抑制素(Inhibin)的研究 Ⅰ.人精液抑制素的制备及其生物学特性

本文报道人精液抑制素的制备及其生物学特性。收集的新鲜人精液经乙醇沉淀和丙酮冲洗,获得的粗提物经Sephadex G100处理,产生具有高活性抑制素hP2组分。应用hP2测定使去势雄性大鼠增高的血清FSH水平降低。其生物特性:hP2的生物活性按单位重量计算为粗提物的10倍以上,包含16种氨基酸,通过SDS-PAGE计算分子量为11,500道尔顿。     

抑制素(Inhibin)的研究Ⅱ.猪精液抑制素在下丘脑水平的作用

实验前24小时给去势成年雄性大鼠第三脑室注射纯化猪精液抑制素pUⅡ,结果证实抑制素在下丘脑水平有抑制GnRH释放的直接作用。pUⅡ注入第三脑室不仅阻止去势大鼠血清FSH水平的继续上升,而且也引起血清FSH含量进一步下降至注入前的水平以下。注入后3小时达到最大效应,并可持续6小时以上。此抑制效应在24小时内消失。随后,血清FSH含量与对照组一样,超过注入前水平。我们的资料提示了抑制素除了公认的直接作用于腺垂体外,还可作用于下丘脑,降低GnRH含量,选择性地抑制FSH的分泌。     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８５－１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应。杂交瘤细胞染色体平均为８５～１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ—１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。其分泌抗元体均为ＩｇＧ１型，均不与大鼠ＬＨ，ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８６～１０３条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定的分泌特异性抗体。     

建立分泌抗人精液抑制素杂交瘤细胞株及其单克隆抗体的研究

用人精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得４株分泌抗人精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＩＢ１０，ＩＧ５，ＩＡ４和ＩＡ６。     

人抑制素α亚基单克隆抗体的制备和鉴定

目的：建立分泌抗人抑制素α亚基３７ － ６５ 片段单克隆抗体（ 单抗） 细胞株,并对单抗进行免疫学鉴定。方法：以猪卵泡液粗提物为免疫原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,取其脾细胞与ＮＳ１ 小鼠骨髓瘤细胞融合。杂交瘤细胞用人工合成的人抑制素α亚基３７ －６５ 片段包被,间接ＥＬＩＳＡ法筛选。结果：获得稳定分泌抗人抑制素α亚基３７ － ６５ 片段单抗细胞３ 株,ＥＬＩＳＡ 检测腹水效价为１×１０－ ５～１×１０ －３ ,与α亚基１ －３２ 及其他多肽激素无交叉反应,３ 株识别同一抗原位点。相对亲和力为ⅠＡ５ ＞ Ⅳ３Ｃ＞ Ⅴ５Ｇ。腹水中的抗体能明显地被人卵泡液和猪卵泡液和α（３７ － ６４）中和。结论：３ 株细胞有特异性、敏感性和实用性。抗体可用于人的正常组织及部分肿瘤组织免疫组化研究     

人抑制素βB亚基单克隆抗体的制备和鉴定

目的：人抑制素βＢ亚基单克隆抗体（单抗）的制备和鉴定。方法：以化学合成人抑制素βＢ（１－ ２８） 和（８５－１１５）多肽片段和粗提猪卵泡抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,经细胞融合与筛选,得到分泌单抗的细胞株,诱生腹水后采用特定的免疫学方法进行鉴定。结果：获得４ 株能分泌单抗的细胞株,ＥＬＩＳＡ 检测腹水效价为１ ×１０－４ ～１ ×１０－ ６,与α、βＡ亚基片段及其他多肽激素无交叉反应,３ 株ＭｃＡｂ（ 抗ＩＮＨβＢ（８５－ １１５）） 识别同一抗原位点。相对亲和力３Ｅ８＞５Ｅ１１＞７Ｂ９。腹水中的抗体能明显地被人卵泡液,猪卵泡液和βＢ（８５ －１１５）ＢＳＡ 中和而呈抑制曲线。结论：成功制备了抗人ＩＮＨβＢ亚基的单抗     

