基因工程链激酶的中试研究

链激酶是急性心肌梗塞溶栓治疗的特效药物，我们利用基因工程方法在大肠杆菌中高效表达重组链激酶，用１０Ｌ发酵罐对工程菌进行高密度，高表达发酵，通过简便的复性和纯化流程，一次能够获得纯度达９８％以上，比活性９～１０万ＩＵ／ｍｇ的ｒ－ＳＫ，可分装３００～４００个剂量静脉注射用ｒ－ＳＫ冻干粉制剂，形成了中试规模的批量生产能力。     

中国姥鲨软骨源溶菌酶样分子的分离纯化,部分氨基酸序列测定及 …

用含０．０２ｍｏｌ／Ｌ ＭＥＳ的１ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍抽提新鲜中国姥鲨软骨组织,抽提物经Ｍｒ３００００ＰＴＴＫ膜超滤、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００和Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５柱层析获得１种新的Ｍｒ为１５２００的高纯度蛋白质,Ｎ－末端序列测表明其与多种哺乳动物来源的溶菌酶具有相关性,并在体外具有显著的溶菌酶活性,其比活性高达２２３０００Ｕ／ｍｇ;Ｓｐ１５在１０μｇ／ｍｌ浓度下,可显著抑制血管内皮细胞的增殖,其     

甘蓝细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

通过对甘蓝细胞溶质ＳＯＤ的纯化及性质研究,开拓制备ＳＯＤ的廉价原料来源。经硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ＤＥ５２层析３个步骤,将昨细胞溶质ＳＯＤ纯化到均一程度。从１０００ｇ叶片中得到３．２ｍｇ酶,酶的比活力达９７００Ｕ／ｍｇ蛋白。经鉴定该酶是Ｃｕ．ｚｎ－ＳＯＤ。测得其Ｍｒ约为３２２００,亚基Ｍｒ约为１６０００。该酶的Ｎ－末端为丙酸,其可见光区与紫外光区的最大吸收峰分别在     

人微小纤溶酶原活性中心丝氨酸突变体基因在毕赤酵母中的表达

用ＰＣＲ方法将编码人微小纤溶酶原（ｍｉｃｒｏｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ,ｍＰｌｇ）活性中心Ｓｅｒ的密码子转换为Ａｌａ密码子,突变体ｃＤＮＡ与分泌型酵母表达载体ｐＨＩＬ－Ｄ８重组,构成受醇氧化酶基因（ＡＯＸ１）的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化ＧＳ１１５酵母菌,经表型筛选、ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达,ＭｍＰｌｇ分泌至培养液,经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证实。培养液经离心,上清与重组葡激酶（Ｓｔａｐｈｙｌｏｋｉｎａｓｅ,Ｓａｋ）孵育后,以酪蛋白－琼脂糖平板溶圈法、发色底物法检测,ＭｍＰｌｇ未显示纤溶活性。此研究为制备Ｓａｋ．ｍＰｌｇ复合物的晶体提供了条件。     

丁基苯酞改善大鼠实验性蛛网膜下腔出血后局部脑血流(英文)

探讨了基苯酞（ｄｌ－３－ｎ－ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅ,ｄｌ－ＮＢＰ）对大鼠蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）的可能治疗作用．方法：侧脑室注射自体动脉血造成蛛网膜下腔出血模型,氢清除法测定尾核局部脑血流（ｒＣＢＦ）,结果：蛛网膜下腔出血后１５ｍｉｎ,ｒＣＢＦ即快速降至注血前的 ５２％,并且在 １８０ｍｉｎ内基本上维持在该水平．ｄｌ－ＮＢＰ ５０,１００ ｍｇ·ｋｇ－１（ｉｇ）皆可提高 ＳＡＨ后 ３０－１８０ ｍｉｎ内的 ｒＣＢＦ;而ｄｌ－ＮＢＰ１００ ｍｇ·ｋｇ－１在 １５ｍｉｎ时即可将ｒＣＢＦ提高２６％,１８０ｍｉｎ时达 ３６％．结果还发现 ｄ－ＮＢＰ （１０ｍｇ·ｋｇ－１, ｉｐ）提高ｒＣＢＦ,但ｌ－ＮＢＰ（１０ ｍｇ·ｋｇ－１, ｉｐ）则无明显作用．结论：丁基苯酞改善ＳＡＨ后ｒＣＢＦ。     

