祛白酊中补骨脂素和异补骨脂素透皮效果的实验研究

目的 :考察祛白酊中君药补骨脂有效成分补骨脂素和异补骨脂素的透皮效果。方法 :采用简单小室法 ,以离体大鼠皮肤为透皮屏障 ,用双波长薄层扫描法测定体外接收液中补骨脂素和异补骨脂素的含量 ,进而计算累积透皮量和透皮率 ,并与未加月桂氮酮和二甲基亚砜的祛白酊透皮效果进行了实验性比较。结果 :补骨脂素的 8h累积透皮量与透皮率分别为 (92 6 5±2 91) μg·ml-1和 (84 6 6± 2 6 6 ) % ,异补骨脂素的 8h累积透皮量与透皮率分别为 (86 37± 2 6 7) μg·ml 1和 (82 2 9± 2 5 4 ) % ,与未加月桂氮酮和二甲基亚砜制剂的透皮效果比较 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :祛白酊的透皮效果良好     

参麦注射液增强羟基喜树碱对肿瘤血管生成的抑制作用研究

目的研究参麦注射液联合羟基喜树碱对肿瘤血管生成的影响.方法:将人结肠癌细胞株(CW-2)细胞分为4组,即空白、参麦、羟基喜树碱、联合用药组.分组后的CW-2细胞培养12 h,制得条件培养液,条件培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),MTT法检测细胞生存率,并用细胞培养小室检测其细胞迁移活性.结果:与空白组比较,其他3个用...     

普纳替尼对人血管内皮细胞功能的影响

目的 观察普纳替尼(Ponatinib)对人血管内皮细胞的增殖、迁移、血管形成及NO合成释放的影响, 从细胞水平评价Ponatinib血栓不良反应形成机制。方法 采用CCK-8法、体外划痕法、Matrigel基底膜成管法及NO检测试剂盒分别考察Ponatinib对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的细胞毒作用、迁移能力、血管形成能力及细胞NO释放水平的影响。结果 研究表明Ponatinib对HUVECs细胞半数抑制浓度(IC₅₀)为(0.69±0.05)μmol/L。非毒性剂量的Ponatinib能够不同程度抑制HUVECs细胞的迁移、血管形成及NO的释放(P<0.05)。结论 Ponatinib通过影响人血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成等正常功能而造成血管内皮损伤, 可能为其诱发血栓的原因之一。     

溶血卵磷脂对血管内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的观测溶血卵磷脂(LPC)对血管内皮细胞增殖及凋亡的影响,从而探讨动脉硬化发生的机制。方法取体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),在含不同浓度LPC(5、10、20mg/L)的培养基中分别培养6、12、24、48h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、荧光显微镜观测血管内皮细胞增殖及凋亡的变化。结果与正常对照组比较,LPC抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,且其作用呈时间-效应、浓度-效应依赖关系,但随着LPC浓度增加,细胞凋亡增加的同时细胞死亡比例也增加。结论LPC抑制血管内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,可能是其致动脉粥样硬化机制之一。     

Omapatrilat对AngⅡ致人血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的观察Omapatrilat对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法体外培养HUVECs,随机分为4组:空白对照组,AngⅡ组,Omapatrilat组和AngⅡ+Omapatrilat组。分光光度计测定培养的HUVECs乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,流式细胞仪技术检测细胞周期,硝酸还原酶法和放射免疫分析技术分别测定HUVECs上清液中一氧化氮(NO)和内皮素(ET1)含量。结果10-7mol·L-1AngⅡ可增加HUVECsLDH漏出和ET1释放,Omapatrilat(10-6mol·L-1)对此具有明显抑制作用,同时它可促进HUVECs增殖和NO释放。结论Omapatrilat可减弱AngⅡ导致的体外培养HUVECs损伤,对内皮细胞具有保护作用。     