人抑制素βA亚基单克隆抗体的制备和鉴定

目的：制备人抑制素βＡ（ＩＮＨβＡ） 亚基多肽单克隆抗体（单抗,ＭｃＡｂ）。方法和结果：用固相多态合成法合成了人抑制素βＡ亚基１ － ２８,８２ － １１４ 多肽片段。以粗提的猪卵泡液抑制素（ＩＮＨ） 和合成肽段纯品作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,经细胞融合与筛选,获得４ 株杂交瘤细胞株,ＥＬＩＳＡ检测腹水效价为１×１０－ ４ ～１ ×１０－ ５ ,抗体特异性试验表明与α亚基片段及其他多肽激素无交叉反应。表位分析表明３ 株ＭｃＡｂ（ 抗ＩＮＨβＡ（８２－ １１４）） 可能针对同一抗原位点。相对亲和力试验表明４Ｇ３＞ ３Ｂ７＞ ６Ｃ５ ＞２Ａ３。抗原竞争试验表明腹水中抗体能明显被人卵泡液和猪卵泡液中和, 而绝经期妇女血清不能中和抗体活性。结论：成功制备抗ＩＮＨβＡ亚基ＭｃＡｂ     

抑制素A和抑制素B对卵巢早衰的诊断价值研究

目的:研究抑制素A和抑制素B对卵巢早衰的诊断价值。方法:选取我院2010年1月～2011年1月妇产科门诊及病房卵巢早衰患者22例及卵巢功能正常的女性志愿者20例进行研究。检测42例研究对象的抑制素A、抑制素B、FSH及E2的水平。结果:在卵巢早衰组和正常组之间具有可比性的前提下发现:两组间INHAI、NHB、FSH以及E2的差异均具有统计学意义(P<0.05)。其中:对照组INHAI、NHB及FSH的水平比卵巢早衰组低,对照组E2的水平比卵巢早衰组高。抑制素单独及联合指标对于卵巢早衰均具有良好的诊断价值。结论:INHA和INHB对卵巢早衰具有一定的诊断价值,INHA/INHB的诊断价值最高。     

抑制素的研究进展

一、PHB基因 抑制素（prohibitin，PHB），1989年由MeClung等首先克隆出哺乳动物的PHB基因。PHB基因广泛存在于哺乳动物、植物、果蝇、酵母、原虫及细菌等各种生物中。基于与酵母抑制素序列的相似性，人抑制素被划分为两个家族，即PHB1和PHB2。     

抑制素在免疫调节中的新作用

抑制素可减少Ⅱ型主要组织相容性复台物(MHC Ⅱ)通过动脉细胞的表达,导致T细胞反应降低。这表明抑制素可能适用于治疗移植物动脉粥样硬化和其他慢性炎性疾病。抑制素可以抑制3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶,此酶是细胞胆固醇合成的关键酶。细胞内胆固醇的最终降低可导致通过低密度脂蛋白(LDL)受体的胆固醇吸收代偿性增加以及血浆胆固醇伴随性降低。胆固醇水平降低能够影响大量的致病机制,这些机制被认为对动脉粥样硬化的形成及其急性后果、血块破裂和血栓形成起一     

精索静脉曲张不育患者血清8-OHdG、NO 及抑制素B水平变化及意义

目的:探讨精索静脉曲张不育患者血清8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、一氧化氮(NO)及抑制素B水平变化及意义。方法:选取精索静脉曲张不育患者131例,将其设定为实验组,包括Ⅰ度35例,Ⅱ度69例以及Ⅲ度27例。取同期在我院接受体检的健康者100例,将其设定为对照组。比较两组8-OHdG、NO及抑制素B差异,分析各项指标和精液质量的关系。结果:相较于对照组,实验组8-OHdG和NO水平更高(P<0.05),抑制素B水平更低(P<0.05);随着病情的不断加重,实验组患者的8-OHdG和NO水平呈逐渐升高趋势(P<0.05),抑制素B水平呈逐渐降低趋势(P<0.05);实验组血清8-OHdG和NO水平和精子畸形率呈正相关(P<0.05),和精子前向活动率、精子存活率呈负相关(P<0.05);实验组抑制素B水平和精子畸形率呈负相关(P<0.05),和精子前向活动率、精子存活率呈正相关(P<0.05)。结论:通过对精索静脉曲张不育患者血清8-OHdG、NO及抑制素B水平开展检测,可评估病情严重程度和精子质量。     

血清抑制素浓度与子痫前期的关系

目的 探讨子痫前期患者血清抑制素A和抑制素B的浓度与病情的关系。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）,检测20例子痢前期患者（子痢前期组）和正常妊娠妇女（正常妊娠组）血清抑制素A和抑制素B的浓度。结果子痢前期组患者血清抑制素A和抑制素B的浓度均高于正常妊娠组（P〈0．01）。结论子痢前期患者血清抑制素A和抑制素B的浓度明显升高,可以作为辅助预测子痢前期的体液因子。     

