糖皮质激素受体在小鼠单纯疱疹病毒性面瘫中的表达变化

目的通过建立1型单纯疱疹病毒(Hsv-1)致小鼠面瘫模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠面部运动皮层及面神经核团中的表达变化规律。方法选取89只4周龄Balb/c雌性小鼠随机分为空白对照组(n=8只)和实验组(n=81只),实验组用26G针头在右耳廓背面近耳根处皮肤连续搔刮后,将25μL HSV-1接种创面上,空白对照组不做处理。分别于面瘫后6、12、24、48、72h及7d取组织,采用蛋白质印迹法(western blot)、RT-PCR法、免疫组织化学技术方法检测小鼠中枢神经系统中糖皮质激素受体的表达变化规律。结果实验组接种HSV-1后,其中44只出现面瘫,面瘫率为54.32%。GR mRNA在面瘫早期小鼠的大脑面部运动皮层及面神经核团中表达逐渐降低,6h达最低值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。之后逐渐升高,于48h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。之后又逐渐降低,7d时已接近对照组,但其差异无统计学意义(P>0.05)。GR mRNA表达变化规律与GR蛋白表达变化相一致。免疫组织化学显示在面神经核团中可见糖皮质激素受体阳性细胞表达,并且也存在先降低后升高的变化规律。结论病毒性面瘫后糖皮质激素受体表达水平呈动态变化,提示糖皮质激素受体表达水平与面神经损伤的进展密切相关,对于临床上合理应用糖皮质激素治疗贝尔面瘫,防止激素抵抗现象具有指导意义。     

大鼠面神经损伤后神经营养因子-4的动态表达

目的研究大鼠面神经损伤后NT-4在面神经、触须肌以及面神经核团中表达的动态变化规律。方法以30只Wistar大鼠建立面神经骨管内挤压伤模型,分别于建模后1、3、7、14、21d取大鼠面神经、触须肌、以及脑桥组织并提取总RNA和蛋白,采用RT-PCR和Western-Blot技术检测不同时段NT-4的表达变化,应用免疫组织化学方法观察其表达部位。结果正常的大鼠面神经、触须肌以及脑桥中均有少量的NT-4表达;NT-4在面神经损伤后大鼠的面神经和面神经核团中表达逐渐增高,并且于第14天达到高峰,随后下降;NT-4的表达变化趋势在mR-NA和蛋白水平一致。在触须肌中,NT-4的表达量逐渐减少,于第14天降至最低,并维持较低水平。结论面神经损伤后,NT-4在神经束和核团神经元细胞中的表达呈现出先升高后下降的动态趋势,而在面神经所支配的肌肉组织中的表达逐渐降低,提示神经组织中NT-4的表达水平和面神经损伤密切相关。     

8 Hz130dB次声作用后鼠脑mGluR1〆的改变

目的　探讨 8 Hz 130 d B次声作用后代谢性谷氨酸受体 1α(m Glu R1α)在鼠脑各核团中表达的改变及其意义 .方法　 SD大鼠 40只随机分为对照组及次声作用 1,7和 14次共 4组 ,次声作用组用 8Hz 130 d B的次声按规定次数作用 ,每次 2 h.多聚甲醛心脏灌注固定鼠脑 ,免疫细胞化学染色 ,光镜下观察 m Glu R1α在各核团表达改变 .结果　次声作用 1次组 ,大多数核团 m Glu R1α阳性神经元表达增多 ;至 7次组免疫反应阳性神经元数目增多显著 ,细胞淡染 ,中间低密度 ,类空泡样变 .核团内免疫阳性纤维同时增多 ,染色加深 ;14次组各核团阳性神经元减少至或低于正常水平 .结论　次声作用可引起脑内多数各核团神经元 m Glu R1α表达增高 ,提示 m Glu R1α是介导谷氨酸兴奋性毒性 ,引起神经元损伤的主要因素之一     

严重烫伤大鼠肝脏热休克蛋白90α的表达变化及意义

目的 研究严重烫伤早期大鼠肝脏组织中糖皮质激素受体分子伴侣热休克蛋白90α(HSP90α)的表达变化及意义。方法 用免疫印迹技术分析严重烫伤后不同时相肝脏组织中HSP90α的表达量改变，通过免疫组化进一步观察HSP90α在肝细胞胞核中的表达变化。结果 大鼠严重烫伤后72h内肝脏HSP90α的表达明显升高，尤其以12～48h更为显著，在48h左右肝细胞核内还出现HSP90α的异位高表达。结论 严重烫伤可以引起肝脏HSP90α异常高表达，这可能是严重创伤早期糖皮质激素受体表达和功能发生改变的原因之一。     

