TLR4对人牙周膜细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响

目的 观察在内毒素脂多糖(LPS)刺激下,Toll样受体4 (TLR4)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLC)分泌白细胞介素(IL)中的IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 选用100 ng/mL、1 μg/mL和10 μg/mL大肠杆菌LPS分别刺激HPDLC,双抗体夹心法检测刺激后 6、12、24、48 h时,HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平.运用不同滴度anti-TLR4单克隆抗体预先处理HPDLC,观察1 μg/mL LPS刺激下其分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平变化.结果 LPS刺激HPDLC 6 h后,即可检测到IL-1β、IL-6和TNF-α,24 h达到顶峰,然后逐渐下降,各LPS浓度组规律基本一致;anti-TLR4单克隆抗体预先处理的HPDLC,在1 μg/mL LPS刺激下,其产生IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显下降(P＜0.05),且与anti-TLR4单克隆抗体滴度呈量效关系.结论 TLR4参与了HPDLC的炎症反应过程;anti-TLR4单克隆抗体能有效抑制LPS刺激后HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的能力.     

内毒素耐受对THP-1细胞分泌TNF-α和IL-10的影响

目的:观察细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)反复刺激人单核细胞株THP-1细胞,诱导产生的内毒素耐受对该细胞分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和抗炎因子白细胞介素(interleukin,IL)-10的影响?方法:采用1 μg/ml牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)LPS或1 μg/ml大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS刺激THP-1细胞24 h,洗脱后,分别采用相同LPS再刺激24 h,构建内毒素耐受模型?采用ELISA技术检测细胞条件培养液中TNF-α和IL-10分泌水平的变化?结果:P.gingivalis LPS或E.coli LPS刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α和IL-10分泌水平均较刺激前明显增高(P < 0.05)?2种LPS重复刺激后,TNF-α分泌水平较第1次刺激后明显降低(P < 0.05),IL-10分泌水平则较第1次刺激后明显增高(P < 0.05)?结论:内毒素耐受能抑制THP-1细胞分泌TNF-α,促进该细胞分泌IL-10,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应?     

IL-6对牙周膜成纤维细胞分泌肌动蛋白的影响

目的探讨白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPLFs)合成肌动蛋白(actin)的影响。方法取体外培养的第5代HPLFs,分别用0 ng/ml(对照),0.1,1,10,100 ng/ml浓度的IL-6干扰48 h后应用免疫细胞化学方法观察细胞胞质中actin的合成情况。结果与对照组相比,HPLFs中actin的表达在1-100ng/ml IL-6干预后都明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-6有抑制HPLFs合成肌动蛋白的作用。     

溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞TLR4的表达及其与TNF-α和IL-6的相关性

目的 分析溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与血清TNF-α和IL-6浓度的相关性,初步探讨TLR4在溃疡性结肠炎发病中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测60例溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞内TLR4 mRNA的水平,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清T...     

银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达

目的：探讨银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平及意义。方法：选取32例银屑病患者和15例正常人,分别作为病例组和对照组,分离培养其外周血PBMC,并用植物血凝素（PHA）诱导,酶联免疫吸附法（ELISA）检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平。结果：①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组（P〈0.05）,刺激后则明显低于对照组（P〈0.01）;②sIL-2R水平在刺激前与对照组间无显著性差异（P〉0.05）,刺激后明显高于对照组（P〈0.01）;③TNF水平在刺激前高于对照组（P〈0.05）,刺激后显著高于对照组（P〈0.01）;④IL-6水平在刺激前明显高于对照组（P〈0.05）,刺激后虽稍高于对照组,但无统计学意义（P〉0.05）;⑤sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数（PASI）均呈显著正相关（r分别为0.53、0.68）,IL-2的水平与PASI呈显著负相关（r=-0.46,P〈0.05）;⑥IL-6的水平与PASI不相关（r=0.30,P〉0.05）。结论：IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α在银屑病的发病过程中发挥一定的作用。     

急性脑梗死患者外周血单核细胞TLR4表达及其与TNF-α、IL-6的相关性

目的 观察急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与TNF-α、IL-6浓度的相关性,初步探讨TLR4在急性脑梗死缺血性炎性损伤中的作用,为临床治疗脑梗死提供新的思路.方法 分别运用Tapman实时定量PCR及流式细胞仪法检测39例急性脑梗死患者外周血单核细胞(淋巴细胞、单核细胞)TLR4 mRNA、蛋白的表达,用ELISA法测定血清TNF-α、IL-6的浓度,与35例同期正常对照及32例脑动脉粥样硬化患者比较.结果 脑梗死组发病第3天TLR4表达、血清TNF-α、IL-6浓度均显著高于正常对照组和动脉粥样硬化组(P＜0.01).TLR4表达与血清炎性因子TNF-α、IL-6浓度变化呈正相关(P＜0.01).结论 研究提示TLR4可能在急性脑梗死缺血性炎症性损伤中具有重要的作用,其机制可能是通过上调TLR4表达促使炎性因子产生分泌来介导脑缺血炎性损伤.     

