浙江省产超广谱β-内酰胺酶菌株SHV型β-内酰胺酶分布

随着三代头孢菌素如头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和单环酰胺类抗生素在临床上的广泛使用 ,超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓ ,ＥＳＢＬｓ)在革兰阴性杆菌中产生率不断增加 ,ＥＳＢＬｓ种类也不断增加 ,至 2 0 0 0年 6月 ,已发现近 10 0种ＥＳＢＬｓ亚型〔1〕,其中ＴＥＭ型有 6 7种 ,ＳＨＶ型有 2 4种 ,非ＴＥＭ非ＳＨＶ型有 2 0多种。ＴＥＭ和ＳＨＶ型分别由广谱酶ＴＥＭ 1、ＴＥＭ 2和ＳＨＶ 1编码基因中 1～ 5个位点发生点突变而来。各国各地区流行的ＥＳＢＬｓ亚型各不相同〔2〕。我们对…     

浙江省产超广谱β-内酰胺酶菌株的TEM型耐药基因的检测

超广谱ＴＥＭ型 β 内酰胺酶菌株在各国的流行状况各不相同 ,我国尚无ＴＥＭ型 β 内酰胺酶流行状况的报告。我们对浙江省临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行了ＴＥＭ型 β 内酰胺酶编码基因研究。菌株来源于浙江大学医学院附属第作者单位 :浙江大学医学院附属第一医院传染病科 (李家斌 ,马亦林 ,俞云松 ) ;安徽医科大学第一附属医院传染病科 (李旭 )通讯作者 :李家斌 ,2 30 0 2 2合肥 ,安徽医科大学第一附属医院传染病科 (Ｅ ｍａｉｌ:ｌｉｊｉａｂｉｎ948@ｓｏｈｕ .ｃｏｍ)一医院传染病科保存 ,经抑制剂增强的肉汤稀释法证实产超广…     

华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

神经外科医院感染及产超广谱β-内酰胺酶菌株感染分析

目的 研究神经外科医院感染的主要病原菌分布及其耐药情况，以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株感染特点，为临床治疗提供依据。方法 通过对患者病历及细菌培养和药敏试验结果的统计分析，计算各种病原菌的构成比和各种抗菌药物的耐药率，不同年份比例的变化趋势采用趋势检验。结果 2003～2005年神经外科281倒患者分离菌株共408株，其中革兰阴性菌占77．2％，革兰阳性菌22．8％。G^-菌对常用的大多数头孢类抗生素耐药率极高，对亚胺硫霉素的敏感率93．7％。G^＋菌对青霉素类抗生素已基本耐药，对万古霉素的敏感率80．6％。分离产ESBLs菌株36株，各年产ESBLs菌占各年总菌株数的比例呈逐年上升趋势。36株产ESBLs菌株对临床常用抗生素耐药率普遍较高，对亚胺硫霉素无耐药。结论 G^- 菌是神经外科医院感染的主要病原菌；病原菌耐药性普遍较高；产ESBLs菌株引起的感染率逐年升高；预防细菌耐药．必须积极采取综合措施，建立细菌耐药监测系统，合理使用抗菌素，以求达到控制或延缓细菌耐药。     

产超广谱β—内酰胺酶菌表型和TEM基因型配对检测的研究

对临床分离的13株产超广谱β-内酰胺酶菌进行表型和TEM基因型配对检测的研究。结果发现该13株菌对氨苄西林,头孢噻吩,头孢唑啉,头孢呋新均表现为耐药;部分菌对头孢他啶,头孢噻肟和氨基糖苷类,环丙沙星表现为耐药,但该13株菌对亚胺培南均表现为敏感。13株菌经TEM基因套式PCR检测均呈阳性,表明该13株菌至少存在TEM型质粒,该13株菌TEM亚型分型和是否同时存在SHV型质粒等仍在研究中。     

