人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素自身受体激活效应

目的 了解剖宫产应激过程中人胎盘促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及其受体CRH-R1的差异表达.方法 分别采用免疫组织化学技术LsAB法和原位杂交技术,观察先兆临产前人足月妊娠剖宫产正常胎盘CRH及其受体CRH-R1的表达.结果 8例正常妊娠胎盘组织切片4种靶目标CRH、CRH mRNA、CRH-R1、CRH-R1 mRNA表现为阳性或强阳性表达,而CRH-R1、CRH-R1 mRNA表达强度又分别强于CRH、CRH mRNA(P＜0.01),CRH-R1阳性表达的灰度值高于CRH (P＜0.05).结论 人正常足月妊娠胎盘组织细胞在剖宫产应激过程中升高的CRH可能会刺激自身受体CRH-R1表达,人正常足月妊娠胎盘组织细胞可能存在CRH自身受体激活效应.     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞死亡受体Fas、TNFR1mRNA表达的影响

目的通过观察同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞死亡受体Fas、TNFR1mRNA表达的研究,探索同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞凋亡的分子机制。方法应用RT-PCR技术对死亡受体Fas、TNFR1mRNA的表达进行观察。结果 RT-PCR技术检测结果发现同型半胱氨酸使血管平滑肌细胞Fas、TNFR1mRNA的表达呈浓度和时间依赖性上调（P〈0.05）。结论同型半胱氨酸诱导人血管平滑肌细胞死亡受体Fas、TNFR1 mRNA表达增加,这可能是同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞凋亡的机制之一。     

雌激素受体α和β mRNA变异型在胎盘组织的表达及定位

目的 探讨人足月胎盘组织雌激素受体α、β（ERα、ERβ）的mRNA变异型种类及其在胎盘的组织细胞学定位。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术和免疫组织化学技术检测正常足月妊娠胎盘组织中ERα、ERβ表达及细胞学定位。结果 人足月胎盘组织中有ERα、ERβmRNA的表达,胎盘组织中ERβmRNA的表达为ERβ5变异型ERα表达定位于滋养层细胞滋养细胞核,ERβ表达定位于滋养层合体滋养细胞胞浆。结果 ERβ5是胎盘组织ERβ的变异型种类,定位于胎盘合体滋养细胞,与胎盘合成和分泌雌激素有关。     

一氧化氮合酶在肝癌血管生成和转移中的作用

观察结构型一氧化氮合酶（cNOS)、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体KDP,肥胖抑素（Leptin)及其受体ob-R在正常肝组织、肝硬化和原发性肝癌中表达的不情况,分析它们与微血管密度（MVD）、Ki-67及其相互之间的关系,探讨cNOS及血管生长因子在原发性肝细胞癌血管生成、肿瘤细胞增殖和转移过程中的调节作用。方法 运用原位杂交技术,检测cNOS mRNA在20例正常肝组织、40例肝硬化、80例肝癌标本中的表达分布和定位情况;采用SP免疫组织化学方法,检测VEGF及其受体KDR、Leptin及其受体ob-R在40例正常肝组织、60例肝硬化、95例肝癌标本中的表达变化。结果 （1）肝细胞癌及非癌性肝组织中血管内皮细胞、肝癌细胞及单核／吞噬细胞上均可见有cNOS mRNA的表达;肝细胞癌、肝硬化中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达率＞肝硬化组织中的肝细胞＞正常肝组织中的肝细胞;肝癌组织中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达者的MVD、细胞增殖指数明显高于阴性表达者;肝癌中细胞增殖指数随着MVD的增大而增高,且有转移倾向的肝癌MVD和细胞增殖指数明显高于无转移倾向的肝癌。（2）VEGF及其受体KDR与肝癌MVD、细胞增殖指数及转移发生率密切相关;肝癌血管内皮细胞cNOS的表达和癌细胞VEGF的表达密切相关,两项均阳性者MVD明显高于cNOS阴性VEGF阳性者,VEGF阴性表达时,cNOS的表达情况对肝癌MVD没有影响。（3）Leptin在肝细胞癌中的表达明显高于肝硬化和正常肝组织,且Leptin强阳性表达者的MVD明显较高,Leptin在肝癌血管内皮细胞上也有表达,而且阳性表达者的MVD及转移发生率显著高于阴性者;肝癌组织中癌细胞Ob-R的表达与MVD之间未见明显相关,血管内皮细胞上可少量Ob-R的表达;肝癌细胞VEGF的表达和血管内皮细胞Leptin的表达呈正相关关系,两项均阳性表达者MVD和转移发生率明显增高;肝癌cNOS与Leptin的表达之间未明显相关。结论 （1）肝癌细胞cNOS的表达可能参与肝癌发生过程;（2）肝癌血管内皮细胞cNOS的表达在肝癌的血管生成和肿瘤细胞增殖过程中起着重要的作用;（3）cNOS和VEGF在肝癌血管生成中相互关联、共同作用,cNOS可能主要在VEGF介导的肿瘤血管生成过程中发挥促血管生成作用;（4）VEGF和Leptin在肝癌的血管生成和转移过程中互相关联、共同作用;（5）cNOS和Leptin在肝癌血管生成方面的作用仅是简单的叠加作用。     

