2型糖尿病小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1表达

目的探讨2型糖尿病动物模型KKAy小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)和组织纤溶酶原激活物(tPA)mRNA表达与肾脏细胞外基质蓄积的关系.方法选取8周龄雄性KKAy小鼠和C57BL-J小鼠,分别于16、20和24周处死.采用发色底物法检测不同周龄的KKAy小鼠及参照组C57BL/J小鼠的血浆PAI-1活性,RT-PCR法检测小鼠肾皮质tPA mRNA表达,原位杂交法检测肾皮质PAI-1 mRNA水平,免疫组织化学和免疫印迹法检测肾皮质层粘连蛋白表达.结果不同周龄KKAy小鼠肾皮质层粘连蛋白表达均高于同龄对照组(P＜0.05).2型糖尿病KKAy小鼠与C57BL/J小鼠血浆PAI-1活性的差异没有显著性(P＞0.05);但肾皮质tPA mRNA水平却显著降低,以16周时最为显著,仅为C57BL/J小鼠的47%,随周龄的增加,其差异逐渐减小.原位杂交显示KKAy小鼠PAI-1mRNA可在肾脏多部位表达,并以近端小管上皮细胞内的表达为主,且明显高于同龄C57BL小鼠.结论2型糖尿病KKAy小鼠早期肾病时,细胞外基质蛋白的蓄积可能和tPA mRNA表达下调及PAI-1 mRNA表达上调所致的纤溶酶降解细胞外基质作用降低有关.     

血浆纤溶酶原激活物抑制物-1与糖尿病血管病变的关系

目的探讨2型糖尿病患者血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平与血管病变的关系.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定了138例糖尿病患者(无临床并发症35例、并发症103例)和31例健康体检者血浆PAI-1水平,同时将血浆PAI-1水平与血糖、血脂、胰岛素、体重和年龄等指标进行了相关分析.结果 138例糖尿病患者血浆PAI-1总体水平明显高于健康对照组(P<0.01),且并发症组患者血浆PAI-1水平明显高于无临床并发症组(P<0.01).血浆PAI-1水平与血糖、血脂、胰岛素、体重等因素有关与患者年龄无关.结论 2型糖尿病患者血浆PAI-1水平显著增高,尤其是伴有血管病变的患者,PAI-1活性增高与糖尿病血管病变的发生、发展有关.     

纤溶酶原激活物抑制物1和器官纤维化

近年来器官纤维化机制的研究热点集中在细胞外基质(ECM)降解过程及其发生机制上。纤溶酶原激活物及其抑制物1(PAI-1)是参与调节ECM代谢的关键酶系,PAI-1的异常表达在器官纤维化的进展过程中起重要作用。现对PAl-1生物学特性以及它和肾纤维化、肺纤维化、肝纤维化、心脏纤维化的关系的研究进展予以综述,为器官纤维化的诊治提供参考。     

纤溶酶原激活物抑制物-1与糖尿病肾病

近20年来我国2型糖尿病患病率急剧上升,全国部分省市的调查1980年为0．67％;1996年为3．21％;2002年为4％～5％。目前DM患病率还在继续增加。King等预测其患病率在2025年将达到5．4％,约3亿多人。糖尿病及其慢性并发症已成为危害人类健康的主要疾病,糖尿病肾病（Dia．bedcnephropathy DN）是糖尿病主要的严重慢性微血管并发症之一。DN患者肾脏的结构变化主要包括：肾小球体积增大,系膜细胞肥大以及细胞外基质（ECM）成分的堆积,肾小球基底膜增厚。肾小球在功能上则表现为高滤过、高灌注状态,以及肾小球滤过屏障的改变。光镜下可见上皮细胞从基底膜脱落、上皮细胞足突融合、系膜区增宽、基底膜增厚、肾小球固有细胞和近曲小管上皮细胞内可见胞饮的血浆蛋白颗粒等。糖尿病肾病的发生机制目前尚未完全阐明,其发生发展除与高血糖、高血压、肥胖、冠心病、吸烟等因素密切相关,尚与纤溶系统功能受损、遗传因素、种族等有关。本文就纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）及其基因多态性与糖尿病肾病的发生、发展及预后的关系综述如下。     

