汉防己甲素对视网膜母细胞瘤细胞系HXO－Rb_（44）放射敏感性的影响

研究汉防己甲素（Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＤＲ）对人视网膜母细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ４４放射敏感性的影响，发现ＴＤＲ在低剂量（０．１μｇ／ｍｌ）时，虽对Ｒｂ细胞无直接抑制作用，但可明显增加放射线对Ｒｂ细胞的杀伤作用。随着药物浓度的增加，细胞杀伤率增高。放射前后给药无明显差别。ＴＤＲ主要通过抑制细胞的潜在致死性损伤的修复增加放疗效果。     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44抑癌基因的表达

目的检测视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞系ＨＸＯＲｂ４４中抑癌基因Ｒｂ的表达状况,为进一步研究ＲＢ的发病机制,利用抑癌基因Ｒｂ进行ＲＢ的基因治疗提供实验依据。方法用ＳＰ免疫组织化学（ＩＨＣ）及流式细胞术（ＦＣＭ）间接免疫荧光法对Ｒｂ基因的表达进行定性、形态学定位及定量检测。结果ＩＨＣ法检测显示：正常视网膜组织中Ｒｂ蛋白呈阳性反应,位于细胞核呈棕黄色;ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达阴性。ＦＣＭ检测显示：正常人淋巴细胞Ｒｂ蛋白表达量是ＨＸＯＲｂ４４细胞的３．７１倍,ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达量极低。结论ＲＢ细胞系ＨＸＯＲｂ４４中存在野生型Ｒｂ基因的功能失活,Ｒｂ基因的突变失活与ＲＢ的发生密切相关。     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44化疗敏感性及多药耐药性研究

对视网膜细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ４４进行１１种不同类抗癌药物的敏感性测试，显示该细胞系存在多药耐药现象，该细胞系在手术取材前及培养过程中，未接触过任何抗癌药物，提示这种多药耐药现象为该肿瘤细胞固有的。本研究为进一步探索视网膜母细胞瘤的化疗抗性，寻找新的抗癌靶点提供了理论依据。     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO一Rb_（44）放射敏感性研究

对人视网膜母细胞瘤细胞系Ｎｘｏ－Ｒｂ４４放射敏感性研究，发现经３Ｇγ射线照射后，细胞生长明显受抑制。集落形成法与ＭＴＴ法都显示该细胞系有较好的放射敏感性。乏氧可使该细胞系放射抗性增加，亚致死性损伤修复能力减弱，氧增比（ＯＥＲ）为２．７７～３．０１。     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44的建立及其生物学特性的检测

对２２例眼球摘除的视网膜母细胞瘤取材进行本外培养，从中建成一个连续细胞系（ＨＸＯ－Ｒｂ４４），在体外已生存近２１个月，传至１８０代，生物学特性显示其在外悬浮生长，排列成团状或链状，群体倍增时间为４４小时，细胞形态，免疫组化与原实体瘤相似，染色体为非整倍体，为数为６０条，在双层软琼脂上可形成克隆，具有较强的异体致瘤性。     

汉防己甲素对实验性葡萄膜炎的治疗作用及机制

用牛血清白蛋白诱发了家兔实验性葡萄膜炎。汉防己甲素(Tet 50 mg/kg/d ip)和地塞米松（Dex 5 mg/kg/d ip）治疗8天，能显著降低眼部炎症反应、房水蛋白含量、血清免疫复合物和外周T淋巴细胞转化率。停止给药后4天,Dex组房水蛋白和血清免疫复合物再度升高。Tet组虽有升高，但比Dex组明显为低。病理学检查发现Tet组脉络膜炎症比对照组明显为轻。结果表明，Tet抑制实验性葡萄膜炎，除了其抗炎作用外，还与其抑制体液和细胞免疫反应有关。 （中华眼底病杂志，1994，10：149-152）     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性研究