切断面神经后大鼠面神经核内5-HT2、M2和α1-肾上腺素能受体的变化

目的探讨运动神经损伤后其起始核团内神经递质受体的变化。方法采用离体定量放射自显影技术．用氚标配体作为标记物．定量观察了术后1、4、7、21、60d5－HT_2、M_2和α_1肾上腺素能受体的变化。结果切断面神经后4d同侧面神经核内以上3种受体密度较对照例明显减少。5－HT_2;受体密度减至正常密度的50％,M_2受体减至64％,α_1肾上腺素能受体减至73％。术后1周·3种受体密度降到最低点、较对照侧比较分别降至39％、43％和65％。术后3周,受体密度开始回升,至第2个月、受体密度增至个常值的84％、74％和86％。结论运动神经损伤引起其起始核团神经递质受体可塑性变化,提示受体由运动神经元产生。     

神经营养素和面神经损伤临床研究

神经营养素(neurotrophins,NTs)是一类分子量相等、具有高度同源性的一类神经营养因子.许多资料表明,在中枢与外周神经系统,NTs能提高损伤后神经元的存活率,促进外周神经纤维的生长及再生.本文从NTs的受体特性、受体在面神经损伤后的表达和NTs 对受损后面神经的作用及机制进行了综述.     

面神经切断对神经元存活和c-jun基因表达的影响

目的 研究面神经损伤后c-jun基因表达的动态及其与神经元存活率的关系。方法 选用84只雄性SD大鼠，分别行面神经高位切断和低位切断，于损伤后不同时间观察面神经运动神经元存活率及c-jun的表达情况。结果 低位切断组术后12h有较多面神经元c-jun表达，并在术后60d内一直维持高水平。高位切断组1d后有较多神经元c-jun表达，且无论是表达数量或高表达维持时间均显著低于同时段低位切断组。高位切断组术后3d面神经元存活率明显降低。以神经元存活率为指标进行比较，各观察时段面神经低位切断组的神经元存活率也显著高于面神经高位切断组。结论 面神经损伤部位离胞体越远，神经元c-jun表达越强，运动神经元存活率越高。     

大鼠面神经损伤后面运动神经元存活情况和脑源性神经营养因子代谢改变

目的：研究面神经损伤后，大鼠面运动神经元（facial motoneuron,FNM）存活情况和脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF)代谢改变。方法：制造大鼠右面神经损伤模型，应用Cresyl Violet染色、原位杂交和免疫组化方法，观察计数FMN细胞，检测BDNF mRNA及其蛋白在FMN的表达，并结合计算机图像分析技术测定双侧FMN数目之比及其反应产物的阳性细胞数比和灰度值百分比。结果：BDNF mRNA及其蛋白阳性细胞分布于正常面神经核各亚核，除神经元细胞外其周围胶质细胞也染色，面神经损伤后1d，损伤侧面神经核BDNF mRNA及其蛋白阳性神经元细胞和胶质细胞数量及染色强度均快速增高；面神经损伤后不同时间组FMN细胞存活率与正常组比较差异均无显著性（P＞0.05）。结论：正常FMN可能存在BDNF的自分泌和旁分泌作用，面神经损伤后这种作用迅速增强；面神经外周损伤后，未发现损伤导致的面运动神经元数目发生改变。     

穴位电针对面神经损伤后面神经核中黏附分子CD56表达的影响

目的通过建立面神经压榨损伤动物模型,研究黏附分子在家兔面神经核中表达的改变,以及穴位电针对黏附分子CD56表达的影响。方法正常对照组4只兔不做任何处理。手术对照组、针刺治疗组各选用新西兰家兔16只,制作右侧面神经上颊支压榨损伤动物模型,损伤程度SunderlandⅣ度。术后2h,针刺治疗组电针刺激翳风、颧缪、颊车、地仓、阳白、四白及合谷穴,每天1次,每次30min;而手术对照组术后不做处理,自然恢复。在术后1、4、7、14d时间点取脑桥中下部组织,运用免疫组织化学SP法检测面神经核运动神经元中黏附分子CD56表达的变化。结果不作任何处理的正常对照组中存在黏附分子CD56的表达(11．25±1．71)。手术对照组阳性细胞数在术后7d达到高峰(78．25±2．22);手术对照组术后7d在形态学上出现了神经元死亡的现象,术后14d神经元的死亡更为明显。针刺治疗组,术后1d CD56标记的阳性细胞数明显增多(63．25±3．09);针刺治疗组阳性细胞数在术后4d达到高峰(97．75±2．99),有明显表达高峰前移趋势,针刺治疗组各时间段均未见有神经元死亡。术后1d、4d手术对照组和针刺治疗组阳性细胞数的比较,针刺治疗组的表达均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论穴位电刺激能促进黏附分子CD56在损伤面神经核运动神经元细胞体中的高表达,且有明显表达高峰前移的趋势。     