大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活子4及mRNA的表达及其意义

目的 研究大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活因子4（STAT4）蛋白及其mRNA表达的变化，探讨其在哮喘性气道炎症形成中的作用。方法 复制大鼠哮喘模型，采用免疫组织化学和组织原位杂交法检测哮喘组及对照组大鼠肺组织STAT4蛋白及其mRNA的表达。结果 STAT4蛋白及其mRNA在两组大鼠气道平滑肌细胞和肺细小动脉的血管平滑肌细胞及内皮细胞上均呈不同强度的阳性表达。对照组STAT4蛋白及其mRNA含量均高于哮喘组（均P〈0．01）。结论 哮喘大鼠气道平滑肌细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞STAT4蛋白及其mRNA的表达被抑制。     

血管内皮生长因子与妊娠及流产的研究进展

血管内皮生长因子（VEGF）又称血管通透因子（VPF），是一种重要的血管生成因子，主要由血管内皮细胞产生。它是近年来发现的作用于血管内皮细胞的高效促有丝分裂因子，在刺激新血管发生、生长及维持血管壁的完整性和通透性方面均具有重要意义。在妊娠过程中胎儿胎盘均有较高的VEGF及其受体（VEGF-R）表达。VEGF在受精、着床、胎盘血管形成及胎儿生长发育中起重要作用。而VEGF功能缺陷可能是流产的重要原因之一。     

大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法：建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定；使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-1的mRNA表达；用免疫组织化学和Western Blot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果：通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定；原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-1的mRNA；免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达，Western Blot显示bFGF有18KDa、22KDa、22．5KDa3种异构体形式。结论：大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1 mRNA，bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。     

乙型肝炎病毒宫内感染相关因素的探讨

目的探讨孕妇乙型肝炎病毒感染状态及胎盘感染与宫内感染关系，进而分析乙型肝炎病毒宫内感染的危险因素。方法采用荧光定量PCR技术及酶联免疫吸附试验，对92例HBsAg阳性孕妇及其新生儿的外周血行HBV DNA及乙肝血清标志物检测。采用免疫组化S-P法，对92例HBsAg阳性孕妇分娩时胎盘组织行HBsAg及HBcAg的检测。结果（1）HBeAg阳性孕妇与HBeAg阴性孕妇HBV宫内感染率分别为21．2％（11／52）和0（0／40），差异有显著性（P〈0．01）；HBV DNA阳性孕妇与HBV DNA阴性孕妇HBV宫内感染率分别为18．64％（11／59）和0（0／33），差异有显著性（P〈0．025）。（2）92例HBsAg阳性孕妇的胎盘中共检测出43例HBsAg和（或）HBcAg阳性，阳性率由胎盘的母面至胎儿面有逐渐下降的趋势。由胎盘屏障的蜕膜细胞（DC）、滋养层细胞（TC）、绒毛间质细胞（VSC）和绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染而致的宫内传播的相对危险度比值比（0R）分别为4．53、7．15、9．33和24．33，0R值从胎盘的母面至胎儿面有逐渐上升的趋势。结论新生儿宫内感染与孕妇乙肝感染状态有关，HBV宫内感染以经胎盘感染为主，感染胎儿的途径可能是通过细胞转移方式实现的，胎盘屏障对胎儿有一定的保护作用。HBeAg阳性、HBV DNA阳性及绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染是新生儿宫内HBV感染的危险因素。     