对人视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb₄₄放射敏感性研究，发现经3Gyγ射线照射后，细胞生长明显受抑制。集落形成法与MTT法都显示该细胞系有较好的放射敏感性。乏氧可使该细胞系放射抗性增加，亚致死性损伤修复能力减弱，氧增比（OER）为2.77~3.01。 （中华眼底病杂志，1994，10：217-219）     

汉防己甲素对体外人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制效应

目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人眼Tenon囊成纤维细胞(Tenon’s capsule fibroblasts,TCFs)的抑制效应。方法:用组织块和混合消化液培养法体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞,并对培养的传代细胞进行形态学的鉴定。采用MTT法检测不同浓度的汉防己甲素(10-4,10-5,10-6,10-7mol/L)及0.2g/L丝裂霉素(MMC)对人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用。结果:人眼Tenon成纤维细胞体外生长良好,经光镜和免疫组化观察证明该细胞为成纤维细胞。MTT法证实,随着Tet药物浓度的增大,TCFs增生活性降低,对应的TCFs抑制率升高。结论:Tet对人眼Tenon囊成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用。     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的:观察汉防己甲素(Tet)对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)分泌及表达的影响.方法:收集正常球结膜与初发翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液,ELISA法检测两种细胞培养上清液中MMP-1,MMP-3,MMP-9的含量及10-5mol/L的Tet作用48h翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液中含量的变化.荧光定量PCR检测10-5mol/L的Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-3mRNA表达的影响.结果:培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1,MMP-3含量较正常成纤维细胞上清中含量高[MMP-1:26928±1135→3148±74(ng/L),MMP-3:52593±1031→12490±3126(ng/L),P＜O.01],加入10-5 mol/LTet作用48h后明显下降[MMP-1:26928±1135→15064±533(ng/L),MMP-3:52593±1031→29943±561(ng/L),P＜O.01].培养的正常结膜及初发翼状胬肉成纤维细胞上清中未检测到MMP-9.初发翼状胬肉成纤维细胞MMP-3 mRNA是正常结膜组织成纤维细胞的3倍,10-5mol/L的Tet作用24h后表达量下降了27.1%.结论:Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-1,MMP-3的分泌有明显的抑制作用,并能抑制其细胞MMP-3 mRNA表达量.     

血栓通和汉防已甲素对实验性增殖性玻璃体视网膜病变的作用（摘要）

血栓通和汉防已甲素对实验性增殖性玻璃体视网膜病变的作用（摘要）郭小健，姜德咏，刘湘平，聂爱光增殖性玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＰＶＲ）是许多眼内疾病共有的病理过程。随着ＰＶＲ的动物模型研制成功，许多...     

汉防己甲素及对眼科疾病防治的研究进展

汉防己甲素是一种中药的有效成分，它具有消炎，镇痛，降血压，降血糖，抗肿瘤、抗矽肺，抗心率失常等广泛的药理作用，本文概述了汉防己甲素的药理作用及在眼科疾病防治上的研究发现，有望在临床上进一步防治这些疾患，提供一种有效的药物。     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO－Rb_（44）化疗敏感性及多药耐药性研究

对视网膜母细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ４４进行１１种不同类抗癌药物的敏感性测试，显示该细胞系存在多药耐药现象。该细胞系在手术取材前及培养过程中，未接触过任何抗癌药物，提示这种多药耐药现象为该肿瘤细胞固有的。本研究为进一步探索视网膜母细胞瘤的化疗抗性，寻找新的抗癌靶点提供了理论依据。     