TGF-β1对IL-1β诱导人牙周膜成纤维细胞分泌HGF影响的研究

目的研究转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-1β（IL-1β）干预人牙周膜成纤维细胞后HGF的基因表达的水平变化,为HGF网络调控人牙周膜成纤维细胞功能的研究提供新资料。方法分别采用IL-1β梯度浓度、IL-1β最佳干预浓度和TGF-β1梯度浓度干预第5代人牙周膜成纤维细胞,并运用RT-PCR法检测人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达。结果经IL-1β单独作用,人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达水平上调,并优选出IL-1β的最佳干预浓度为10ng/ml（P〈0.05）;当一定浓度的TGF-β1和10ng/ml的IL-1β共同作用于人牙周膜成纤维细胞后,该细胞中HGF的基因表达水平比单独IL-1β作用组低（P〈0.05）。结论 TGF-β1能够抑制IL-1β所诱导的人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达。     

银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达

目的:探讨银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平及意义。方法:选取32例银屑病患者和15例正常人,分别作为病例组和对照组,分离培养其外周血PBMC,并用植物血凝素(PHA)诱导,酶联免疫吸附法(ELISA)检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平。结果:①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组(P<0.05),刺激后则明显低于对照组(P<0.01);②sIL-2R水平在刺激前与对照组间无显著性差异(P>0.05),刺激后明显高于对照组(P<0.01);③TNF水平在刺激前高于对照组(P<0.05),刺激后显著高于对照组(P<0.01);④IL-6水平在刺激前明显高于对照组(P<0.05),刺激后虽稍高于对照组,但无统计学意义(P>0.05);⑤sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数(PASI)均呈显著正相关(r分别为0.53、0.68),IL-2的水平与PASI呈显著负相关(r=-0.46,P<0.05);⑥IL-6的水平与PASI不相关(r=0.30,P>0.05)。结论:IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α在银屑病的发病过程中发挥一定的作用。     

关于肾细胞癌患者尿中IL-1β、IL-6及TNF-α的探讨

已知白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)作为细胞因子,与免疫应答及炎症反应有着重要的关系.近年来的研究揭示了这些细胞因子也参与了肿瘤的分化、发育和转移的过程.因此,我们测定了肾细胞癌患者肾摘除前后尿中上述三种细胞因子的浓度,探讨了这些因子是否可以作为肾癌诊断的瘤标.     

TNF-α对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人牙周膜成纤维细胞（HPDLFs）的核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）及其饵受体骨保护素（OPG）mRNA表达的影响,了解TNF-α在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法 将体外培养的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的TNF-α处理24h,通过半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）来观察人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达强度变化。结果 TNF-α上调人牙周膜成纤维细胞的RANKLmRNA表达,RANKL／OPG比率呈上升趋势。结论TNF-α通过调节人牙周膜成纤维细胞的RANKL／OPG的比值可间接地调节破骨细胞分化和活性,从而影响骨代谢。     

重组人TLR4胞外段对诱导分化成熟的U937细胞TNF-α分泌的影响

目的 观察重组人TLR4胞外段对诱导分化成熟的U937细胞TNF-α分泌的影响.方法 通过G418筛选稳定表达TLR4胞外段的HEK293细胞,用培养液上清作用于诱导分化成熟的U937细胞,通过ELISA观察该细胞TNF-α的分泌变化.结果 稳定表达TLR4胞外段的HEK293细胞培养液上清能减少诱导分化成熟的U937细胞TNF-α的分泌量(P＜0.01),并随剂量增加而降低.结论 表达的重组人TLR4胞外段能与诱导分化成熟的U937细胞表面的TLR4胞外段竞争性结合LPS,干扰LPS所引起的炎症信号转导,引起TNF-α分泌量降低.     

