OLETF大鼠胰岛素抵抗及相关因素分析

目的　探讨自发持续高血糖动物模型雄性OLETF(otsukalong evanstokushimafatty)大鼠的胰岛素抵抗状态以及各相关因素。方法　选择 14周OLETF大鼠 10只 ,LETO大鼠 10只作为对照。记录 2 4h大鼠进食量。在禁食 10～ 14h后 ,测定大鼠的体重 ,采血测定空腹血脂谱 ,行口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)。大鼠处死后 ,测定腹内脂肪 ,取大鼠股四头肌测定脂肪酸谱。留尿 ,测定尿酮兰蛋白 (U CP)、尿白蛋白 (U Alb)和肌酐(Cr) ,计算U CP/Cr和U Alb/Cr。采用正常血糖高胰岛素钳夹技术 ,评价其胰岛素抵抗状态。结果　①OLETF大鼠进食量明显高于LETO大鼠 ;②OLEFT大鼠体重明显高于LETO大鼠 ,腹内脂肪、大网膜脂肪和肾周脂肪也高于LETO大鼠 ;③OLETF大鼠三酰甘油、胆固醇均高于LETO大鼠 ;④OLETF大鼠U CP/Cr高于LETO大鼠 ;⑤除空腹血糖外 ,OLETF大鼠葡萄糖负荷后各点血糖均较高 ;⑥OLETF大鼠的葡萄糖输注率 (GIR)明显降低 ;⑦OLETF大鼠和LETO大鼠的多不饱和脂肪酸 (PUFA)相似 ,但OLETF大鼠以n 6PUFA含量较高 ,而LETO大鼠以n 3PUFA含量较高。结论　 14周的OLETF大鼠已存在胰岛素抵抗 ,体重和腹内脂肪重量增加 ,同时存在三酰甘油和胆固醇的增高及肌肉组织磷脂中n 6PUFA/n 3PUFA含量的改变。     

自发性2型糖尿病大鼠血浆低脂联素血症导致胰岛素抵抗

目的观察自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。饲养13和40周后,行口服葡萄糖耐量试验;于8、32和40周分批宰杀,检测血糖、血浆脂联素、胰岛素、血清甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平。结果 8周龄时OLETF鼠血浆APN水平显著低于LETO组(P<0.05),并进行性降低。32周龄和40周龄时OLETF组大鼠血浆胰岛素水平和甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸显著高于LETO组(P<0.01)。结论 OLETF鼠血浆APN水平与胰岛素抵抗显著负相关,且先于胰岛素抵抗和葡萄糖耐量受损发生;低脂联素血症可能是导致胰岛素抵抗的重要原因。     

脂联素在OLETF大鼠脂肪组织中的表达及意义

目的观察自发2型糖尿病动物模型OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达的变化。方法选择4周龄的雄性OLETF大鼠20只,LETO大鼠10只作为对照组,饲养28周后,行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);取空腹血清测甘油三酯、游离脂肪酸、胆固醇和血浆胰岛素水平;取大网膜脂肪组织,RT-PCR检测脂联素mRNA表达。结果OGTT试验结果显示,OLETF组大鼠负荷后0.5h和1h血糖明显高于LETO大鼠(P<0.05);OLETF组大鼠血清甘油三酯和血浆胰岛素水平显著高于LETO组(P<0.05)。OLETF组大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达量明显低于LETO组(P<0.05)。结论OLETF大鼠脂肪组织脂联素mRNA表达水平明显降低。     

