糖尿病大鼠主动脉α1肾上腺素受体功能的改变

目的：观察糖尿病和糖尿病合并高血压大鼠主动脉α１肾上腺素受体及其亚型介导血管收缩反应的改变。方法；采用腹腔注射锭脲佐菌素和结扎肾动脉人注射链脲佐菌素方法。复制糖尿颊和糖尿病合并高血压大鼠模型，做了体灌流血管收缩功能实验；在ＨＥＫ２９３细胞株分别转染α１Ａ－、α１Ｂ－和α１Ｄ－ＡＲＣＤＮＡ并稳定表达受体，做放射配体结合实验。结果：与对照组相比，糖尿病大鼠主动脉的去甲肾上腺素浓度－收缩效应曲线ＰＤ２值     

不同年龄大鼠主动脉功能性α1-肾上腺素受体亚型的比较

目的：比较５～７ 天龄,５ ～６ 月龄以及１８ 月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１肾上腺素受体（α１ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ,α１ＡＲ） 及其亚型分布。方法：采用离体血管收缩功能实验,利用不同的α１ＡＲ 亚型选择性拮抗剂,分别测定５ ～７天龄,５ ～６ 月龄以及１８ 月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１ＡＲ 及其亚型。结果：由去甲肾上腺素（ＮＥ）引起的主动脉最大收缩反应在５～７ 天龄乳鼠显著低于５～６ 月龄及１８ 月龄大鼠。ＷＢ４１０１（α１ＡＡＲ和α１ＤＡＲ选择性拮抗剂）对ＮＥ介导的血管收缩效应的ｐＡ２ 值在５ ～７ 天龄,５～６ 月龄及１８ 月龄大鼠间差异无显著性,ＢＭＹ７３７８（α１ＤＡＲ选择性拮抗剂） 和Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌ（α１ＡＡＲ 选择性拮抗剂） 在５～７ 天龄与５ ～６ 月龄大鼠的ｐＡ２ 值间差异也无显著性,但在１８ 月龄大鼠主动脉ＢＭＹ７３７８ 的ｐＡ２ 值显著减小;而Ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ 的ｐＡ２ 值则明显增大。氯乙基可乐定（ＣＥＣ, 为α１ＢＡＲ和α１ＤＡＲ不可逆阻断剂） 对ＮＥ 引起的胸主动脉收缩的抑制作用在１８ 月龄大鼠明显小于５ ～６ 月龄大鼠。结论：在大鼠的生长过程中,从幼年到成年胸主动脉上的功能性α１     

糖尿病大鼠主动脉α1肾上腺素受体功能的改变

目的:观察糖尿病和糖尿病合并高血压大鼠主动脉α1肾上腺素受体(α1-AR)及其亚型介导血管收缩反应的改变.方法:采用腹腔注射链脲佐菌素和结扎肾动脉加腹腔注射链脲佐菌素方法,复制糖尿病和糖尿病合并高血压大鼠模型,做离体灌流血管收缩功能实验;在HEK293细胞株分别转染α1A-、α1B-和α1D-AR cDNA并稳定表达受体,做放射配体结合实验. 结果:与对照组相比,糖尿病大鼠主动脉的去甲肾上腺素浓度-收缩效应曲线pD2值无显著性改变,最大收缩反应显著增加;而糖尿病合并高血压大鼠的去甲肾上腺素浓度-收缩效应曲线pD2值显著降低,最大收缩反应无显著改变.在对照组α1-AR亚型选择性拮抗剂(5-MU, spiperone, BMY7378, WB4101)拮抗去甲肾上腺素介导主动脉收缩的pA2值与克隆的α1D-AR的pKI值呈高度相关(r2为0.9),这些拮抗剂的pA2值在糖尿病和糖尿病合并高血压大鼠均与对照组差异无显著性.结论:大鼠发生糖尿病时主动脉α1-AR介导的最大收缩反应增强,当合并高血压时这种增强作用消失,而且对去甲肾上腺素的敏感性降低.     