汉防己甲素对PRK术后纤维连接蛋白的影响

目的探讨汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对兔准分子激光屈光性角膜切削术(photorefractive keratectomy,PRK)术后纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的抑制作用,并初步探讨其机制。方法健康新西兰大耳白兔60只,雌雄不限。随机分为实验组Tet0.5g·L-1组、1g·L-1组、2g·L-1组,艾氟龙(FML,1g·L-1)阳性对照组及生理盐水阴性对照组。于PRK术后1周、2周、1个月、2个月用裂隙灯显微镜进行Haze的分级并记录,用免疫组织化学法检测角膜基质FN的表达,并应用计算机图像分析系统进行定量分析。结果不同浓度Tet、FML滴眼,术后各时间点Haze形成明显减轻,与生理盐水相比差异有显著统计学意义(P<0.01)。正常兔角膜基质FN为阴性表达;PRK术后1个月生理盐水组角膜基质细胞FN呈强阳性表达;Tet各浓度组FN呈弱阳性表达;FML组FN呈阳性表达。Tet各浓度组与FML组、生理盐水组相比差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论Tet可能是通过减少细胞外基质——FN的生成而发挥其对Haze的抑制作用。     

汉防己甲素抑制自由基眼损伤的实验研究

目的 搪塞汉防己甲素对自由基眼损伤的影响。方法 将２４只实验兔随机分为汉防己甲素组及对照组。术后动态测定房水中丙醛含量。结果 汉防己甲素丙二醛含量明显低于对照组。结论 汉防己甲素能够显著抑制自由基引起的眼损伤。     

汉防己甲素对体外培养的兔结膜成纤维细胞抑制作用的实验研究

目的：观察汉防己甲素（Tet)对体外培养的兔结膜成纤维细胞（RCF）生长的抑制作用，探讨其作用的可能机制，为防治与成纤维细胞增殖相关的多种眼病提供一种有效的药物。方法：应用MTT法测定不同浓度的Tet对RCF的抑制作用；用细胞计数法观察不同浓度的Tet在不同时间下对RCF的生长抑制作用；用流式细胞仪检测Tet对RCF细胞周期的影响。结果：给药48小时后，终浓度为0．16、0．8、4、20、100μg/ml的Tet对RCF的生长均明显抑制作用；且在上述不同浓度的Tet作用下，于1、3、5、7天计数细胞，发现Tet对RCF的抑制具有时间、剂量关系。流式细胞仪显示，RCF经2μ/mlTet处理48h后，G1期细胞增加了13．3％，S期细胞下降了9．55％，G2期细胞下降了4．23％。结论：汉防己甲素可抑制RCF生长，有时间剂量效应。Tet影响RCF细胞周期各时相群体，抑制G1期向S期的过渡，进而阻止细胞向G2期的过渡，从而抑制细胞增殖。     

汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞抑制机制的实验研究

目的探讨汉防己甲素（Tet）对离体兔角膜基质细胞的抑制作用及其作用机制。方法 选用原代及传代兔角膜基质细胞，实验组加入含不同质量浓度Tet的培养液，对照组加入含等量PBS的培养液，同时用不同质量浓度氟美童作比较。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测对细胞增生的抑制；流式细胞仪（FCM）测定细胞周期和凋亡率的变化；透射电子显微镜观察其超微结构变化；免疫细胞化学检测其凋亡指标的改变。结果 Tet质量浓度为1～10μg／ml时，作用24、48、72h均明显抑制角膜基质细胞的增生（P〈0．01），并具有剂量-反应关系，其各时间点IC50均低于氟美童；FCM结果显示，实验组G0／G1期细胞增加，并可见细胞凋亡峰和凋亡率的升高；免疫细胞化学显示，实验组bax、bcl-2表达均增加，但bax增加更为明显。结论 Tet对角膜基质细胞的增生具有明显抑制作用，并呈现剂量-反应关系，其抑制作用强于氟美童。Tet可能通过诱导细胞凋亡和使细胞周期停滞在G0／G1期而发挥其抗增生作用。     