纤溶酶原激活物抑制物1在肿瘤中的研究进展

很多研究证实,纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)作为纤溶酶原激活物的主要抑制物,与肿瘤患者的预后差呈正相关。而纤溶酶原激活物本身介导的纤维蛋白的溶解,能促进恶性肿瘤的侵袭转移,与患者预后差呈正相关。PAI-1在恶性肿瘤的生长、浸润和转移中所起的作用目前还不确切,本文综述了近年来对PAI-1的一些体内、外实验的研究,尝试解释PAI-1在肿瘤生长、侵袭和转移中的作用。     

瘦素在诱导血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达中的作用

目的通过体外研究探讨瘦素对血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达的影响。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离和培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,在不同时间采用不同剂量瘦素培养HUVECs,应用荧光定量PCR、Northern blot以及Western blot检测技术研究瘦素对HUVECs PAI-1 mRNA及蛋白表达的影响。结果100ng／ml瘦素作用于内皮细胞,PAI-1 mRNA表达水平随着时间延长呈升高的趋势,8h达到最高（P〈0．001）,24h后仍高于起点（P〈0．005）,而tPA的表达则无显著变化（P〉0．05）。不同浓度的瘦素作用于内皮细胞,其PAI-1 mRaNA水平呈剂量依赖性升高（P〈0．001）;tPAmRNA表达亦无显著变化（P〉O．05）。100ng）ml瘦素孵育HUVECs时间依赖性促进PAI-1蛋白表达,24h达到最高峰。结论瘦素可能通过诱导血管内皮细胞PAI-1表达促进动脉粥样硬化和血栓的形成。     

脑梗死血糖与纤溶酶原激活物抑制物-1的相关性研究

目的探讨血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activitor inhibitor-1,PAI-1)活性与急性脑梗死患者空腹血糖及糖化血红蛋白的关系。方法应用ELISA法(酶联免疫吸附双抗体夹心法),对急性脑梗死患者(162例)进行检测血浆PAI-1活性。结果(1)急性脑梗死患者PAI-1活性明显升高,空腹血糖、糖化血红蛋白与PAI-1活性升高密切相关(P<0.01)。(2)血脂、体重指数、C-反应蛋白、神经功能评分与PAI-1活性无明显相关(P>0.05)。结论PAI-1活性升高是急性脑梗死患者的特征之一,空腹血糖及糖化血红蛋白与PAI-1活性升高有关,积极控制血糖、糖化血红蛋白可能降低PAl-1活性,改善预后。     

糖尿病肾病纤溶酶原激活物抑制因子-1检测分析

目的:探讨糖尿病肾病患者血浆纤溶酶原激活物抑制物的变化。方法:检测33例糖尿病肾病患者及30例健康体检对照组血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1),观察检测结果。结果:33例糖尿病肾病患者纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)检测值(51.7±12.5)ng/ml,明显高于对照组检测值(27.1±11.2)ng/ml(P<0.01)。结论:糖尿病肾病患者存在血浆纤溶酶原激活物及其抑制物系统失衡。     

血浆纤溶酶原激活物抑制物1、胰岛素抵抗与冠状动脉病变程度的关系

目的：研究血浆纤溶酶原激活物抑制物1(PAI 1)、胰岛素抵抗和冠心病患者冠状动脉病变程度的关系。方法：对120例患者行冠脉造影，其中冠心病组60例，非冠心病组60例，测定血清胰岛素、血浆PAI1抗原含量等指标，各检测指标与冠状动脉病变严重度积分(CSS)行直线相关分析及多因素逐步回归分析。砖果：随着冠状动脉病变支数的增加，PAI1水平逐渐增高，INS敏感性指数逐渐下降。血浆PAI1水平、空腹胰岛素和胰岛素抵抗与冠状动脉病变范围和病变程度密切相关。多元逐步回归发现血浆PAI1抗原含量与冠脉病变严重性积分和支数相关。结论：血浆PAI1水平和胰岛素抵抗对预测冠状动脉病变有一定的价值。     