大鼠血管功能性α1肾上腺素受体的亚型分析

研究大鼠不同血管中α１ 肾上腺素受体（α１ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ,α１ＡＲ） 亚型的分布情况及其功能意义。方法：采用离体血管收缩功能实验,测定α１ＡＲ 选择性拮抗剂抑制大鼠血管ＮＥ收缩反应的功能性亲和常数（ｐＡ２） ,与分别表达α１Ａ、α１Ｂ和α１ＤＡＲ的克隆细胞上结合常数（ｐＫｉ）作相关性分析,以判断血管中的α１ＡＲ 亚型分布。结果：哌唑嗪、ＷＢ４１０１ 、５ＭＵ、ＢＭＹ７３７８ 和ＲＳ１７０５３ 分别竞争性地抑制血管对ＮＥ 的收缩效应,ｐＡ２ 值与这些拮抗剂对克隆α１Ａ、α１Ｂ、α１ＤＡＲ 的ｐＫｉ 值间的决定系数在肺动脉分别为０ ．０５、０．４５、０．７７ ;在肠系膜动脉分别为０．０２、０．４７ 、０ ．８７ ;在尾动脉分别为０ ．７７ 、０ ．７７ 、０ ．４４ ;在门静脉分别为０ ．７９ 、０ ．８１、０ ．２７。结论：大鼠肺动脉、肠系膜动脉的功能性α１ＡＲ主要为α１ＤＡＲ;而尾动脉与门静脉的功能性α１ＡＲ主要是α１Ａ和α１Ｂ亚型。     

大鼠血管中α_1－肾上腺素受体的同源性减敏不受β－肾上腺素受体和血管内皮影响

目的：确定在大鼠血管中β－肾上腺素受体和血管内皮对α＿１－肾上腺素受体（α＿１－ＡＲ）同源性减敏有否影响。方法：采用大鼠离体血管收缩功能实验。结果：经去甲肾上腺素（ＮＥ）预温育的主动脉和肾动脉由α＿１－ＡＲ介导的收缩效应较对照明显降低，而５－羟色胺和氯化钾引起的收缩效应均无明显改变，有或无β－ＡＲ激动内皮的存在对上述改变并无明显影响。结论：血管在α＿１－ＡＲ经激动剂持续作用后产生的减敏为同源性减敏，不受β－肾上腺素受体和血管内皮的影响。     

大鼠血管中a_1－肾上腺素受体不同亚型的减敏差异

目的：观察α＿１－ＡＲ的减敏过程及其亚型差异。方法：给清醒大鼠持续输注苯肾上腺素（ＰＥ）及离体主动脉和肾动脉用去甲肾上腺素（ＮＥ），持续温育后，测定血压或进行血管收缩功能实验。结果：持续输注ＰＥ后，由ＰＥ介导的升压作用较对照组明显降低，升高相同血压所需的ＰＥ剂量显著增加；离体血管经不同时间和不同浓度的ＮＥ预温育后，α＿１－ＡＲ介导的血管收缩－效应曲线（ＣＲＣ）显著右移，但含α＿（１Ｄ）－ＡＲ的主动脉的右移程度均显著大于含。α＿（１Ａ）－ＡＲ的肾动脉。结论：α＿１－ＡＲ在激动剂持续作用下可产生减敏，且α＿（１Ｄ）－ＡＲ远较α＿（１Ａ）－ＡＲ容易发生。     

不同年龄大鼠主动脉功能性α1—肾上腺素受体亚型的比较

目的：比较５－７天龄,５－６月龄以及１８月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１－肾上腺素受体（α１－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ,α１－ＡＲ０及其亚型分布。方法;采用离体血管收缩功能实验,利用不同的α１－ＡＲ亚型选择性拮抗剂,分别测定５－７天龄,５－６月龄以及１８月龄大鼠胸主动脉血管功能性α１－ＡＲ及其亚型。结果：由去甲肾上腺素（ＮＥ０引起的主动脉最大收缩反应在５－７天龄乳鼠显著低于５－６月龄及１８月龄大鼠。     

大鼠血管功能性α1肾上腺素受体的亚型分析

研究大鼠不同血管中α１肾上腺素受体（α１－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ,α１－ＡＲ０亚型的分布情况及其功能意义。方法：采用离体血管收缩功能实验,测定α１－ＡＲ选择性拮抗剂抑制大鼠血管ＮＥ收缩反应的功能性亲和常数,与分别表达α１Ａ－,α１Ｂ－和α１Ｄ－ＡＲ的克隆细胞上结合常数作相关性分析,以判断血管中的α１－ＡＲ亚型分布。结果：哌唑嗪,ＷＢ４１０１,５－ＭＵ,ＢＭＹ７３７８和ＲＳ１７０５３分别竞争性地抑     