低氧对大鼠大脑皮质细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响

目的 观察低氧环境对大鼠大脑皮质细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响.方法 原代培养新生SD大鼠大脑皮质细胞,设1％、4％两个低氧浓度和3h、6h两个低氧处理时间,处理结束后采用ELISA方法检测各组细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量.结果 与相应的常氧(20％氧)对照组相比,1％氧浓度环境处理细胞3h和6h,IL-6含量均下降(P＜0.01,P＜0.05),IL-1β和TNF-α含量变化无统计学意义(P＞0.05).与相应的常氧(20％氧)对照组相比,4％氧浓度环境处理细胞3h,IL-1β、IL-6和TNF-α含量变化均无统计学意义(P＞0.05);处理细胞6h时,IL-1β (P＜0.01)和IL-6 (P＜0.05)均显著下降,TNF-α含量变化无统计学意义(P＞0.05).结论 1％氧浓度环境虽对大脑皮质细胞分泌IL-1β和TNF-α无影响,但可抑制细胞分泌IL-6. 4％氧浓度环境虽对细胞分泌TNF-α无影响,但对细胞分泌IL-1β和IL-6具有抑制作用.     

龈下菌斑诱导的耐受对人巨噬细胞分泌TNF-α和IL-10的影响及机制

目的:观察龈下菌斑诱导的耐受对人巨噬细胞分泌炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和抗炎因子白介素-10(inter leukin 10,IL-10)的影响,以及与Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2?TLR4的关系?方法:采集中?重度慢性牙周炎患者及健康人的龈下菌斑,分别重复刺激,诱导人巨噬细胞产生耐受?采用ELISA 技术检测TNF-α和IL-10表达水平的变化,采用流式细胞技术检测TLR2?TLR4表达水平的改变?结果:2种菌斑第1次刺激巨噬细胞后,TNF-α和IL-10水平均较刺激前明显增高(P < 0.05)?2种菌斑重复刺激后,TNF-α分泌水平均较第1次刺激后明显降低(P < 0.05),IL-10水平均与第1次刺激后无明显差别(P > 0.05)?尽管2种菌斑第1次刺激后,TLR2?TLR4表达水平均较刺激前明显升高(P < 0.05),2种菌斑重复刺激后,TLR2?TLR4表达水平均与第1次刺激后无明显差别(P > 0.05)?结论:龈下菌斑诱导的耐受能够抑制TNF-α的分泌,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应,但这种改变与TLR2?TLR4表达水平无关?     

TNF-α和IL-1β对人脐静脉内皮细胞 蛋白C受体mRNA表达的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素 1β（IL-1β）对人脐静脉内皮细胞 （ECV304）蛋白C受体（EPCR）mRNA表达的影响。方法：通过体外培养ECV304细胞,分别以含 TNF-α和IL-1β的培养基孵育ECV304细胞,行剂量和时间依赖性实验。采用实时定量聚合酶链反 应（quantitative real-time PCR ）技术测定 ECV304 细胞 EPCR mRNA 的表达。结果：TNF-α和 IL-1β均能显著下调 ECV304 EPCR mRNA 的表达,并呈剂量和时间依赖性（P<0.05）。结论： TNF-α和IL-1β可能通过显著下调ECV304上EPCR mRNA的表达而成为损伤内皮细胞功能的一 个新作用机制。     

安心汤对冠心病患者TNF-α、IL-1β、IL-6的影响

目的:观察安心汤治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的临床疗效及其对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6水平的影响。方法:124例冠心病患者随机分为观察组和对照组,每组各62例。对照组采用西医常规治疗,观察组在对照组基础上口服中药安心汤,药物组成:丹参30 g,黄芪30 g,当归15 g,红花15 g,麦冬30 g,生晒参15 g,益母草15 g,桃仁10 g,桂枝15 g,炙甘草5 g。自汗者加五味子10 g;失眠者加酸枣仁30 g,柏子仁30 g。水煎取汁400 m L,早晚2次分服。30 d为1个疗程,连续治疗3个疗程。治疗结束后,比较两组患者的临床疗效和TNF-α、IL-1β、IL-6水平。结果:治疗前,两组患者TNF-α、IL-1β、IL-6水平无明显差异(P0.05);治疗3个疗程后,观察组患者的TNF-α、IL-6水平显著低于观察组(P0.05),但两组患者的IL-1β水平无明显差异(P0.05)。观察组患者有效率为95.16%,显著高于对照组的74.19%(P0.05);观察组的不良反应率为4.84%,显著低于观察组的14.52%(P0.05)。结论:安心汤可以降低冠心病患者的TNF-α、IL-6水平,具有较好的临床疗效,不良反应较少。     