周围神经损伤后免疫系统变化的动物实验观察

目的 :检测周围神经损伤后免疫系统的变化。方法 :用 MTT法检测了坐骨神经损伤 1 ,2 ,5,7和 1 4d的大鼠脾细胞 NK活性及淋巴细胞转化功能 ,并用 PEG沉淀法检测了大鼠血清中循环免疫复合物 (CIC)的含量。结果 :坐骨神经损伤后 7和 1 4d大鼠脾细胞的自发转化率较对照组 (同样手术应激但无坐骨神经损伤 )略有增高 ;循环免疫复合物的含量术后 7d明显增高 ,1 4d时增加明显 ;而 NK活性则无明显变化 ,后期变化如何尚待进一步研究。结论 :周围神经损伤后 ,机体发生了免疫变化。     

面神经断裂后大鼠面神经核区神经元凋亡和星形胶质细胞变化的实验研究

目的：研究面神经断裂后面神经核区神经元凋亡基因bcl-2,bax和星形胶质细胞变化及其意义。方法：大鼠面神经离断后，采用免疫组化的方法，通过图像分析和对面神经核区神经元bcl-2,bax的表达和星形胶质细胞变化进行定量分析。结果：面神经断裂后15d面神经核内神经元出现凋亡高峰，bcl-2/bax在面神经断裂后15d达最低，与正常对照组相差显著（P＜0．01），GFAP阳性细胞达最多，细胞着色最明显，与正常对照组相差显著（P＜0．01），结论：bcl-2和bax可能在面神经元凋亡过程中发挥重要作用；星形胶质细胞反应与面神经元的损伤和修复关系密切。     

病毒性面瘫小鼠脾脏糖皮质激素受体表达的研究

目的建立1型单纯疱疹病毒(HSV-1)致小鼠面瘫的模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠脾脏中的表达。方法选择4周龄Balb/c雄性小鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组及实验组。实验组小鼠用搔刮法接种病毒于左耳耳郭后,对照组接种生理盐水。分别于面瘫后不同时间点取脾脏,采用real-time PCR、westernblot、免疫组织化学技术检测小鼠脾脏中糖皮质激素受体的表达变化规律。结果实验组GR mRNA及蛋白于面瘫后24 h达最低值,与生理盐水对照组及空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),之后逐渐升高,于3 d达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),之后又逐渐降低,7 d时与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学显示在实验组小鼠脾脏中可见GR阳性细胞。结论 GR在HSV-1致病毒性面瘫小鼠脾脏中的表达呈现先降低后增高,再恢复至对照水平的表达规律。提示小鼠病毒性面瘫后,脾脏中GR呈规律性的表达变化,可能在面瘫的发生发展过程中发挥一定的作用。     

垂直段损伤面神经减压术式选择

目的:探讨面神经全段减压术和垂直段减压术治疗面神经垂直段损伤所致周围性面瘫疗效。方法:按House和Brackmann评分法对63例面神经垂直段损伤致面瘫患者进行术前、术后的面神经功能评估。所有患者皆行耳后切口,26例经乳突一上鼓室进路全段面神经减压术;28例仅行垂直段面神经减压术;5例行面神经端端吻合术;4例行面神经移植术。结果:术后1年评估:垂直段减压术28例,Ⅰ级恢复者11例,Ⅱ级恢复者10例,Ⅲ级恢复者7例。全段减压术26例,Ⅰ级恢复者9例,Ⅱ级恢复者11例,Ⅲ级恢复者6例。两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后面神经功能恢复程度与病程有密切的正相关关系。面神经吻合和移植术后,面神经功能恢复多不理想。结论:垂直段面神经损伤性面瘫,术后功能恢复与减压术式无明显关系,而与病程和损伤程度有关。     

甲状腺激素在新西兰家兔面神经损伤修复中的作用

目的 观察甲状腺激素在兔面神经损伤修复中的作用.方法 25只成年健康新西兰家兔,设立正常对照组、手术对照组、T3治疗组3个实验组.制作双侧面神经横断损伤、损伤局部硅胶管套接的动物模型;其中右侧为T3治疗组,硅胶管中注入甲状腺素溶液16～18μl;左侧为手术对照组,硅胶管中注入等量生理盐水.在术后4、6周取再生面神经,电镜检测有髓轴突比率和髓鞘厚度,取脑桥中下部组织,运用免疫组织化学SP法检测面神经核运动神经元中神经营养因子NGF、BDNF表达的变化,光镜下计数两种神经营养因子标记的阳性细胞数.结果 电镜结果显示在术后4周和6周,T3治疗组的有髓轴突比率和髓鞘厚度均＞手术对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).术后4周,手术对照组和T3治疗组NGF、BDNF两种分子标记的阳性细胞数较之正常对照组增幅明显,差异有统计学意义(P＜0.01).术后6周,T3治疗后阳性细胞数NGF、BDNF比手术对照组NGF、BDNF仍有明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 面神经横断损伤后,再生室中注射T3能够促进面神经有髓轴突比率和髓鞘厚度的增加,并且增加面神经核运动神经元中神经营养因子NGF、BDNF的表达.     