高糖环境早期对血管内皮细胞的作用之商榷

目的:探讨高糖环境在48 h内对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的增殖以及粘附分子表达的影响,并观察在炎性刺激下高糖作用的改变。方法:用不同浓度的葡萄糖作用于HUVEC,用噻唑蓝法(MTT法)检测48 h内高糖对细胞增殖的影响。采用流式细胞术及细胞酶联免疫吸附法(cell ELISA)测定高糖作用下HUVEC表达的细胞间粘附分子(ICAM-1)的水平。脂多糖(LPS)与高糖联合刺激HUVEC后,比较其与只用LPS刺激情况下的ICAM-1的表达之间的差异。结果:25、45 mmol.L-1的葡萄糖在48 h内无抑制HUVEC增殖的作用,对其表达粘附分子的水平也无显著影响。但在LPS刺激条件下,高糖组HUVEC的增殖明显被抑制,ICAM-1水平也较正常糖浓度组显著增加。结论:在短期内高糖对HUVEC的增殖及粘附分子的表达无明显影响,而在炎症刺激存在下,高糖显著抑制其增殖、增加粘附分子的表达。     

栀子苷对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的研究栀子苷对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法采用过氧化氢(Hy-drogen peroxide,H2O2)建立体外培养的HUVEC细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为正常对照组、H2O2氧化损伤组、H2O2加栀子苷低、中、高剂量组,其中后3组给予栀子苷预培养24h后加入400μmol.L-1H2O2,然后继续培养12h。MTT法检测细胞存活率;检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)水平和培养液中一氧化氮(NO)水平;检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期改变。结果栀子苷能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率,提高细胞内SOD、GSH-Px、NOS活性,使培养液中NO含量增加,降低细胞内ROS水平,减少H2O2诱导的细胞凋亡率,恢复血管内皮细胞增殖。结论栀子苷具有较强的抗氧化能力及内皮细胞保护作用,可减轻血管内皮细胞的氧化损伤。     

灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响

目的研究灵芝多糖(GlPS)抗肿瘤作用及其机制。方法通过相差显微镜和间接免疫荧光的方法鉴定了人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。采用MTT法检测GlPS对人前列腺癌细胞(PC-3M)和HUVECs增殖的影响。检测GlPS对PC-3M细胞与HUVECs粘附的影响。采用transwell双层小室观察GlPS对PC-3M迁移穿过单层HUVECs的影响。结果GlPS对PC-3M无直接细胞毒作用,对HUVECs增殖无显著性作用。GlPS能够减少粘附和迁移穿过单层内皮细胞的肿瘤细胞数目。结论灵芝多糖通过抑制肿瘤细胞粘附并迁移穿过内皮细胞发挥其抗肿瘤作用。     

辛伐他汀对脂多糖损伤血管内皮细胞的保护作用

目的 探讨辛伐他汀对炎性刺激物脂多糖(LPS)刺激诱导血管内皮细胞生成肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化物(SOD)及丙二醛(MDA)的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别用不同浓度LPS刺激,在50mg/L LPS刺激的基础上用不同浓度的辛伐他汀(0.1、1.0、5.0、10.0μmol/L)及10μmol/L辛伐他汀 0.2mmol/L甲羟戊酸共育,用ELISA μmol/L法测定TNF-α的浓度,用化学比色法测定SOD活力和MDA的含量.结果 不同浓度LPS刺激内皮细胞24h后,培养上清TNF-α浓度和MDA含量明显高于空白对照组(分别为P<0.01和P<0.05),而SOD活力显著低于空白对照组(P<0.01).在50mg/L LPS刺激基础上,加入不同浓度辛伐他汀干预,培养上清TNF-α浓度和MDA含量显著低于LPS刺激组(分别为P<0.01和P<0.05),而SOD活力显著高于LPS刺激组(P<0.01).加入甲羟戊酸后,培养上清中TNF-α浓度、MDA含量和SOD活力与LPS刺激组无明显差异.结论 辛伐他汀可以抑制LPS诱导的内皮细胞TNF-α的生成,提高SOD的活性,降低MDA的水平,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用.其作用可被甲羟戊酸逆转.     

萝卜硫素对饥饿诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的:研究萝卜硫素抑制饥饿诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用。方法:以饥饿培养法诱导HUVECs凋亡。试验随机均分为正常对照(完全培养液)组、模型(模型培养液)组与萝卜硫素高、低浓度(10、5μmol/L)组。观察HUVECs形态;SRB法检测HUVECs存活率;Hoechst 33258染色法观察HUVECs的凋亡程度;吖啶橙染色和Western blot法观察HUVECs自噬水平的变化。结果:在饥饿条件下,萝卜硫素可以有效抑制饥饿HUVECs边缘发亮,脱离皿底的现象随时间延长而愈加明显;提高HUVECs的存活率;抑制HUVECs的凋亡,且具有剂量、时间依赖性;提高HUVECs的自噬水平。结论:萝卜硫素可能通过诱导自噬而起到抑制饥饿诱导HUVECs凋亡的作用。     