内氏放线菌株ATCC 19246菌毛诱导成纤维细胞L929产生IL-1β,IL-6,TNF-α的研究

目的提取内氏放线菌菌毛,并检测内氏放线菌菌毛是否能引起成纤维细胞表达释放IL-1β,IL-6,TNF-α。方法用搅拌法提取内氏放线菌19246菌毛,电镜鉴定菌毛的纯度。用提取的菌毛诱导小鼠成纤维细胞L929,48h后收集细胞培养上清,Western-blotting分别检测细胞培养上清中IL-1β,IL-6,TNF-α。结果电镜负染观察显示内氏放线菌菌毛与菌体充分分离,得到菌毛粗提物。Western-blotting结果显示菌毛处理过的细胞培养基中可检测到IL-1β、TNF-α、IL-6,而未经菌毛处理过的细胞培养基中未见IL-1β、TNF-α、IL-6。结论内氏放线菌19246菌毛初提物可以诱导L929细胞产生IL-1β、TNF-α、IL-6。     

急性脑梗塞患者IL-6、IL-8和TNF-α的测定及临床意义

目的探讨急性脑梗塞患者血浆白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在发病中的作用及临床意义。方法采用放射免疫分析法检测46例急性脑梗塞患者血浆IL-6、IL-8和TNF-α含量,并与34例正常对照组比较。结果急性脑梗塞患者急性期血浆IL-6、IL-8和TNF-α水平显著高于正常对照组（P〈0.01）,恢复期3种因子有下降的趋势,但仍高于正常对照组（P〈0.01）,急性脑梗塞患者恢复期IL-6、IL-8和TNF-α水平低于急性期（P〈0.05）。结论脑梗塞发病过程中存在IL-6、IL-8和TNF-α介导的炎症和免疫反应,IL-6、IL-8和TNF-α的测定对急性脑梗塞的治疗和预后判断有一定价值。     

肺挫伤患者血清TNF-α、IL-1和IL-6变化的临床价值

目的探讨外伤所致肺挫伤患者外周血中肺瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)和IL-6的动态变化及其临床意义。方法上海交通大学附属第六人民医院选取90例肺挫伤患者根据创伤严重度评分(ISS)标准划分A组(<20分)、B组(≥20分),两组于入院后第1、3、5、7、9、11、13日时分别取外周血,监测TNF-α、IL-1和IL-6水平。结果 A组血清TNF-α水平入院后即显著升高,3～5 d后逐渐下降,IL-1和IL-6入院后逐渐增高,于入院后3～5 d达到峰值,11～13 d后下降显著。B组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平显著高于A组(P<0.05),且一直处于高水平,无下降趋势。B组患者呼吸困难、咯血症状、PaO2<60 mm Hg、肺部感染、肺不张、ARDS的发生率显著高于A组患者。结论 TNF-α、IL-1和IL-6在肺挫伤发病机制中起着重要作用,动态监测肺挫伤患者外周血TNF-α、IL-1和IL-6水平有助于评估病情和评价疗效。     

内毒素、TNF-α、IL-6在慢性肝炎中的作用研究

目的研究内毒素血症与慢性肝炎的关系,探讨内毒素在慢性肝炎中的作用机理.方法收集如下血标本正常健康献血员30例,慢性乙型肝炎患者30例,慢性深度黄疸乙型肝炎患者60例.采血当日送检功能.分别用鲎实验改良基质法进行内毒素定量测定,放射免疫方法(RIA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6).结果内素素、TNF-α、IL-6和总胆红素(TBIL)水平在三组患者中依次升高,各组两两比较,其差异有显著性意义(P＜0.01);四项指标进行直线相关性分析,各指标之间呈正相关关系(P＜0.01).结论内素素血症与肝脏损害的严重程度有关;内毒素可能主要是通过引起以下TNF-α为主的细胞因子水平的升高发挥肝脏损害作用的.     

谷氨酰胺对急性腹膜炎大鼠IL-1、IL-6和TNF-α表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺对急性腹膜炎大鼠IL-1、IL-6和TNF-α表达的影响.方法 90只Wistar大鼠随机分为 CLP组(n=30)、GLN组(n=30)和对照组(n=30),CLP组和GLN组均采用大鼠盲肠结扎加穿孔(CLP)制作急性腹膜炎模型;GLN组术后于腹腔注射谷氨酰胺(500mg/kg·d),CLP组术后注...