补气活血中药对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用研究

目的探讨补气活血中药对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用。方法将大鼠随机分为对照组、模型组和用药组(补气活血中药),用药组预防给药7d;建立肾缺血再灌注损伤模型。比较各组大鼠血清和肾组织中补体C3和一氧化氮(NO)的含量及肾组织病理变化。结果模型组血清和肾组织中补体C3和NO含量升高,肾组织出现明显病理变化;与模型组比较,用药组血清和肾组织中补体C3和NO含量下降,肾组织病理变化明显改善。结论补气活血中药对肾缺血再灌注损伤模型大鼠具有保护作用。     

心脑肾康对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用研究

目的：研究心脑肾康对脑缺血再灌注（MCAO）模型大鼠的保护作用。方法：以线栓法复制大鼠MCAO模型。实验分为6组,即假阻断（等容生理盐水）、模型（等容生理盐水）、杏灵（2g·kg^-1）与心脑肾康高、中、低剂量（32、16、8g·kg^-1）组。测定大鼠大脑皮层生化指标与血小板聚集阻率,TTC染色观察脑梗死病变范围。结果：与模型组比较,心脑肾康高、中、低剂量组大鼠脑梗死范围显著减小,一氧化氮合酶、活性氧、丙二醛、乳酸水平显著降低,超氧化物歧化酶、三磷酸腺苷水平显著升高,血小板聚集阻率显著升高（P〈0.01）。结论：心脑肾康对脑缺血再灌注模型大鼠有一定保护作用。     

纳洛酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

纳洛酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用孙成春贾暖张霞１郝俊文２王景祥（济南军区总医院药理科、１病理科、２泌尿外科，济南２５００３１）１９９６－１０－２３收稿，１９９７－０３－０７修回作者简介：孙成春，女，３２岁，硕士，主管药师；王景祥，男，６２岁，...     

预缺血对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

目的　研究预缺血 (IPC)对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用 ,并探讨其机制。方法　SD大鼠 2 0只 ,随机分成实验组和对照组 ,每组 10只 ;实验组在缺血前 ,先做预缺血处理 ;对照组皮瓣形成后 ,不做预缺血处理 ;然后两组均以血管夹持续阻断血流 8h ,松夹后恢复血流。术后第7d判断皮瓣成活情况。另外 ,两组在缺血前、缺血 8h及再灌注 3 0min ,分别抽取股静脉血 0 5ml,检测血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果　 ( 1)实验组皮瓣平均存活率80 2 1%± 15 73 % ,明显高于对照组 5 2 80 %± 18 91% (P <0 0 1)。 ( 2 )实验组和对照组血清SOD活性及MDA含量在缺血前和缺血 8h ,差异无显著性意义。但在再灌注 3 0min ,实验组SOD活性平均为 ( 91 84± 7 85 )NU/ml,对照组为 ( 83 4 5± 9 71)NU/ml,差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;实验组MDA含量平均为 ( 8 76± 1 0 4 )nmol/ml,对照组为 ( 9 71± 0 99)nmol/ml,差异也有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　IPC能提高大鼠腹部皮瓣的存活率 ,其机制与IPC能减轻氧自由基介导的缺血再灌注损伤有关。     

龙血竭胶囊对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的探究龙血竭胶囊对肾缺血再灌注损伤的大鼠的保护作用及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和龙血竭胶囊0.081、0.162、0.324 g/kg组,每组10只。龙血竭胶囊组将各剂量药物分别溶解于生理盐水中,ig 10 mL/kg(人临床等效剂量),模型组和假手术组大鼠灌胃给予相应剂量的生理盐水。7 d后,除假手术组外,另外4组大鼠都建立肾缺血再灌注损伤模型。肾脏缺血再灌注后24 h,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡率。采用免疫组化法检测肾组织FAS、FASL蛋白的表达,Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果与模型组大鼠比较,龙血竭胶囊各剂量组大鼠血清中的Scr、BUN显著降低(P0.01),且龙血竭胶囊0.324 g/kg组大鼠血清中的IL-6、TNF-α、IFN-γ显著下降(P0.05)。与模型组大鼠比较,龙血竭胶囊组大鼠细胞凋亡率均有所下降,但龙血竭胶囊0.324 g/kg组下降更为显著(P0.01)。与模型组比较,龙血竭胶囊组FAS和FASL蛋白的表达量均显著降低(P0.05),且降低的程度具有剂量相关性,剂量越大降低的趋势就越明显。与模型组比较,龙血竭胶囊各剂量组的大鼠Bax、Bad、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达量降低,而Bcl-2、VEGF蛋白的表达量升高;龙血竭胶囊0.081 g/kg时Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2、VEGF及龙血竭胶囊0.162g/kg时Caspase-3的蛋白表达与模型组的差异无统计学意义,而其余剂量给药组大鼠蛋白的表达与其差异均具有统计学意义(P0.05)。结论龙血竭胶囊对肾缺血再灌注损伤大鼠具有保护作用,其机制可能是调节炎症因子从而抑制炎症反应,以及调节细胞凋亡和增殖的相关蛋白表达量来减轻组织损伤。     