非胰岛素依赖型糖尿病患者血浆D-二聚体的变化及其意义

为探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者凝血及纤溶活性，采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了３５例ＮＩＤＤＭ患者的血浆Ｄ－二聚体。结果：ＮＩＤＤＭ患者血浆Ｄ－二聚体水平为１．６３ｍｇ／Ｌ±０．１４ｍｇ／Ｌ），明显高于正常对照组（０．３３ｍｇ／Ｌ±０．０９ｍｇ／Ｌ）（Ｐ＜０．０５）；有血管病变组Ｄ－二聚体为２．６２ｍｇ／Ｌ±０．６８ｍｇ／Ｌ，高于无血管病变组（０．６９ｍｇ／Ｌ±０．６８ｍｇ／Ｌ），差异有显著性（Ｐ＜０．００１）；血浆Ｄ－二聚体与ＦＢＧ、ＴＣ、ＴＧ相关分析表明Ｄ－二聚体与ＦＢＧ、ＴＧ呈正相关（分别为ｒ＝０．５８，Ｐ＜０．００１；ｒ＝０．０３５，Ｐ＞０．２；ｎ＝１４），与ＴＣ呈负相关（ｒ＝－０．０４５，Ｐ＞０．２，ｎ＝１４）。８例ＮＩＤＤＭ患者治疗后血浆Ｄ－二聚体较治疗前显著降低，分别为１．１１±０．８１，３．６５±１．２２，Ｐ＜０．０５）。提示ＮＩＤＤＭ患者体内存在高凝和继发纤溶活性亢进，血浆Ｄ－二聚体是反映ＮＩＤＤＭ患者高凝和缺血性疾病的诊断、疗效观察的良好指标。     

毛细管气相色谱法测定撒烈痛片含量

本文采用毛细管气相色谱法测定撒烈痛片的含量。色谱柱：交联ＳＥ－５４弹性石英毛细管柱（０．２５ｍｍｉｄ×２５ｍ），氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ），进样量在０．３ｍｇ－１．３ｍｇ内４种成分与峰面积比呈直线相关（非那西丁：ｙ＝２．９５５４ｘ－０．１２８１，ｒ＝０．９９９５；咖啡因：ｙ＝１．５５８４ｘ－０．０２５７，ｒ＝０．９９９４；氨基比林：ｙ＝１．１６５３ｘ－０．０８９３，ｒ＝０．９９９２；苯巴比妥：ｙ＝２．５３５ｘ－０．１７５４，ｒ＝０．９９９８）。平均回收率±标准差分别为１００．２％±１．１７％、９９．８％±１．９４％、１００．５％±１．４６％、９８．４％±１．８２％。     

聚乙二醇修饰超氧化物歧化酶的研究

以氰尿酰氯活化单甲氧基聚乙二醇（ＭＰＥＧ Ｍｒ５０００）对猪血Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ进行修饰，制得ＭＰＥＧ２－ＳＯＤ。产物的酶活性保持８２．０％，期半衰期比修饰前延长至７．６倍，在动物脑中的ＳＯＤ活性较高。修饰ＳＯＤ抗炎活性增强，抗原性降低，稳定性提高。     

国产高密度脂蛋白胆固醇直接测定法的评价

目的 评价国产的高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）直接测定法在临床上应用的可行性。方法 将国产的直接测定法与硫酸葡聚糖镁（ＤＳ－ｍｇ＾＋２）沉淀法进行比较分析，观察其精密度，线性范围，准确度及部分干扰因素。结果 直接测定法的ＣＶ略小于ＤＳ－ｍｇ＾＋２法，与ＤＳ－ｍｇ＾＋２的相关性良好，Ｙ＝０．８３ｘ＋０．２６，ｒ＝０．９２，ＨＤＬ－Ｃ含量在２．３０ｍｍｏｌ／Ｌ时线性良好；黄疸、溶血对直接测定法有一定     