足月妊娠胎盘滋养细胞FasL表达与母血促肾上腺皮质激素释放激素浓度的关系

目的:研究胎盘滋养细胞FasL表达及母体外周血促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)浓度与足月妊娠的关系,探讨CRH是否参与调控足月妊娠胎盘滋养细胞FasL的表达以及二者在病理妊娠中的意义。方法:随机选取分娩孕妇142例分为正常妊娠组90例和病理妊娠组52例,ELISA法检测CRH浓度,免疫组化测定Fas L的表达,分析胎盘上FasL表达及母血CRH浓度与足月妊娠的关系。结果:正常足月妊娠外周血CRH水平40周以前CRH随孕周增高而增高,40周以后有下降趋势;足月妊娠期高血压疾病孕妇外周血CRH较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);胎儿窘迫、胎膜早破、羊水过少与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05);妊娠期高血压疾病、胎儿窘迫胎盘Fas L的表达低于正常妊娠组(P<0.05),胎膜早破、羊水过少胎盘Fas L的表达与正常妊娠组比较差异均无统计学意义(P>0.05);足月妊娠胎盘滋养细胞Fas L表达与CRH无相关性。结论:CRH可以在一定程度上反映胎盘功能,Fas L表达降低可能是与胎盘有关的足月病理妊娠的病因,Fas L在足月妊娠中不受CRH调控,二者在病理妊娠中的作用及机制尚需要进一步探讨。     

HBsAg阳性孕妇足月分娩胎盘HBV感染状态的免疫组织化学研究

目的：拟从观察胎盘乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染状态，探讨ＨＢＶ宫内传播发生的机制，以期为进一步预防ＨＢＶ宫内传播提供科学依据．方法：采用ＡＢＣ免疫组织化学染色检测ＨＢｓＡｇ阳性孕妇足月分娩胎盘ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ感染和分布状态．结果：在６２例足月分娩胎盘中，２１例检出了ＨＢｓＡｇ，８例检出ＨＢｃＡｇ．ＨＢｓＡｇ主要分布于蜕膜血管内皮细胞（１８例）、蜕膜细胞（２１例）、滋养层细胞（８例）、绒毛间质细胞（８例）和绒毛血管内皮细胞（５例）的胞浆和绒毛间隙（２１例）中．ＨＢｃＡｇ分布于蜕膜细胞（５例）、蜕膜血管内皮细胞（８例）和绒毛间质细胞（８例）的胞核内．结论：结果提示，ＨＢＶ可在胎盘组织中复制．ＨＢＶ经胎盘感染胎儿的主要途径可能是经血和（或）细胞传递方式实现的．即ＨＢＶ经蜕膜细胞和（或）绒毛间感染滋养层细胞，然后感染绒毛间质细胞，最终感染胎儿毛细血管内皮细胞     

骨髓间质干细胞和脱细胞基质构建组织工程血管的动物实验

目的以骨髓细胞作为种子细胞,血管脱细胞组织基质作为支架、构建组织工程血管。方法分离小猪骨髓单个核细胞,分别置于内皮细胞培养液和平滑肌细胞培养液中培养,观察分化细胞的抗原标志;多步骤法制备犬血管脱细胞组织基质,将未经分化的骨髓单个核细胞种植于脱细胞基质构建组织工程血管,移植至骨髓供体小猪,代替部分肺动脉血管。结果小猪骨髓细胞经内皮细胞培养液或平滑肌细胞培养液培养后,分别出现成熟内皮细胞或平滑肌细胞的形态学改变,并分别表达内皮细胞或平滑肌细胞的特异性抗原;组织工程血管移植100d后管腔通畅,无血栓、钙化或动脉瘤形成,内皮细胞和平滑肌细胞分化、增殖良好;移植血管的最大负载为2．76N,最大伸长度为20．31mm。结论骨髓单个核细胞复合脱细胞基质可成功构建组织工程血管。     