心脑肾康对脑缺血的干预作用及机制探讨

目的探讨心脑肾康对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的干预作用及可能机制。方法用线栓阻断大鼠大脑中动脉,制作局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO模型),缺血1.5h再灌24h后腹主动脉采血,测定血小板聚集率;断头取脑,检测大脑皮层多项生化指标。结果心脑肾康口服能使脑缺血大鼠的神经行为明显改善,脑梗死面积降低;与模型组相比,高、中、低3个剂量组均能降低缺血后脑组织匀浆中的丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、活性氧(ROS)、一氧化氮合酶(NOS)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)、ATPase活性(P<0.05),并具明显的抑制血小板聚集作用。结论心脑肾康对大鼠局灶性脑缺血有明显保护作用。     

银杏内酯保护大鼠肝脏缺血/再灌注损伤作用的机制探讨

目的：观察银杏内酯对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响，探讨其保护大鼠肝缺血再灌注损伤作用的机制。方法：通过大鼠60min缺血、2h再灌注损伤模型，应用硝酸酶还原法测定肝脏缺血前5min和再灌注后10min，30min血清NO水平变化；测定再灌注后2h血清ALT、AST、LDH酶学差异和肝组织内ATP、MDA含量变化；再灌注2h取肝组织完成肝细胞、肝小叶显微结构和超微结构的观察。结果：肝脏缺血再灌注损伤后血清NO水平降低，ALT、AST、LDH水平升高；银杏内酯能提高再灌注后血清NO水平，并对ALT、AST、LDH的病理性升高有降低作用，且能改善肝脏缺血再灌注损伤的微循环，减轻肝细胞内超微结构的损害程度。结论：银杏内酯对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其作用机制可能是通过NO介导的。     

山药对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究山药灌胃预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用和促进肾脏再生修复的作用.方法 3～4周龄雄性大鼠60只随机分正常对照(A)组(n=6)、假手术对照(B)组(n=6)、缺血再灌注损伤山药灌胃预处理(C)组(n=24)及缺血再灌注损伤无菌生理盐水灌胃对照(D)组(n=24).C、D组在缺血再灌注损伤前灌胃5 d,在损伤后2、12、24、48 h分别采集6只鼠的血并收获肾脏标本.4组标本进行尿素氮、肌酐、丙二醛测定,常规病理切片、细胞凋亡、免疫组化检测增殖细胞抗核抗体(PCNA)、激光共聚焦免疫荧光检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、同源盒基因2(Pax-2).结果 C组尿素氮、肌酐、丙二醛明显低于D组;缺血再灌注损伤2h可测到肾小管细胞凋亡,12 h达高峰;C组凋亡指数明显低于D组;C组PCNA阳性肾小管细胞明显高于D组;C组检测到BrdU、Pax-2双标记阳性细胞;常规病理形态4组有其特有表现.结论 山药灌胃预处理能减轻肾脏缺血再灌注损伤大鼠的多项检测指标,促进受损肾小管的再生修复和重建,有效保护了肾功能.肾脏缺血再灌注损伤后测到的BrdU、Pax-2双标记阳性细胞提示肾组织内的祖细胞参与了肾脏的修复再生.     

米屈肼对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用的研究

肺缺血-再灌注损伤（lung ischemia—reperfusion injury,LIRI）通常发生于引起肺梗死的血栓栓子切除术后、肺栓塞溶栓治疗术后、心脏搭桥术后以及各种体外循环术后等Ⅲ,其确切发病机制尚未完全明了。文献[2]表明,线粒体是细胞缺血缺氧损害的核心靶细胞器,     

黄芪注射液对大鼠肾缺血-再灌注损伤的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠肾缺血-再灌注损伤的影响。方法建立肾缺血-再灌注损伤大鼠模型,25只大鼠随机分为治疗组(n=10)和模型组(n=15)。另设假手术组(n=5)作为对照。治疗组于肾动脉夹闭时给予黄芪注射液4 mL.kg-1,静脉输入,开夹再灌注时又给予原药量的1/2;模型组同时给予等量0.9%氯化钠溶液静脉输入。另取仅作麻醉、开腹、不阻断肾血流的5只大鼠作为对照组。观察肾组织中P-选择素、ICAM-1的表达以及丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化,检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的含量。结果缺血-再灌注后,模型组大鼠肾组织中P-选择素、细胞间粘附分子(ICAM-1)明显表达,MDA含量增高,SOD活性下降,BUN和Cr含量明显上升;治疗组经黄芪注射液处理后肾组织中P-选择素、ICAM-1表达受到抑制。相对模型组MDA含量降低,SOD活性增高,BUN和Cr含量降低。结论粘附分子P-选择素和ICAM-1参与肾缺血-再灌注损伤机制,黄芪注射液明显减少脂质过氧化反应,对肾缺血-再灌注损伤大鼠有保护作用。     

