酶联免疫吸附试验检测HBsAg的应用体会

目的总结酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HBsAg的经验,提高乙肝检测水平。方法利用酶标记物作为指示物,以抗原-抗体的特异性结合反应为基础,在酶标记物同抗原-抗体结合后,由于酶的催化放大作用,使得ELISA既保持抗原抗体反应的特异性又体现酶催化放大的敏感性。针对检测过程,总结应用体会。结果仪器设备、试剂、标本、操作过程、环境、质量控制等方面都会影响检测结果,操作时一定要严格控制。结论控制影响检测结果的因素,可为临床提供准确可靠的检测结果。     

酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg的分析体会

乙型肝炎表面抗原的检测是诊断乙型肝炎的主要指标。随着检测技术的不断发展，ELISA一步法检测HBsAg的试剂、方法均已成熟，因其方法简便、灵敏度高、特异性强、实验要求条件不高而被各级医疗机构广泛采用。但其方法的缺点是干扰因素特别多，在实际操作中每一步控制不好都可能影响检测结果的质量，现针对操作中可能出现的问题进行分析，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。     

灰区设置在酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原中的意义

乙型肝炎是目前流行最广泛、危害最严重的病毒性肝炎之一,乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物检测仍是目前临床诊疗的重要依据。有关血清中低水平乙型肝炎表面抗原（HBsAg）测定及其临床意义已有报道,而对HBsAg检测中灰区设置及其临床意义尚缺乏系统的研究。     

酶联免疫吸附试验检测乙肝核心抗体假阳性分析

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝核心抗体(抗HBc)的假阳性分析.方法 ELISA法采用的是竞争抑制法检测抗HBc;化学发光微粒子免疫测定法(CMIA)检测抗HBc.结果 用ELISA法初检210份标本,其中抗HBc高值80例、抗HBc低值130例,在抗HBc低值组中,ELISA法、CMIA法复检的阳性率分别为46.1％、15.4％,三者之间差异都有统计学意义(P均＜0.01),两对半模式主要以2、5阳和5阳为主.结论 用ELISA法初检时,当抗HBc值处在低值时,两对半模式为2、5或5阳时,应对标本用ELISA法复检,甚至用CMIA法重测,以确保结果的准确性.     

酶联免疫吸附试验“灰区”结果探讨

酶联免疫吸附试验（ELISA）具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低等优点，已成为检验科免疫室应用最广泛、最基础的实验项目之一。常用于感染性疾病如乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等的抗原和抗体检测。定性ELISA的结果判断方式以商品试剂盒所设定的阳性判定值（cut-off value，CO）为界线，当样品的检测信号值如吸光度值（A）超出CO值时，     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）目前已是血站、医院的常用检测方法,虽然该方法操作简单、灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗-HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,给临床诊断、治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗-HCV的因素较多,现就比较常见的影响因素进行分析总结。     

影响酶联免疫吸附试验测定的关键环节

临床酶联免疫吸附试验(ELISA)测定现通常采用微孔板为固相的测定模式,测定操作非常简单,一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步操作不当都会影响测定结果,现将测定过程中可能发生的主要问题分析如下.……     

酶联免疫吸附试验在血液检测中应注意的问题及对策

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其具有敏感性高、特异性强、操作简便等优点,作为目前采供血机构血液检测最主要的方法[1],但仍有一些困扰实验室人员的问题需要注意及解决.探讨如下.     

酶联免疫吸附试验两种方法检测梅毒螺旋体抗体结果比较

目的比较梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)一步法和二步法检测梅毒螺旋体抗体(抗-TP)的结果,研究钩状效应对TP-ELISA一步法检测抗-TP结果的影响,评价TP-ELISA二步法检测抗-TP的应用价值。方法分别用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、TP-ELISA一步法和二步法检测3 600份住院患者血清,并用TP-ELISA一步法(稀释法)检测怀疑存在钩状效应的血清标本12份。结果 TPPA、TP-ELISA二步法分别检测出91份抗-TP阳性,结果一致;TP-ELISA一步法检测出79份抗-TP阳性,12份TP-ELISA一步法检测结果阴性怀疑存在钩状效应的血清标本进行1∶5、1∶10、1∶40、1∶80倍稀释后,再采用TP-ELISA一步法进行检测,分别有12份、12份、8份、4份结果转为阳性。结论采用TP-ELISA二步法或TP-ELISA一步法同时对标本进行一定倍数稀释后检测,可以克服钩状效应,提高检测的敏感度。     

胶体金法代替酶联免疫吸附法检测人血清蛋白HBsAg的研究

目的：探讨胶体金法和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测人血清蛋白乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的一致性,并分析存在的差异。方法用胶体金法（血清/全血）法和ELISA对43批次市售人血清蛋白 HBsAg 进行检测,并将检测结果进行比较。结果 ELISA与胶体金法（血清）检测结果的一致性为100％;ELISA 与胶体金法（全血）检测结果一致性为65．12％。结论胶体金法简便快速,可以用于人血清蛋白 HBsAg快速筛查,但是还不能代替ELISA法作为常规检测人血清蛋白 HBsAg 的方法。     

