鳖甲煎丸对HepG2裸鼠移植瘤Wnt信号通路相关分子及靶基因的影响

目的:通过研究鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关信号分子及靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌的分子机制。方法:建立裸鼠移植瘤肝癌模型,随机分为鳖甲煎丸高、中、低剂量(2.2,1.1,0.55 g·kg-1)组,模型组,正常组,肉眼观察鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长的抑制作用,免疫组化检测移植瘤组织中β-catenin和T-框蛋白3(TBX3)的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测其移植瘤组织中p19ARF,双微基因2(MDM2),p53的表达水平。结果:鳖甲煎丸对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,鳖甲煎丸能够抑制其移植瘤组织中β-catenin和TBX3的表达,和模型组比较,鳖甲煎丸高、中剂量组中β-catenin和TBX3表达均明显降低(P0.05)。同时,鳖甲煎丸能够促进人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤组织p19ARF和p53表达,并抑制MDM2表达,鳖甲煎丸高、中剂量组p19ARF,p53,MDM2表达较模型组均有明显差异(P0.05)。结论:鳖甲煎丸能通过影响Wnt/β-catenin通路,调控β-catenin和TBX3的表达,继而通过调控TBX3/p19ARF/MDM2通路激活抑癌基因p53,最终抑制肝癌细胞的增殖并诱导其出现凋亡,从而达到抗肝细胞癌的目的。     

鳖甲煎丸通过NF-κB信号通路抑制肝癌细胞上皮间质转化的作用机制

目的:研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β₁(TGF-β₁)诱导Hep G2细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨其抑制肝癌细胞EMT的作用机制。方法:以Hep G2细胞为研究对象,将细胞随机分为空白组,模型组(10μg·L^-1TGF-β₁),鳖甲煎丸低(10μg·L^-1TGF-β₁+0.55 g·kg^-1鳖甲煎丸)、中(10μg·L^-1TGF-β₁+1.1 g·kg^-1鳖甲煎丸)、高(10μg·L^-1TGF-β₁+2.2 g·kg^-1鳖甲煎丸)组,索拉非尼组(10μg·L^-1TGF-β₁+0.03 g·kg^-1索拉非尼)。用10μg·L^-1TGF-β₁诱导Hep G2细胞发生EMT,构建EMT模型。分别给予相应的含药血清处理后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖情况,分别采用细胞划痕实验,transwell迁移实验检测细胞迁移情况,采用免疫荧光、蛋白免疫印迹法分别检测EMT,核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,TGF-β₁刺激4 d后,细胞呈梭形改变,细胞之间变得松散,间隙增宽,伸出触角,同时E-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达降低(P<0.05),N-钙黏素(N-cadherin),波形蛋白(vimentin)蛋白表达升高(P<0.05),说明TGF-β₁刺激4 d成功构建了Hep G2细胞的EMT模型组。与模型组比较,用相应含药血清处理48 h,各用药组均能抑制已发生EMT作用的Hep G2细胞增殖,其中以鳖甲煎丸低、高剂量组最为显著(P<0.01)。与模型组比较,鳖甲煎丸中剂量组E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),磷酸化(p)-p65,N-cadherin,vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。与空白组比较,细胞划痕实验和transwell迁移实验表明TGF-β₁增强了Hep G2细胞的迁移能力(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组和索拉非尼组抑制Hep G2细胞迁移能力(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组促进p65,Snail入核表达;与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组和索拉非尼组抑制p65和Snail入核表达。结论:鳖甲煎丸可能通过抑制NF-κB信号通路来抑制TGF-β₁诱导Hep G2细胞的EMT进程、增殖和迁移,从而发挥抗肝癌的作用。     

