孕期染毒壬基酚对子代雄性胎鼠睾丸发育和胰岛素样因子-3表达的影响

目的 探讨母体染毒壬基酚(NP)对雄性胎鼠生殖发育的影响,并检测胎鼠睾丸组织中胰岛素样因子-3(Insl-3)的mRNA以及蛋白的表达.方法 将已受孕的SD雌性大鼠随机分为对照组、5、40、100、200 mg/kg NP染毒组(每组20只),染毒组大鼠于孕14～19 d以NP灌胃染毒,对照组大鼠用纯花生油灌胃第19天处死孕鼠后检测孕鼠和雄性胎鼠生殖发育相关指标;反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测其睾丸组织中Insl-3的mRNA及蛋白的表达.结果 与对照组比较,40、100、200 mg/kg组胎鼠体重和睾丸系数明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照组比较,40、100、200 mg/kg组的睾丸下降程度降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,40、100、200 mg/kg组Insl-3mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 孕期暴露NP可致其雄性胎鼠睾丸发育不良,下降不全,并且可下调Insl-3的表达.     

壬基酚对P450arom和MIS基因表达的影响

[目的]研究壬基酚(p-nonylphenol,NP)对细胞色素P450芳香化酶基因(P450arom)和苗勒氏管抑制物基因(MIS)表达的影响,探索其对鱼类雌激素样作用的分子机制。[方法]日本比目鱼在性分化过程中能随环境因子改变而发育为不同性别,在幼鱼孵化后第30天到第100天性分化敏感期于27℃水温下,给予幼鱼投食NP 100μg/g饲料。分别对各组比目鱼生殖腺做病理组织切片,判断其性别和雌雄比例,并通过原位杂交方法结合RT-PCR分析第100天青年期鱼生殖腺中P450arom和MISmRNA的表达,观察NP对比目鱼性分化标志基因的作用。[结果]NP对27℃水温饲养下的比目鱼幼鱼有一定程度的雌性化诱导作用,成年雌性的百分比为30%,高于27℃水温对照组(0%);比目鱼幼鱼出生后第100天时对其生殖腺进行原位杂交分析显示,P450arom的mRNA在各组的雌鱼卵巢中有明显表达,但在雄鱼精巢中未见表达;而MIS的mRNA在各组的雌鱼卵巢中不表达,却在雄鱼精巢中能见到很明显的表达。RT-PCR分析也显示,P450芳香化酶的mRNA仅仅在雌鱼卵巢中表达,而MIS也仅仅在雄鱼精巢中表达,证实了原位杂交实验的结果。[结论]在日本比目鱼体内,NP染毒可以诱导P450芳香化酶mRNA表达并抑制MIS的mRNA的表达,从而对生殖腺性分化期的幼鱼发挥雌激素样干扰作用。     

甲基汞生殖毒性的研究

生殖毒理学的研究发现环境化学物、金属、激素、抗癌药物等可影响雄性动物生殖过程。甲基汞是一种重要的重金属污染物,研究证实它可通过胎盘产生胎儿性水误病[1,2]。为了解甲基汞对雄性动物的生殖毒性,我们采用不同剂量甲基汞对雄性小鼠经口慢性染毒,然后同正常处女鼠进行交配,观察其交配能力、受孕能力及胎鼠的发育情况。     

有机毒物对雄性动物生殖系统影响的研究

近年来,关于化学物质对雄性生殖系统影响的研究受到人们的关注。经毒理学研究,有愈来愈多的化学物质被证实对雄性哺乳动物生殖系统有损害作用。流行病学调查亦表明,某些毒物可影响男性工人的生殖能力。本文仅就部分致雄性动物生殖系统损害有机毒物的毒理学研究结果予以综述。     

