肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达变化

目的 :探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法 :将实验动物分为二组 :(1)正常对照组 ;(2 )肾阳虚证大鼠模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northernblot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果 :肾阳虚证大鼠模型组 ,肾病理损伤 ,肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达上调。结论 :肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达明显上调。     

肾阴虚、肾阳虚模型大鼠股骨皮质骨差异蛋白质表达的分析

目的研究肾阴虚、肾阳虚模型大鼠股骨皮质骨差异表达的蛋白质,从功能蛋白质组角度探讨肾阴虚、肾阳虚证的实质。方法将90只大鼠按随机数字表法分为正常组、肾阴虚组和肾阳虚组,每组30只,获取造模成功且表现稳定大鼠的股骨皮质骨,分别进行皮质骨总蛋白的提取制备、双向电泳(2-DE)、凝胶图谱的获取与分析、差异蛋白的质谱分析及相关功能的生物信息学检索。结果 3组大鼠股骨皮质骨总蛋白2-DE凝胶图谱可辨识蛋白点数目均为470个,与正常组比较,肾阴虚、肾阳虚组各有12个差异蛋白,其中有6个是肾阴虚、肾阳虚组共有的差异蛋白,4个表达趋势一致,分别为表达上调的载脂蛋白A-1、α烯醇化酶,表达下调的GDP解离抑制因子β、原肌球蛋白异构体2α-3链;有2个蛋白表达趋势相反,Ⅰ型胶原α-1链在肾阴虚组中表达上调,在肾阳虚组中表达下调;线粒体热休克蛋白60在肾阴虚组中表达下调,在肾阳虚组中表达上调;肾阴虚、肾阳虚组各有6个独自的差异蛋白,其中肾阴虚组有3个蛋白表达上调,3个蛋白表达下调;肾阳虚组6个蛋白表达均下调。结论大鼠股骨皮质骨中,4个共同且表达趋势一致的差异蛋白可以视为肾阴虚、肾阳虚证的共性功能蛋白质组;2个表达趋势相反及12个肾阴虚、肾阳虚组独自的差异蛋白可归为相应证型的差异功能蛋白质组。     

肾阳虚大鼠股骨皮质骨差异蛋白质表达分析

目的比较分析肾阳虚证模型大鼠与正常大鼠股骨皮质骨差异表达蛋白质,从骨组织功能蛋白质角度初步探讨肾阳虚证的实质。方法 60只雄性WISTAR大鼠随机分为正常组和肾阳虚组,每组各30只,适应性喂养1周。肾阳虚组:臀部肌肉注射氢化可的松注射液2.5 mg/100 g,每日1次,自由饮水、饮食。正常组:自由饮食、饮水。注射造模干预15 d后继续观察3周。模型鉴定成功后分别获取肾阳虚组和正常组大鼠股骨皮质骨标本,进行总蛋白的提取制备。采用双向凝胶电泳(2-DE)技术展示2组大鼠的皮质骨蛋白质组图谱,应用PDQuest软件分析2组间差异表达蛋白点,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)初步鉴定差异表达蛋白点。结果 2组皮质骨2-DE凝胶图谱可辨别蛋白点数目为470个;与正常组比较,肾阳虚组皮质骨中存在12个已知的差异表达蛋白,其中载脂蛋白A-I、α烯醇化酶和热休克蛋白60表达上调,原肌球蛋白异构体2α-3链、I型胶原α-1链、GDP解离抑制因子β、LOC683667蛋白、白细胞酪氨酸激酶受体、线粒体ATP合酶亚基α、膜联蛋白A3、丙酮酸激酶同工酶及蛋白质二硫键异构酶A3表达下调。结论股骨皮质骨12个蛋白表达改变可能与肾阳虚证的发生有关。     

中药复方治疗早期糖尿病肾病的实验研究

目的:观察中药复方对糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、Ⅳ型胶原基因表达等指标的影响,探讨该复方防治早期糖尿病肾病的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠采用链脲佐菌素(STZ),造成糖尿病模型,随机分为正常组、模型组、西药对照组、中药治疗组4组,用药干预8周后,观察24h尿微量白蛋白(Ualb)、肾皮质转化生长因子β1mRNA表达、肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达及各组肾组织形态学改变情况。结果:模型组肾皮质转化生长因子β1mRNA表达、肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达均明显升高;中药组肾皮质TGF-β1mRNA、Ⅳ型胶原mRNA表达与模型组比较均有所下降;电镜观察结果显示:肾小球基底膜增厚及足突融合显著减轻。结论:中药复方可能通过抑制糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1mRNA与Ⅳ型胶原mRNA表达而实现其对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用。     