自发性高血压大鼠后肢血管床α1肾上腺素受体亚型特征

研究自发性高血压大鼠阻力高管α１肾上腺素受体亚型特征。选用大鼠后肢血管床灌流功能性实验和分别表达３种α１－ＡＲ亚型的克隆细胞上放射性配体结合实验。结果，ＳＨＲ和和正常大鼠后肢血管床α１－ＡＲ介导收缩的ｐＤ２ＷＦＨＧＷＶ ＫＬＪ Ｏ ５．３６±Ｓ     

大鼠血管中α1—肾上腺素受体的同源性减敏不受β—肾上腺素…

目的：确定在大鼠血管中β－肾上腺素受体和血管内皮对α１－肾上腺素受体（α１－ＡＲ）同源性减敏有否影响。方法：采用大鼠离体血管收缩功能实验。结果：经去甲肾上腺素（ＮＥ）预温育的主动脉和肾动脉由α１－ＡＲ介导的收缩效应较对照明显降低，而５－羟色胺和氯化钾引起的收缩效应均无明显改变，有或无β－ＡＲ激动内皮的存在对上述改变并无明显影响。结论：血管在α１－ＡＲ经激动剂持续作用后产生的减敏为同源性减敏，不受β     

大鼠基底动脉和肾动脉肾上腺素受体的异质性

用离体小血管收缩功能实验法比较了Ｗｉｓｔａｒ大鼠基底动脉（ＢＡ）和肾动脉（ＲＡ）β和α（α_１和α_２）肾上腺素受体分布和功能的差异。结果表明：（１）由β受体介导的非内皮依赖性舒张反应在ＢＡ明显强于ＲＡ，提示ＢＡ的β受体分布多于ＲＡ。（２）大多数ＢＡ对α_１激动剂无反应，仅个别ＢＡ对α_１激动剂显示一种低亲和力、低效能的收缩反应，这与ＲＡ明显不同。提示大多数ＢＡ无α_１受体分布，仅个别ＢＡ有α１受体分布，但其亚型可能不同于ＲＡ上的α_１受体亚型。（３）无论是保留内皮还是去除内皮，ＢＡ对α_２受体激动剂ＢＨＴ９２０（１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）均无反应，而在ＲＡ保留内皮对ＢＨＴ９２０（１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）呈舒张反应，去内皮后则呈收缩反应。提示在大鼠ＢＡα２受体分布极少，而在ＲＡ则有α_２受体分布，且内皮之α_２受体介导内皮依赖性舒张反应，平滑肌之α_２受体介导内皮非依赖性收缩反应。     

大鼠心室β2肾上腺素受体的分布及功能

利用放射配基结合实验及离体大鼠乳头肌灌流实验方法分析β２肾上腺素受体（β２～ＡＲ）在心室中的分布及其介导的正性变力效应。β２选择性拮抗剂ＩＣＩ１１８，５５１与受体结合包含高、低亲和性两个位点，Ｋ１值分别与β２－和β１－ＡＲ的亲和性相符，各占４３％与５７％。ＩＣＩ１１８，５５１与ＣＧＰ２０７１２Ａ均可使异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）的浓度－效应曲线显著右移，ｐＫＢ值分别为７．３６与８．５４，均介于它们与β１－和β２－ＡＲ的亲和性之间。以上结果表明：大鼠心室中共存β１－与β２－ＡＲ两种亚型，约各占一半；β１与β２－ＡＲ均介导ＩＳＯ引起的正性变力效应。     

老年大鼠血管平滑肌中多巴胺受体DA1亚型的改变

选用ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ作为ＤＡ１受体的特异性激动剂，利用离体血管环的方法对老年（１８月龄）大鼠与年轻大鼠（３月龄）血管平滑肌中多巴胺受体ＤＡ１亚型的差别进行了观察。结果显示，老年大鼠主动脉、肾动脉、肠系膜动脉由去甲肾上腺素引起的最大收缩反应与年轻大鼠无明显差别，但３种血管由ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ引起的累积浓度－舒张反应曲线均明显右移，提示老年大鼠血管平滑肌中ＤＡ１受体显著下调。     