壬基酚对大鼠F1子代脑内分泌调控相关基因表达的影响

目的　利用芯片技术探讨壬基酚 (nonylphend ,NP)对F1子代脑内分泌调控相关基因表达影响。方法　NP染毒F0亲代母鼠 ,分别提取NP组和对照组F1子代雄性 2日龄大鼠的脑组织mR NA ,分别用cy5和cy3逆转录标记 ,与Mouse4 0S基因表达谱芯片杂交 ,并对cy3、cy5荧光信号做扫描分析。结果　芯片结果显示实验组已知功能差异表达基因有 16条 ,其中下调基因有 13条 ,4条与内分泌调控密切相关。结论　NP可通过多种途径影响机体类固醇激素的合成、代谢及干扰雄性的生殖功能。     

壬基酚对机体的毒性影响及其机制

壬基酚(Nonylphenol,NP)作为一种工业污染物,在环境中具有高度生物蓄积性,人群可通过食用被污染的水,水生动物、乳汁等食物接触NP,NP的雌激素样作用能干扰多种动物的生殖、免疫和内分泌等系统,导致胚胎发育毒性、生殖毒性、免疫毒性和神经毒性等。其毒性机制包括:诱导细胞凋亡、影响胚胎期器官分化相关基因的表达和影响细胞间的信号传递以及内分泌代谢器官产生脂质过氧化损伤等。本文从整体和细胞水平介绍NP对机体的毒性影响及其作用机制。     

乙酰甲胺磷致雄性大鼠生殖毒性作用

乙酰甲胺磷(acephate)化学名称为O,S-二甲苯-N-乙酰基硫代磷酰酸酯,是一种高毒农药甲胺磷的乙酰基衍生物,以高效、低毒、低残留而优于众多有机磷杀虫剂,可作为替代高毒农药的产品[1].国外有报道.乙酰甲胺磷对雄性小鼠的生殖系统具有毒性作用,可致小鼠精子数量减少和精子运动能力下降[2].本文旨在探讨不同剂量乙酰甲胺磷暴露对雄性大鼠的生殖毒性作用.     

壬基酚对睾丸支持细胞类固醇生长因子-1mRNA表达的影响

目的 研究壬基酚(nonylphenol,NP)对离体培养大鼠睾丸支持(Sertoli)细胞类固醇生成因子-1(steroidogenic factor 1,SF-1)表达的影响.方法 大鼠Sertoli细胞经离体原代培养后,分别用0.08、0.40、2.00、10.00 μg/L浓度NP染毒24 h.运用实时荧光定量PCR检测不同剂量染毒后的Sertoli细胞的SF-1 tuRNA水平.结果 0.08、0.40、2.00、10.00 μg/L NP染毒剂量组的SF-1基因相对表达量分别是3.10±0.88,10.10±0.18,4.83±0.30,3.27±0.81,而阴性对照组、β-雌二醇组的值则分别为12.34±1.37,2.08±0.01.与阴性对照组比较,除0.4 μg/L组外的各NP染毒组及β-雌二醇组Sertoli细胞SF-1mRNA表达均降低,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 NP可以抑制大鼠Sertoli细胞SF-1的表达,并可能是影响生殖功能的机制之一.     

双酚A对雄性生殖功能影响的研究进展

近年来,有关环境类雌激素样物质双酚A(BPA)对生殖功能影响的研究成为了热点.该文综述了BPA对雄性生殖器官形态、生殖内分泌功能和男性生殖功能的影响及其毒性作用机制的最新进展和观点,并结合众多的研究现状提出了BPA雄性生殖毒性研究未来的发展方向.     