不同类型脂肪酸对SD大鼠血清脂肪酸及胰岛素抵抗的影响

目的分析中链饱和脂肪酸(MC-SFA,MCF组)、长链饱和脂肪酸(LC-SFA,LCF组)、n-6多不饱和脂肪酸(n-6 PUFA,SUF组)和n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA,TUF组)四种脂肪酸对大鼠血清脂肪酸及胰岛素抵抗的影响。方法雄性SD大鼠40只随机分为5组,对照组给予普通日粮,高脂组给予脂肪热量比相同的高脂日粮。喂养10周,每18 d测定空腹血糖(GLU)、血清脂肪酸、血清胰岛素水平,根据胰岛素敏感性指数(ISI)=ln1/(FPG×FINS)评定大鼠的胰岛素敏感性。结果10周后,LCF组和SUF组大鼠体重显著高于对照组和其它高脂组;LCF组血清胰岛素显著高于对照组(P﹤0.05);LCF组、TUF组ISI显著低于对照组(P﹤0.05);各组间血糖无明显差异(P0.05)。SUF组、TUF组血清LC-SFA浓度显著低于LCF组(P﹤0.05);TUF组血清(n-3 PUFA)显著高于对照组和其它高脂组(P﹤0.05)。结论不同类型脂肪酸的高脂饲料对SD大鼠的血清脂肪酸组成和含量有显著的影响,SD大鼠脂肪沉积及胰岛素抵抗程度随血清脂肪酸代谢作用的不同而变化。     

增加n-6脂肪酸对高脂诱导的大鼠胰岛素抵抗和血清游离脂肪酸谱的影响

目的：探讨喂养饱和占总热量59％和n-6脂肪酸代替其中20％热量后，对胰岛素抵抗和血清游离脂肪酸谱的影响。方法：45只雄性Wistar大鼠分为3组。对照组喂饲普通饲料，高脂组喂饱和脂肪酸提供59％热卡的高脂饲料，n-6脂肪酸组喂饲饲料为高脂饲料中饱和脂肪酸提供热量的20％由豆油中的C18：2代替。各组共喂饲11周后测定指标。结果：①高脂组大鼠从第4周开始体重明显升高，糖负荷后血糖、胰岛素抵抗指数、血清瘦素、血清胆固醇和甘油三酯含量均较正常对照组明显升高。高脂组大鼠血清游离脂肪酸谱中，饱和脂肪酸明显升高，不饱和脂肪酸明显下降。②n-6脂肪酸组从第1—10周体重均较高脂组明显减轻，糖负荷后血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清胆周醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量均较高脂组明显降低；血清瘦素水平、高密度脂蛋白、18碳2烯酸较高脂组明显升高。结论：n-6脂肪酸代替诱导大鼠胰岛素抵抗的饱和脂肪酸的20％热量后可以降低胰岛素抵抗，同时血清中18碳2烯酸提高。     

胰岛素抵抗大鼠肌肉中IRS-1、P70S6K的表达

目的 应用不同饮食喂养大鼠,测定大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,观察大鼠骨骼肌IPS-1、P70S6K的表达及大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)和超敏C反应蛋白(hsCRP)的变化.方法 4周龄Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法 检测大鼠血清中游离脂肪酸及超敏C反应蛋白,分别用Western-Blot、Rt-PCR检测大鼠骨骼肌中的IRS-1、P70S6K.结果 高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸及超敏C反应蛋白明显高于非胰岛素抵抗大鼠(P<0.01),IRS-1在胰岛素抵抗组大鼠明显低于非胰岛素抵抗组大鼠、P70S6K在胰岛素抵抗组大鼠明显高于非胰岛素抵抗组大鼠体重.结论 高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功的诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸及炎症反应有关.IRS-1在胰岛素抵抗大鼠中的表达降低,P70S6K升高.     

四种高脂饲料诱发胰岛素抵抗的实验研究

目的：建立能够诱导大鼠胰岛素抵抗的高脂饲料配方。方法：四种高脂饲料配方分别喂养大鼠8周,定期检测大鼠饮食量、体重、空腹血糖、空腹胰岛素、葡萄糖耐量、动态胰岛素及血脂。结果：四种高脂饲料均饮食量下降,体重显著增加,空腹血糖及空腹胰岛素无明显差异;高脂饲料3组大鼠口服葡萄糖后,30、60 min时血糖明显升高,胰岛素亦明显升高;高脂饲料1组胆固醇明显增加。结论：高脂饲料3喂养8周可能诱导大鼠胰岛素抵抗。     