依达拉奉对过氧化氢致血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨依达拉奉对过氧化氢(H2O2)致内皮细胞氧化损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用H2O2作为外源性自由基生成系统,模拟血管内皮细胞氧化应激损伤模型,观察不同剂量依达拉奉对H2O2所致内皮细胞的影响。通过检测各组丙二醛(MDA)的含量反应细胞的损伤程度,检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)反应细胞的抗氧化能力。结果依达拉奉各浓度组均明显降低MDA的含量,提高SOD的活性及总T-AOC,上述作用随药物浓度增加呈增强趋势。结论依达拉奉能降低内皮细胞的氧化损伤程度,提高内皮细胞抗氧化能力。     

亚砷酸钠对人脐静脉内皮细胞迁移、增殖的影响及其机制

目的 探讨亚砷酸钠对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移和增殖的影响.方法 通过细胞损伤修复实验和细胞增殖实验分别观察亚砷酸钠对细胞迁移、增殖能力的影响.RT-PCR分析其mRNA表达.结果 亚砷酸钠抑制HUVECs迁移和增殖能力,两者均呈典型的剂量效应关系.并发现亚砷酸钠下调HUVECs的黏着斑激酶(FAK)和原癌基因蛋白(c-Myc)的mRNA水平.结论 亚砷酸钠通过下调FAK和c-Myc基因表达抑制细胞迁移和增殖能力,提示其在损伤血管内皮细胞修复机能中起重要作用.     

西妥昔单抗抑制血管生成的实验研究

目的 探讨西妥昔单抗(C225)对体内、外血管生成的抑制作用.方法 用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代培养模型,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Transwell小室趋化实验、体外小管形成实验及流式细胞术,观察C225在体外对HUVEC增殖、迁移、小管形成和凋亡的影响;利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,观察C225对CAM新生血管的抑制作用.结果 0.0625～2.0000μg/ml的C225作用HUVEC 48 h,细胞增殖抑制牢为12.34%～25.26%;体外迁移及小管形成实验显示,0.0625～1.0000 μg/ml C225的HUVEC迁移抑制率为15.51%～48.68%,HUVEC小管形成抑制率为22.91%～44.71%;0.25 μg/ml和1.00 μg/ml的C225诱导HUVEC细胞凋亡率分别为33.20%和35.05%.体内CAM试验表明,0.0625～1.0000 μg/ml的C225对新生血管抑制率为20.39%～36.18%.结论 C225在体内、外具有血管生成作用.     

纤维蛋白诱导的自噬促进人脐静脉内皮细胞增殖与血管腔样结构形成

目的 探讨纤维蛋白诱导的自噬对内皮细胞增殖和血管腔样结构形成的作用.方法 MTT法观察在不同浓度和时间的纤维蛋白作用下,人脐静脉内皮细胞(HUVECs)形成血管腔样结构和细胞增殖的改变;采用RT-PCR检测不同浓度(1.5、3.0和6.0 mg/ml)和时间(6、12和24 h)的纤维蛋白作用下,微管相关蛋白1轻链3(MAP1 LC3)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预作用最显著的纤维蛋白浓度和时间,观察细胞增殖、血管形成和基因表达变化.结果 HUVECs在纤维蛋白作用下,可见管腔样结构形成,并呈浓度和时间依赖性;细胞增殖也较对照组明显增加.LC3和VEGF的表达均随着纤维蛋白浓度和时间的增加而增加.但在自噬抑制剂3-MA的作用下,细胞增殖降低,未见明显的新生血管形成;并且LC3、VEGF的mRNA表达也明显减少.结论 纤维蛋白激活自噬,参与了细胞增殖和血管新生的过程.     