产超广谱β内酰胺酶大肠杆菌的检测及其耐药表 …

目的 研究临床分离的产超广谱β内酰胺酶（ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓ，ＥＳＢＬｓ）大肠杆菌对常用抗生素的耐药性及其基因类型。方法应用双纸扩散法及Ｅ ｔｅｓｔ检测ＥＳＢＬｓ；微量稀释法测定产ＥＳＢＬｓ大肠杆菌对临床常用抗生素的耐药性；全自动核型分析和脉冲场凝胶电泳（ｐｕｌｓｅｄ ｆｉｅｌｄｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＰＦＧＥ）研究产ＥＳＢＬｓ大肠杆菌的基因型。结果     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的　了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及其耐药特点 .方法　对 2 0 2株肺炎克雷伯菌和 134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定 ,纸片扩散法进行常规药敏试验 ,按照NCCLS的标准判读结果 .结果　对 336株儿童患者感染菌株试验 ,共检测出 81株ES BLs菌株 ,ESBLs总产生率为 2 4 .1% ;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 2 9.7% ,大肠埃希菌产ESBLs率为 15 .7% .产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株 (t=6 .6 0 3,p <0 .0 1) ,对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药 ,对复方新诺明、氨苄西林 /舒巴坦的耐药率也较高 (耐药率高于 6 0 % ) ,且多为多重耐药株 ,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦敏感率较高 (耐药率低于 30 % ) ;所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为 0 .结论　儿童感染细菌ESBLs发生率相当高 ,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌 ,耐药高且多重耐药情况严重 ,治疗较困难 ,需加强ESBLs检测 ,以合理使用抗生素 ,延缓和防止ESBLs的发生和播散     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t＝6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.     

超广谱β-内酰胺酶代表株的临床分布和药敏

大肠埃希氏菌是临床感染最广泛的细菌,这些菌对很多药物的敏感性很高,容易治疗。近来由于抗菌药物的不断开发及临床大量应用,出现了一些产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的菌株,而大肠埃希氏菌是这类细菌的代表株,因而有必要对它做出一些调查研究。为了解大肠埃希氏菌在重庆地区的耐药特性,以便临床医生合理选用抗生素和有效控制ESBL感染提供依据,将临床分离的大肠埃希氏菌对14种抗生素的耐药性进     

一株产SHV-5α型超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌检测

质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的产生引起了肠杆菌科细菌的耐药,ESBL能够水解氧亚氨基β-内酰胺类抗生素和氨曲南,并可被β-内酰胺酶抑制剂所抑制.截止2005年4月11日,在全球范围内至少已发现200多种ESBL.大多数ESBL来源于广谱酶TEM-1、TEM-2和SHV-1,系这些酶活性部位1个或多个位点的氨基酸突变所致,使酶活性部位的空间结构发生改变而扩大了水解底物范围,从而增加了对氧亚氨基类抗生素的亲和力和水解能力.自Prinarakis于1996年首次报道了SHV-5α以来,这一β-内酰胺酶的相继报道不多.我们在研究蚌埠三院临床分离的产ESBL菌株时,从一株阴沟肠杆菌中检测到SHV-5α,现将结果报道如下.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌感染及耐药率的分析

目的提高医务人员对超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌感染的认识,指导临床合理使用抗菌用药。方法对本院2004～2006年间分离出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和不动杆菌进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测,比较每年发生率并对其做药物敏感试验。结果产ESBLs大肠埃希菌每年发生率分别为18.2%、23.5%、27.7%,产ESBLs肺炎克雷伯菌每年发生率为15.8%、20.3%、26.9%,产ESBLs不动杆菌每年发生率为14.6%、20.1%、28.1%。三种细菌对氨苄西林、哌拉西林及头孢菌素类耐药率约为72～100%。结论产ESBLs菌的发生率与耐药率呈逐年上升趋势,这与临床大量使用三代头孢类抗生素及不合理使用抗菌药物有关,同时ESBLs细菌对一些抗菌药物耐药率也不断提高,应引起临床治疗方面的足够重视。     

头孢美唑和头孢西丁对产与不产超广谱β-内酰胺酶菌株体外抗菌活性比较

目的：测定头孢羡唑和头孢西丁对产与不产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的体外抗菌活性。方法：收集2004年1月到2004年12月从华西医院各临床科室分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌520株,采用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行体外药敏试验并用表型确证试验检测ESBLs。结果：筛选出产ESBLs菌226株,ESBLs阳性检出率为43．5％,其中大肠埃希菌的ESBLs检出率为45．8％．肺炎克雷伯菌的ESBLs检出率为39．6％。头孢美唑对我院ESBLs阳性菌株体外抗菌活性优于头孢西丁。结论：头霉素类抗生素可作为治疗ESBLs菌株引起的重症感染的可选药物,且对我院分离的产ESBLS犬肠杆菌和肺炎克雷伯菌,头孢美唑体外活性略优于头孢西丁。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的分析

对我院 2 0 0 1年 10月～ 2 0 0 2年 5月临床分离的 30株非重复的产ESBLs大肠埃希菌进行检测 ,了解CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。采用琼脂平皿对倍稀释法进行耐药表型检测 ,抗菌药物为头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢哌酮 舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星和阿米卡星。采用PCR方法进行 β 内酰胺酶基因型分析 ,对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ,用PFGE分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌的同源性。琼脂糖电泳结果表明 30株产ESBLs大肠埃希菌中有 13株携带CTX M基…     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌药物敏感性和基因型研究