AMPK对心肌细胞FOXO1转录因子活性及泛素连接酶MuRF1表达的影响

目的 研究AMP激活的蛋白激酶(AMPK)特异性激动剂AICAR对心肌细胞FOXO1转录因子活性及泛素连接酶MuRF1蛋白表达的影响,探讨AMPK对心肌细胞蛋白质降解通路的可能作用.方法 培养出生1～3 d大鼠心肌细胞,用AICAR干预激活AMPK,并用Western blotting检测其对FOXO1转录因子活性,以及MuRF1蛋白表达的影响.结果 AICAR能够激活心肌细胞AMPK,与对照组比较,AMPK激活后显著抑制FOXO1磷酸化(P＜0.01),促进MuRF1蛋白表达(P＜0.01).结论 AMPK可能通过激活心肌细胞FOXO1的转录活性,上调MuRF1蛋白表达,参与心肌细胞蛋白质降解的调控.     

胰岛素,胰岛素原对肝胚胎瘤细胞PAI—1分泌的影响

选择在合成PAI－1方面与肝细胞相似的肝胚胎瘤细胞株（HEPG2），用不同浓度的胰岛素、胰岛素原在不同时间内刺激单层HEPG2细胞，测培液中PAI—1活性。结果发现：胰岛素和胰岛素原均能刺激PAI－1的分泌，具有时间和剂量依赖性。不同浓度的胰岛素、胰岛素原在刺激8h内PAI－1的分泌差异性不明显，8h后超生理量的胰岛素、胰岛素原的刺激作用明显高于生理浓度的胰岛素和胰岛素原。     

2型糖尿病患者血和尿中t-PA、PAI-1的变化及其临床意义

目的探讨2型糖尿病患者血和尿t-PA及PAI-1浓度的变化，了解它们在糖尿病血管病变中的变化及其临床意义。方法根据尿白蛋白排泄率（UAER）将37例2型糖尿病患者分为两组：正常白蛋白尿组（DM）17例，微量白蛋白尿组（DN）20例。另取正常键康者20例作为对照组。用ELISA法分别检测3组的血浆和尿液t—PA及PAI-1浓度。结果尿液中t-PA浓度在正常白蛋白尿组低于正常对照组（P〈0．05）；微量白蛋白尿组明显低于正常对照组（P〈0．01）。结论尿液中t-PA浓度较血浆浓度更能反映中糖尿病的肾脏血管病变。     

缺氧复氧对血管内皮细胞分泌tPA、PAI-1的影响及辛伐他汀的干预作用

目的探讨缺氧复氧对血管内皮细胞分泌tPA、PAI-1的影响及辛伐他汀的干预作用，并探讨其可能的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304，使用自制的缺氧小室对ECV304进行缺氧复氧处理。第一组：仅进行缺氧复氧处理。第二组：不同浓度的辛伐他汀（0．1、1．0、5．0、10．0μmol／L）以及10．0μmol／L辛伐他汀＋0．2mmol／L甲羟戊酸预处理ECV304后再行缺氧2h、复氧2h处理．其对照组未加药物。用ELISA法分别检测培养液中tPA、PAI-1的含量。结果复氧2h、4h培养液中tPA浓度明显增加。缺氧2h和复氧2h、4h PAI-1浓度明显增加；5．0、10．0μmol／L辛伐他汀预处理组PAI-1浓度较对照组明显降低；同时用辛伐他汀和甲羟戌酸预处理内皮细胞则以上作用消失。结论缺氧复氧刺激使ECV304分泌tPA、PAI-1增加；辛伐他汀可减少缺氧复氧应激下血管内皮细胞分泌PAI-1，对tPA无影响，减少PAI-1／tPA比值，该作用可被甲羟戊酸逆转。     