鳖甲煎丸对人肝癌细胞Bel-7402VEGF/Dll4-Notch信号通路的影响

目的:观察鳖甲煎丸含药血清促进人肝癌细胞Bel-7402的凋亡作用,探讨其抑瘤作用与VEGF/Dll4-Notch信号通路之间的关系。方法:制备各浓度鳖甲煎丸大鼠含药血清,采用 AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术检测鳖甲煎丸对Bel-7402细胞凋亡的影响,Western blot方法检测细胞中VEGF、Dll4、NICD蛋白表达情况。结果:AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术结果表明鳖甲煎丸可有效促进肝癌细胞Bel-7402的凋亡;Western blot 结果显示鳖甲煎丸能降低VEGF、Dll4、NICD蛋白表达。结论:鳖甲煎丸可通过降低VEGF、Dll4、NICD蛋白表达,阻断VEGF/Dll4-Notch信号转导,抑制肿瘤血管生成,减少肿瘤血液供应,最终控制肿瘤生长。     

佛手柑内酯通过PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制

目的:探究佛手柑内酯通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路诱导人肝癌细胞Hep G2和Hep3B凋亡的机制。方法:设立佛手柑内酯(5,50,200μmol·L~(-1))组和空白组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测佛手柑内酯作用Hep G2和Hep3B细胞24,48 h细胞增殖;磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测相关m RNA和蛋白的表达含量;进行平板细胞克隆形成实验评价各组Hep G2和Hep3B细胞的克隆形成率与效果。结果:MTT实验表明,佛手柑内酯能明显抑制Hep G2和Hep3B细胞的增殖活性,且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析结果表明,佛手柑内酯200μmol·L~(-1)组作用于Hep G2和Hep3B细胞48 h,有明显促凋亡作用(P 0. 05); Western blot结果显示,佛手柑内酯可以上调半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-8蛋白表达量(P 0. 05),并且下调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),PI3K蛋白表达(P 0. 05); Real-time PCR显示PI3K,Akt m RNA相对表达量降低(P 0. 05);平板细胞克隆形成实验的结果显示,随着佛手柑内酯浓度的增加,各组细胞克隆形成率呈递减趋势,且佛手柑内酯200μmol·L~(-1)组作用降低明显(P 0. 05)。结论:佛手柑内酯对人肝癌细胞Hep G2和Hep3B的增殖存在抑制作用,其可能是通过PI3K/Akt信号通路诱导Hep G2和Hep3B细胞的凋亡。     

藏族药翼首草正丁醇部位提取物体外抑制人肝癌Hep3B细胞增殖和侵袭转移

目的:本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法:取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×104/m L(MTT法)或2.5×105/m L(Western blot,heochst 33258实验),1×105/m L(划痕实验),5×104/m L(Transwell实验),培养24,48,72 h后分别加入不同质量浓度的药物(50,100,200 mg·L-1),分组设3~4个复孔。通过MTT法检测YSC-ZDC对于Hep3B细胞增殖的影响,形态观察该药对Hep3B细胞凋亡的影响。划痕实验和Transwell小室检测YSC-ZDC对Hep3B细胞侵袭、迁移的影响;Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化。结果:YSC-ZDC 50,100,200 mg·L-1作用于Hep3B细胞24,48,72 h后可明显抑制其增长。50,100,200 mg·L-1YSC-ZDC作用于Hep3B细胞24 h后可明显抑制其侵袭和迁移;YSC-ZDC可明显影响上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏素,N-钙黏素(E-cadherin,N-cadherin)和纤维连接蛋白(FN)的表达(P0.05)。结论:YSC-ZDC能显著抑制Hep3B细胞的增殖和侵袭转移,并诱导Hep3B细胞凋亡,其作用机制可能与EMT有关。     

