家族性腺瘤性息肉病患者APC基因胚系突变的检测

探讨国有家族性腺瘤性息肉病患者ＡＰＣ基因胚系突变的规律。方法；运用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法对１５个ＦＡＰ家系１８例患者的ＡＰＣ基因４个片断的胚系突变情况进行检测。结果：６例来自不同家系的患者存在突变，其中一个患者在３个片段有突变，国一个患者在两个片断有突变。结论：此方法具有简便，快速，敏感，经济和无同位素污染等特点，可望成为ＦＡＰ症前及产前基因诊断的新技术。     

家族性腺瘤性息肉病患者APC基因胚系突变的初步研究

目的:探讨国人家族性腺瘤性息肉病(FAP)患者APC基因胚系突变的特点.方法:对我院2004年3月至2005年3月收治的6例FAP患者运用PCR变性高效液相色谱技术检测APC基因,对可疑突变者进行测序.结果:变性高效液相色谱检测共发现3个可疑突变片段,经DNA测序证实3个片段均存在突变.其中,15号外显子2例,14号内含子1例.结论:国人FAP患者相同基因型APC基因突变可有不同表现型.     

家族性腺瘤性息肉病患者APC基因胚系突变的检测

目的：探讨国人家族性腺癌性息肉病（FAP）患者APC基因胚系突变的规律。方法：运用PCR－SSCP法对15个FAP家系18例患者的APC基因4个片断的胚系突变情况进行检测。结果：6例来自不同家系的患者存在突变，其中一个患者在3个片段有突变，另一个患者在两个片断有突变。结论：此方法具有简便、快速、敏感、经济和无同位素污染等特点，可望成为FAP症前及产前基因诊断的新技术。     

APC基因与家族性腺瘤性息肉病

家族性腺瘤性息肉病(familial adenomatous polypo-sis,FAP)是一种常染色体显性遗传病,该病的发生与结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)突变密切相关.大多数APC基因突变的结果是在其下游形成提前的终止密码,使APC蛋白呈"截短"改变,从而导致APC蛋白功能的障碍.该基因容易发生自发的胚系突变,在结肠直肠腺瘤演变为癌的过程中起重要作用.     

家族性腺瘤性息肉病家系成员APC基因胚系突变分析

目的分析家族性腺瘤性息肉病(familial adenomatous polyposis pedigree,FAP)一家系成员结肠腺瘤性息肉病(aenomatous polyposis coli,APC)基因突变类型。方法对本区一家系3代9人抽取静脉血试剂盒提取白细胞DNA,应用聚合酶链反应(Polymerase chainreaction,PCR)方法扩增APC全基因,制备DNA测序的模板,用DNA自动测序仪进行测序,并利用生物信息学方法进行分析。结果9名家族性腺瘤性息肉病家系成员结果一致,共检出2类APC基因突变类型,无意义突变:1493(ACG>ACA)、1756(TCT>TCG)和错义突变:1822(GTC>GAC)。结论9名家系成员具有一致的APC基因突变类型组合,这种组合可能是引起该家系临床表型的原因。     

利用生物信息学技术分析APC基因同义突变SNP在家族性腺瘤性息肉病发病机制的研究

目的 利用生物信息学技术分析APC基因同义突变SNP(sSNP)在家族性腺瘤性息肉病(FAP)中的发病机制.方法 选取云南省遗传性大肠癌组织标本库中的5个FAP患者的组织标本进行APC基因突变比对分析,将筛选得到的sSNP进行生物信息学预测,包括蛋白编码、剪接调节、转录调节、翻译后调节,并对RNA二级结构影响分析方面的预测.结果 筛选得到5个可能对APC蛋白产生影响的sSNP,生物信息学预测提示这些sSNP在mRNA水平影响剪接增强子(ESE)从而引起APC外显子异常剪切,使APC蛋白截短而导致FAP.RNA二级结构分析发现这些sSNP对RNA稳定、与其他RNA或蛋白的相互作用等产生功能性影响.结论 利用生物信息学预测手段,APC基因的某些sSNP引起的突变效应可以解释部分APC阴性FAP的病因.     

