结直肠癌患者外周血人类端粒酶反转录酶及基质金属蛋白酶-7 mRNA的表达及其相关性研究

 目的　应用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测结直肠癌患者外周血中人类端粒酶反转录酶（hTERT）及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）mRNA 的表达情况,探讨其对监测结直肠癌血液微转移的临床意义及二者的相关性。方法　采用TRIzol法提取血液标本中的总RNA,将其反转录成cDNA,然后用RT-PCR技术检测血液标本中MMP-7 mRNA和hTERT mRNA表达,计算样本的△Ct值。结果　在181例结直肠癌患者中,hTERT mRNA表达阳性63例,阴性118例。MMP-7 mRNA 表达阳性61例,阴性120例。不同性别、不同年龄的结直肠癌患者外周血hTERT、MMP-7 mRNA表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。低分化腺癌患者MMP-7 mRNA表达阳性率（43.9 %）较中高分化腺癌（27.8 %）增高（χ2＝4.873,P＜0.05）。Ⅲ、Ⅳ期患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（42.5 %）较Ⅰ、Ⅱ期患者（24.0 %）增高（χ2＝6.591,P＜0.05）。Ⅲ、Ⅳ期患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（39.6 %）较Ⅰ、Ⅱ期患者（25.3 %）增高（χ2＝4.014,P＜0.05）。有远处转移的结直肠癌患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（53.3 %）较无远处转移的患者（28.7 %）增高（χ2＝9.059,P＜0.05）。有远处转移的结直肠癌患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（46.7 %）较无远处转移的患者（29.4 %）增高（χ2＝4.506,P＜0.05）。CEA阳性患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（52.6 %）较CEA阴性的患者（30.1 %）明显增高（χ2＝6.735,P＜0.05）。CEA阳性患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（60.5 %）较CEA阴性的患者（26.6 %）明显增高（χ2＝15.490,P＜0.05）。无远处转移的结直肠癌患者中,以hTERT、MMP-7 mRNA一项高于正常值范围为血液微转移表达阳性。检测后6个月微转移表达阳性组肿瘤复发转移率（36.58 %）与阴性组（7.14 %）比较增高（χ2＝13.027,P＜0.05）;检测后12个月微转移表达阳性组肿瘤复发转移率（68.29 %）与阴性组（12.5 %）比较增高（χ2＝31.948,P＜0.01）。至检测12个月后,微转移表达阳性组41例患者中28例出现复发转移,微转移表达阴性组56例患者中7例出现复发转移。联合检测的敏感度80.00 %,特异度79.03 % 。Spearman相关性分析结果表明,hTERT与MMP-7 mRNA呈正相关（r＝0.341,P＝0.000）。结论　联合检测结直肠癌患者外周血hTERT、MMP-7 mRNA的表达,对早期发现血液微转移及预后具有重要意义。     

贲门癌患者外周血人类端粒酶反转录酶及基质金属蛋白酶-7 mRNA表达的临床意义

 目的　分析人类端粒酶反转录酶（hTERT）及基质金属蛋白酶-７（MMP-7）mRNA 在贲门癌患者外周血中的表达。方法　采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测157例贲门癌患者术前血液标本中MMP-7 mRNA和hTERT mRNA表达，对其表达与临床病理参数的关系进行比较。对无转移的81例患者术后 6 、12个月进行随访，根据患者临床症状、体征相应检查，判断复发转移。并将MMP-7 mRNA和hTERT mRNA表达阳性组与阴性组复发转移情况进行比较。结果　157例贲门癌患者中，hTERT阳性表达73例（46.0 %）；MMP-7阳性表达61例（38.8 %）。hTERT、MMP-7表达与性别（χ2值为2.597、0.199）、年龄（χ2值为4.314、0.073）等因素无相关性（均P＞0.05），但与TNM分期（χ2值为10.624、14.530）、有无远处转移（χ2值为7.294、12.824）及组织的分化程度（χ2值为12.003、6.482）之间存在相关性（均P＜0.05）。术后随访6、12个月肿瘤转移率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。血行微转移阳性患者术后12个月肿瘤转移概率是阴性患者的6.12倍（OR＝6.120）。结论　贲门癌患者外周血hTERT及MMP-7 mRNA的异常表达与贲门癌的发展和转移有关，血液微转移检测对贲门癌早期发现及预后具有重要意义，值得进一步研究。     