中药复方对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1、Ⅳ型胶原mRNA表达的影响

目的观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)与Ⅳ型胶原mRNA表达的影响,探讨其作用机理。方法采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT-PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1与Ⅳ型胶原mRNA表达。结果各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、Ⅳ型胶原mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1、Ⅳ型胶原mRNA的表达,从而起到保护肾脏、延缓肾脏病理损害、抑制糖尿病肾病形成的作用。     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾间质细胞外基质代谢的影响

[目的]通过复制免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠模型,探讨肾络宁对IgAN大鼠肾间质细胞外基质(ECM)代谢的影响。[方法]口服并定时尾静脉注射牛血清白蛋白,复合葡萄球菌肠毒素感染的方法复制IgAN模型,同时给予肾络宁治疗,利用原位分子杂交和免疫组织化学的方法,结合计算机病理图像分析,观察肾络宁对IgAN大鼠肾间质Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因及蛋白表达的影响。[结果]1)肾络宁组肾间质ColⅢ蛋白及PAI-1、TIMP-1mRNA表达与模型组相比明显降低(P<0.01或0.05)。2)肾络宁组肾间质MMP-1mRNA表达与模型组相比显著升高(P<0.01)。[结论]肾络宁能降低IgAN模型大鼠肾间质ColⅢ蛋白的表达,下调PAI-1、TIMP-1mRNA的表达,上调MMP-1mRNA的表达,从而发挥调节ECM代谢的作用。     

扶肾降浊方对系膜增生性肾炎肾小管间质损害大鼠COLⅠ及COLⅢ蛋白和基因表达的影响

目的观察扶肾降浊方对系膜增生性肾炎大鼠肾小管间质细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原(COLⅠ及COLⅢ)蛋白和基因的调节作用。方法采用系膜增生性肾炎模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、扶肾降浊方中药组、贝那普利西药组。采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法分别检测实验12周、16周和20周末各组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和基因的表达。结果 12周、16周和20周末的模型组肾脏COLⅠ及COLⅢ蛋白表达呈强阳性(P0.01),COLⅠ及COLⅢ基因表达上调(P0.01),扶肾降浊方中药组和贝那普利组大鼠肾脏COLⅠ及COLⅢ蛋白表达均较模型组降低(P0.01),COLⅠ及COLⅢ基因表达亦均较模型组下调(P0.05);随着造模时间的延长,模型组肾小管COLⅠ及COLⅢ蛋白和基因表达均呈升高趋势,治疗组仍作用明显(P0.05)。结论扶肾降浊方可通过基因和蛋白水平调节COLⅠ和COLⅢ在肾脏的表达,减少COLⅠ和COLⅢ在肾小管间质的积聚以减轻肾间质纤维化,从而对肾小管间质损害起到防治作用。     

基于右归饮与肾阳虚证方证相应关系探寻肾阳虚证标志蛋白质的初步研究

目的：探寻肾阳虚证动物模型大鼠肝、肾组织脏器的肾阳虚证标志蛋白质。方法：将大鼠分为对照组、模型组与给药组3组，对其肝、肾组织蛋白质提取液分别进行蛋白质双向电泳并对电泳图谱进行分析。根据右归饮与肾阳虚证的方证相应关系，把右归饮将模型组差异表达的蛋白质调节为正常表达的那些蛋白质判定为肾阳虚证标志蛋白质。结果：在给药组的肝、肾组织中分别发现28和31个右归饮调节为正常表达的蛋白质点，这些蛋白质点即为肾阳虚证标志蛋白质。结论：以右归饮与肾阳虚证方证相应关系作为切入点，运用蛋白质组学技术探寻肾阳虚证标志蛋白质是可行的。     

化瘀解毒汤抗肾间质纤维化的实验研究

目的探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制.方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分(I、Ⅲ型胶原)、TGFβ1mRNA及MMP1mRNA表达,并做相关肾组织学检查.结果模型组和各治疗组大鼠肾组织I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA的平均吸光度值显著增加(P＜0.05),MMP1mRNA平均吸光度值显著降低(P＜0.05);各治疗组大鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA平均吸光度值较模型组减少(P＜0.05),MM-P1mRNA平均吸光度值较模型组增加(P＜0.05);治疗组中以中药预防组鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TG-Fβ1mRNA平均吸光度值最低、MMP1mRNA平均吸光度值最高(P＜0.05).经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善.结论化瘀解毒汤通过下调TG即1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达,以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维化.     

