1－（2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐对兔血小板胞浆游离钙浓度的影响

１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐对兔血小板胞浆游离钙浓度的影响夏敬生，罗湘，曾繁典（同济医科大学临床药理研究室，武汉４３００３０）１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐［１－（...     

3H－1，2－二氢－2－（4－甲基苯胺基）甲基－1－吡咯里嗪酮在家兔体内主要代谢产物的研究

用高效液相色谱法对家兔单剂量ｉｇ７５０ｍｇ新抗炎镇痛剂３Ｈ－１，２二氢－２－（４－甲基苯胺基）－甲基－１－吡咯里嗪酮（Ｚ－４７）后尿中的代谢物进行了分离、检测。根据代谢物的色谱行为及与Ｚ－４７结构有关的其它药物的代谢途径，推测Ｚ－４７羧基衍生物［４－（３Ｈ－１，２－二氢－１－吡咯里嗪酮－２－甲基胺基）苯甲酸］是一可能的代谢产物，遂用化学方法合成了该衍生物。利用色谱保留值、紫外双波长吸收比值等对代谢物和标准品进行比较，并对尿样的酶水解产物进行色谱分析，证实Ｚ－４７羧基衍生物及其酯型β－Ｄ－葡糖苷酸结合物是Ｚ－４７在家兔体内的主要代谢产物。     

（±）－N，－N－二甲基－1，2－二苯基乙二胺的合成及其拆分

Ｎ，Ｎ－二甲基－１，２－二苯基乙二胺（１）可通过用低价的钛将苯亚甲基甲胺进行还原－偶联制备，得到的是（±）－１和内消旋－１的９：１混合物，通过用石油醚重结晶可除去内消旋－１而得到纯的（±）－１，将（±）－１分别用（＋）－和（－）－酒石酸拆分得到（Ｒ，Ｒ）－（＋）－和（Ｓ，Ｓ）－（－）－１。     

药物对映体含量测定的核磁共振法研究──Ⅱ．3，4－环氧－3，4－二氢－2，2－二甲基－6－乙酰胺基－7－硝基－二氢－1－苯骈吡喃

报道了位移试剂Ｅｕ（ＦＯＤ）３、Ｅｕ（ＨＦＣ）３，存在下３，４－环氧－３，４－二氢－２，２－二甲基－６－乙酰胺基－７－硝基－二氢－１－苯骈吡喃（Ⅰ）的镧诱导位移（ＬＩＳ）值；在手性位移试剂Ｅｕ（ＨＦＣ）３存在下，观察到５－Ｈ和８－Ｈ明显的对映体位移差值（△△δ），据此，可对化合物Ⅰ直接进行对映体的定量分析。当Ｅｕ（ＨＦＣ）３：Ⅰ为０．９５５（０．７０５）（摩尔比）时，８－Ｈ（５－Ｈ）的（＋）和（－）对映体两峰峰谷高度为峰高的３．５％（７．１％），即当对映体之一的含量不低于３．５％（７．１％）时，可对化合物Ⅰ的对映体含量进行精确的直接测定。     

双（2，6－哌嗪二酮）类抗肿瘤药物的研究：2，3－二乙酰氧基－1，4－二（3′，5′－二酮－N4′－取代哌嗪甲基）苯的合成

双（２，６－哌嗪二酮）类抗肿瘤药物的研究：２，３－二乙酰氧基－１，４－二（３′，５′－二酮－Ｎ４′－取代哌嗪甲基）苯的合成李全，沈旭，邵华武，谢毓元（中国科学院上海药物研究所２０００３１）１９６９年Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ等人试图用ＥＤＴＡ与甲酰胺反应合成...     

2－（2－甲氧苯氧）乙胺的合成

２－（２－甲氧苯氧）乙胺是合成某些β－受体阻断剂的重要中间体。我们探讨了几种不同的制备途径，发现将愈创木酚与１，２－二氯乙烷（或１，２－二溴乙烷）反应的单取代卤代物转化为叠氮化物，通过催化氢化，可以获得产率高，纯度好的伯胺。目标物也可以通过Ｇａｂｒｉｅｌ反应或通过相应睛的还原制得，但是叠氮化合物途径是一条经济而安全的路线。     