食管鳞癌患者外周血MMP-9 mRNA表达水平及临床意义研究

[目的]探讨食管鳞癌患者外周血中基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)基因的表达及其与临床病理资料、生存情况的关系.[方法]应用实时定量PCR技术定量检测食管癌外周血标本中MMP-9 mRNA的表达,分析MMP-9基因表达情况与患者临床病理参数及预后之间的关系.[结果]在169例食管鳞癌患者外周血标本中,有106例(62.7％)存在外周血MMP-9基因的阳性表达,与食管癌的淋巴结转移(P=0.039)、远处转移(P=0.019)和TNM分期(P=0.014)显著相关.单因素生存分析显示N分期(P=0.000)、M分期(P=0.002)、TNM分期(P=0.003)、MMP-9表达(P=0.042)对患者生存的影响有统计学意义.MMP-9基因阳性表达的食管癌患者远期生存明显低于阴性表达者.多因素分析显示N分期是食管鳞癌患者预后的独立影响因子(RR=1.671,95％CI:1.212～2.306).[结论]食管鳞癌患者外周血中MMP-9基因的高表达与食管癌转移存在关联,并可提示食管癌患者的不良预后.     

MMP-11在胃癌患者血清中的表达及临床意义

背景与目的:基质金属蛋白酶11(MMP-11)是基质金属蛋白酶家族中的一员,已有文献报道其与食管癌、肺癌等疾病的预后相关,尚缺乏MMP-11与胃癌的相关研究,本实验旨在观察基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌患者外周血清中的表达情况及临床意义。方法:收集2005年3月—2007年2月北京肿瘤医院收治的130例胃癌患者血清,采用逆转录-聚合酶链反应及酶联免疫技术检测MMP-11mRNA及蛋白表达情况。取20例正常健康人血清为对照组。结果:MMP-11mRNA在正常人群中表达的阳性率为5%,而在胃癌患者外周血清中阳性表达率(68.4%)高于正常人群;MMP-11蛋白在胃癌患者外周血清中表达量为(44±27)ng/ml,高于正常人群的(3±3)ng/ml;130例胃癌患者中,根治术后辅助治疗未见复发30例;术后复发或(和)转移的胃癌患者30例,复发、转移组血清MMP-11蛋白表达量(51±27)ng/ml,术后未见复发、转移的胃癌患者血清MMP-11蛋白表达量(27±28)ng/ml;两组患者外周血清MMP-11mRNA表达差异与蛋白水平一致。结论:MMP-11在胃癌患者外周血清中高表达,显著高于正常人群,尤其在根治术后转移和(或)复发的晚期患者的外周血中,推测其可能作为胃癌诊断、复发/转移的分子标志物。     

基质金属蛋白酶-7和E-钙黏附素在胃癌组织中的表达及其相关性

目的探讨基质金属蛋白酶．7（MMP．7）、E-钙黏附素（E—CD）在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭、转移的相关性。方法采用原位杂交法,检测78例胃癌组织中MMP-7mRNA和E—CDmRNA的表达,观察二者与浸润深度和淋巴结转移之间的关系。结果胃癌组织中MMP-7mRNA和E-CDmRNA的阳性表达与浸润深度和淋巴结转移有关。MMP-7mRNA阳性表达的胃癌组织中E—CDmRNA的阳性表达率[9．09％（6／66）[低于MMP-7mRNA阴性表达的胃癌组织中E—CDmRNA的阳性表达率[66．70％（8／12）1,二者呈负相关（r=-0．269,P〈0．05）。结论MMP-7mRNA和E—CDmRNA的表达与胃癌的浸润、转移密切相关,且二者的表达呈负相关。检测MMP-7mRNA和E—CDmRNA在胃癌患者胃镜活检组织中的表达有助于预后判断。     

检测细胞角蛋白在食管癌外周血和骨髓微转移中的意义

目的：探讨食管癌患者外周血和骨髓中CK18mRNA基因表达及临床意义。方法：采用巢式RT—PCR方法检测50例M0、10例M0的食管癌患者及10例食管良I生病变患者外周血及肋骨骨髓中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果：50例M0食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为38．0％（19／50）和42．0％（21／50）;10例M,的食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为90．0％（9／10）、100％（10／10）;食管良性病变患者的外周血和骨髓中K18mRNA阳性表达率均为0％（0／10）,CK18mRNA阳性表达在三组间差异有显著性（P〈0．01）。CK18mRNA在Ⅳ期食管癌患者外周血和骨髓中阳性表达率与III期以前患者相比,有显著性差异（P〈0．05）。CK18mRNA在外周血和骨髓中表达无差异（P〉0．05）,但呈正相关性（r=0．704,P〈0．01）。结论：应用RT—PCR法检测食管癌患者外周血或骨髓中CK18mRNA微转移有助于食管癌的分期和预后的判断。     