鳖甲煎丸通过TGF-β/Smad信号通路抑制DEN诱导肝癌大鼠上皮间质转化的机制

目的:通过研究鳖甲煎丸对二乙基亚硝胺(DEN)诱导肝癌模型大鼠中转化生长因子-β(TGF-β)/Smad通路信号分子及下游靶基因的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝癌侵袭转移的分子机制。方法:大鼠分为正常组、模型组、鳖甲煎丸组(2.2 g·kg-1·d-1),对模型组及鳖甲煎丸组大鼠使用DEN进行腹腔注射,诱导大鼠肝脏发生肝炎-肝硬化-癌变病理改变,鳖甲煎丸组在肝硬化阶段给予鳖甲煎丸连续灌胃6周,收集血清及肝脏标本。采用试剂盒检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),白蛋白(Alb),γ-谷氨酰转肽酶(GGT),碱性磷酸酶(ALP);苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏病变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测转化生长因子(TGF)-β1的mRNA转录水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β/Smad通路中TGF-β1,Smad2/3,磷酸化Smad2/3及上皮间质转化标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin),E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。结果:鳖甲煎丸组与模型组之间肝功能指标差异均无统计学意义。与模型组比较,鳖甲煎丸能改善大鼠肝癌组织中细胞呈气球样变性、水肿、凝固性坏死的病理变化,降低肝癌组织中TGF-β1mRNA转录及蛋白表达水平(P0.01),下调磷酸化Smad2蛋白表达水平(P0.01),同时下调下游靶基因蛋白N-cadherin,Vimentin蛋白表达水平(P0.01)。结论:鳖甲煎丸可能通过减少肝癌组织中TGF-β1的表达水平,抑制由TGF-β/Smad通路激活介导的肝癌细胞上皮间质转化(EMT),从而达到抗肝细胞癌转移侵袭的作用。     

大柴胡汤含药血清通过Sirt3线粒体途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的:探讨大柴胡汤含药血清抑制人肝癌Hep G2细胞增殖的作用机制。方法:采用血清药理学方法制备大柴胡汤含药血清。以Hep G2人肝癌细胞为对象,采用噻唑蓝法测定其对生长抑制的影响,倒置相差显微镜观察含药血清对Hep G2细胞作用后形态改变,罗丹明123荧光染色观察细胞线粒体膜电位的变化,免疫印迹实验探讨其作用机制。结果:与空白血清组比较,大柴胡汤组(8.1 g/kg)5%、10%和20%含药血清能够抑制Hep G2人肝癌细胞增殖并呈时间-浓度依赖性特点。5%、10%和20%大柴胡汤含药血清作用24 h后,能够显著降低细胞线粒体膜电位并下调Sirt3、PI3K、Akt、NF-κB和Bcl-2蛋白表达,上调Bax和Caspase3蛋白表达。结论:大柴胡汤含药血清能够显著抑制人肝癌Hep G2细胞增殖并通过线粒体依赖的Sirt3/PI3K途径发挥作用。     

蜂毒素基因重组腺病毒对人肝癌Hep3B细胞增殖抑制作用

采用现代分子生物学手段,将蜂毒素基因重组入复制缺陷型腺病毒骨架,并在蜂毒素基因上游插入特异性的甲胎蛋白启动子,构建成功携蜂毒素基因的重组腺病毒。体外实验证明,该重组腺病毒可特异性地杀伤分泌AFP的肝癌细胞。目的:观察携动物毒素基因重组腺病毒在体外对人肝癌细胞的杀伤作用。方法:用X-gal染色法测定腺病毒介导基因转染的效率;将携蜂毒素基因重组腺病毒转染人肝癌Hep3B细胞,采用细胞计数及MTT法测定转染后对Hep3B细胞的增殖抑制作用,并采用流式细胞术测定基因转染后对增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。结果:重组腺病毒对Hep3B细胞具有较高的转染效率;细胞计数及MTT实验证明携蜂毒素基因重组腺病毒转染后,人肝癌Hep3B细胞的增殖受到明显抑制,PCNA标记指数下降。结论:携蜂毒素基因重组腺病毒在体外可抑制肝癌细胞增殖,抑制PCNA的合成可能是其作用机理之一。     