安定中间体2－（N－甲基－2－氯乙酰胺基）－5－氯二苯酮的一锅合成法

用５－氯－３－苯基－２，１－苯并异唑在甲苯中三步一锅合成安定中间体２－（Ｎ－甲基－２－氯乙酰胺基）－５－氯二苯酮，总收率８１％以上。     

1－（2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐对培养心肌细胞缺氧后再给氧损伤的影响

采用离体培养大鼠乳鼠心肌细胞，研究了１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对培养心肌细胞缺氧后再给氧损伤的影响。ＤＤＰＨ１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１可使缺氧后再给氧心肌细胞搏动能基本维持正常，乳酸脱氨酶释放有所减少，细胞成活率提高，减少心肌细胞膜损伤。其作用与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ具有相似之处。表明ＤＤＰＨ对缺氧与再给氧心肌细胞具有保护作用。     

2，6－哌嗪二酮类抗肿瘤药物的研究1－取代苯基－4－（2′，3′－二乙酰氧基－5′－甲氧羰基苄基）－2，6－哌嗪二酮的合成

本文设计合成了１１个１－取代苯基－４－（２′，３′－二乙酰氧基－５′－甲氧羰基苄基）－２，６－哌嗪二酮类化合物，并经对小鼠白血病细胞Ｐ３８８、小鼠肝癌细胞Ｈｅｐ和人体胃癌细胞ＳＧＣ７９０１的体外实验表明，化合物９ｊ对Ｐ３８８白血病细胞有较强的抑制作用，化合物９ｄ对Ｈｅｐ肝癌细胞有较强的抑制作用。本文还考察了超声波辐射时间对Ｍａｎｎｉｃｈ反应的影响。     

（＋）－布雷菲德菌素A的中间体合成研究Ⅰ．7－氰基－1－二甲叔丁硅氧基－2，3－反－环氧庚烷的制备

简述从四氢吡喃丙炔醇（３）和１－溴－４－氯丁烷（４）开始经６步反应制备７－氰基－１－二甲步丁硅氧基－２－，３－反－环氢庚烷（５），此化合物是合成（＋）－布雷菲德菌素Ａ中间体的原料。     

H_2O_2预处理对多巴胺损伤PC12细胞的适应性保护作用

目的探讨H2O2预处理对多巴胺(dopamine,DA)损伤PC12细胞的适应性保护作用。方法透射电镜、Hoechst染色和PI染色流式细胞仪(flowcytometry,FCM)观测细胞凋亡,MTT代谢率法观察细胞线粒体氧化磷酸化功能状态,Rh123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(△Ψm)。结果50μmol·L-1DA作用PC12细胞24h后,电镜可观察到PC12细胞体积缩小,核染色质浓缩、边集,核碎裂等细胞凋亡征象。Hoechst33258染色显示,DA(50μmol·L-1)作用24h后,经H2O2预处理的PC12细胞的凋亡量较未预处理的明显减少。50、100和200μmol·L-1DA作用24h后,PC12细胞的凋亡率分别为(20.9±1.8)%、(40.5±6.4)%、(88.1±3.9)%,而经H2O2预处理的PC12细胞的凋亡率分别下降至(4.9±2.9)%、(12.0±1.4)%、(61.5±3.4)%(P<0.01)。20、40、80μmol·L-1DA作用细胞24h后,细胞MTT代谢率明显下降,而H2O2预处理抑制20、40、80μmol·L-1DA引起的PC12细胞MTT代谢率的下降(P<0.01)。50μmol·L-1DA作用24h后,PC12细胞的平均Rh123荧光强度由正常对照的(46.87±0.33)下降至(4.39±2.93),而经H2O2预处理的PC12细胞,其平均Rh123荧光强度仅下降到(10.50±0.28),下降程度明显减轻(P<0.01)。结论H2O2预处理对DA损伤PC12细胞具有适应性保护作用。     