海参糖胺聚糖对内皮细胞vWF和PAI-1表达的影响

目的探讨玉足海参糖胺聚糖（GAG）对活化人脐静脉内皮细胞（HUVECs）von Willebrand因子（vWF）和纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）表达的影响，以进一步明确GAG抗血栓作用机制。方法不同浓度GAG与凝血酶活化HUVECs共同孵育，MTT比色法检测GAG对细胞活力的影响，分别采用ELISA法和RQ—PCR法检测GAG对活化HUVECs vWF和PAI-1抗原蛋白和基因表达的影响。结果GAG可以降低活化HUVECsvWF抗原和PAI-1抗原的表达，5mg／LGAG抑制作用最为显著（P〈0．001），且强于相同剂量的肝素。5mg／LGAG还可以抑制活化HUVECsvWFmRNA和PAI-1 mRNA转录（P〈0.01、0.05），5mg／L肝素虽然对此两种mRNA转录亦呈抑制作用，但对PAI-1mRNA转录的抑制作用无统计学意义（P〉0．05）。结论GAG可能通过降低活化HUVECsvWF和PAI-1抗原表达及其mRNA转录，从而达到抗凝血及抗血栓作用。     

The Relationship among Polymorphism of Promotor of PAI-1 Gene,Type 2 Diabetes Mellitus,Hypertension and Coronary Heart Disease

Objective:To explore the relationship between polymorphism of PAI-1 gene and type 2 diabetes mellitus(DM} , hyperten-sion, and coronary heart disease. Methods: The polymorphism of plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) gene was analyzed by PCRtechnique in 281 subjects. Results: The frequency uf 4G/ 4G genotype and 4G allele uf PAI- 1 in type 2 diabetic patients were in-creased compared with non-diabetic subjects(X2 = 6. 0 and 6. 3 respectively,P<0. 05). In DM group, the frequency of 4G/4.G geno-type and 4G allele of PAI-1 in patients with coronary heart disease were significantly increased than in patients without coronary heart dis-ease (X2 = 6. 9 and 7. 6 respectively,P<0. 05 ,P<0. 01 respecitively). In the model uf multiple factors non-conditional logistic re-gression analyses,coronary lieart disease related to age, obesity ard 'polymorphism of PAI-1(P<0. 001, P<0. 05,P<0. 01 respec-tively). Conclusion :These results suggested that the 4G allele uf PAI-1 gene might be a risk factor of type 2 diabe     

高脂饮食对西藏小型猪胰岛素抵抗及肝胰岛素受体底物1、2表达的影响

目的 探讨高脂饮食对西藏小型猪胰岛素抵抗（IR）及肝胰岛素受体底物（IRS）1、2表达的影响。方法 将10只西藏小型猪随机分为正常对照组（Ctr）5只饲喂普通饲料、IR模型（IR model）组5只饲喂高脂饲料,连续造模12周。造模12周后,称重并测量体长,计算体质量指数（BMI）,空腹取前腔静脉血测定总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、空腹血糖（FBG）和胰岛素（insulin）,计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment-estimated insulin resistance,HOMA-IR）;同时进行糖耐量试验,并计算糖耐量曲线下面积（AUC）;取肝组织检测IRS-1和IRS-2基因和蛋白表达,并行油红O、PAS和HE染色,分别观察肝脂质沉积、糖原及组织病理变化。结果 与正常对照组比,IR模型组体重、BMI指数、TC、LDL-C、HDL-C、FFA、FBG、insulin和HOMA-IR指数均显著升高（P<0.05,P<0.01）;糖耐量试验显示血糖和胰岛素水平曲线下降延缓,而AUC_血糖和AUC_胰岛素均明显升高（P<0.05,P<0.01）;肝组织中出现脂质沉积、糖原增加和局部肝细胞浊肿、部分胞核消失或被挤向一端,偶见淋巴细胞浸润;同时肝组织中IRS-1和IRS-2 mRNA和蛋白表达均显著降低（P<0.05,P<0.01）。结论 高脂饮食可引起西藏小型猪胰岛素抵抗,肝组织IRS-1和IRS-2表达降低是高脂饮食影响西藏小型猪胰岛素敏感性的分子机制之一。     