外周血中生存素的表达与胃癌预后的相关研究

通过检测外周血中生存素来判断是否能预测胃癌的复发与转移。方法:以反转录-聚合酶链式反应-酶联免疫测定（RT-PCR-ELISA）方法检测胃癌患者外周血中生存素mRNA的表达,分析其与临床病理因素之间的关系。对部分患者进行36个月随访,分析复发及转移时间与外周血中生存素mRNA的表达之间的关系。结果:53例胃癌外周血中32例（60.4%）生存素mRNA表达阳性。肿瘤大小>5cm及≤5cm生存素mRNA表达率分别为78.3%、46.0%。浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率74.2%,高于侵及黏膜下层及肌层的表达率（33.3%）,淋巴结有转移者外周血表达率为75.0%,高于无淋巴结转移的表达率（29.4%）。通过随访研究发现外周血生存素阳性的患者复发及转移率明显高于阴性患者。结论:生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位、分化程度无明显相关。并可用于提示患者复发与转移风险。外周血生存素的表达可作为评价胃癌生物学行为及预后的参考指标。      

黑色素瘤相关抗原A基因家族在食管癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的：探讨黑色素瘤相关抗原A家族（melanoma antigen A,MAGE-As）在食管癌患者外周血中的表达,分析其与食管癌患者临床病理学指标及预后的关系。方法：采用多重巢式PCR（multiplex semi-nested PCR）法检测153 例食管癌患者和30 例健康人外周血中MAGE-As mRNA 表达水平,并利用酶切的方法鉴定该家族成员MAGE-A1、A2、A3、A4和A6 的表达情况。结果：MAGE-As 在食管癌患者外周血中阳性表达率为19.61%（30/153）,MAGE-A1、A2、A3、A4、A6 的阳性表达率分别为10.46%（16/153）、16.34%（25/153）、9.8%（15/153）、11.11%（17/153）和18.30%（28/153）。MAGE-As 阳性表达与临床分期、远处转移、淋巴结转移呈正相关（均P<0.05）,MAGE-As 及其亚型基因的阳性表达均与食管癌患者5 年生存率较差相关（均P<0.05）;MAGE-As 表达、肿瘤大小、淋巴结转移及远处转移可作为食管癌患者生存的独立预后因素（均P<0.01）。结论：MAGE-As在食管癌患者外周血中的表达与食管癌预后相关,有可能作为监测食管癌预后的重要指标。     

骨肉瘤中RECK和MMP-2基因的表达及其临床意义

目的 探讨RECK和MMP-2基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义。方法 采用荧光实时定量PCR（RT-PCR）对我院2001年至2006年45例骨肉瘤手术切除标本中RECK mRNA、MMP-2 mRNA进行检测,同时结合患者的性别、年龄、转移、复发等临床病理特征,分析其表达的临床意义。结果 45例骨肉瘤组织中RECK mRNA和MMP-2 mRNA的相对表达量分别为38.15±14.15和65.00±22.86,两者表达呈负相关（r=-0.740,P=0.000）。RECK mRNA和MMP-2 mRNA表达与性别、年龄、肿瘤部位、组织亚型无关（P＞0.05）,与肿瘤复发、转移及5年生存期显著相关（P＜0.05）。结论 RECK mRNA和MMP-2 mRNA表达与骨肉瘤转移、复发及预后相关,可作为预测骨肉瘤转移、复发及预后的分子指标。     

基质金属蛋白酶-9 mRNA表达与食管癌侵袭转移的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA在食管癌组织中的表达及其与食管癌侵袭转移的关系。方法：用反转录PCR（RT-PCR）法检测41例食管癌患者的癌组织及其癌旁组织MMP-9mRNA表达。结果：食管癌组织中MMP-9mRNA表达率明显高于癌旁组织。并与食管癌淋巴结转移及静脉侵袭有关。髓质型食管癌组织中MMP-9mRNA半定量值显著高于其它类型。结论：MMP-9过表达与食管癌的侵袭转移密切相关。是食管癌侵袭转移的标志。     

MMP-2和E-cadherin蛋白在食管黏膜病变中的表达

目的： 探讨MMP-2和E-cadherin蛋白在食管黏膜病变中的表达及其与食管癌的发生及转移的关系。方法：采用免疫组织化学方法对45例食管癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中MMP-2和E-cadherin蛋白的表达进行检测,并分析MMP-2和E-cadherin表达与食管癌发生发展过程中各项病理指标的关系。结果：MMP-2蛋白在癌组织中的表达率为40.00%(18/45),在不典型增生组织中的表达率为38.10% (8/21),在正常组织中表达率为4.17%(1/24),三者间差异具有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移组的MMP-2蛋白阳性表达率(55.56%,15/27)明显高于无淋巴结转移组(16.67%,3/18);有纤维膜浸润组MMP-2蛋白的阳性表达率(48.57%,17/35)明显高于无纤维膜浸润组(10.00%,1/10)。E-cadherin蛋白在正常的食管黏膜上皮组织阳性表达为100% (24/24),在不典型增生组织中的阳性表达率为71.43%(15/21),在癌组织中的阳性表达率为28.89%(13/45),较前两组明显降低(P<0.05)。E-cadherin与MMP-2蛋白的表达呈负相关(χ2=4.615,r=-0.793,P<0.05)。结论：MMP-2蛋白的高表达和E-cadherin蛋白的低表达可能与食管癌的发生和转移有关,在食管癌的侵袭、转移过程中MMP-2与E-cadherin有拮抗作用。     