胰岛素抵抗OLETF大鼠血清IL-18水平变化及替米沙坦的干预研究

目的:测定胰岛素抵抗(IR)OLETF大鼠血清白介素-18(IL-18)的表达水平,研究血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(AT1R)替米沙坦对IL-18水平的影响及对IR的干预作用,探讨其改善IR的可能机制。方法:OLETF大鼠24只,高脂喂养20周诱导建立IR模型,将成功造模的24只IR大鼠随机分为2组,模型(M)组12只继续给予高脂饲料,替米沙坦(T)组12只给予替米沙坦[5 mg/(kg·d)]加高脂饲料,LETO大鼠12只为对照(NC)组,给予标准饲料。干预20周后测定两组大鼠的体质量(W)、血清胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及IL-18水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)。结果:M组大鼠与NC组大鼠相比,W、FBG、TG、LDL-C及IL-18水平明显增高(P<0.05或P<0.01);T组与M组相比,FBG、TG、LDL-C、IL-18水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。多元线性回归分析提示IL-18是HOMA-IR的独立影响因素。结论:IL-18可能通过促进炎症参与了IR,而替米沙坦可能通过调节糖脂代谢、抑制前炎性因子IL-18的表达改善IR。     

脂糖舒对肥胖大鼠胰岛素抵抗和脂质过氧化的影响

目的探讨脂糖舒对营养性肥胖大鼠胰岛素抵抗和脂质过氧化的影响。方法Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、脂糖舒-1组(1.0g/kg)和脂糖舒-2组(2.0g/kg),每组10只。正常组喂普通饲料,模型组用高脂高糖饲料喂养9周诱导营养性肥胖大鼠模型,脂糖舒高低剂量组用高脂高糖饲料喂养并用不同剂量的脂糖舒(1.0g/kg,2.0g/kg)灌胃给药。测定与胰岛素抵抗相关的各项指标及血清SOD、GSH-Px活性和MDA的含量。结果脂糖舒能有效地控制肥胖大鼠的腹内脂肪质量、Lee’s指数、胰岛素抵抗指数(IRI)以及血糖的增加,显著增强SOD、GSH-Px活性,降低血清MDA的含量(P<0.01);同时还能提高肥胖大鼠的胰岛素敏感性指数(ISI),与模型组比较,P<0.01,差异有显著性。且脂糖舒两剂量组间降低IRI和升高ISI作用呈量效正相关(P<0.01)。结论脂糖舒对营养性肥胖大鼠血糖、胰岛素抵抗及脂质过氧化有明显的改善作用。     

不同饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型的比较

目的:应用不同饮食喂养大鼠,观察大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,同时观察大鼠游离脂肪酸(FFA)的变化。方法:分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法检测大鼠血清中游离脂肪酸,测量大鼠体重、附睾脂肪垫重量。结果:高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸明显高于非胰岛素抵抗大鼠,胰岛素抵抗组大鼠体重及附睾脂肪垫重量明显高于非胰岛素抵抗大鼠。结论:高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功地诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸有关。     

高脂饮食诱导的胰岛素抵抗对大鼠血浆同型半胱氨酸水平的影响

目的:研究高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)对血浆同型半胱氨酸(Hcy)的影响。方法:将16只 Wistar大鼠随机分为2组:对照组给予普通饲料喂养;高脂组:喂高脂饲料诱导胰岛素抵抗动物模型。各组动物喂 食11周时,分别做空腹血糖、葡萄糖耐量实验后处死。测定血糖、胰岛素水平,用HOMA模型评价胰岛素抵抗指 数。同时喂食前和喂食11周后测定血浆Hcy水平。结果:高脂组体重变化、空腹胰岛素、空腹血糖、胰岛素抵抗指 数均有显著高于对照组(P<0.05)。两组间血浆Hcy也有显著差异,高脂组[(35.7±14.1)μmol/L]高于对照组 [(9.95±2.40)μmol/L]。相关分析显示空腹胰岛素、空腹血糖、胰岛素抵抗指数均与血浆Hcy水平显著相关 (P<0.05)。多元回归分析显示仅空腹血糖和胰岛素抵抗指数是血浆Hcy水平的独立相关因素。结论:高脂诱导 的胰岛素抵抗与大鼠血浆Hcy水平升高有关,并可能是胰岛素抵抗与心、脑血管疾病危险增加的原因之一。     

六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素水平的影响

目的 观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型血浆脂联素水平的影响.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组.干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4 mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃.定期OGTT试验,监测各组大鼠摄食及体质量增长情况,每周称量大鼠体质量和摄食量.于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠.检测血浆脂联素、血浆胰岛素水平.结果 与对照组相比,干预组的血浆脂联素水平均明显增加.对照组血浆脂联素水平与LETO组相比显著降低.结论 OLETF鼠血浆脂联素水平与胰岛素敏感性呈正相关.六味地黄丸早期干预能明显增加OLETF鼠血浆脂联素水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗.     