灯盏花素对谷氨酸诱导大鼠海马神经细胞毒性的保护作用

选用培养的海马神经细胞研究灯盏花素(breviscapine，Bre)对谷氨酸(glutamate，Glu)诱导神经细胞毒性的保护作用及其机制。新生大鼠海马神经细胞体外培养8 d后， 用L-谷氨酸(0.1， 0.5及1.0 mmol·L^-1)处理30 min； 灯盏花素处理组在加入L-谷氨酸的同时给予不同剂量的灯盏花素(10， 20及40 μmol·L^-1)； 继续正常培养24 h后， 用Annexin V联合流式细胞仪检测细胞的凋亡和坏死率； RT-PCR分析凋亡蛋白抑制剂XIAP mRNA的表达。结果表明， L-谷氨酸浓度依赖性地诱导神经细胞发生凋亡和坏死， 并使细胞XIAP mRNA表达发生浓度依赖性的双向变化： 0.1 mmol·L^-1 L-谷氨酸使神经细胞XIAP mRNA表达增强， 而较高浓度使XIAP mRNA表达下调。灯盏花素(20和40 μmol·L^-1)可有效抑制谷氨酸诱导的神经细胞死亡， 分别使细胞凋亡率下降30.4%和40.1%， 坏死率下降32.5%和38.8%； 并上调XIAP mRNA表达45.1%和54.9%。激光共聚焦显微技术联合Fluo-3荧光标记检测表明，L-谷氨酸处理过程中海马神经细胞内Ca²⁺水平显著升高， 而灯盏花素可抑制谷氨酸引起的细胞内Ca²⁺超载(P<0.01)。以上结果提示， 灯盏花素可能通过抑制细胞Ca²⁺超载， 调节凋亡抑制因子XIAP的表达而有效保护谷氨酸对神经细胞的兴奋性毒性作用。     

(2R,4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯的合成工艺改进

目的 优化(2R,4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯的合成工艺.方法 以S-(-)-α-甲基苄胺为原料,与乙醛酸乙酯反应得到[(S)-1-苯乙基亚胺基]乙酸乙酯,与异戊二烯进行环合后,再经不对称氢化和脱保护反应制得(2R,4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯.结果 总收率从17.0％提高至47.6％.结论 本工艺可有效地降低生产成本.     

1-氨基-2-丙醇的拆分

(2S,3S)-(-)-酒石酸于水中拆分消旋1-氨基-2-丙醇,然后用强酸性阳离子树脂分离,得到核苷类药物合成中间体(R)-(-)-1-氨基-2-丙醇,收率66.6%,拆分剂可直接回收利用.     

腺苷A1受体激动抑制高糖诱导的心肌细胞肥大

目的研究腺苷A1受体激动剂R(-)-N6-(2-phenyl-isopropyl)adenosine(R-PIA)对高糖(HG)诱导心肌细胞肥大的作用及机制。方法大鼠乳鼠心肌细胞培养,以HG(25.5mmol·L-1)诱导心肌细胞肥大模型,观察1μmol.L-1R-PIA和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂U0126对心肌肥厚的作用。用Lowry法测心肌细胞蛋白含量;Western blot法测心肌细胞p-ERK1/2的相对表达水平;Till图像测定系统测心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化。结果1μmol·L-1R-PIA和U0126可以相似程度地抑制HG诱导的心肌细胞蛋白含量增加、p-ERK1/2相对表达增加及[Ca2+]i瞬间增加。合用0.1μmol·L-1腺苷Al受体拮抗剂8-eyelo-pentyl-1,3-dipropylxanthine(CPDPX)抑制作用消失。结论腺苷通过激动A1受体抑制HG诱导的心肌肥厚,其机制与减少心肌细胞p-ERK1/2的相对表达和降低[Ca2+]i瞬间变化有关。     

环维黄杨星D对分离大鼠心室肌细胞内Ca2+和L型钙电流的影响

目的研究环维黄杨星D（CD）对大鼠心室肌细胞内Ca²⁺动员和L型钙电流(I_{Ca-L/sub>)的影响。方法采用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦显微术研究CD对心肌细胞ICa-L/sub>以及氯化钾、咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺动员的影响。结果CD浓度依赖性抑制ICa-L/sub>。指令电压为10 mV时，1和10 μmol·L^-1 CD分别使ICa-L/sub>电流密度从（-9.9±1.8）pA/pF降至（-6.4±1.4）pA/pF和（-4.2±0.6）pA/pF。共聚焦实验显示1和10 μmol·L^-1 CD不影响静息心肌细胞［Ca²⁺］i?/sub>，对氯化钾诱发［Ca²⁺］i?/sub>升高水平无明显抑制作用；咖啡因引起的细胞内Ca²⁺动员可被CD进一步增强。结论CD浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞ICa-L/sub>，并有促进咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺释放的作用。}     

氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙肝病毒抗原表达的抑制作用

目的研究氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙型肝炎病毒抗原表达的影响。方法培养HepG 2.2.2.15细胞并在使用药物处理细胞之后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性作用,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对细胞向培养上清液中分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果氧化苦参碱在0.125~1 g.L-1浓度范围内,对HepG 2.2.2.15细胞毒性较小,而2 g.L-1和4 g.L-1的剂量对细胞毒性较大;氧化苦参碱对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.125~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加。黄芩苷在0.625~2 g.L-1浓度范围内,对细胞的毒性作用逐渐增加;黄芩苷对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.625~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加,但是抑制效果明显弱于氧化苦参碱。氧化苦参碱黄芩苷组合物(A~F组)对HepG2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原具有良好的抑制作用,而且对HBeAg的抑制效果优于HBsAg。其中C组氧化苦参碱黄芩苷组合物对乙肝病毒抗原分泌抑制作用优于单独使用氧化苦参碱(HBsAg:P=0.043;HBeAg:P=0.026)。结论氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG 2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原有良好的协同抑制作用。     

2-(3-羟基-1-金刚烷基)-2-乙醛酸的合成

金刚烷经相继甲酸化、酰氯化后与丙二酸二乙酯乙氧基镁反应,得到1-金刚烷甲酰基丙二酸二乙酯,再经水解脱羧、高锰酸钾氧化得到沙克列汀中间体2-(3-羟基-1-金刚烷基)-2-乙醛酸,总收率约28%。     

蚓激酶的心肌保护作用及机制

目的研究蚓激酶对心肌缺血的保护作用，并进一步探讨其可能机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型，观察蚓激酶对心肌缺血的保护作用；应用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦技术，研究蚓激酶对L-型钙电流(I_Ca-L)和细胞内游离钙离子浓度的影响。结果蚓激酶80，40和20 mg·kg^-1剂量组均可缩小心肌梗死面积。膜片钳研究结果表明，当刺激电压为+10 mV时，10和50 μmol·L^-1蚓激酶使I_Ca-L降低共聚焦结果显示，在静息状态下，10 μmol·L^-1蚓激酶对［Ca²⁺］_i无明显影响；但10 μmol·L^-1蚓激酶对60 mmol·L^-1 KCl诱导的［Ca²⁺］_i升高却有明显抑制作用，并且在整个实验过程中(240 s)并未出现明显的峰值。结论蚓激酶对大鼠心肌缺血具有保护作用，其机制可能与抑制I_Ca-L及下调［Ca²⁺］_i有关。     

Characterization of the cytochrome P450 enzymes and enzyme kinetic parameters for metabolism of BVT.2938 using different in vitro systems

An important step in the drug development process is identification of enzymes responsible for metabolism of drug candidates and determination of enzyme kinetic parameters. These data are used to increase understanding of the pharmacokinetics and possible metabolic-based drug interactions of drug candidates. The aim of the present study was to characterize the cytochrome P450 enzymes and enzyme kinetic parameters for metabolism of BVT.2938 [1-(3-{2-[(2-ethoxy-3-pyridinyl)oxy]ethoxy}-2-pyrazinyl)-2(R)-methylpiperazine], a potent and selective 5HT2c-receptor agonist. The enzyme kinetic parameters were determined for formation of three main metabolites of BVT.2938 using human liver microsomes and expressed cytochrome P450 (CYP) isoforms. The major metabolite was formed by hydroxylation of the pyridine ring (CL_int = 27 μl/mg min), and was catalysed by both CYP2D6*1 and CYP1A1, with K_m values corresponding to 1.4 and 2.7 μM, respectively. The results from enzyme kinetic studies were confirmed by incubation of BVT.2938 in the presence of the chemical inhibitor of CYP2D6*1, quinidine. Quinidine inhibited the formation of the major metabolite by approximately 90%. Additionally, studies with recombinant expressed CYP isoforms from rat indicated that formation of the major metabolite of BVT.2938 was catalysed by CYP2D2. This result was further confirmed by experiments with liver slices from different rat strains, where the formation of the metabolite correlated with phenotype of CYP2D2 isoform (Sprague–Dawley male, extensive; Dark Agouti male, intermediate; Dark Agouti female, poor metabolizer). The present study showed that the major metabolite of BVT.2938 is formed by hydroxylation of the pyridine ring and catalysed by CYP2D6*1. CYP1A1 is also involved in this reaction and its role in extra-hepatic metabolism of BVT.2938 might be significant.