农药污染的雄性生殖毒性

在职业生产和日常生活中,农药污染物可通过皮肤、呼吸、消化道等多种途径进入体内,损伤生殖器官和生精细胞功能,影响内分泌功能,引起生殖相关基因的异常表达,从而影响男(雄)性精子发生的正常进行,导致男性少精、弱精、精子畸形或无精子症。为探讨农药污染对生精细胞毒性的一般规律与内在机制,该文对农药污染与雄性生殖毒性之间的关系进行综述,为预防并干预有机农药的雄性生殖毒性,保障生殖健康等提供基础资料。     

壬基酚对断乳期子代雄性SD大鼠生殖系统发育的影响

[目的]研究壬基酚(NP)对断乳期子代雄性SD大鼠生殖系统发育的影响。[方法]对母鼠孕期d7直至产后断乳期染毒NP(0,50,100,200mg/kg),每组10只母鼠。断乳期处死母鼠,同时每个剂量组处死F1雄性子代大鼠10只,两者均股动脉取血,测定血清催乳素(PRL)、黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平和血清NP浓度,检查F1雄性子代脏器系数,并对F1雄性子代睾丸进行组织病理学分析。[结果]50mg/kg,100mg/kgNP组母鼠催乳素(PRL)低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。100mg/kg,200mg/kgNP组的血清NP浓度高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。F1子代大鼠断乳期血清壬基酚浓度,100、200mg/kgNP剂量组高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05),而体重低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。组织病理学观察可见200mg/kg壬基酚组睾丸生精小管与对照组相比显著缩小,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]母鼠孕期和哺乳期染毒壬基酚能够影响断乳期子代雄性SD大鼠生殖系统的正常发育。     

铅对雄性大鼠睾丸重量影响的Meta回归分析

[目的]综合分析铅对雄性大鼠睾丸重量的影响.[方法]应用Meta回归方法对12个研究方法相同有关铅对雄性生殖功能影响的病例对照研究进行综合分析.计算控制年龄、体重的影响后的合著效应值,并进行异质性检验及偏倚分析.[结果]单纯随机效应模型显示铅暴露后雄性大鼠睾丸重量平均降低量(d)为0.047 g(95%CI:0.0044～0.089 0,P＜0.05),未成年组大鼠暴露后睾丸重量降低0.06 g,大于性成熟组的0.025 g(P=0.027),随着体重增加,大鼠睾丸重量受铅暴露影响越来越小(b=-0.000 4,P=0.024).与单纯随机效应模型相比,控制了年龄、体重的影响后Meta分析研究间变异逐渐减少.[结论]运用Meta回归方法控制了年龄和体重影响后,铅可导致雄性大鼠睾丸重量降低,影响雄性生殖功能.     

双酚A对硬骨鱼性腺分化的作用机制研究

[目的]研究双酚A对硬骨鱼生殖腺性分化的影响并探索其作用机制。[方法]运用日本比目鱼由饲养水温决定性别的生物学特性,在鱼卵孵化后的第30天到第100天性分化敏感期内,利用27℃水温使幼鱼都分化成表型的雄性,同时给予幼鱼双酚A100μg/g的饲料。在第100天(青年期)和第300天(成年期),分别对各组比目鱼样本做病理组织切片,判断其性别和雌雄比例,通过原位杂交分析以及RT-PCR分析,探索它们的作用机制。[结果]双酚A对27℃水温饲养下的雄性比目鱼幼鱼都有雌性化诱导作用,100μg/g组成年鱼的雌性比例占57%,显著高于27℃对照组(0%);比目鱼幼鱼出生后第100天时,原位杂交分析显示,芳香化酶P450的mRNA在双酚A组的雌鱼卵巢中有明显表达,但在雄鱼精巢中不表达;而苗勒氏管抑制物质(MIS)的mRNA在双酚A组的雌鱼卵巢中不表达,却在雄鱼精巢中能见到极其明显的表达。RT-PCR实验也证实了原位杂交的结果。[结论]双酚A对日本比目鱼的生殖腺性分化有雌激素样的作用,雌性化作用的机制很可能是诱导了芳香化酶P450的mRNA表达且抑制了MIS的mRNA表达。     