经方鳖甲煎丸抑制H22肝癌细胞血管生长的实验研究

目的:探讨经方鳖甲煎丸对H22肝癌细胞荷瘤小鼠血管生长的抑制效果,为鳖甲煎丸在肝癌治疗的临床应用提供动物实验理论依据。方法:选用120只昆明小鼠,以H22肝癌细胞建立H22荷瘤小鼠动物模型,随机分为A组、B组、C组和D组各30例,A组为高剂量鳖甲煎丸灌胃服用,B组为低剂量鳖甲煎丸灌胃服用,C组为环磷酰胺注射液腹腔注射,D组为阴性对照组,连续用药15d后将其处死,剥离瘤块并检测肿瘤组织的微血管计数和血管内皮生长因子表达阳性的细胞面积占肿瘤细胞面积的比例并进行对比。结果:A组小鼠的微血管计数结果为(4.08±1.32)条,显著少于其余三组小鼠(均P0.05);B组小鼠的微血管计数结果为(7.72±1.51)条,显著少于C组和D组小鼠(均P0.05);A组小鼠的血管内皮生长因子表达阳性细胞所占面积为(2.32±1.08)%,显著少于其余三组小鼠(均P0.05);B组小鼠的血管内皮生长因子表达阳性细胞所占面积为(5.61±1.42)%,显著少于C组和D组小鼠(均P0.05),C组小鼠的血管内皮生长因子表达阳性细胞所占面积为(9.21±3.36)%,显著少于D组小鼠(P0.05)。结论:鳖甲煎丸可显著降低H22荷瘤小鼠肝癌组织血管内皮生长因子的表达,抑制新生微血管的生成,进而对肿瘤组织的生长和转移有一定的抑制作用。     

珍珠梅黄酮纳米粒调控STAT3抑制人肝癌HepG2细胞侵袭和转移作用的研究

目的探讨中药珍珠梅黄酮纳米粒(5,2’,4’-trihydroxy-6,7,5’-trimethoxy flavone nanoparticle,TTF1-NP)调控STAT3抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭、转移的作用和分子机制。方法利用Western blot技术检测人肝癌HepG2细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达,利用Transwell和细胞划痕技术检测人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移能力,采用Western blot技术检测细胞侵袭迁移的相关蛋白MMP2和MMP9表达。结果 Western blot检测发现TTF1-NP可以抑制人肝癌Hep G2细胞STAT3的活化表达,通过抑制MMP2和MMP9表达抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移。结论 TTF1-NP通过抑制STAT3的活化抑制MMP2和MMP9蛋白表达抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移。     

鳖甲煎丸抗肝癌转移的理论依据及分子机制探讨

转移和侵袭是肝癌的基本特征,也是影响肝癌治疗效果的重要因素。肝细胞癌的转移侵袭与Wnt/β-catenin信号通路密切相关。针对肝癌转移的病机特点,从扶正培本、解毒散结及活血化瘀等3个方面分析了鳖甲煎丸抗肝癌转移的防治原则和理论依据。在此基础上,深入探讨鳖甲煎丸干预肝细胞癌转移的作用机制和分子机制,对筛选肝细胞癌的预后指标和寻找新的治疗靶点、深化和完善肝细胞癌转移侵袭的基础理论研究具有十分重要的意义。     

鳖甲煎丸抑制肝癌细胞增殖、黏附及侵袭作用的实验研究

目的 研究鳖甲煎丸对肝癌细胞生长增殖、黏附及侵袭能力的影响,初步探讨鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。方法 运用血清药理学方法,以高、中剂量的鳖甲煎丸含药血清和空白血清分别培养肝癌细胞HepG2,采用MTT 比色法、细胞黏附实验和transwell侵袭实验检测药物对细胞生长、黏附和侵袭作用的影响,以进一步阐明鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。结果 高剂量和中剂量含药血清可显著抑制肝癌细胞生长增殖,对基底膜的黏附及侵袭穿越迁移亦有抑制作用,且该作用与药物浓度有关。结论 鳖甲煎丸能显著抑制肝癌细胞的生长增殖、黏附及转移侵袭。     