酶免法检测乙肝表面抗原实验精密度研究

目的探讨酶免法检测HBsAg实验精密度的影响因素及实验精密度对检验结果的影响。方法检测卫生部临检中心0.5ng/ml质控血清,计算精密度;比较手工操作与全自动酶免分析仪法检测的精密度;检测不同效价的阳性血清,比较精密度,并作统计学分析。结果临界值附近的标本可能引起误判,手工操作与全自动酶免分析仪法检测实验精密度差异有统计学意义（t=4.72,P〈0.01）。结论实验精密度的高低对酶免法检测HBsAg实验存在影响,检验结果的判定应设置灰区并进行复检或进一步检测。     

AST/ALT、HBeAg与单纯HBV感染疾病的关系

目的研究谷草/谷丙转氨酶比值(AST/ALT)、乙型肝炎e抗原(HbeAg)与慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、原发性肝癌的关系及临床意义。方法AST、ALT由贝克曼生化仪采用速率法检测,HBeAg由西班牙班珀斯变色龙全自动酶免分析仪采用ELISA方法检测。结果①肝炎后肝硬化的AST/ALT比值(1.67±0.72)与原发性肝癌组的(2.07±1.46)均高于慢性乙型肝炎组(0.84±0.46)(P<0.01);肝炎后肝硬化的HBeAg阳性率(16/49)与原发性肝癌组的(10/50)均低于慢性乙型肝炎组(30/51)(P<0.05,P<0.01);②慢性乙型肝炎组与肝炎后肝硬化组各组内HBeAg阳性的AST/ALT比值与HBeAg阴性的AST/ALT比值比较,无统计学意义(P>0.05)。结论随着HBV感染后疾病的进展,AST/ALT比值升高,HBeAg阳性率降低,提示肝细胞的破坏加剧可能与机体自身免疫功能有很大关系。     

献血者肝炎病毒感染状况分析

目的分析献血者肝炎病毒感染现状。方法应用固相酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测16578例献血者血清中的HBsAg、抗-HCV。结果献血者HBsAg、HCV感染率分别为7．80％、1．40％,总感染率为9．20％;男性组与女性组的总感染率分别为6．65％和2．52％,两组间差异有统计学意义（P〈O．01）。结论男性组比女性组有更高的肝炎病毒感染率。     

乙型肝炎病毒表面抗体定性测定S/CO的临床意义

目的探讨乙肝病毒表面抗体定性测定S／CO（标本吸光度/临每界值）值与定节测定值的相关性。方法时间分辨荧光免疫分析法（TRF）及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同浓度的血清，绘制标准曲线，建立方程。结果S／CO值与定量测定值呈曲线正相关，转换方程式为Y＝8．9118&#215;e^0.1774X。S／CO计算值与实测值组内相关系数为0．934。结论乙肝病毒表而抗体含量可通过定性S／CO值推算，适用于基层未开展乙肝标志物定量检测的实验室应用。     

电化学发光免疫分析定量检测血清抗HBs的临床意义

目的探讨电化学发光免疫分析技术（ECLIA）定量检测乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）的临床意义。方法用ECLIA和酶联免疫吸附法（ELISA）对质控品和680例临床血清标本同时进行测定,对两种方法的结果经Х^2检验,进行比较分析。结果ECLIA检测灵敏度为2．0mIU／ml,,ELISA法灵敏度为20mIU／mL,两种检测方法检测103例正规乙肝疫苗接种患者抗-HBs的阳性检出率分别为ECLIA 83．5％、ELISA 60．1％;对已确诊肝炎患者577例的标本检测,ELISA法漏俭率为4．3蟛;对溶血标本的测定ECLIA法优于ELISA法。结论ECLIA是目前较好的定量检测抗-HBs的新技术,在乙型肝炎的诊断、疗效观察和预后判断等方面有重要的临床意义。     

ELISA检测乙型肝炎表面抗原的范围和确认试验探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）测定乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性样本临界结果的复检范围和确认试验的弱阳性样本检测范围。方法血清样本用国产ELISA试剂测定HBsAg,阴性样本进行复检,复检结果阳性进行确认试验。确认试验应用雅培公司的AxSYM全自动酶免疫荧光分析系统和配套试剂。结果HBsAg阴性样本547例,其中510例吸光度（A）值i〉0．0735,复检结果阳性5例,确认试验结果亦为阳性;37例A值〈0．0735,复检结果均为阴性。HBsAg阳性样本332例,其中160例A值≥1．0,确认试验均为阳性;172例A值〈1．0的样本中有7例确认试验结果为阴性。结论应用国产ELISA试剂进行HBsAg的确认试验,应先确定阴性样本的复检范围和需做确认试验的弱阳性样本范围。     