X线造影剂影响肺阻力动脉张力的中介因子:内皮素和内皮来源舒张因子的研究

目的：观察Ｘ线造影剂引起肺阻力动脉（ＰＲＡ）张力改变是否由内皮素和内皮来源舒张因子（ＥＤＲＦ）介导。方法：（１）离体ＰＲＡ分别于内皮素Ａ／Ｂ受体拮抗剂ＳＢ－２０９６７０处理前后暴露于泛影葡胺或其等容甘露醇对照溶液，观察其收缩反应。（２）离体ＰＲＡ依次由前列腺素Ｆ２α（ＰＧＦ２α）和左旋－硝基精氨酸甲基酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）＋ＰＧＦα诱发２次程度相似的收缩反应后分别暴露于低渗显影葡胺，观察其舒张反应。结果：（１）泛影葡胺及甘露醇对照组ＳＢ－２０９６７０处理前后的２次ＰＲＡ收缩反应均无显著差异；（２）ＰＧＦ２α或Ｌ－ＮＡＭＥ＋ＰＧＦ２α收缩ＰＲＡ后低渗显影葡胺引起的舒张反应间无显著差异。结论：内皮素不介导泛影葡胺或高渗溶液引起的离体ＰＲＡ收缩反应，ＥＤＲＦ不介导低渗显影葡胺引起的离体ＰＲＡ舒张反应。     

糖尿病高血压者尿儿茶酚胺与动态血压的关系

目的：探讨２型糖尿病高血压者尿儿茶酚胺（ＵＣＡ）与动态血压（ＡＢＰ）的关系。方法：用ＨＰＬＣＥＣＤ测定３０例糖尿病高血压者（ＨＤＭ组）及２５例糖尿病血压正常者（ＮＤＭ组）ＵＣＡ浓度［ｃ（ＵＣＡ）］昼夜ＵＣＡ包括去甲肾上腺素（ＮＥ）、肾上腺素（Ｅ）、多巴胺（ＤＡ），同时监测２４ｈＡＢＰ。结果：ＨＤＭ与ＮＤＭ２组间以及血压昼夜节律反转（ｎ＝１０）与非反转者（ｎ＝４３）间日、夜及２４ｈ尿的ＮＥ、Ｅ水平均无显著差异，ＵＣＡ与２４ｈＡＢＰ指标间亦无显著相关，而尿白蛋白排泄率（ｒｕａｅ）则ＨＤＭ组显著高于ＮＤＭ组，血压节律反转者高于非反转者；ＨＤＭ组日ＤＡ、２４ｈＤＡ均显著低于ＮＤＭ组，且日、夜及２４ｈＤＡ与ｒｕａｅ呈显著负相关。结论：交感神经肾上腺髓质系统活性在糖尿病高血压的发病及血压昼夜节律异常的产生机制中似不占主导地位，而糖尿病肾病变可能起重要作用；外周ＤＡ水平降低有可能参与糖尿病高血压及肾病变的发病     

大鼠主动脉血管平滑肌舒张因子的释放

目的通过观察内皮舒张因子（ＥＤＲＦ）对去甲肾上腺素（ＮＥ）和去氧肾上腺素（ＰＥ）引起的缩血管效应的影响，研究大鼠主动脉平滑肌释放平滑肌舒张因子（ＭＤＲＦ）的可能性。方法内皮完整和去内皮大鼠主动脉环悬于器官浴槽中，测定血管的张力和收缩速度的变化。实验在消炎痛（ｉｍｄｏｍｅｔｈａｏｉｎ，１０μｍｏｌ／Ｌ）和普萘洛尔（ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ，３μｍｏｌ／Ｌ）存在下进行。结果用甲烯蓝（ＭＢ，１０μｍｏｌ／Ｌ）和左旋硝基精氨酸（ＬＮＮＡ，３０μｍｏｌ／Ｌ）处理内皮完整的大鼠主动脉环，ＮＥ和ＰＥ的剂量反应曲线明显左移（Ｐ＜０．００１）。ＥＣ３０值降低７倍和５倍。用阻断剂处理去内皮的大鼠主动脉环，剂量反应曲线仍可见有统计学意义的左移（Ｐ＜０．０５）。ＥＣ３０值下降３倍。结论实验结果证明，血管平滑肌细胞也能产生少量ＭＤＲＦ。     