马来酸噻吗洛尔对人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖、凋亡、成管的影响

目的探讨马来酸噻吗洛尔在治疗婴幼儿血管瘤的作用机制。方法培养HUVEC细胞,采用CCK-8检测细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡,体外血管形成试验检测细胞成管情况,应用SPSS17. 0统计包进行数据分析。结果用CCK-8测定马来酸噻吗洛尔能抑制人脐静脉内皮细胞HUVEC的生长;使用Annexin V-FITC/PI双染色法结果表明马来酸噻吗洛尔对HUVEC细胞的凋亡成剂量依赖性抑制;采用体外血管形成试验,表明马来酸噻吗洛尔对HUVEC细胞的成管能力成剂量依赖性的抑制。结论马来酸噻吗洛尔可能通过对婴幼儿血管瘤肿瘤中内皮细胞增值和血管生成能力的抑制,同时诱导内皮细胞凋亡来实现治疗目的。     

芹菜素延缓人脐静脉内皮细胞衰老的体外实验研究

目的：探究芹菜素对人脐静脉内皮细胞衰老的延缓作用及相关机制。方法：将人脐静脉内皮细胞培养至第12代（老年细胞）,且自第4代（幼年细胞）起,与芹菜素（1、3、10μmol&#183;L^-1）共孵育。通过检测细胞β-半乳糖苷酶（sAβ-gal）阳性率,推断细胞衰老程度;通过检测胞内双氢罗丹明氧化产物Rh123的荧光强度,推断胞内活性氧簇（ROS）水平,即氧化应激水平;通过检测培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量,推断胞内一氧化氮（NO）水平。结果：与幼年细胞组相比,老年细胞对照组中内皮细胞SAβ-gal阳性率及ROS水平均明显提高（P〈0．05）,且其培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量明显降低（P〈0．05）;在老年细胞组中,与对照组相比,芹菜素组中内皮细胞sAβ-gal阳性率及ROS水平均明显呈芹菜素剂量依赖性降低（P〈0．05）,而其培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量也明显呈芹菜素剂量依赖性增加（P〈0．05）。结论：芹菜素可延缓人脐静脉内皮细胞的衰老,且该作用与胞内ROS生成减少及NO生成增加有关。     

丹参对人脐静脉内皮细胞的保护机制

综述近年来丹参对人脐静脉内皮细胞的保护机制和临床研究进展.     

地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤内皮细胞的保护作用研究

目的观察地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用1×10^-6mol·L^-1的血管紧张素Ⅱ作为损伤因子模拟体内损伤模型。用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2（MTT）法检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率,对细胞上清液乳酸脱氢酶活力进行检测。观察地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用。结果与对照组相比,血管紧张素Ⅱ(1×10^-7,1×10^-6,1×10-5mol·L^-1)呈浓度依赖性及时间依赖性降低细胞活力和细胞凋亡率。地尔硫卓能够呈浓度依赖性提高细胞活力和凋亡率,且与血管紧张素Ⅱ相比,地尔硫卓能够呈浓度依赖性的减少细胞上清液乳酸脱氢酶活力。结论地尔硫卓对血管紧张素Ⅱ损伤的人脐静脉内皮细胞具有保护作用。     

他汀类药物干预对血管内皮细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的探讨单核细胞与血管内皮细胞相互作用对基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达的影响及阿托伐他汀对其干预作用,为预防动脉粥样硬化提供实验依据。方法体外培养的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-304)及健康人外周血分离的单核细胞用于实验。用(0.6×104,1.2×105,6×105,1.2×106,6×106)单核细胞与1.2×106HUVEC-304共同培养24h;1.2×106单核细胞与1.2×106HUVEC-304共同培养(6h,12h,24h,48h);1.2×106单核细胞与1.2×106HUVEC-304共同培养加(0.01、0.05、0.10、0.50、1.00μmol/L)阿托伐他汀孵育24h后,采用细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定MMP-1表达水平。结果单核细胞不分泌MMP-1,单核细胞刺激HUVEC-304分泌MMP-1显著增加(P<0.05),单核细胞与HUVEC-3041∶1共同培养时HUVEC-304 MMP-1分泌达最高峰(P<0.001)。单核细胞与HUVEC-3041∶1共同培养,HUVEC-304 MMP-1分泌呈时间依赖性,但24h与48h MMP-1的含量差异无统计学意义(P>0.05)。0.01μmol/L阿托伐他汀对HUVEC-304表达MMP-1无影响(P>0.05),0.05、0.10、0.50、1.00μmol/L的阿托伐他汀能明显抑制HUVEC-304表达MMP-1(P<0.05),抑制效应呈浓度依赖性。结论单核细胞与血管内皮细胞相互作用使MMP-1表达上调可能加速动脉粥样硬化的进程和斑块破裂。阿托伐他汀可抑制单核细胞刺激HUVEC-304表达MMP-1。