过氧化物酶增殖体激活受体-γ辅助激活因子1 mRNA在OLETF大鼠组织表达的变化

目的过氧化物酶增殖体激活受体-γ辅助激活因子1(peroxisome proliferator-activated receptor-γco-activator 1,PGC-1α)是一种重要的核受体辅助激活因子,参与调节肝糖分解、糖异生以及周围组织对葡萄糖的利用,在维持机体能量代谢平衡和糖脂代谢中起重要作用。本研究通过观察PGC-1αmRNA在OLETF大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪和胰腺组织中表达的变化,初步探讨PGC-1α在胰岛素抵抗及糖尿病发病中的作用。方法①实验动物模型建立:从第8周开始喂养OLETF和LETO大鼠10%蔗糖水,每周测体质量,于第14、18、22、28周时进行OGTT并测定大鼠血脂值。OLETF大鼠在第18周时全部成为糖尿病大鼠,动物模型建立成功。②第8周和28周分别取LETO和OLETF大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪和胰腺组织,提取总RNA,应用实时定量PCR方法分析组织中PGC-1αmRNA的表达量。结果①OLETF大鼠体质量和三酰甘油(triglyceride,TG)随周龄增加逐渐增加,从14周起高于同周龄LETO大鼠,差异均有统计学意义;空腹和糖负荷后胰岛素浓度从22周起OLETF大鼠高于同周龄LETO大鼠。②第8周时,OLETF大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪和胰腺组织PGC-1αmRNA的表达与LETO大鼠比较差异无统计学意义。③第28周时,与LETO大鼠相比,OLETF大鼠PGC-1αmRNA在肝脏(0.040±0.006vs0.074±0.003,P=0.029)和胰腺(0.659±0.299vs1.610±0.091,P=0.029)中表达明显下降,而在骨骼肌(0.192±0.065vs0.104±0.012,P=0.029)中表达则明显增加。在脂肪组织(0.055±0.036vs0.161±0.124,P=0.100)中表达有下降趋势,差异无统计学意义。结论OLETF大鼠28周时表现出2型糖尿病早期胰岛素抵抗和高血糖的病理变化,PGC-1αmRNA在肝脏、胰腺和脂肪组织表达减少,骨骼肌组织表达增加,可能是2型糖尿病早期胰岛素抵抗和高血糖状态下的一种代偿性反应,提示PGC-1αmRNA在组织内表达变化可能与胰岛素抵抗和2型糖尿病密切相关。     

降糖及调脂治疗对OLETF大鼠血浆和胃组织中ghrelin水平的影响

目的:探讨ghrelin与糖脂代谢的关系.方法:8周龄OLETF大鼠分别为未治组(n=10)、二甲双胍[200 mg/(kg·d)]治疗组(n=10)、微粒化非诺贝特[20 mg/(kg·d)] 治疗组(n=10),同周龄LETO大鼠(n=10)为正常对照.用放射免疫法测定胃组织及血浆ghrelin水平,以 Northern blotting检测胃组织中ghrelin的Mrna水平.结果: (1) 30周龄时,OLETF大鼠每100 Μl空腹血浆ghrelin的质量(pg)显著低于LETO大鼠(37.49±6.42比58.52±5.85,P＜0.01),二甲双胍有增加OLETF大鼠ghrelin空腹血浆浓度的趋势,但与未治组间差异无统计学意义(49.65±6.76比37.49±6.42,P＞0.05),非诺贝特治疗组在30周龄时显著高于未治组(62.02±7.35比37.49±6.42,P＜0.05).(2) 胃组织中每微克蛋白ghrelin的多肽(pg)和Mrna水平,17周龄时各组间均差异无统计学意义;30周龄时,OLETF大鼠均显著低于LETO组[Mrna(1.18±0.06 比1.27±0.05,P＜0.05),多肽(114.77±31.65 比152.87±18.24, P＜0.05)];二甲双胍治疗组与未治组间差异无统计学意义;非诺贝特治疗组显著高于未治组[Mrna(1.36±0.09 比1.18±0.06,P＜0.05),多肽(161.75±23.61比114.77±31.65,P＜0.05)].结论: ghrelin 可能对糖脂代谢的紊乱起一种保护性的、代偿性的负调节作用.     