山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病大鼠肾皮质糖化终产物及其受体mRNA表达的影响

目的：探讨山茱萸环烯醚萜总苷(HXMTZG)对糖尿病大鼠肾皮质糖化终产物(AGEs)的抑制作用及其对肾皮质内AGEs受体(RAGE)mRNA转录水平的影响。方法：用STZ60mg／kg一次性腹腔注射造成糖尿病大鼠，连续灌胃给药12周，取右肾皮质测定其AGEs荧光强度以间接表示肾皮质内AGEs的含量；用RT-PCR半定量方法体外扩增目的基因RAGE,并以β-actin作为内参，比较肾皮质内RAGE mRNA的表达情况。结果：模型组AGEs沉积显著增加，RAGE表达明显上调；而环烯醚萜总苷能减少AGEs在肾皮质的过度沉积，同时亦能显著抑制RAGE的过高表达。结论：山茱萸环烯醚萜总苷能抑制糖尿病大鼠肾皮质AGEs的形成，使其受体mRNA表达水平下降，具有减轻糖尿病肾病变的作用。     

肾衰保肾胶囊对肾间质纤维化大鼠肾脏MMP-1表达及活性的影响

目的:研究肾衰保肾胶囊对慢性肾间质纤维化大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达及活性的影响。方法:将Wistar大鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、肾衰保肾胶囊低剂量组和肾衰保肾胶囊高剂量组,采用腺嘌呤灌胃复制慢性肾间质纤维化大鼠模型,各组分别给药8周,采用免疫组化法、RT-PCR及酶谱分析法检测肾组织中的I、Ⅲ型胶原、MMP-1表达及MMP-1活性。结果:肾衰保肾胶囊组大鼠肾组织中的I、Ⅲ型胶原表达降低,MMP-1表达及活性增强,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:肾衰保肾胶囊可能是通过增强MMP-1表达及活性的途径来减少肾组织中I、Ⅲ型胶原的积聚,进而发挥减轻肾间质纤维化的作用。     

金匮肾气丸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:探讨金匮肾气丸对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、吡非尼酮组(100μg/g)、金匮肾气丸低剂量组(1.0g/kg)、金匮肾气丸高剂量组(2 g/kg),每组6只。建立UUO大鼠肾纤维化模型,造模结束即灌胃给药,各药物组灌胃相应药物,假手术组和模型对照组灌胃质量分数为5 g/L羧甲基纤维素钠,1 d 1次,连续14 d。末次给药后24 h,处死大鼠,取左侧肾组织。固定制片,采用苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)和马松三色染色法(masson-trichrome staining,Masson)观察肾组织病理学改变,采用免疫组织化学法检测Ⅲ型胶原、肌动蛋白α(alpha smooth muscle actin,α-SMA)和上皮钙黏素在肾组织的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测Ⅲ型胶原、α-SMA和上皮钙黏素在肾组织的信使核糖核酸(mRNA)水平。结果:与模型对照组对比,金匮肾气丸组大鼠的肾间质损伤指数降低,间质胶原阳性面积减少,Ⅲ型胶原和α-SMA的蛋白表达减少,上皮钙黏素蛋白表达升高,Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白的信使核糖核酸(mRNA)表达减少,上皮钙黏素蛋白mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:金匮肾气丸可以减轻UUO大鼠梗阻肾组织肾间质损伤,减少间质内胶原沉积,减轻肾脏纤维化程度,其作用机制可能与减少Ⅲ型胶原、α-SMA的蛋白和mRNA表达,增加上皮钙黏素的蛋白和mRNA表达有关。     

川芎嗪对肾间质纤维化模型大鼠Smad7和SnoN蛋白表达的影响

目的:探讨川芎嗪(tetramothylpyrazine,TMP)对单侧输尿管梗阻(unilatcral ureteral obstruction,UUO)所致大鼠肾间质纤维化的作用及机制.方法:雄性SD大鼠18只,随机分为3组:假手术组、模型组以及TMP组,每组6只.采用单侧输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化模型.川芎嗪(40mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗3周后取梗阻侧肾组织,分别进行HE和Masson染色,观察肾组织病理改变和胶原沉积的变化;采用放射免疫分析法检测Ⅲ型前胶原含量;应用酶联免疫吸附(ELIsA)法检测肾组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;采用Western blotting检测肾组织中Smad7和Smad转录共抑制因子SnoN蛋白表达水平的变化.结果:与假手术组比较,镜下可见模型组大鼠肾小管萎缩,管腔扩张,肾间质中大量胶原纤维沉积,肾间质明显增宽;Ⅲ型前胶原、TGF-β1含量显著增加;Smad7,SnoN蛋白表达水平显著下调.TMP组与模型组比较,肾组织病理改变明显改善,Ⅲ型前胶原、TGF-β1含量明显降低,Smad7,SnoN蛋白表达水平明显上调.结论:川芎嗪具有显著抗肾间质纤维化的作用,其机制与降低肾组织中促纤维化细胞因子TGF-β1含量,同时恢复Smad逆向调控因子Smad7和SnoN蛋白表达水平有关.     