PIWI蛋白相互作用RNA与生殖功能的关系

PIWI蛋白相互作用RNA(PIWI-interacting RNA,piRNA)是长度大约有24～31个核苷酸的非编码RNA,特异性表达于动物的生殖细胞中。piRNA的生成过程可分为细胞核内的转录以及细胞质内的后期加工两部分。piRNA可以在PIWI家族蛋白的协助下发挥沉默转座子基因和调控mRNA等功能,并可进一步调控生殖功能。在雄性生殖功能中,piRNA可以在PIWI家族蛋白的协助下通过控制组蛋白泛素连接酶RNF8、谷胱甘肽过氧化物酶5等蛋白的表达调控精子发生,引起无精子症、少精子症和弱精子症等影响雄性生殖功能的疾病。在piRNA最初的研究中,学者普遍认为piRNA在雌性生殖方面作用不大,但是近年对金黄地鼠的研究发现piRNA/PIWI复合物在雌性生殖功能的调控过程中也发挥着重要作用。综述piRNA的产生及其与生殖功能的相关性。     

双酚A雄性生殖毒性研究进展

目前,对环境雌激素双酚A(BPA)是否诱发雄性生殖毒性仍有争议.笔者就国内外关于BPA雄性生殖毒性的研究进行了综述.文献报道表明,BPA虽然胚胎毒性不明显,但对雄性动物具有生殖毒性,而且睾丸和前列腺为主要靶器官,即使低剂量暴露BPA亦可出现毒性效应.     

氟他胺对尿道下裂相关凋亡基因表达影响

目的 探讨氟他胺(Flu)诱导尿道下裂形成过程中相关凋亡基因的表达水平,研究其导致尿道下裂的作用机制.方法 将孕鼠在第12～17d用氟他胺(6.0546 mg.kg)连续每天皮下注射染毒,在第20d行破宫产取子代雄鼠的尿道生殖结节和睾丸,用免疫组化和基因芯片技术检测氟他胺致尿道下裂形成相关凋亡基因的表达水平.结果 Ful染毒组胚胎20dSD大鼠生殖结节、间充质细胞和尿道细胞中表皮生长因子(EGF).表皮生长因子受体(EGFR)的表达减弱;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)等相关凋亡基因的表达增强.图像灰度值两样本均数的比较显示,对照组灰度值与染毒组灰度值差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 氟他胺通过在性发育期干扰子代雄鼠尿道生殖结节和睾丸组织中相关凋亡基因的表达水平,导致子代雄性大鼠尿道下裂的发生.     

妊娠期壬基酚暴露对雄性仔鼠生长发育的影响

目的 探讨孕期暴露壬基酚(nonylphenol,NP)对雄性仔鼠生长发育的影响.方法 将SD大鼠分为6组(每组7～9只),妊娠第14～19天灌胃染毒NP(20、40、80、200 mg/kg),另设阴性对照组(0 mg/kg NP)和阳性对照组(β雌二醇30μg/kg).观察NP对母鼠生产指标(产仔数、活产数、出生性别比、出生死亡率、20 d死亡率)、对雄性仔鼠出生指标(出生体重、肛殖距、身长、尾长、肛殖距/身长)、体重变化(3 d至12周)、血红蛋白含量的影响.称重90 d龄雄性仔鼠的肝脏、脑、睾丸、前列腺、肾脏、胸腺、脾,并计算脏器系数.制作睾丸和脾脏的病理切片并观察.结果 与阴性对照组(Omg/kgNP组)比较,200mg/kg NP组所产雄性仔鼠出生体重、肛殖距、身长、尾长,肛殖距/身长的比值降低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);2～12周内80、200mg/kgNP组所产雄性仔鼠体重显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);200mg/kgNP组所产雄眭仔鼠1～3月血红蛋白含量显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);200mg/kg NP组脑、睾丸、前列腺、肾脏、胸腺、脾脏器系数降低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).光镜下可见200mg/kg NP组所产雄性仔鼠脾内淋巴细胞数目明显减少,睾丸精曲小管内生精细胞层数减少,管腔内几乎无精子.结论 孕期暴露80 mg/kg以上NP可影响雄性仔鼠的生长发育.     