三种国产抗-HCV酶联免疫诊断试剂检测结果与电化学发光法比较

目的探讨A、B和C三种不同国产酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）结果的差异性,并将检测结果与电化学发光法检测结果进行比较。方法随机挑选临床检测样本94例。所有样本再使用B、C和Roche电化学发光法试剂盒进行检测。ELISA试剂都使用各自的试剂盒S/CO值进行阴阳性判断,电化学发光检测结果判断以仪器的COI作为判断标准,结果〉1为检测有反应性。结果 A、B、C和电化学发光检测的阳性率分别为84.04%（79/94）、35.11%（33/94）、25.53%（24/94）和39.36%（37/94）,A试剂显著高于电化学发光法,而C试剂显著低于电化学发光法。A、B、C和电化学发光检测的结果一致性分别为55.32%（52/94）、95.74%（90/94）和86.17%（81/94）。将A试剂盒检测的结果分为阴性组（〈1）、弱阳性组（1~8）、阳性组（〉8）三个组,阴性和阳性组四种试剂检测结果符合率较好,而弱阳性组符合率较低。结论 3种国产试剂对阴性和阳性标本与Roche电化学发光法检测符合率很高,弱阳性标本符合率则存在差异,对于弱阳性标本建议使用确诊试验。     

乙型肝炎病毒表面抗原确认试验的临床应用

目的对珠海丽珠试剂公司研发的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）确认试剂盒（中和试验法）进行初步临床试验,评价其应用价值。方法血清样本来源于本院门诊患者（包括体检者）,经上海科华公司生产的HBsAg酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定．结果呈阳性者。确认试验方法参照丽珠公司提供的说明书进行。结果133例样本中确认为阳性者99例（74．43％）,其中有4例常规确认试验结果为“不确定”,经延长时间的确认试验,均确认为阳性。其余34例样本在确认试验中对照孔的结果为阴性,经科华试剂复测,结果亦均为阴性。此34例科华试剂初筛为阳性的样本,其吸光度（A）值均≤0．500。结论丽珠公司的HBsAg确认试剂盒适用于临床榆验。国产HBsAg ELISA试剂测定结果为弱阳性的样本应进行复检,以排除假阳性;如采用确认试验,则可保证真阳性样本的真实性。     

血清CA125检测对肿瘤诊断价值的探讨

目的检测血清中CA125含量,探讨其在肿瘤疾病诊断中的应用价值。方法应用ELISA方法分别检测150例肿瘤患者(38例卵巢癌,22例其他癌,即肝癌、肺癌和胃癌,50例卵巢囊肿,40例子宫肌瘤)和正常对照组40例血清CA125含量。结果卵巢癌、其他癌(肝癌、肺癌和胃癌)、卵巢囊肿和子宫肌瘤患者CA125阳性率分别为78.9%、45.5%、16.0%和2.5%;CA125含量分别为(217.9±225.2)U/ml、(105.8±55.0)U/ml、(67.3±34.7)U/ml和(17.0±7.1)U/ml,正常对照组为(13.4±7.4)U/ml。结论(1)恶性肿瘤患者比良性肿瘤患者CA125阳性率高,均值比较呈显著性差异(t=2.171,P<0.05);(2)妇科恶性肿瘤患者比其他恶性肿瘤患者(肝癌、肺癌和胃癌)CA125阳性率高,均值比较差异不显著(t=1.570,P>0.05);(3)良性肿瘤患者中卵巢囊肿CA125均值与正常对照组比较,有极显著性差异(t=9.281,P<0.001),而子宫肌瘤患者与正常对照组比较则无显著性差异(t=1.170,P>0.05)。CA125检测对妇科肿瘤疾病的诊断价值最大,对肝癌、肺癌和胃癌的诊断有一定参考价值,对良性肿瘤诊断价值有限。     

3 480例输血前患者血清标志物检测结果分析

目的 了解和掌握输血前患者血清标志物的感染状况。方法 采用酶联免疫吸附（ELISA）法对3480例输血前患者进行乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）、梅毒抗体（抗-TP）、艾滋病病毒抗体（抗-HIV）检测；并对前3种标志物阳性患者不同性别、年龄作统计分析。结果 3480例患者中HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV的阳性率分别为11．10％、0．40％、4．30％、0．08％；对197例HBsAg、71例抗-TP和22例抗～HCV阳性患者按性别和年龄进行分组比较，除了HBsAg、抗-TP阳性患者性别差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论 （1）HBsAg、抗-HCV、抗-TP阳性患者中40岁以上较高，表明中老年健康值得关注。（2）对受血者输血前血清标志物检测，有利于医患双方采取有效的预治措施，同时避免医疗纠纷的发生。