实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其意义。方法 应用立体定向技术于大鼠尾壳核注射自体尾动脉血建立大鼠脑出血模型，动态观察组织病理学改变，动态观察脑组织含水量。免疫组织化学染色显示脑出血后VEGF在脑组织内的表达。结果 大鼠脑出血后脑含水量于24h开始明显升高。48h达高峰并持续到72h，与病灶对侧及假手术组比较有统计学意义；脑出血后脑内VEGF阳性细胞数随时间逐渐增多。以24h，48h，72h最为显著，7d时呈现血管样结构。结论 脑出血后脑内VEGF的表达与脑水肿相关，且VEGF可促进血肿周围组织的血管增生，可能对脑出血后的组织修复起促进作用。     

豚鼠面神经损伤后运动终板及面神经核AchE含量的变化

研究面神经挤压损伤后运动张板，面神经核乙酰胆碱酯酶含量变化。方法：利用组织化学染色和图象分析技术，对ＭＥＰ和ＦＮ的ＡｈｃＥ进行量化分析。结果：正常口轮匝肌ＡｃｈＥ染色的ＭＥＰ在光镜下呈葡萄状或斑块状的椭圆形结构，锯齿状分布。     

成年及新生大鼠面神经结扎后NADPH-d阳性神经元的不同表达

目的: 研究新生及成年大鼠面神经结扎后,面神经核运动神经元(FMN)NADPH-d阳性细胞的动态变化. 方法: 于新生及成年大鼠茎乳孔处结扎面神经,于3, 7, 14, 21, 28, 56, 84 d采用NADPH-d组织化学方法观察NADPH-d阳性细胞在面神经核中的变化. 并观察NADPH-d阳性细胞与存活神经元之间的关系. 结果: 成年大鼠面神经结扎FMN受损后,3 d～12 wk NADPH-d阳性持续表达. 但是幼年大鼠面神经结扎FMN受损后1 wk,NADPH-d阳性方可在损伤侧观察到,至8 wk则几乎观察不到NADPH-d阳性FMN. 结论: 面神经损伤后,成年及新生大鼠损伤侧NADPH-d阳性FMN数目均有所增加,但是它们在表达时程上显示了不同的模式.     

周围性面神经断裂伤的外科治疗

目的:评估周围性面神经断裂损伤患者手术治疗后的效果,分析影响预后的相关因素。方法:自1999年至2009年因周围性面神经断裂在我院接受手术修复的患者104例,男75例,女29例,年龄2~77岁,中位年龄30岁。单纯面神经吻合术72例,随访至最终恢复的65例(90.2%)。自体神经移植术32例,随访至最终恢复的24例(75.0%)。面神经功能评价采用了整体及分区House-Brackmann(HB)评价方法,以卡方检验或Fisher确切概率法进行统计分析。结果:单纯面神经吻合术后总体恢复程度为HBⅠ级者37例(56.9%),Ⅱ级者11例(16.9%),Ⅲ级者15例(23.1%),Ⅳ级者2例(3.1%);各分区恢复至HBⅠ、Ⅱ级的比例分别为:眼部97.6%、面中部97.9%、口角78.6%、额部27.3%(P<0.001)。自体神经移植术后总体恢复程度为HBⅠ级者4例(16.7%),Ⅱ级者5例(20.8%),Ⅲ级者7例(29.2%),Ⅳ级者8例(33.3%);各分区恢复程度达HBⅠ、Ⅱ级的分别为:眼部73.7%、面中部72.7%、口角44.4%、额部37.5%。神经吻合术后面神经功能恢复程度优于自体神经移植术(P=0.002)。结论:面神经吻合术和自体神经移植是修复周围性面神经断裂损伤的有效方法;面神经受损分支、损伤范围、手术修复距离损伤的时间和患者年龄均对手术预后有所影响。     

利用组织芯片检测上皮型钙黏素在宫颈癌浸润转移中的作用

目的 检测上皮型钙黏素E-cad在宫颈鳞癌中的表达，探讨其在浸润转移中的作用。方法 利用组织芯片的免疫组化染色对10例正常宫颈上皮、63例无淋巴结转移宫颈鳞癌、63例有淋巴结转移宫颈鳞癌组织中E-cad的蛋白表达进行检测。结果E-cad在正常宫颈组织的表达高于宫颈鳞癌P〈0．05，在无淋巴结转移宫颈鳞癌组织显著高于有淋巴结转移组织（P〈0．05），且E-cad的表达与淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论 E-cad与宫颈鳞癌的浸润转移密切相关，可用于判断预后及指导临床治疗。