基于叶绿体基因序列黄精和多花黄精遗传多样性分析

目的 基于叶绿体基因联合序列分析不同地理居群黄精和多花黄精遗传多样性.方法 目的序列经PCR扩增、测序、拼接和比对后,DnaSP分析单倍型多态性,Permut计算遗传分化,Arlequin分析居群标准分子变异,最后构建基于遗传距离的系统发育树.结果 94条黄精序列存在2个多态性位点,得到3个单倍型,居群间总遗传多样性为...     

多花黄精遗传多样性和遗传变异规律研究

目的揭示多花黄精遗传多样性及地理分布特征。方法采用ISSR分子标记技术,对来自浙江、安徽、江西、福建、湖南、湖北6省20个种源118株多花黄精进行综合分析。结果 16条引物共扩增出130条清晰条带,其中多态性条带123条,平均多态百分率(PPL)为94.62%,种源内遗传多样性在33.85%～60.00%,平均Nei’s基因多样度(H_e)为0.1838,Shannon信息指数(I)为0.267 4,遗传分化系数(G_st)为0.529 3。UPGMA聚类分析显示,同一种源的种质基本上聚在一起,说明种源间的遗传分化大于种源内不同个体间的基因遗传分化;在遗传相似系数值等于0.61时可将118份种质聚为武夷山脉、武陵山脉和罗霄山脉、大别山脉、洞宫山脉和天目山脉4类。结论多花黄精具有丰富的遗传多样性,遗传变异与山脉密切相关,山脉之间的平原、水域隔离可能是导致群体间遗传分化的主要原因之一。研究结果对黄精种质资源保护、品种选育具有重要的理论价值与现实意义。     

浙江多花黄精及长梗黄精的鉴定研究

黄精,始载于晋代《名医别录》,列为上品。中医学认为,黄精性平,味甘,入脾、肾、肺经,具有补肾益精、滋阴润燥之功效,长期用于治疗肾虚亏损,脾胃虚弱,肺虚燥咳,体倦乏力等症,并有“血气双补之王”的美称。     

重楼根际及药用部位内生真菌多样性与群落结构差异分析

目的寻找能促进宿主植物活性代谢产物合成的微生物,为后续功能菌群的建立及功能基因的发掘,提供理论支持。方法应用IlluminaMiseqPE250高通量测序技术对重楼根际土壤真菌、根及根茎内生真菌ITS1区进行序列测定,并进行生物信息学分析。结果测序结果共获得154228条序列,这些序列对应的根际土、根茎、根分别被聚类为408、119、57个OTUs。结论重楼根际及内生真菌多样性的关系为根际土根茎根,在重楼药用部位根茎中发现Mucoromycota门较非药用部位根中的门为特有门,Ascomycota门为优势门,Roseodiscus属真菌为重楼根茎内生真菌优势菌群,根茎和根部的特有种群及优势菌群可能与重楼活性产物合成密切相关。     

多花黄精炮制方法考证与研究进展

为了更好地运用现代技术提升黄精根茎炮制工艺,该文对黄精炮制方法进行了古法考证及文献研究.经考证,黄精始载于《名医别录》,炮制方法始载于《抱朴子内篇》,古代用药黄精基原植物以轮叶系的滇黄精、黄精、粗毛黄精、轮叶黄精和对叶系的棒丝黄精为主,互叶系的多花黄精和长梗黄精为辅;多花黄精作为药用黄精使用史见于宋朝,民国开始作为药用...     

毛竹林下多花黄精仿野生栽培技术

目的：毛竹林下仿野生栽培多花黄精,以扩大黄精种植途径,并为其仿野生栽培提供试验依据。方法：根据竹林内毛竹的疏密及山势、坡度整地挖穴,选择健壮,具顶芽的根茎做种栽,其锄草、松土、施肥等结合竹林管理统一进行。结果：毛竹林下仿野生栽培多花黄精3年后,产量可达1 500～1 800 kg·hm-2;经检验,其品质符合2010年版《中国药典》黄精质量标准规定。结论：有计划地进行毛竹林下黄精仿野生栽培,既不占用农田,减少了投入,有利于发展林下多种经济,又保护和改善了生态环境,增加了竹农收入,扩大了黄精种植途径。     

不同种源多花黄精生物生态特性研究

连续3年进行物候观测、产量对比,研究不同种源多花黄精生物生态特性,并分析探讨其多糖含量与原生地多年生态环境相关性。研究结果表明:多花黄精整个生长期为201~240 d,不同种源各有差异,最短的与最长的相差39 d,平均值为218.8 d;可分出苗期、伸长期、开花期、果实期和枯萎期,其中出苗期为24~38 d,伸长期为38~45 d(从出土到展叶10~15 d),开花期36~47 d,果实期为116~134 d(结果期20~40 d),枯萎期为75~108 d;种植2年增产最明显的为浙江庆元种源173.1%,其次为安徽青阳种源164.5%、浙江莲都种源161.7%、浙江安吉种源159.8%;优质多花黄精对各项生态因子的要求为:空气湿度78.9%,活动积温4791.4℃,日照时数1 691,年降水量平均1463 mm,七月最高温30.6℃,一月最低温1.1℃。     