关苍术乙酸乙酯提取物对大鼠缺血再灌注损伤心肌保护作用的研究

目的:研究关苍术乙酸乙酯提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法:将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、关苍术乙酸乙酯提取物低、高剂量(200、400mg.kg-1)组及维拉帕米(阳性药物)组,各组心肌缺血40min。分别于再灌注30min后取心肌组织,测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,心肌线粒体钙(Mit-Ca2+)的含量,心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶的活力。结果:再灌注30min后,关苍术乙酸乙酯提取物组心肌组织中的GSH-Px活力显著高于模型组;心肌Mit-Ca2+的含量显著低于模型组;心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶的活力显著高于模型组。结论:关苍术乙酸乙酯提取物通过增加心肌组织中GSH-Px酶的活力,降低Mit-Ca2+的含量,增加心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶的活力,来发挥对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

银杏内酯对大鼠移植肝缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的:观察银杏内酯对大鼠自体原位肝移植缺血再灌注损伤的影响,探讨其对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法:通过银杏内酯在门静脉-左肾静脉搭桥、肝后下腔静脉内置管分流法建立的大鼠自体原位肝移植模型上的应用,采用硝酸酶还原法测定肝脏缺血前和再灌注后5min、30min、2h血清血管活性递质一氧化氮(NO)和血浆内皮素(ET1)的水平变化;测定血清谷丙氨基转移酶(ALT)、谷草氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)的酶学差异和肝组织三磷酸腺苷(ATP)及丙二醛(MDA)的含量变化;再灌注2h取肝组织,用甲醛固定制成电镜标本,观察肝细胞、肝小叶超微结构。结果:银杏内酯能提高再灌注后血NO水平,并对ALT、AST、LDH的病理性升高有降低作用,且能改善肝脏缺血再灌注损伤的微循环,减轻肝细胞内超微结构的损害程度。结论:肝移植术前施行门腔分流是预防术后发生肝缺血再灌注损伤的有效措施;NO/ET1平衡可能是影响移植肝脏微循环血流量变化的调节因素。银杏内酯对大鼠肝缺血再灌注损伤有保护作用。     

归术活血胶囊对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

目的:探讨归术活血胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:建立大鼠大脑动脉栓塞模型,随机将大鼠分为模型组、尼莫地平阳性对照组及归术活血胶囊高、中、低剂量组,另设假手术组。各组灌胃给予水或相应药物,将皮层及海马组织分为损伤侧与对照侧,测定两侧天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LD)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量或活性,并以红四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死面积,以烘干法测定脑含水量。结果:与模型组比较,归术活血胶囊组(其中一组或几组)皮层Asp含量无明显变化,而海马组织损伤侧Glu含量明显降低(P<0·05),皮层损伤侧TNF-α含量明显增加(P<0·05),皮层及海马组织两侧MDA含量和GSH-Px活性显著降低(P<0·05),皮层损伤侧LD含量轻微升高,对照侧LD含量明显下降(P<0·05),皮层两侧K+-Na+-ATP酶活性降低(P<0·05),脑含水量降低且脑梗死面积明显减小(P<0·05)。结论:归术活血胶囊对模型大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

川芎嗪对大鼠缺血再灌注肾脏功能的影响

目的:通过研究不同浓度的川芎嗪(tertramethylpyrazine,TMP)在大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中的作用,探讨川芎嗪对肾脏组织发挥保护作用的最佳浓度。方法:建立大鼠肾脏缺血再灌注模型,分别检测假手术组、模型组、川芎嗪用药组(川芎嗪15,30,45,60,90 mg·kg~(-1))血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,观察肾组织形态并测定其中的诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)活性。结果:15 mg·kg~(-1)和30 mg·kg~(-1)组川芎嗪显著降低肾组织内iNOS的活性,降低血浆Cr和BUN水平,减轻肾小管上皮细胞坏死程度,以15 mg·kg~(-1)最为显著;45 mg·kg~(-1)组血Cr和BUN水平及肾小管坏死程度低于模型组,但高于假手术组,且均有显著性差异;60 mg·kg~(-1)组和90 mg·kg~(-1)组血Cr和BUN反而上升,小管上皮细胞坏死比模型组明显加重,肾组织内iNOS较模型组变化不明显。结论:合适剂量(15～45 mg·kg~(-1))的川芎嗪可以通过降低iNOS活性,保护缺血再灌注肾功能,减轻肾组织病理损害,以15 mg·kg~(-1)最为显著,随剂量增加保护作用减弱。而较高浓度(45～90 mg·kg~(-1))川芎嗪失去对缺血再灌注肾脏的保护作用。     