河南省2个家族性腺瘤性息肉病家系APC基因突变检测

目的:分析2个家族性腺瘤性息肉病(FAP)家系APC基因外显子1-15(E1～E15)基因突变情况,探讨FAP的分子遗传学机制.方法:抽取2个FAP家系成员静脉血,并提取基因组DNA,PCR-SSCP法检测APC基因E1～E15,对可疑条带进行DNA测序分析.结果:PCR-SSCP电泳显示,DNA条带未发现明显异常.经测序分析,证实无突变.结论:上述2个家系均未发现APC基因E1～E15突变,APC基因可能不应该作为FAP的惟一诊断基因.     

家族性腺瘤息肉病家系的APC基因突变筛查

目的:对4个家族性腺瘤息肉病(FAP)家系进行腺瘤性结肠息肉(APC)基因突变筛查.方法:回顾性分析2017年4月至2019年11月就诊于郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心的4个FAP家系的临床资料.应用高通量测序技术对先证者进行FAP基因突变检测,并行Sanger测序验证.结果:4例先证者均携带APC基因杂合变异...     

家族性腺瘤性息肉病临床病理观察

目的探讨家族性腺瘤性息肉病(FAP)的临床病理特点及诊断、鉴别诊断要点。方法通过临床资料、肠镜及病理检查对2例FAP进行观察,总结其特点,并结合文献加以分析。结果2例患者均为男性,年龄分别为19岁和36岁。临床主要表现为反复血便,大便稀烂,伴腹部疼痛。肠镜及病理检查均为FAP。其中1例病理检查示:个别息肉腺上皮有重度不典型增生,癌变。结论FAP恶变率极高,诊断依赖临床、肠镜、病理三方面的结合。     

家族性腺瘤性息肉病家系的APC基因突变分析

目的 腺瘤性息肉病基因APC胚系突变是家族性腺瘤性息肉病(FAP)的主要致病原因,文中旨在研究FAP患者的APC基因胚系突变情况,明确其致病原因。方法 选取2017年1月至2021年12月东部战区总医院院消化科住院治疗的3个FAP家系。提取家系成员外周静脉血基因组DNA,应用二代测序(NGS)技术对先证者进行基因检测,应用Sanger测序对先证者及家系成员分别进行变异位点的验证。结果 3个家系均检测到APC基因外显子的杂合性变异,分别为两种无义突变和一种移码突变,其中家系1为第14外显子c.1945C>T(p.Q649X)杂合变异;家系2为第15外显子c.3129＿3130delAC(p.Q1044Kfs*2)杂合变异;家系3为第10外显子c.1363C>T(p.Q455X)杂合变异。结论 3个FAP家系均存在致病性APC基因病理性胚系突变,是发病的根本原因,基因检测可以帮助明确诊断,家系受累成员均应筛查肠镜及时治疗。     

5个家族性腺瘤样息肉病家系APC基因突变研究

目的探讨结肠腺瘤病（adenomatous polyposis coli,APC）基因在5个云南省家族性腺瘤样息肉病（Familial adenomatous polyposis,FAP）家系的突变情况。方法对昆明医科大学第一附属医院住院病例进行统计,查找FAP家系,绘制家系图谱。抽取该家系成员外周静脉血提取DNA,利用PCR方法扩增APC基因,应用DNA自动测序仪进行测序。结果 5个家系（2个白族家系,2个彝族家系,1个汉族家系）中,只有汉族家系查出APC基因1196S〉SX（1196号氨基酸由丝氨酸变为了终止密码子）的突变。其余家系均未查出APC基因的无义突变。结论通过对5个FAP家系进行APC基因测序,发现云南省少数民族家系APC基因的突变率不高,APC基因突变存在民族差异。     