汉防己甲素对兔结膜成纤维细胞超微结构和兔眼内组织毒性作用

目的　观察汉防己甲素 (Tet)对兔结膜成纤维细胞超微结构的影响及对兔眼内组织的毒性作用。方法　用含 2、4mg·L-1的Tet作用于体外培养的兔结膜成纤维细胞(RCF) 4 8h ,观察Tet对其超微结构的影响 ;用含 30 0、6 0 0mg·L-1的Tet 0 1mL向兔眼玻璃体腔内注射 ,对照组玻璃体腔内仅注入 0 .1mL生理盐水。观察用药前、用药后 3、14d各组视网膜电流图 (ERG)、视觉诱发电位 (VEP)变化。结果　 2mg·L-1Tet作用RCF 4 8h后 ,电镜观察细胞超微结构无改变 ,而 4mg·L-1Tet作用RCF 4 8h后 ,细胞次级溶酶体数量增多 ,呈髓鞘样结构。向兔眼玻璃体腔内注射 30 0、6 0 0mg·L-1Tet 0 .1mL后 ,用药前及用药后 3dERG、VEP与对照组相比均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;而 6 0 0mg·L-1Tet行玻璃体腔内注射达 14d后 ,ERG、VEP与对照组相比有高度显著性差异 (P <0 .0 0 0 1)。结论　汉防己甲素对兔结膜成纤维细胞生长有一定的毒性作用 ,但适宜浓度的汉防己甲素应用于兔眼内组织防止成纤维细胞增殖是安全的。     

视网膜母细胞瘤细胞系SO—Rb50瘤细胞Rb基因突变动态变化研究

目的：研究SO－Rb50细胞系瘤细胞Rb基因突变的动态变化。方法：1．用Southern blot杂交法分析SO－Rb50细胞系第327代瘤细胞DNA。2．用PCR－SSCP法对SO－Rb50细胞系第415代及第713代瘤细胞的Rb基因27个外显子和1个启动子逐个筛查。3．将SO－Rb50细胞系的第775代克隆出3个细胞株：MC2、MC3及MC4。用PCR－SSCP－HA法对MC2、MC3及MC4第11代细胞和MC3第138代细胞的Rb基因的27个外显子逐个筛查。结果：SO－Rb50细胞系第327代细胞DNA缺失3．5Kb、2.9Kb及1.0Kb的三条带,证明SO－Rb50细胞系瘤细胞Rb基因缺失。第415代瘤细胞Rb基因第23外显子少一条单链;第713代第25外显子发生新的突变。SO－Rb50细胞系第775代的3个克隆株MC2、MC3及MC4的第11代细胞,只有MC4第24外显子突变;而MC3第138代第24外显子突变,提示MC3经多次传代后第24外显子发生新突变。结论：SO－Rb50细胞系在长期培养传代过程中,瘤细胞的Rb基因突变有动态变化。     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞相关因子分泌的影响

目的 观察翼状胬肉组织块分泌的相关因子变化,了解汉防己甲素（tetrandrine,Tet）对翼状胬肉病变的作用.方法 收集初发翼状胬肉（实验组）和正常球结膜组织块（对照组）体外培养上清液,ELISA检测上清液中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的含量及10^-5 mol·L^-1 Tet作用48 h实验组中各因子含量的变化.结果 实验组上清液中VEGF含量较对照组高（P＜0.01）;加入Tet作用48 h后明显下降（P＜0.01）,与对照组上清液中VEGF含量无差异（P＞0.05）.2组上清液中IL-1β的含量相比差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 VEGF在翼状胬肉新生血管形成中发挥着重要作用.汉防己甲素对翼状胬肉组织中VEGF的分泌有明显抑制作用,有良好的应用前景,但IL-1β在翼状胬肉中的作用仍需进一步研究.     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的实验研究

目的观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用，寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物。方法用MTT比色法测定不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增生的抑制作用，并与丝裂霉素C（MMC）进行比较；用荧光定量PCR检测10^-5mol／L的汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶（MMP）MMP-3 mRNA的表达的影响。结果不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增生均有明显的抑制作用（P〈0．01）；10^-5mol／L的汉防己甲素作用24h其MMP-3 mRNA的表达量下降了27．12％。结论汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞具有明显的抑制作用，可望用于对翼状胬肉的治疗。