抑制率、胃蛋白酶活力、血清中丙二醛(MDA)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力为检测指标,对不同极性溶剂(石油醚、醋酸乙酯、正丁醇与水)萃取部位的抗胃溃疡活性进行评价。结果: 三九胃泰方各极性萃取部位均能显著抑制乙醇致大鼠胃黏膜损伤(P<0.05),其中石油醚萃取部位胃溃疡抑制率最高(89.15%),高于西米替丁组(59.90%)及三九胃泰颗粒剂组(55.31%)。三九胃泰方各极性萃取部位均可显著降低大鼠胃蛋白酶活力,同时增强血清中SOD的活力(P<0.05)。结论: 三九胃泰方不同极性萃取部位均具有显著的抗胃溃疡作用,其中石油醚萃取部位活性最强。     

不同溶剂对川芎药材中有效成分提取效果的影响

目的:比较水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚对川芎中10种有效成分的提取效果以及相应提取物的成分特征.方法:采用超声辅助溶剂萃取,高效液相色谱法进行有效成分的含量测定.CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6mm ×150mm,5μm);流动相甲醇-0.5％冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长280 nm,柱温30℃,流速0.7 mL·min-1,进样量10 μL.结果:乙醇和甲醇对川芎中阿魏酸、羟基苯酞类、烷基苯酞类、藁本内酯二聚体4类成分提取较为完全且两者间无显著性差异;乙酸乙酯对于羟基苯酞类成分和阿魏酸的提取率显著偏低;水和石油醚对4类有效成分的提取率均显著偏低,并且水提取物具有不同的成分特征.结论:乙醇和甲醇是最适合提取川芎中4类主要有效成分的提取溶剂.     

檀香不同萃取物对豚鼠离体肠平滑肌收缩的影响

目的:观察檀香不同萃取物对豚鼠离体回肠平滑肌收缩的影响,探讨其作用机制.方法:利用BL-420F生物机能实验系统,在HW-400S恒温平滑肌浴槽中,37℃下观察檀香不同萃取物对豚鼠离体回肠运动功能的影响.结果:檀香水提液乙醚萃取物、檀香水提液乙酸乙酯萃取物、檀香醇提液乙醚萃取物、檀香醇提液乙酸乙酯萃取物对豚鼠离体肠自主运动有抑制作用(P＜0.01),表现为振幅减低;檀香水提液乙醚萃取物、檀香水提液乙酸乙酯萃取物、檀香醇提液石油醚萃取物、檀香醇提液乙醚萃取物、檀香醇提液乙酸乙酯萃取物对乙酰胆碱( Ach)造成的豚鼠离体肠痉挛状态有拮抗作用(P＜0.01),表现为振幅减低;檀香水提液乙酸乙酯萃取物对阿托品造成的松弛状态有明显的协同作用(P＜0.01),表现为振幅减低.结论:檀香不同萃取物对豚鼠离体肠平滑肌有抑制作用.     

千斤拔总黄酮提取工艺的优化及其萃取相体外抗氧化活性研究

目的 优化千斤拔中总黄酮乙醇回流提取工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法 通过单因素实验、响应面法优化千斤拔中总黄酮的提取工艺;采用优化后的提取条件对千斤拔进行乙醇回流提取,提取液减压浓缩以水分散,依次用等量的石油醚、环己烷、乙酸乙酯,以及正丁醇萃取,通过冷冻干燥得到各萃取物。采用紫外可见分光光度法测定各萃取物的总黄酮含量,采用1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)清除实验、羟基自由基清除实验和铁离子还原能力实验(FRAP法),对千斤拔总黄酮粗提物中不同极性组分的抗氧化活性进行测定。结果 提取温度91.75 ℃、提取时间127.79 min,料液比1∶19.6 g·mL^-1,体积分数80%乙醇,为千斤拔中总黄酮的最佳提取工艺,在此条件下总黄酮的得率为0.366 08%,与预测值0.366 138%相接近;千斤拔总黄酮提取物的不同极性组分均含有黄酮类化合物,并具有一定的抗氧化活性,各组分抗氧化活性的顺序为:正丁醇>水相>乙酸乙酯>石油醚>环己烷。结论 本实验所建立的千斤拔总黄酮乙醇提取工艺,方法稳定、高效;极性萃取物抗氧化活性的高低与其黄酮含量相关,正丁醇萃取物的抗氧化活性最强,该研究可为千斤拔开发利用提供实验依据。     