柚寄生总黄酮的提取工艺优化及其体外抑制人肝癌细胞Hep3B作用的初步评价

目的:优选柚寄生总黄酮的提取工艺,并初步评价总黄酮体外抑制人肝癌细胞Hep3B的作用。方法:以芦丁为对照品测定柚寄生提取液的总黄酮含量,选取提取时间、提取温度、料液比及乙醇体积分数为影响因素,采用正交试验法优选柚寄生总黄酮的提取工艺条件,采用单因素试验考察提取次数;采用MTT法测定总黄酮对人肝癌细胞Hep3B的体外抑制作用。结果:优选的提取工艺为加30倍量60%乙醇于80℃提取2次,每次2 h;体外抗肿瘤活性试验结果表明,总黄酮质量浓度500 mg·L-1时对人肝癌细胞Hep3B的生长抑制率51.40%。结论:优选出的柚寄生总黄酮提取工艺条件稳定可行,柚寄生总黄酮有一定的体外抑制人肝癌细胞Hep3B的作用。     

蜂毒素基因重组腺病毒对人肝癌Hep3B细胞增殖抑制作用

采用现代分子生物学手段，将蜂毒素基因重组入复制缺陷型腺病毒骨架，并在蜂毒素基因上游插入特异性的甲胎蛋白启动子，构建成功携蜂毒素基因的重组腺病毒。体外实验证明，该重组腺病毒可特异性地杀伤分泌AFP的肝癌细胞。目的：观察携动物毒素基因重组腺病毒在体外对人肝癌细胞的杀伤作用。方法：用X－gal染色法测定腺病毒介导基因转染的效率；将携蜂毒素基因重组腺病毒转染人肝癌Hep3B细胞，采用细胞计数及MTT法测定转染后对Hep3B细胞的增殖抑制作用，并采用流式细胞术测定基因转染后对增殖的细胞核抗原（PCNA）的影响。结果：重组腺病毒对Hep3B细胞具有较高的转染效率；细胞计数及MTT实验证明携蜂毒素基因重组腺病毒转染后，人肝癌Hep3B细胞的增殖受到明显抑制，PCNA标记指数下降。结论：携蜂毒素基因重组腺病毒在体外可抑制肝癌细胞增殖，抑制PCNA的合成可能是其作用机理之一。     

鳖甲煎丸含药血清对SMMC-7721肝癌细胞凋亡的影响

目的研究鳖甲煎丸含药血清对SMMC-7721肝癌细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测鳖甲煎丸不同浓度含药血清(0%、2%、4%、6%、8%、10%、12%、14%、16%)对肝癌细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测鳖甲煎丸含药血清对SMMC-7721细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR检测鳖甲煎丸含药血清对SMMC-7721细胞BAX、Bcl-2、STAT3 mRNA表达;Western blot法检测细胞BAX、Bcl-2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果分别处理SMMC-7721细胞24、28 h,鳖甲煎丸含药血清能明显抑制肝癌细胞的增殖,具有浓度依赖性。鳖甲煎丸含药血清(5%、10%、15%)作用肝癌细胞24 h后,细胞总凋亡率显著增高(P0.01),随浓度增加而增高。与空白对照组比较,鳖甲煎丸含药血清(10%、15%)上调BAX mRNA表达(P0.05),而BAX蛋白表达不明显;除5%含药血清鳖甲煎丸组Bcl-2 mRNA外,鳖甲煎丸含药血清(5%、10%、15%)下调Bcl-2、STAT3 mRNA和蛋白表达,并能抑制STAT3磷酸化,升高BAX/Bcl-2比值(P0.05,P0.01)。结论鳖甲煎丸含药血清诱导SMMC-7721肝癌细胞发生凋亡可能与影响STAT信号通路有关。     