遗传性非息肉病性大肠癌和家族性腺瘤性息肉病腺瘤的预防性干预治疗

目的 探索非甾体抗炎药（NSAID）消退遗传性非息肉病性大肠癌（HNPCC）和家族性腺瘤性息肉病（FAP）结直肠腺瘤的有效性和安全性。方法6例HNPCC患者,口服赛来昔布400mg／d。18例符合FAP临床诊断的患者按照随机数字表随机分为2组：赛来昔布400mg组（8例,口服赛来昔布400mg／d）,赛来昔布200mg组（10例,口服赛来昔布200mg,／d）,服药观察24个月。另外4例FAP患者不愿接受赛来昔布治疗,改服肠溶阿司匹林80mg／d（阿司匹林组）。FAP患者以息肉数目描述治疗效果,HNPCC患者按照息肉级别描述治疗后息肉的变化。由专人负责肠镜复查,第1年每3个月复查肠镜1次,第2年每6个月复查肠镜1次。结果两种剂量的赛来昔布均有消退FAP结肠腺瘤作用,服药9个月后400mg组腺瘤消退的比率为86．69％（280／323）,200mg组腺瘤消退比率为51．81％（129／249）,两组比率的差异有统计学意义。4例FAP患者服用80mg肠溶阿司匹林9个月后,37．89％（36／95）的腺瘤消退,5例HNPCC腺瘤患者治疗9个月后腺瘤消失。无论是FAP还是HNPCC结肠腺瘤,服用大剂量（400mg）药物,时间超过6个月时,14例患者中有7例发生不良反应;当减少药物剂量或换用阿司匹林后,不良反应均可逆转。赛来昔布200mg组,治疗期间无不良反应发生。结论NASID是FAP和HNPCC腺瘤干预性治疗的有效药物;赛来昔布400mg／d疗效好,但不良反应较大,国人可先以200mg／d长期治疗或400mg／d治疗6个月后以200mg／d维持;肠溶阿司匹林也有类似效果。     

多重连接探针扩增法检测和识别脊柱肌肉萎缩症的纯合型或杂合型SMN基因缺失(英文)

Spinalmuscularatrophy (SMA)isanautosomalreces siveneuromusculardegenerationoftheanteriorhorncellsofthespinalcordandbrainstem .Thisdegenerationresultsinoneofthemostcommondiseasesrelatedtomusclefatigueandatrophy[1] .SMAdiseasesareclassifiedintofourcategorie…     

SMN基因缺失多重连接探针扩增法检测和识别脊柱肌肉萎缩症的纯合型或杂合型SMN基因缺失

Objective: Spinal muscular atrophy(SMA), an autosomal recessive neuromuscular degen-eration of the anterior horn ceils of the spinal cord and brain stem, results in one of the most common dis-eases with muscle fatigue and atrophy. Most SMA cases including all the types are due to the homozygous deletion of at least exon 7 within the survival motor neuron 1 (SMN-1) gene. Although a ““golden stand-ard““ assay ( PCR with mismatch primer followed by enzyme digestion) is very reliable for the identifica-tion of homozygous SMN-1 deletion, the carrier detection of heterozygous SMN-1 deletion remains a chal-lenge. Methods: Some PCR-based gene dosage assays or multiplex PCR allow for the determination of the copy number of SMN-1 gene to identify heterozygous deletion, but these procedures are often time consuming and available on a limited clinical basis. Recently developed MLPA (multiplex ligation-de-to establish the copy number of the SMN gene. We performed a validation for simultaneous detection of homozygous SMN-1 deletions of SMA patients and heterozygous SMN-1 deletions of SMA carriers in a sim-ple assay using a MLPA-SMA assay specific reagent. Results: Six out of 20 patients with SMA were found to have homozygous SMN-1 deletion, confirmed by the PCR/digestion assay. All 4 parents of the children with SMA had heterozygous SMN-1 deletion, confirmed by an independent relative quantitative analysis. Conclusion: MLPA provides a simple, rapid and accurate method of simultaneously detecting homozygous deletions and heterozygous deletions in a sinzle assay for both SMN-1 and SMN-2 zenes.     