人睾丸和卵巢抑制素样物质的免疫组织化学定位

用人抑制素α亚基单克隆抗体（ＭｃＡｂ）腹水作为第一抗体，采用链霉卵白素－生物素－过氧化物酶（ＬＳＡＢ）免疫组织化学方法，在光镜下对人睾丸和卵巢中抑制素样免疫活性物质进行定位观察。结果显示：人睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞Ｌｅｙｄｉｇ细胞、精原细胞、精母细胞和卵巢颗粒细胞、泡膜细胞及间质细胞等胞浆内存在人抑制素α亚基ＭｃＡｂ的阳性免疫染色反应。提示：这些细胞为抑制素的分泌来源。     

人睾丸和卵巢抑制素样物质的免疫组织化学定位

用人抑制素α亚基单克隆抗体（ＭｃＡｂ）腹水作为第一抗体，采用链霉卵白素－生物素－过氧化物酶（ＬＳＡＢ）免疫组织化学方法，在光镜下对人睾丸和卵巢中抑制素样免疫活性物质进行定位观察，结果显示：人睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞、Ｌｅｙｄｉｇ细胞、精原细胞、精母细胞和卵巢颗粒细胞、泡膜细胞及间质细胞等胞浆内存在人抑制素α亚基ＭｃＡｂ的阳性免疫染色反应，提示：这些细胞为抑制素的分泌来源。     

抑制素的研究进展

一、PHB基因抑制素(prohibitin,PHB),1989年由MeClung等[1,2]首先克隆出哺乳动物的PHB基因。PHB基因广泛存在于哺乳动物、植物、果蝇、酵母、原虫及细菌等各种生物中。基于与酵母抑制素序列的相似性,人抑制素被划分为两个家族,即PHB1和PHB2。在各种生物中至少有PHB1和PHB2的两个复制。PHB1是作为肿瘤抑制因子而被逐渐认识的,并且有抗细胞增殖活性[1]。然而进一步的研究[2]表明,这种抗肿     

关于抑制素的回顾与展望

1923年,随着生殖腺反馈调节垂体功能的概念的提出,关于抑制素的研究开始了。抑制素是一种非类固醇类物质,能够抑制垂体细胞的活性。1932年,这种物质在水状的睾丸提取物中得到证实,并被命名为抑制素。又经过了50多年的研究,到1985年,抑制素才被纯化和克隆。而直到化验技术的进步使人和动物的循环浓度得以分析,抑制素的生理活性的揭示才得以完成。本文综述抑制素的历史、生理作用及其在辅助生殖技术中的最新的应用和研究。     

激活素A及抑制素A与子痫前期的相关性

目的探讨子痫前期病人血清抑制素A和激活素A的水平变化及其与病情的关系。方法采用酶联免疫分析法(ELISA),检测了40例子痫前期病人(子痫前期组,包括轻度20例,重度20例)及40例正常妊娠妇女(正常妊娠组)的血清抑制素A和激活素A水平。结果子痫前期组病人血清抑制素A、激活素A水平均高于正常妊娠组,差异有统计学意义(t=69.93、30.12,P<0.01);其中重度子痫前期病人血清抑制素A、激活素A水平高于轻度子痫前期病人,差异有统计学意义(t=43.88、18.84,P<0.01)。两组病人血清抑制素A与激活素A水平呈正相关(r=0.59、0.52,P<0.01);子痫前期组病人血清抑制素A、激活素A水平与24 h尿蛋白含量呈显著正相关(r=0.76、0.56,P<0.01)。重度子痫前期伴胎儿生长受限(FGR)与不伴FGR病人血清抑制素A、激活素A水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论子痫前期病人血清抑制素A、激活素A水平较正常妊娠妇女显著升高,且与子痫前期病情进展关系密切。     

激活素、抑制素与肿瘤的研究进展

肿瘤的发生、发展受众多因素调节，是一个多步骤复杂的过程。很多研究表明，激活素与抑制素对卵巢、甲状腺、肾上腺、前列腺等生殖内分泌肿瘤及其它肿瘤的发生发展有一定影响。激活素、抑制素均属转化生长因子-β超家族成员（transforming growth factor-β，TGF—β）。