壬基酚影响机体生殖系统研究进展

壬基酚(Nonylphenol,NP)是环境雌激素的典型代表,因其广泛的使用和对环境的严重污染引起人们的关注,成为当今环境医学领域的研究重点之一.NP是一类结构简式为C6H4 (OH) C9H19的几种同分异构体的总称,它是合成壬基酚聚氧乙烯醚(全球第二大类商用非离子表面活性剂)的单体,使用范围广,主要作为乳化剂应用于工业及日用洗涤剂、农药、医药、化妆品、玩具、造纸、石油开采等数十种行业中[1].NP常温下相当稳定,在环境中难于降解,具有高度脂溶性和生物蓄积性.NP可由污水排入水体环境,加拿大、美国、德国等在河水与河底淤泥中均发现其存在[2].与国外相比,我国环境中的NP污染更为严重[3].随着工业的发展,人类难以避免接触环境中的NP,它可通过食物和水经消化道进入人体[4].NP对生物体的潜在危害不容忽视,特别是对生殖系统的危害值得重视.本文就NP及其对机体生殖系统影响的研究进展综述如下.     

三种环境雌激素对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

[目的 ]探讨环境中常见的三种类雌激素壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)影响人乳腺癌细胞T47D增殖和凋亡的分子生物学作用机制。 [方法 ]T47D细胞在含 10 %胎牛血清的DMEM培养液中进行常规传代培养 ,实验前将细胞转移至无酚红DMEM(含 5 %活性碳葡聚糖苷处理过的FBS)中继续培养 5d ,收集细胞 ,PBS洗涤后接种于内置盖玻片的 6孔板或 75ml培养瓶中 ,用 3 2× 10 -7mol/LNP、3 2× 10 -7mol/LBisA及 3 2× 10 -6mol/LDBP对细胞分别处理 72h ,用半定量RT PCR技术观察这 3种化合物对核增殖抗原PCNA、bcl 2及baxmRNA表达的影响 ,并用免疫组化方法对结果进行验证。 [结果 ]与溶剂对照组相比 ,NP和BisA对T47D细胞处理 72h可显著抑制baxmRNA表达而促进bcl 2和PCNAmRNA的表达 ,随后的免疫组化实验也证实了这一结果 ;DBP可促进PCNAmRNA及蛋白的表达 ,但对bcl 2及bax的表达未见统计学意义。 [结论 ]环境雌激素NP和BisA可通过调节PCNA、bcl 2及bax的表达而调节乳腺癌T47D细胞的增殖和凋亡作用。DBP通过促进核增殖抗原PCNA的表达而促进T47D的增殖作用     

微量镉对胎鼠睾丸超微结构及P450scc表达的影响

目的 研究孕期微量镉暴露对胎鼠睾丸超微结构的损伤及细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)表达的影响,探讨镉对雄性子代生殖发育的干扰作用.方法 成熟雌性SD大鼠12只,随机分为2个镉染毒组[1.2、1.5mg/(kg·d)]和对照组,于孕期第9、11、13天腹腔注射氯化镉,对照组给予等体积生理盐水.妊娠第18天行剖宫产取雄性胎鼠睾丸作光镜、电镜观察及P450scc免疫组化分析.结果 光镜下1.5 mg/(kg·d)镉染毒组睾丸精曲小管内支持细胞排列紊乱,间质异常增生,1.2mg/(kg·d)镉染毒组无明显改变.电镜下两个镉染毒组均见支持细胞、精原细胞及间质细胞内线粒体肿胀、内质网扩张,问质细胞内脂滴堆积,尤以支持细胞和间质细胞损伤最为明显.镉染毒组间质细胞中P450scc阳性产物表达均显著低于对照组(P＜0.01).结论 孕期微量镉暴露可致性分化期胎鼠睾丸超微结构损伤,降低睾酮合成关键酶的活力.