N-cadherin 、MMP-9 在直肠癌中表达的临床意义

 目的 探讨N-钙黏附素(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在直肠癌中表达的临床意义。方法 采用免疫组织化学两步法对80例直肠癌组织中的N-caclherin、MMP-9表达进行检测。结果 (1)N-cadherin在直肠癌组织中的阳性表达率为41．25％，其中A、B期患者和C、D期患者分别为28．9％和57．1％(P<0．05)；淋巴结转移组和无淋巴结转移组分别为58．6％和31．4％(P<0．05)；肝转移组和无肝转移组阳性表达率分别为69．2％。35．8％(P<0．05)。(2)MMP-9在直肠癌组织中的阳性表达率为60％，其中A、B期患者和C、D期患者阳性表达率分别为40％，85．7％(P<0．01)；淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性表达分别为82．8％。47．1％(P<0．01)，发生肝转移组和无肝转移组阳性表达率分别为84．6％，55．2％(P<0．05)。(3)Kaplan-Meier分析，N-cadherin、MMP-9阳性表达者的生存时间和5年生存率明显低于N-cadherin、MMP-9阴性表达者(P<0．01)。结论 Ncadherin、MMP-9的表达与直肠癌关系密切。对判断其预后可能具有重要意义。     

MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ～Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。MMP-9的高表达及MMP-9与TIMP-1的平衡失调在晚期卵巢癌的发     

半乳糖凝集素-3及骨桥蛋白在食管癌中的表达及其意义

 目的　研究半乳糖凝集素-3（Gal-3）、骨桥蛋白（OPN）在食管癌中的表达情况及其临床意义。方法　选取2006年至2008年接受手术治疗的食管癌患者37例,男28例,女9例,年龄41～82岁。应用荧光PCR及ELISA方法分别检测食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织Gal-3 mRNA、OPN mRNA和血浆中Gal-3、OPN的水平,并结合术后随访,对其表达差异进行分析。结果　37例食管癌患者的肿瘤组织与癌旁组织及正常食管组织中Gal-3 mRNA相对表达值差异有统计学意义（F＝11.934,P＜0.05）。三者之间OPN mRNA相对表达值差异有统计学意义（F＝4.269,P＜0.05）。不同分期患者的食管癌组织Gal-3 mRNA和OPN mRNA表达差异有统计学意义（F=3.216,P＜0.05）,而与患者的年龄、性别和肿瘤病理性质无关。复发组血浆中Gal-3和OPN水平及癌组织中的Gal-3 mRNA和OPN mRNA表达均高于未复发组（P＜0.05）。结论　食管癌组织中Gal-3 mRNA和OPN mRNA的差异表达可能与食管癌的发生、发展和转移有关。术前外周血Gal-3和OPN检测可能成为判定食管癌术前微转移的重要指标之一。     

半乳糖凝集素-3及骨桥蛋白在食管癌中的表达及其意义

目的 研究半乳糖凝集素-3(Gal-3)、骨桥蛋白(OPN)在食管癌中的表达情况及其临床意义.方法 选取2006年至2008年接受手术治疗的食管癌患者37例,男28例,女9例,年龄41～82岁.应用荧光PCR及ELISA方法分别检测食管癌组织、癌旁组织及正常食管组织Gal-3 mRNA、OPN mRNA和血浆中Gal-3、OPN的水平,并结合术后随访,对其表达差异进行分析.结果 37例食管癌患者的肿瘤组织与癌旁组织及正常食管组织中Gal-3 mRNA相对表达值差异有统计学意义(F=11.934,P<0.05).三者之间OPN mRNA相对表达值差异有统计学意义(F=4.269,P<0.05).不同分期患者的食管癌组织Gal-3mRNA和OPN mRNA表达差异有统计学意义(F=3.216,P<0.05),而与患者的年龄、性别和肿瘤病理性质无关.复发组血浆中Gal-3和OPN水平及癌组织中的Gal-3 mRNA和OPN mRNA表达均高于未复发组(P相似文献