当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护机制研究

目的 研究当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,探究可能的保护机制。方法 采用无创动脉夹阻断肾蒂血管构建大鼠肾缺血再灌注损伤模型,肾微透析技术结合HPLC测定腺苷及其代谢产物含量;免疫组化法测定肾组织Bax、Bcl-2、iNOS蛋白表达。结果 假手术组腺苷、次黄嘌呤和肌苷的含量分别为（0.57±0.11）,（3.14±0.20）,（0.16±0.03）μmol·L^-1,保持稳定并作为各实验组基准值,肾缺血再灌注损伤后90 min,模型组升高至（8.61±0.62）,（10.92±1.14）,（0.85±0.05）μmol·L^-1,而当归补血颗粒组升高至（6.91±0.67）,（6.04±0.67）,（0.61±0.13）μmol·L^-1,明显低于模型组（P〈0.05）。免疫组化显示,与假手术组比较,肾缺血再灌注损伤后各组大鼠肾组织细胞中Bcl-2、Bax、iNOS蛋白表达显著增强（P〈0.01）。再灌注后,当归补血颗粒组与模型组同时间点比较Bcl-2蛋白表达明显增强（P〈0.05）,而Bax和iNOS蛋白表达明显减弱（P〈0.05）。结论 当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护机制可能与抑制ATP降解,上调Bcl-2基因表达,下调Bax、iNOS基因表达有关。     

大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法封闭群SD大鼠24随机分为对照组与实验组,每组12只。2组均切除右肾,实验组左肾实施冷缺血再灌注。2组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测。透射电镜检查肾组织形态学,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果①超微结构检查（透射电镜）：对照组肾脏组织形态结构正常,实验组呈现损伤,部分细胞核可见凋亡迹象。②细胞凋亡检测：对照组偶见肾小管上皮细胞凋亡,实验组显著增多,细胞凋亡指数实验组均显著大于对照组（P〈0.05）。结论大鼠肾脏冷缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡明显增加。     

芍药苷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

摘 要 目的： 观察芍药苷对大鼠心肌缺血再灌注（myocardial ischemia/reperfusion, MI/R）损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法: 结扎冠脉造成心肌缺血30 min再灌注2 h,建立MI/R损伤大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、芍药苷三个剂量组（20,10,5 mg·kg^-1）（n=10）,于术前1 h和再灌注即刻分别进行尾静脉注射给药。取血清,测定肌酸激酶(CK)、乳酸脱氯酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;取心脏,测定心肌梗死面积。结果:芍药苷高、中剂量可明显缩小大鼠心肌梗死面积,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）;芍药苷各剂量组可不同程度降低血清CK和LDH活性（P<0.05或P<0.01）,升高SOD活性（P<0.01）;芍药苷高、中剂量组降低血清MDA含量,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 芍药苷预处理对MI/R损伤的保护作用与其减少自由基的生成、抑制脂质过氧化反应等有关。     

Standardization of in vitro Cell-based Model for Renal Ischemia and Reperfusion Injury

Renal ischemia reperfusion injury contributes patho-physiological imbalance of acute renal failure that comprises of generation of reactive oxygen species, nitric oxide and peroxynitrite and inflammation involving cytokine/adhesion molecule cascade, finally leads to cell death. Oxygen deprival associated with ischemia that in turn lead to decline ATP production is the characteristic feature usually addressed in the development of in vitro cell based ischemic model. In order to create oxygen deficit in the cell lines different approaches like chemical induction, enzymatic induction and anaerobic chamber models are widely used. However efficiencies of these models were varied and the present study was aimed to compare the suitability of these models in creating in vitro ischemia reperfusion in cell culture. In the chemical induced method we used different concentrations of rotenone, antimycin and sodium azide to inhibit electron transport chain and thereby reduced the ATP production, measured indirectly by cell viability assay. Among the chemical induced model, antimycin mediated cell injury was more reliable for ischemia reperfusion study. In the enzymatic model, comprises of glucose oxidase (3mM/s) and catalase (998 s^-1 at 10:1 ratio) was used and found to be best among the three approaches as it can create injury in short experimental time and are reproducible. However anaerobic chamber method was not suitable for ischemia reperfusion study as it need more time to induce significant cell injury.