应用多重连接探针扩增法简便高效检测Prader-Willi综合征的基因缺失

Objective: Prader-Willi syndrome (PWS) is characterized by severe hypotonia and feeding difficulties in early infancy, followed by excessive eating and gradual development of morbid obesity in later infancy or early childhood. Patients with PWS are often too young to manifest sufficient features or have atypical findings, making genetic testing important to confirm the diagnosis of PWS. Approximately 99% of patients with PWS have a diagnostic abnormality in the parent - specific methylation imprint with in the Prader-Willi critical region (PWCR) at chromosome 15q11.2-q12.0.Of them,70% have a paternaldeletion;25% have a maternal uniparental disomy(UPD);and＜5% have a mutation in the imprinting center. Methods: Current techniques can identify a diagnostic abnormality, such as paternal deletion or maternal UPD for most of patients with PWS, but they are labor-intensive and cost - expensive. Multiplex ligation-dependent probe amplification(MLPA)ys a novel,simple,and cost-ettective technique for analysis of relative quantification in a single assay,which has recently been applied for the detection of genomic deletions, duplications, and amplifications in a variety of genes.Results: Six out of 20 patients referred for genetic diagnosis of PWS were found to have a deletion by MLPA,confirmed by FISH and DNA methylation analysis with 100% concordance. Conclusion: MLPA‘ s high sensitivity and specificity for deletion detection is the same as FISH or Southern blot based analysis. Additional collaborative effort for developing and validating the complete MLPA-PWS assay, for not only detecting deletion but also identifying methylation abnormality, is on going.     

多重连接依赖的探针扩增技术检测中国人遗传性非息肉病性结直肠癌错配修复基因大片段缺失

目的了解中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系hMSH2和hMLH1基因大片段缺失特点。方法采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术和GeneMapper分析技术检测17个HNPCC家系先证者hMSH2和hM-LH1基因种系大片段缺失。结果在3个家系中分别发现hMSH2基因第8外显子、1~6外显子和1~7外显子3种大片段缺失类型,未发现hMLH1基因大片段缺失。大片段缺失占hMSH2和hMLH1基因总种系病理性突变的19%。结论中国人HNPCC错配修复(MMR)基因大片段缺失发生率较高,hMSH2基因缺失可能更为常见。在分子遗传学检测中有必要开展MMR基因大片段缺失的检测。     

联用多重连接酶依赖探针扩增技术和基因测序技术检测地中海贫血基因缺陷

目的联用多重连接酶依赖探针扩增技术（MLPA）和基因测序技术,对地中海贫血病患者进行基因诊断。方法回顾性分析2011年10月-2013年2月来深圳市坪山新区人民医院就诊的地中海贫血病患者110例,先对他们进行基因检测,再对他们进行MLPA技术。结果通过基因检测,α1型地中海贫血病21例,α2型地中海贫血病27例,β型地中海贫血病62例。在62例β型地中海贫血病患者中,21例（33.9%）合并α型地中海贫血病双重杂合子,41例（66.1%）是41～42杂合基因型。通过MLPA检测,又发现16例（14.55%）α型地贫缺失型。结论发现运用基因测序技术能检测到大部分的地中海贫血病,再联用多重连接酶依赖探针扩增技术能更准确的检测到全部地中海贫血病,所以联用多重连接酶依赖探针扩增技术和基因测序技术是检测地中海贫血病有效的方法,为以后的临床检测提供了依据。     

多重连接依赖式探针扩增法在区分肾上腺皮质肿瘤良恶性中的应用

目的 采用多重连接依赖式探针扩增法(MLPA),分析筛查不同肾上腺皮质肿瘤中基因缺失/重复的差别. 方法 选择5例肾上腺皮质腺瘤和2例肾上腺皮质癌患者,采用MLPA的方法针对癌基因和抑癌基因,对肿瘤组织DNA潜在发生缺失/重复的基因进行突变筛查. 结果 肾上腺皮质良性肿瘤中,部分存在06p21.3、12q24.13、17p13.1、17q21.1、19q13.41基因位点重复性改变;在肾上腺皮质癌中,上述区段均发生改变,同时存在片段11q13缺失. 结论 MLPA法适合检测肾上腺皮质肿瘤的基因缺失/重复位点,肾上腺皮质腺瘤中基因位点改变数目显著少于皮质癌.