补肾复方对压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察补肾复方对压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达的影响．探讨补肾复方逆转心肌纤维化的分子机制。方法：采用RT—PCR的方法检测心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原的基因表达。结果：模型组大鼠左室心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原mRNA表达较假手术组显著上升,卡托普利组和补肾复方大、小剂量组大鼠左室心肌组织α2（Ⅰ）型胶原、α2（Ⅲ）型胶原mRNA表达较模型组显著下降。结论：补肾复方与卡托普利具有基本一致的逆转-心肌纤维化的作用,该作用可能是通过降低α2（Ⅰ）型胶原和α2（Ⅲ）型胶原基因表达来实现的。     

康心汤对主动脉缩窄心肌肥厚大鼠模型心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的探讨康心汤对腹主动脉缩窄心肌肥厚大鼠模型心脏Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达的作用。方法造模4周后,予以康心汤干预,实验分假手术组、模型组、模型组+康心汤大、中、小剂量组。假手术组(生理盐水),模型组(生理盐水),模型+康心汤低剂量组[2.5g/(kg·d)],模型+康心汤中剂量组[5g/(kg·d)],模型+康心汤高剂量[10 g/(kg·d)]灌胃,药物干预8周后无痛处死大鼠取材,测定左心室质量指数,RT-PCR检测心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA。结果模型组左心室重量增加,左心室质量指数增加,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达上调,康心汤降低左心室质量指数,下调心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。结论康心汤可以调节心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达缓解腹主动脉缩窄大鼠模型心肌肥厚和纤维化。     

德都红花-7味散原药方与优化方对肝纤维化大鼠Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨德都红花-7味散原药方及优化方对肝纤维化大鼠Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:40只Wistar大鼠分为正常组、模型组、阳性药组、原药组、优化组。大鼠ip 30%CCl4橄榄油溶液建立肝纤维化模型。同时1次/日ig给药,阳性药组给予秋水仙碱片0.4 mg·kg-1;原药组给予德都红花-7味散0.6 g·kg-1;优化组给予德都红花-7味散优化方0.6 g·kg-1。连续40 d后处死大鼠。取肝脏天狼星红染色,观察肝组织纤维化程度和Ⅰ,Ⅲ型胶原分型。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织匀浆Ⅲ型前胶原和Ⅳ型胶原,层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA)含量。实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原mRNA表达变化。结果:天狼星红染色模型组Ⅰ,Ⅲ型胶原纤维较正常组增多,阳性药组、原药组、优化组Ⅰ,Ⅲ型胶原纤维较模型组减少。与正常组比较,酶联免疫法检测模型组Ⅳ型胶原,HA含量升高(P0.05)。与模型组比较,阳性药组、原药组、优化组Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、HA含量明显降低(P0.05)。实时荧光定量PCR法检测模型组Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA表达较正常组上调(P0.01)。阳性药组、原药组、优化组Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA表达较模型组下调(P0.01)。原药组、优化组Ⅰ型胶原mRNA表达较阳性药组下调(P0.05)。优化组Ⅰ型胶原mRNA表达较原药组下调(P0.05)。结论:德都红花-7味散原药方与优化方是通过抑制Ⅰ型胶原mRNA和Ⅲ型胶原mRNA的转录,达到阻断或延缓肝纤维化的发生发展,德都红花-7味散优化方优于原药方。     