不同浓度槲皮素对人肝癌细胞株Hep3B、Huh7细胞凋亡的影响

目的 观察不同浓度槲皮素对人肝癌细胞株Hep3B、Huh7凋亡的影响.方法 将人肝癌细胞株Hep3B、Huh7分别种植于96孔板中,每孔2×105个细胞,设6个复孔,放入37℃、5％CO2培养箱中培养至贴壁生长.加入不同浓度槲皮素(0、10、50、100 μM)干预,48h后用胰蛋白酶收集细胞,利用流式细胞仪分析不同浓度槲皮素干预下Hep3B、Huh7细胞周期分布情况.结果 槲皮素浓度为10、50、100 μM时,Hep3B和Huh7在Pre-G0期随浓度增加所占百分比升高,并且以100 μM时所占百分比最高(P＜0.01),而在不同浓度槲皮素干预下的G1期、S期和G2/M期时Hep3B和Huh7所占百分比显著降低(P＜0.01). 结论 槲皮素可诱导人肝癌细胞株Hep3B、Huh7的凋亡,并且以浓度为100μM时效果最好.     

鳖甲煎丸抗肝癌作用机制研究进展

肝癌是消化系统常见恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。鳖甲煎丸出自《金匮要略》,具有软坚散结、行气活血、祛湿化痰等功效,广泛用于肝脏系统疾病的治疗。现代研究证实,鳖甲煎丸能够显著抑制肝癌细胞生长、侵袭及转移,其主要从抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡、阻滞肝癌细胞周期、抑制肝癌细胞侵袭转移、抑制肿瘤血管生成、改善肿瘤微环境、增强机体免疫功能等途径发挥抗肝癌作用。鳖甲煎丸抗肝癌作用机制研究多集中于单一通路,且多为细胞和动物实验,发挥抗肿瘤的有效成分、量效关系尚不完善,缺少逆转肝癌耐药方面的相关研究。未来可从以上几点进行深入研究,为临床应用提供新的科学依据。     

鳖甲煎丸对肝癌大鼠黏着斑激酶/雷帕霉素靶蛋白通路的影响

目的:探讨鳖甲煎丸对肝癌模型大鼠肝组织病理特征及FAK/mTORC1通路的影响。方法:HepG2(1×10⁷)细胞注射于大鼠右腋皮下,建立肝癌模型,分为模型组、5-氟尿嘧啶组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,另设正常组。各药物组给予相应药物灌胃,持续给药4周,正常组、模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。实验结束后,测定肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、肝癌FAK、mTORC1水平、肝癌VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白、肝癌FAK、mTORC1 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,5-氟尿嘧啶组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率、VEGFR-2、VEGF、IL-4、IL-8、TNF-α蛋白、肝癌FAK、mTORC1 mRNA和蛋白表达降低(均P<0.05)。鳖甲煎丸高剂量组肝癌组织重量、肝癌组织体积、肝癌组织抑瘤率...     

鳖甲煎丸对肝癌细胞Bcl-2、Bax表达及IL-6/Stat3信号通路的影响

目的探讨鳖甲煎丸对H22小鼠肝癌细胞的作用机制,并对其相关信号通路进行研究。方法制造H22肝癌移植瘤模型,对荷瘤鼠瘤重、胸腺指数进行检测;采用酶联免疫吸附测定(Elisa)法对荷瘤鼠血清IL-6检测;免疫组织化学法检测H22细胞中Stat5b蛋白表达;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测鳖甲煎丸对H22细胞的Bcl-2、Bax和Stat3 mRNA表达的影响,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Bax、Bcl-2、Stat3和p-Stat3的蛋白表达。结果与模型对照组相比,鳖甲煎丸降低H22荷瘤鼠瘤重(P0.01),提高胸腺指数(P0.05),降低IL-6的含量(P0.01),具有剂量依赖性;鳖甲煎丸上调Bax mRNA和蛋白表达(P0.01),下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P0.01);鳖甲煎丸抑制Stat3 mRNA和Stat3、Stat5b蛋白表达(P0.01),p-Stat3蛋白表达也下调(P0.05)。结论鳖甲煎丸可能通过下调Bcl-2,上调Bax基因表达,并抑制IL-6/Stat信号通路,发挥其抗肿瘤作用。