三种去神经法对清醒大鼠动脉压力感受性反射功能的影响

目的：测定急、慢性去主动脉神经（ＡＤ）、去颈动脉窦神经（ＳＤ）、同时去主动脉和窦神经（ＳＡＤ）后大鼠动脉压力感受性反射对血压控制（ＡＢＲ－ＢＰ）和心动周期控制（ＡＢＲ－ＨＰ）的影响。方法：测定ＡＢＲ－ＢＰ采用阻断动脉压力感受性反射传出通路前后，比较机体对去氧肾上腺素升压反应面积差异的方法，所得数值与改良的Ｓｍｙｔｈ方法测定的ＡＢＲ－ＨＰ值进行比较。结果：（１）大鼠ＳＡＤ后ＡＢＲ－ＨＰ为零，且代偿不明显；而ＡＢＲ－ＢＰ约为３０％，且代偿明显；（２）ＳＤ后ＡＢＲ－ＢＰ与ＡＢＲ－ＨＰ无显著差异，而ＡＤ和ＳＡＤ后ＡＢＲ－ＢＰ的作用显著大于ＡＢＲ－ＨＰ的作用。结论：（１）大鼠的ＡＢＲ－ＨＰ传入冲动全部来自于主动脉弓和颈动脉窦的压力感受器，而ＡＢＲ－ＢＰ传入冲动大部分来自于这两处的感受器；（２）主动脉神经和窦神经感受传入在ＡＢＲ－ＢＰ中的作用是相当的，并有明显的相互代偿；而在ＡＢＲ－ＨＰ中，主动脉神经的作用比窦神经重要，其代偿能力也比窦神经显著。     

p53蛋白、nm23-H1蛋白、表皮生长因子受体和癌胚抗原在大肠癌原发与复发灶中的表达

目的：了解ｐ５３蛋白、ｎｍ２３Ｈ１蛋白、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及癌胚抗原（ＣＥＡ）的表达与肿瘤局部复发的关系。方法：用ＡＢＣ免疫组化技术检测了ｐ５３、ｎｍ２３Ｈ１、ＥＧＦＲ、ＣＥＡ在２０例大肠癌原发及局部复发灶中的表达。结果：复发后ｐ５３阳性率显著增高，ｐ５３、ＥＧＦＲ及ＣＥＡ的表达程度均显著增加，ｎｍ２３Ｈ１阳性率及表达程度呈下降趋势。肿瘤复发后组织分化程度呈下降趋势。结论：复发大肠癌的生物学行为可能恶化，ｐ５３、ｎｍ２３Ｈ１、ＥＧＦＲ及ＣＥＡ在局部复发中可能起重要作用。     

血小板激活因子及其拮抗剂WEB2170对短暂缺氧－复氧血管内皮舒张功能的影响

测定大鼠胸主动脉环张力，发现血小板激活因子（ＰＡＦ）可使缺氧２０ｍｉｎ后复氧３０ｍｉｎ动脉环对内皮依赖性舒血管剂乙酰胆碱（Ａｃｈ）的舒血管反应明显降低，占去甲肾上腺素（ＮＥ）预收缩的３６．１％。ＰＡＦ受体拮抗剂ＷＥＢ２１７０可明显改善短暂缺氧－复氧动脉环对Ａｃｈ的舒血管反应，占ＮＥ预收缩的８６．７％。提示ＰＡＦ是导致短暂缺氧。复氧后内皮舒张功能障碍的介质之一，ＰＡＦ受体拮抗剂ＷＥＢ２１７０具有内皮舒张功能保护作用。     

mRNA差异展示法检测氧化镍所致基因表达差异

目的：建立一种简便快速的从经染毒处理细胞中分离差异表达基因的新方法。方法：基于ＡＰＰＣＲ技术的ｍＲＮＡ差异展示分析法。结果：用黑色氧化镍染毒处理人胚肺２倍体细胞株，用基于ＡＰＰＣＲ技术的ｍＲＮＡ差异展示分析法，琼脂糖凝胶电泳直接ＥＢ染色分离ＡＰＰＣＲ产物，对未染毒和经染毒处理的人胚肺２倍体细胞株的基因表达情况进行分析，发现在染毒组与对照组细胞株间存在明显的基因表达差异。对其中１个差异片段ｐＤＬ回收纯化并作ＲＮＡ斑点杂交。结论：非同位素ｍＲＮＡ差异展示方法可快速从经染毒处理细胞株中分离差异基因。