L-赖氨酸高产菌株筛选

本实验以Ｌ－赖氨酸产生菌钝齿棒杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｒｅｎａｔｕｍ）ＯＭ－４（ＨＳ＋，ＡＥＳｒ，Ｍｅｔｒ）为出发菌株，经硫酸二乙酯和氯化锂复合诱变处理，用ＡＥＣ（Ｓ－［２－氨乙基）－Ｌ－半胱氨酸）和苏氨酸定向筛选获得了高抗ＡＥＣ的突变株ＡＴ－５（ＨＳ＋，ＡＥＣｒ，Ｍｅｔｒ）菌株，再以ＡＴ－５为出发菌株经亚硝基胍诱变处理，获得一株产Ｌ－赖氨酸的ＴＡ（２－噻唑－ＤＬ－丙氨酸）抗性突变株（ＡＴＴ一６８号），菌株产酸量由原来ＯＭ一４菌株的４６．３ｍｇ／ｍＬ提高到７４．８ｍｇ／ｍＬ提高１６１．５％，在筛选结构类似物抗性突变株时采用小钢杯法，可大大节省结构类似物药品．     

1－环丙基－5－取代－7－（4－甲基哌嗪基）－6，8－二氟－1，4－二氢－4－氧－3－喹啉羧酸定量构效关系的比较分子力场分析（CoMFA）研究

利用３Ｄ－ＱＳＡＲ中的ＣｏＭＦＡ方法研究了１－环丙基－５－取代－７－（４－甲基哌嗪基）－６，８－二氟－１，４－二氢－４－氧－３－喹啉羧酸定量构效关系。研究表明，从ＰＬＳ分析的ｒｃｖ，ｒ值看，模型有效强的预测能力；从立体与静电作用分数比可看出，５位取代基对活性的影响立体效应起主要作用，但静电效应亦十分重要。依据ＣｏＭＦＡ系数图设计了一些新化合物，预测结果表明，以５位氨基对抑制革兰氏阳性、阴性菌的活性为最高，与近几年实验研究的结果一致．     

GC 法测定榄香烯注射液中有效成分

采用气相色谱法，以水杨酸甲酯为内标物，测定榄香烯注射液中的有效成分β－，γ－，δ－榄香烯含量．榄香烯浓度在０．５～１．５ｍｇ／ｍＬ范围内峰面积比与浓度呈良好的线性关系，ｙ＝１．３２ｘ－０．０３，ｒ＝０．９９９９（ｎ＝５）．平均回收率１００．９％，ＲＳＤ０．５％．     

联产人尿激肽释放酶的纯化工艺

为解决联产工艺人尿激肽释放酶（ＨＵＫＮ）的纯化，用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ亲和层析柱纯化ＨＵＫＮ，可得到ＨＰＬＣ单峰，比活性２９３．９ＥＵ／ｍｇ的产品，收率为４８．６％，本工艺简单，容易放大，能适合大规模生产的需要。     

碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用度研究

目的：评价碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用度。方法：以原子吸收光谱法测定１０名健康志愿者口服碳酸钙泡腾颗粒与进口碳酸钙片后的尿钙浓度，以尿钙总排泄量与尿钙增量为指标评价两种制剂吸收差异。结果：口服１．２ｇ碳酸钙泡腾颗粒与碳酸钙片后４ｈ尿钙总排泄量分别为０．１４３ｍｇ·（ｍｇＣｒ）－１与０．１０９ｍｇ·（ｍｇＣｒ）－１；尿钙增量分别为０．０５１ｍｇ·（ｍｇＣｒ）－１与０．０３１ｍｇ·（ｍｇＣｒ）－１，前者均显著高于后者（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。结论：碳酸钙泡腾颗粒的口服生物利用度高于碳酸钙片。     

1—环丙基—5—取代—7—（4—甲基哌嗪基）—6,8—一二氟—1,4—二氢…

利用３Ｄ－ＱＳＡＲ中的ＣｏＭＦＡ方法研究了１－环丙基－５－取代－７－（４－甲基哌嗪基）－６，８－二氟－１，４－二氢－４－氧－３－喹啉羧酸定量构效关系。研究表明，从ＰＬＳ分析的ｒｅｖ，ｒ值看，模型有较强的预测能力；从立体与静电作用分数比可看出，５位取代基对活性的影响立体效应起主要作用，但静电效应亦十分重要，依据ＣｏＭＦＡ系数图设计了一些新化合物，预测结果表明，以５位氨基对抑制革兰氏阳性、阴性菌的活性     