TRPV4在小鼠脑血管内皮细胞中的表达及对血管张力调节作用研究

目的 比较瞬时受体电位(TRP)通道家族中香草素受体亚家族(TRPV)和经典瞬时感受器电位亚家族(TRPC)在小鼠脑、心和肝微血管内皮细胞表达差异,寻找脑微血管中具有特异性高表达亚型,阐明其对脑动脉血管舒张的调节作用.方法 挖掘GEO数据库中芯片表达谱数据,分析各个通道亚型差异表达情况,再采用免疫组化检测TRPV4、TRPP2和TRPC1在脑基底动脉中表达情况,血管张力实验检测TRPV4通道在调节小鼠脑基底动脉舒张中的效应.结果 通过分析表达谱数据显示,在小鼠脑、心和肝三种微血管内皮中,TRPV4通道在脑微血管内皮细胞显著高表达,而TRPC3通道显著低表达.TRPV4、TRPP2和TRPC1在脑基底动脉内皮和平滑肌层也显著表达.TRPV4通道激动剂GSK1016790A能浓度依赖地舒张苯肾上腺素引起的脑基底动脉收缩,而且其舒张效应可以被TRPV4通道阻断剂HC067047所阻断.结论 与心和肝血管内皮细胞相比,TR-PV4通道在小鼠脑血管内皮细胞中显著高表达,可能在调节脑血管内皮功能中具有重要意义.     

生物反应器构建组织工程化血管的初步研究

目的探讨生物反应器内构建具有一定力学强度的组织工程化血管的可行性。方法从6月龄毕格犬的颈总动脉、颈外静脉分别获取平滑肌细胞和内皮细胞,体外培养扩增后,将平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸（PGA）上形成细胞-材料复合物,置于生物反应器内（搏动频率75次／min;扩张量〈5％）培养3周,接种内皮细胞继续培养1周后取新生血管,进行大体观察、组织学和免疫组化检测。结果生物反应器内培养的组织工程化血管大体观察具有良好的弹性,管腔圆;平滑肌纤维成分排列规则且有层次感;免疫组化染色显示,平滑肌细胞呈棕黄色层状排列,内皮细胞于血管内侧呈单层排列。结论应用生物反应器可构建具有良好弹性的组织工程化血管。     

冠状血管平滑肌细胞发生机制的研究进展

冠状血管为心脏提供营养及氧供,对心脏的正常工作至关重要。冠状血管的管壁主要由平滑肌细胞及内皮细胞构成,平滑肌细胞的结构和功能对冠状血管及心脏的正常工作有重要影响。控制细胞分化、迁移及平滑肌前体细胞数量的分子通路决定了冠状血管的结构及容量。这些信号通路的异常会导致血管畸形,故了解这些机制有益于利用前体细胞进行体内细胞重排从而诱导血管再生。     

过期妊娠胎盘和子宫肌层雌、孕激素受体表达的免疫组化研究

目的　对胎盘和子宫肌层雌激素受体 (ER)及孕酮受体 (PR)的表达进行检测 ,探讨ER及PR与过期妊娠的关系。方法　采用免疫组化法结合计算机辅助图像分析技术 ,定量分析过期妊娠胎盘和子宫下段肌层组织ER及PR表达。结果　①胎盘合体滋养细胞及子宫平滑肌细胞均有ER和PR的表达。②过期妊娠子宫下段肌层PR含量高于足月妊娠者 (PU值 9 2 2± 0 72vs 8 5 6± 0 68) ,ER含量低于足月妊娠者 (PU值 8 3 6± 0 73vs 10 5 3± 0 5 7)。过期妊娠胎盘和子宫下段肌层ER/PR比值均低于足月妊娠者 (PU值分别为 1 2 9± 0 11vs 1 41± 0 16,0 91± 0 10vs 1 2 2±0 14 )。结论　胎盘和子宫下段肌层ER/PR比值低下与过期妊娠的发生有关。     