金匮肾气丸对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的影响

目的:研究金匮肾气丸对腺嘌呤致大鼠肾间质纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法:96只SD大鼠随机分成正常组、模型组、氯沙坦组(5 mg·kg-1)和金匮肾气丸高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg-1),采用腺嘌呤灌胃(200 mg·kg~(-1)·d~(-1))诱导肾间质纤维化大鼠模型,2 h后灌胃给予相应药物,造模连续9周;给药连续16周。采用生化法测定血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理改变情况;马松(Masson)染色观察大鼠肾脏胶原沉积情况;以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠肾脏组组转化生长因子-β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),钙黏蛋白(E-cadherin),Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ),Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ),Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ),基质金属蛋白酶-1(MMP-1),基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1),基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA的表达;以免疫组化法测定大鼠肾脏TGF-β1,α-SMA和E-cadherin的表达。结果:与正常组比较,模型组中SCr和BUN显著升高(P0.01),给予金匮肾气丸干预后SCr和BUN水平降低(P0.05);HE染色和Masson染色结果显示,与正常组比较,模型组肾间质损伤严重且肾间质胶原物质大量沉积,给予金匮肾气丸干预后肾间质小管损伤减轻,肾间质胶原物质沉积减少;Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA表达上调(P0.05),模型组E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA表达下调(P0.05),给予金匮肾气丸干预后E-cadherin,MMP-1,MMP-2,MMP-9 mRNA的表达上调(P0.05),TGF-β1,α-SMA,Col-Ⅰ,Col-Ⅲ,Col-Ⅳ,TIMP-1,TIMP-2mRNA的表达明显下调(P0.05);免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组E-cadherin蛋白表达下调(P0.01),TGF-β1和α-SMA蛋白表达上调,金匮肾气丸干预后E-cadherin蛋白表达上调(P0.05),TGF-β1和α-SMA蛋白表达下调(P0.05)。结论:金匮肾气丸可有效改善肾间质纤维化并对肾脏有一定的保护作用,其改善肾间质纤维化的机制可能与降低基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1,TIMP-2)活性,TGF-β1蛋白表达,α-SMA蛋白表达,升高基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-2,MMP-9)活性,E-cadherin蛋白表达,从而减少胶原物质的沉积有关。     

复方虎桃合剂对大鼠肺纤维化胶原合成和分解代谢影响的研究

目的:观察复方虎桃合剂(HT)对肺纤维化模型大鼠肺组织胶原代谢的影响。方法:以牛血清白蛋白等建立大鼠免疫复合物损伤性肺纤维化模型后,用 HT 进行预防性治疗,并用羟脯氨酸法测定大鼠肺组织总胶原的含量,以 DNA-RNA 斑点杂交法检测大鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和胶原酶基因的 mRNA 表达水平。结果:羟脯氨酸含量预防组明显低于模型组(P<0.01),与正常组接近;Ⅰ、Ⅲ型胶原 mRNA 表达水平与模型组比较,预防组均降低(P<0.01)。胶原酶基因表达水平:与模型组相比,预防组在26、36天时有增加的倾向,但差异无显著性。结论:HT 对肺组织胶原的合成有明显的抑制作用,可下调肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA 表达水平,对肺纤维化具有明显的防治效果。     

复方愈疡散治疗糖尿病慢性难愈性创面的机制

目的:研究复方愈疡散治疗糖尿病慢性难愈性创面的作用机制。方法:SD大鼠腹腔注射四氧嘧啶,在背部剪出直径约2 cm创面,制造糖尿病慢性难愈合创面大鼠模型,建立糖尿病大鼠创面模型后随机分为模型组、阳性药对照组、复方愈疡散组、补虚组、祛瘀组,每组30只。模型组灌胃生理盐水,阳性药组灌胃康复新液(10 g·kg-1),复方愈疡散组灌胃复方愈疡散(13.0 g·kg-1),补虚组灌胃补虚方(5.1 g·kg-1),祛瘀组灌胃祛瘀方治疗(7.9 g·kg-1)。于治疗后第10,16,20天于创面组织取材,用酶联免疫吸附测定法检测Ⅰ,Ⅲ型胶原,Smad信号蛋白家族-3(Smad3),Smad信号蛋白家族-7(Smad7),转化生长因子-β1(TGF-β1)含量。结果:与模型组比较,复方愈疡散组能够上调Ⅲ型胶原,Smad7表达(P<0.05),降低Smad3的表达(P<0.05),其中以第20天效果最佳;补虚组能够上调Ⅰ型胶原表达,升高Smad7的表达(P<0.05),康复新组下调Ⅲ型胶原表达,升高TGF-β,Smad 3表达(P<0.05)。祛瘀组能够上调Ⅰ,Ⅲ型胶原表达,升高TGF-β1,Smad3的表达(P<0.05)。结论:复方愈疡散促进糖尿病大鼠创面愈合的机制可能与双向调节TGF-β1-Smad3,Smad7通路,调整Ⅰ,Ⅲ型胶原在创面组织中的比例有关。     

肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:观察肾衰灵对慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(C-Ⅲ)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达及肾脏病理变化。结果:模型组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达与正常组相比均明显增加(P<0.05),肾衰灵、赖诺普利组明显低于模型组(P<0.05),肾衰灵组明显低于赖诺普利组(P<0.05)。肾衰灵组肾脏病理变化明显减轻。结论:肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏有明显保护作用,肾衰灵可显著降低大鼠肾组织TGF-β1相对mRNA表达,使LN,C-Ⅲ型胶原的合成减少,减轻肾组织中细胞外基质的沉积和肾小球的硬化,进而达到延缓肾功能衰竭的目的。