川楝素上调FOXO1的表达增强多柔比星的体外抗乳腺癌活性

目的: 探讨川楝素对乳腺癌多柔比星化疗的辅助治疗作用并研究其机制。方法: MTT法检测乳腺癌细胞系MDA-MB-435和MDA-MB-231的细胞活力;流式细胞术检测MDA-MB-435的细胞凋亡;western blot实验检测MDA-MB-435细胞中FOXO1、Bim、Noxa的表达水平,细胞色素c的释放水平及caspase-9、caspase-3的活化水平。结果: 川楝素明显增强MDA-MB-435和MDA-MB-231细胞系对不同浓度多柔比星的敏感性。多柔比星联合川楝素处理的MDA-MB-435的相对细胞活力(0.55±0.04)显著低于多柔比星单治疗组(0.87±0.07,P<0.05)和多柔比星+川楝素+FOXO1 siRNA组(0.79±0.07,P<0.05)。多柔比星联合川楝素处理的MDA-MB-435的细胞凋亡率(34.2±2.8)显著高于多柔比星单治疗组(9.3±0.8,P<0.05)和多柔比星+川楝素+FOXO1 siRNA组(12.5±1.1,P<0.05)。多柔比星联合川楝素处理的MDA-MB-435细胞中FOXO1、Bim、Noxa的表达水平,细胞色素c的释放水平及caspase-9、caspase-3的活化水平均显著高于多柔比星单治疗组和多柔比星+川楝素+FOXO1 siRNA组。结论: 川楝素上调FOXO1的表达增强多柔比星的体外抗乳腺癌活性。     

辛伐他汀对内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的影响

目的　研究HMG CoA还原酶抑制剂辛伐他汀对内皮细胞分泌t PA和PAI 1的影响。方法　培养肺静脉内皮细胞 (ECV30 4 ) ,分别用不同浓度TNF α刺激 ,在 5 0ng/mlTNF α刺激的基础上用辛伐他汀 ( 0 .1、1.0、5 .0、10 .0 μmmol/L)共育 ,用ELISA方法检测培养上清中的t PA和PAI 1的浓度。 结果　各浓度的TNF α刺激 2 4h后PAI 1的浓度明显增加 ,与空白对照相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ,而t PA变化没有统计学差异 ;各浓度的辛伐他汀明显抑制TNF α( 5 0ng/ml)诱导的PAI 1分泌增多 (P <0 .0 1) ,而该作用可被甲基戊酸逆转 ,同样t PA的变化不明显。结论　TNF α可以增加内皮细胞PAI 1的分泌 ,辛伐他汀可以抑制TNF α诱导的PAI 1的分泌 ,而该作用可被甲基戊酸逆转 ,t PA则不受TNF α、辛伐他汀、甲基戊酸等因素的影响。     

1,5二羟维生素D3对哮喘大鼠气道重塑及纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的 观察1,25二羟维生素D3(VD)对哮喘大鼠气道重塑及其肺组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1( PAI-1)表达和血浆中PAI-1含量的影响.方法 30只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、VD干预组,每组各10只.卵蛋白致敏和激发复制慢性哮喘模型.VD干预组每次激发前给予VD 干预.用免疫组化检测肺组织PAI-1的表达,酶联免疫法测血浆中PAI-1含量,采用图像分析进行图像分析.结果 (1)哮喘组支气管管壁厚度较对照组和VD干预组显著增加(P＜0.01).(2)哮喘组PAI-I在大鼠肺组织的表达程度较对照组和VD干预组显著增加(P＜0.01).(3)哮喘大鼠血浆中PAI-1含量较对照组和VD干预组明显增加(P＜0.01).(4)直线相关性分析显示,哮喘组支气管管壁厚度与大鼠肺组织中PAI-1表达水平呈正相关(r=0.822,P＜0.01);哮喘组支气管管壁厚度与大鼠血浆中PAI-1含量呈正相关(r=0.942,P＜0.01).结论 1,25二羟维生素D3干预可明显减轻慢性哮喘气道重塑的病理改变,并可通过部分抑制PAI-1的表达来延缓气道重塑.