【摘要】 目的 研究产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌基因型和药敏特征。方法 对2003年12月～2004年12月哈尔滨地区临床分离的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌，测定菌株对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性，并采用SHV型和TEM型特异性引物检测ESBLs的基因型别。结果 产ESBLs细菌对头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的敏感率依次71.6%、20.3%、54.1%、31.1%，对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为54.1%，69株（93.2%）对亚氨培南敏感。74株产ESBLs细菌中携带blaSHV和blaTEM基因的阳性例数分别是45（60.8%）和23（31.1%）。结论 本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性降低，临床上需慎用酶抑制剂复合物及第四代头孢菌素，亚氨培南仍是治疗产ESBLs菌感染的首选药物。产ESBLs肺炎克雷伯菌blaSHV的流行频率高于blaTEM。     

产超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型检测

通过PCR基因测序分析两种酶的基因类型，用接合转移试验了解肺炎克雷伯菌耐药基因转移方式，并用纸片扩散试验和微量稀释法测定细菌对17种抗生素的敏感性，现报道如下。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的研究

目的 :了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌中CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 30株产ESBLs大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法和PCR方法进行耐药表型和 β 内酰胺酶基因型分析 ;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ;用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌同源性。结果 :1 3株菌携带CTX M基因 ,CTX M酶亚型为CTX M 3和CTX M 1 4。产CTX M酶菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟…     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌临床分离株药敏分析

目的了解郑州地区临床分离大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶情况和耐药特征。方法双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),琼脂二倍稀释法对大肠埃希氏菌进行MIC检测。结果产ESBLs大肠埃希氏菌检出率为57.4%,产ESBLs菌株多数呈多重耐药,仅亚胺培南的耐药率在10%以下。结论本地区临床分离大肠埃希氏菌具有较高的产ESBLs流行率,对于产ESBLs大肠埃希氏菌应以亚胺培南为首选药物。     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC型β-内酰胺酶的分子流行病学研究

目的 研究北京大学第三医院分离的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（Klebsiellapneumoniae,Kpn）中超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和质粒AmpC型β-内酰胺酶（p-AmpC）的分子流行病学特征.方法 收集2003年6月至2004年7月无重复临床分离E.coli和Kpn共293株,对其中产ESBL和/或p-AmpC的86株进行研究.采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度;等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶等电点;接合实验判断β-内酰胺酶基因位置和移动性;PCR及其产物测序确定基因型;ERIC/BOX-PCR判断菌株克隆性（E.coli菌株分型同时结合种系进化群PCR结果）.结果 PGR产物测序结果显示：我院E.coli和Kpn中只产生ESBL、只产生p-AmpC、同时产生两种酶菌株的发生率分别是30.8%（60/195）、17.3%（17/98）、0.5%（1/195）和1.0%（1/98）、0.5%（1/195）、6.0%（6/98）;E.coli中ESBL以CTX-M-14型酶为主（70.5%）,Kpn中则以CTX-M-3（30.4%）、CTX-M-9（30.4%）、CTX-M-14（21.7%）常见,p-AmpC均为DHA-1型;发现blacrx-M-52（GenBank登录号DQ223685）,该基因编码的β-内酰胺酶和CTX-M-3相比有两处点突变（A77V和P167S）,导致对头孢他啶的水解活性比头孢噻肟高（临床株相应接合子MICCTX=16 μg/ml,MICCAz≥256 μg/ml）.产酶株多数呈多重耐药,对美罗培南敏感.E.coli种系进化群D群以一个克隆株为主,而Kpn则以两个克隆株常见.结论 我院存在分别或同时产生ESBL和p-AmpC酶的E.coli和Kpn,相应常见酶型分别是CTX-M型和DHA型,菌株间呈一定程度的同源性.应对产生两类酶的菌株进行持续的表型监测和深入的机制研究.     

多重耐药铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶分析

目的 对多重耐药铜绿假单胞菌产β－内酰胺酶进行分析。方法 用E－试验和三相水解试验分析46株常规药敏试验全部耐药的铜绿假单胞菌的耐药表型，并用PCR扩增和产物测序方法检测其中可能产β－内酰胺酶的情况。结果 46株中8株产超广谱β－内酰胺酶，经分子生物学方法证实有blaVEB-1基因，同时还有D类酶blaOXA-10基因；46株中5株为持续高产AmpC酶；1株产生1种既能水解亚胺培南，又能被氯唑西林抑制的酶。结论 我院多重耐药铜绿假单胞菌所产β－内酰胺酶以超广谱β－内酰胺酶（8／46同时有blaVEB-1基因和blaOXA-10基因）和持续高产AmpC酶（5／46）为主。