北五味子仁提取物对高胆固醇血症小鼠脂质代谢的影响

目的：研究北五味子仁石油醚提取物（A1）、乙醇提取后石油醚提取物（A2）、乙醇提取物（A3）和石油醚提取后乙醇提取物（A4）对高胆固醇血症小鼠脂质代谢的影响。方法：将雄性ICR 小鼠分为11组（n=10）,分别为正常饲料组、高脂饲料组、高脂饲料+1%或4%A1、A2、A3、A4 组和高脂饲料+0.1%非诺贝特（阳性药）组。饲养10 天后按照试剂盒说明书测定血清和肝脏脂质水平。结果：高脂饲料组小鼠血胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）水平,以及胆囊和粪便中TC 含量显著升高。非诺贝特可显著降低高胆固醇血症小鼠血/肝脏脂质水平及胆囊中TC 含量,但增加粪便中TC 的排出量,并显著升高血清丙氨酸转移酶（ALT）活性。A1 具有升高高胆固醇血症小鼠的血脂和肝重量的作用。A2 和A3 降低高脂饲料组小鼠血TG水平,A4 降低血清中TC 和LDL 水平。北五味子仁4 种提取物均可显著降低胆囊TC 水平,A2、A3 和A4增加粪便TC 含量。结论：北五味子仁提取物可显著影响高胆固醇血症小鼠的脂质代谢,促进TC 排泄。     

快速溶剂萃取GC-MS分析不同枣的挥发性成分

目的:建立枣中挥发性成分分析方法,鉴定其化学成分。方法:采用快速溶剂萃取(ASE)-气质联用(GC-MS)法分析不同枣中挥发性成分,利用峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。比较ASE和索式提取(SE)2种提取方法对大枣枣果中挥发性成分提取效果的差异,同时考察ASE法下不同溶剂(80%乙醇和石油醚)对挥发性成分提取效率的影响,探讨了提取物甲酯化处理后对提取挥发性成分的影响,并利用主成分分析比较了9种枣中挥发性成分的差异。结果:ASE法以80%乙醇为提取剂较为高效、安全。对河北行唐大枣甲酯化处理后发现更多的挥发性成分,比未甲酯化处理多18种成分。9种枣果中不饱和脂肪酸相对含量占45.3%~70.3%,其中十六烯酸(甲酯)相对含量最高,可达24.0%~38.3%。将9种枣果18个共有峰相对含量采用主成分分析评价不同产地的枣果品质,9种枣果得到有效区分,其中武邑马牙枣品质最佳,其次为武邑小枣、香河小枣和武邑大枣。结论:不同地区、不同品种枣果挥发性成分存在一定的差异性。该实验可为开发枣资源提供参考依据。     

明党参多糖提取工艺研究

目的筛选明党参多糖提取优化的最佳工艺。方法以明党参多糖为工艺筛选指标,采用正交实验设计方法筛选最佳提取工艺及其条件。结果明党参多糖最佳提取工艺为石油醚回流2h;滤渣用95%乙醇回流2h;滤渣再用10倍体积水回流浸提多糖。用sevage法除蛋白,加入乙醇使含醇量为80%,于冰箱静置12h,得多糖沉淀。采用优化后的工艺提取明党参多糖粗品的得率约为10%。结论采用该提取工艺,明党参多糖的提取率较高。