大鼠提睾肌神经损伤后Bcl-2、Bax和P_(53)在血管平滑肌细胞和内皮细胞的表达

目的　研究大鼠提睾肌神经损伤后血管平滑肌细胞和内皮细胞的Bcl -2、Bax及P53 表达和意义。方法以免疫组织化学SP法 ,对大鼠提睾肌神经损伤后的血管平滑肌细胞和内皮细胞的Bcl -2、Bax及P53 表达进行研究。结果　支配提睾肌的神经损伤后 ,Bcl-2、Bax和P53 均有表达。在平滑肌细胞中 ,Bcl -2的表达明显强于Bax和P53,而在内皮细胞Bax和P53 的表达强于Bcl-2。结论　大鼠提睾肌损伤后平滑肌细胞有增殖现象 ,而内皮细胞则可能出现过度凋亡 ,上述改变可能对微循环产生不利影响。     

疏血通对VEGFR-2及SRF表达的影响

目的探讨生物药品疏血通对血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)和血清应答因子(SRF)表达的影响及其促进血管生长的机制。方法在内皮细胞培养基中加入药物疏血通的稀释液,药物与细胞作用后,在6个特定的时间点,采用免疫细胞化学染色方法,通过阳性细胞计数,检测VEGFR-2和SRF蛋白的表达。结果与对照组比较,疏血通处理组VEGFR-2和SRF蛋白表达水平明显增高(P<0.01)。结论疏血通能明显增加体外培养的血管内皮细胞VEGFR-2和SRF的表达,其促血管生长的可能机制之一是通过诱导内皮细胞增殖及血管平滑肌细胞分化,从而促进新生血管形成。     

成人和3种成体哺乳动物血管组织动力学研究

目的:观察正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁组织结构及其演化关系,探讨血管的组织动力学过程.方法:5例成人尸检大动脉和中动脉标本、5只家犬主动脉和股动脉标本、12只大鼠大动脉至髂动脉标本、3只家兔大动脉标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成人与成体犬、大鼠、家兔大中血管壁一般包括内膜、中膜、外膜和鞘膜4层.血管内膜内皮表面可见成血-血管干细胞归巢和内化与血液沉积物及其表面内皮化;内膜与中膜之间可见内膜细胞与膜平滑肌细胞演化序列;中膜与外膜之间可见平滑肌退变序列;外膜外有神经源的鞘膜.植物神经末端可演化形成滋养血管.结论:正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁主要由归巢和沉积方式来源于成血-血管干细胞形成的内膜细胞演化而成,内膜细胞演化形成中膜平滑肌,平滑肌退化而成外膜.     

肝细胞癌微血管和成熟血管的特征及其相互关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)微血管和成熟血管的特征及其关系。方法选取行手术切除并经病理证实的HCC 31例,检测VEGF、Flk 1、PCNA的表达情况,同时对微血管和成熟血管的数目、平均面积、总面积、周长、直径、异型指数、血管间距、表达部位,以及动脉数、静脉数、动脉比、静脉比、血管成熟指数和平均灌注分数等进行统计。HE染色计算细胞外间隙及细胞外血管外间隙。分析微血管和成熟血管特征差异及其相互关系。结果HCC微血管的数目、总面积、异型指数均大于成熟血管,而平均面积、直径和血管间距则相反(P＜0.05)。在VEGF阴、阳性表达组之间,微血管的数目、周长及细胞外间隙均存在统计学差异(P＜0.05),但各成熟血管参数未见统计学差异(P＞0.05)。在Flk 1阳性和阴性表达组,微血管的数目、异型指数、周长以及动脉数也存在统计学差异(P＜0.05)。另外,PCNA与微血管异型指数呈正相关(P=0.045, r=0.563),与微血管间距负相关(P=0.022, r=-0.627)。其余测量参数之间差异未见统计学意义(P＞0.05)。结论HCC微血管和成熟血管特征存在较大差别,VEGF及Flk 1主要参与微血管生成的调控,对成熟血管作用不大。