利拉鲁肽对糖耐量异常OLETF大鼠胰岛白细胞介素-1β表达的影响

目的观察利拉鲁肽对糖耐量异常大鼠胰岛炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和凋亡基因caspase3表达的影响。方法 12周龄糖耐量异常OLETF大鼠分为生理盐水组和不同剂量利拉鲁肽干预组(50、100、200μg/kg),8只LETO作为正常对照组。实验12周结束时,所有大鼠均检测糖耐量试验空腹及服糖后30 min胰岛素,并检测胰岛IL-1β和caspase3 mRNA和蛋白水平。结果利拉鲁肽干预的糖耐量异常大鼠和生理盐水干预组相比,胰岛IL-1β和caspase3表达显著降低,血糖、胰岛β细胞功能及早期胰岛素分泌指数明显改善。结论利拉鲁肽可能通过抑制胰岛IL-1β炎症因子表达,从而改善胰岛功能及糖代谢,延缓或阻止糖尿病发生发展。     

大豆异黄酮对胰岛素抵抗大鼠抵抗素基因表达的影响

目的探讨大豆异黄酮(SIF)改善高脂高蔗糖膳食诱导大鼠胰岛素抵抗(IR)状态的作用及可能机制。方法选用高脂高蔗糖饲料诱导的IR雄性SD大鼠,根据胰岛素抵抗指数(IRI)随机分为模型对照组和3个SIF组(50mg/kg·bw、150mg/kg·bw及450mg/kg·bw)。各组给予相应受试物1月后,酶法检测各组动物空腹血糖、放免法检测空腹血胰岛素、酶免法检测血抵抗素含量,实时定量RT-PCR法检测肾周脂肪组织抵抗素基因的mRNA水平。结果与模型对照组比较,450mg/kg·bwSIF组能明显降低大鼠肾周脂肪组织抵抗素基因mRNA的表达及血清抵抗素的含量。150mg/kg·bwSIF和450mg/kg·bwSIF组能显著降低空腹血胰岛素水平及IRI。3个SIF组的血糖与对照组比较差异无统计学意义。IRI与血清抵抗素水平存在着明显的正相关(r=0.355,P<0.05)。结论SIF可能具有通过下调抵抗素基因mRNA表达及降低血清含量而提高胰岛素敏感性的作用。     

OLETF鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素mRNA水平的关系

目的探讨OLETF大鼠内脏脂肪沉积与脂肪组织脂联素(APN)mRNA水平的关系。方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组。监测体质量,定期口服葡萄糖耐量试验(OGTT),于8、32和40周分批处死大鼠,检测血糖(BG)、胰岛素、血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CHOL)和血浆APN水平。分离并称量腹部脂肪,并检测脂肪组织APN的mRNA水平。结果随病程进展,OLETF鼠体质量和内脏脂肪/体质量逐渐高于LETO组(P<0.05),并表现出糖耐量受损。血浆胰岛素、TG、FFA、CHOL显著高于LETO鼠(P<0.05),血浆APN水平不同周龄均显著低于LETO组(P<0.05)。脂肪组织APN的mRNA水平8周龄与LETO组无显著差异(P>0.05),在32和40周龄显著降低(P<0.01)。结论血浆APN水平可较好地反映OLETF鼠胰岛素抵抗和内脏脂肪含量。内脏脂肪APN转录水平降低不是初期血浆APN降低的主要原因。