β—胡萝卜素对阿霉素所致的大鼠心脏毒性的作用

目的：研究β－胡萝卜素减轻阿霉素所致的大鼠心脏毒性的作用及其机制，方法：应用光学显微镜技术观察心肌组织的病理变化，心肌ＭＤＡ值用巴比妥酸法测定，ＳＯＤ活性用邻苯二酚法测定，ＧＳＨ－Ｐｘ活性用ＤＴＮＢ法测定，运用顺磁共振（ＥＳＲ）技术测定半醌自由基，结果：β－胡萝卜素素１０或３０ｍｇ．ｋｇ＾－１可明显减轻阿霉素引起的大鼠心肌损害，保护ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ活性，对抗阿霉素引起的心肌ＭＤＡ水平升高，体外     

小剂量β—受体阻滞剂对急性心肌梗死患者心率变异的影响

目的 研究小剂量β－受体阻滞剂对急性心肌梗患者心率变异的影响。方法 ４４例急性心肌梗死患者入院后随机分为β－ 体阻滞剂治疗组（１８例）和对照组（２６例）。治疗组于即刻给予氨酰心安（１２．５～２５ｍｇ／ｄ）或美多心安（２５～５０ｍｇ／ｄ），余治疗相同。１０～１４ｄ后行２４ｈ动态心电图检查，分析心率变异的时域指标ＳＤＮＮ ＳＤＡＮＮ ｒＭＳＳＤ ＰＮＮ５０、散点图指标ＶＬＩ ＶＡＩ的变化。用配对ｔ检验     

黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用

应用小鼠烧伤模型，对黄芪多糖（ＡＰＳ）的免疫增强作用进行了体内外研究。结果表明：体内应用ＡＰＳ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｑｄ，连续５ｄ），可明显提高烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ的表达；体外分别应用５０、１００、２５０ｍｇ·Ｌ－１的黄芪多糖，发现其可纠正烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ表达的受抑状态，并促进巨噬细胞产生ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，且呈剂量依赖关系；体外去除烧伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞后，ＡＰＳ对Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用消失。提示ＡＰＳ对烧伤小鼠的免疫调节作用依赖于巨噬细胞，通过调节其分泌ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，而促进ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达，进而增强Ｔ淋巴细胞增殖。     

人绝经促性腺激素分离纯化新方法

介绍了一种人绝经促性腺激素（ＨＭＧ）纯化新方法。该方法包括ＳＰ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ色谱分离、Ｒ试剂处理、ＤＥＡＥ－Ｃ色谱分离、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００色谱分离。与现行方法比较，舍弃了乙醇溶液抽提、协和树脂吸附等较为繁琐的步骤。该法可将ＨＭＧ的促卵泡激素（ＦＳＨ）活性从０．９６ＩＵ／ｍｇ纯化提高至９６ＩＵ／ｍｇ。     

抗生素89－07联合氟氧头孢实验治疗mec A基因阳性MRSA感染小鼠败血症体内抗菌疗效

应用ｍｅｃＡ基因阳性的甲氧西林耐药金葡球菌２株临床分离菌株，金葡球菌９２－１０６与８９－１８７感染小鼠引起的小鼠败血症实验模型，评价抗生素８９－０７与氟氧头孢联合方案的体内抗菌活性并与去甲万古霉素单独给药进行比较。结果表明去甲万古霉素治疗金葡球菌９２－１０６和８９－１８７引起的小鼠ＭＲＳＡ感染的半数有效剂量ＥＤ５０值分别为５．８±１．１和４．１±０．８ｍｇ／ｋｇ，均显著低于抗生素８９－０７（１０．０，１０．５ｍｇ／ｋｇ）或氟氧头孢（２６；９，２９．２ｍｇ／ｋｇ）。抗生素８９－０７与氟氧头孢联合治疗ＭＲＳＡ９２－１０６与８９－１８７感染小鼠的ＥＤ５０值分别为３．８与２．５ｍｇ／ｋｇ。均显著低于去甲万古霉素、抗生素８９－０７和氟氧头孢相应的ＥＤ５０值。说明抗生素８９－０７与氟氧头孢联合方案的体内抗菌活性比去甲万古霉素强，具有统计学显著意义（Ｐ＜０．０１）。表明两药联合具有很好的体内协同作用。