不同产地多花黄精生态因子与品质形成的相关性分析

目的 研究不同产地多花黄精品质形成与生态因子的相关性,为黄精药材的规范化种植布局、引种栽培及资源可持续利用提供参考。方法 分析浙江、福建、安徽、江西、湖南、湖北6个产区31个产地的多花黄精的形态特征和有效成分含量,应用单因素方差分析,评价不同产地多花黄精质量与生态因子的相关性。结果 不同产地多花黄精形态和有效成分含量差异较大,纬度、海拔、年均温、7月均温、日照时数及无霜期对多花黄精质量有较大的影响。纬度和年均温对多花黄精有效成分含量影响较大,纬度和叶宽呈显著正相关,海拔和株高、叶长、叶宽及根茎鲜质量呈显著负相关,年均温与叶宽呈负相关,7月均温和多糖含量呈显著正相关,叶片数量和日照时数、积温及无霜期呈显著性负相关,土壤中有效磷、速效钾有利于黄精株高、根茎和叶片的生长,水解性氮含量与叶长呈显著负相关,地上部分与地下根茎产量呈显著正相关。结论 在进行多花黄精规范化种植过程中,应注意海拔、温度、无霜期、土壤酸性、生长期温度、磷肥及钾肥施用等对药材质量的影响。     

丹参叶片内生真菌群落结构及其与有效成分相关性分析

以5个不同地域丹参为材料,采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术和高效液相色谱法(HPLC)探究了不同产地丹参叶片内生真菌群落结构特征与有效成分积累规律,进一步分析了二者的相关性。结果表明5个不同产地的丹参叶片内生真菌群落结构与有效成分的积累量均存在一定的相似性和差异性,二者相关性分析显示一些内生真菌与丹酚酸B、咖啡酸等几种有效成分的含量极显著相关(P <0.01)。     

多花黄精挥发油GC-MS分析及其生物活性研究

目的分析多花黄精根状茎挥发油成分及检测其抑菌和抗肿瘤生物活性.方法采用水蒸汽蒸馏法(sD)提取挥发油,用气相色谱.质谱(GC-MS)联用技术分析多花黄精根状茎精油的成分,生物活性检测采用杯碟法和Alamar blue法.结果共鉴定出16个化合物,占总挥发油的95.97%,该挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、红酵母均有较强的抑制能力;对人肺癌细胞(NCI-H460)有显著的抑制作用,当浓度达到100μg·mL-1,抑制率达到98.08%.结论实验结果表明多花黄精挥发油成分具有较强的生物活性,为进一步研究其药理作用提供了科学依据.     

多花黄精粗多糖抗肿瘤活性研究

目的:研究多花黄精粗多糖(PSP)体内外抗肿瘤作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)考察PSP对S180肿瘤细胞和人乳腺癌细胞株(MCF-7)的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤为模型,考察PSP对体内肿瘤生长的抑制作用。结果:PSP对S180肿瘤细胞及MCF-7有较明显的增殖抑制作用,且呈现良好的浓度-效应依赖关系,但其IC50&gt;30μg&#183;mL-1;PSP对小鼠S180肉瘤也有显著的抑制作用,并能显著提高S180荷瘤小鼠的脾脏指数及胸腺指数,且呈现良好的剂量-效应关系。结论:PSP可有效抑制S180肉瘤的生长,促进荷瘤鼠胸腺和脾脏的生长发育,可通过提高动物的免疫功能来达到控制和杀灭肿瘤细胞的目的。     

九华黄精本草考证

查阅古今文献,对九华黄精的基原植物及药材使用进行本草考证。九华黄精基原植物为多花黄精,叶序类型为互叶型;九华黄精作为药用,其炮制方法主要为九蒸九晒法,近现代九华黄精从药用转为食用,可以进行九华黄精的食品开发,为九华黄精的现代化生产打下基础;但是目前仅能确定湖南、贵州、广西、安徽九华山所产多花黄精为佳,因此需进一步研究从而确定现代九华黄精是否可以成为道地药材。     

多花黄精栽培技术研究进展

多花黄精为百合科黄精属多年生植物,中药材黄精基原植物之一。近年来,其种植面积逐年递增,对栽培技术的需求已越来越迫切。对近10年多花黄精立地因子、种苗培育、栽培模式等栽培技术关键问题进行综述,对其研究方向进行了展望。     

多花黄精地上部分化学成分的研究

目的研究多花黄精Polygonatum cyrtonema地上部分的化学成分。方法采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据波谱学数据鉴定化合物的结构。结果从多花黄精地上部分的甲醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为(3R)-5,7-dihydroxy-3-(2'-hydroxy-4'-methoxybenzyl)-chroman-4-one(1)、5,7-dihydroxy-6-methyl-3-(2',4'-dihydroxybenzyl)-chroman-4-one(2)、5,7-dihydroxy-6-methyl-3-(4'-hydroxybenzyl)-chroman-4-one(3)、(3S)-3,7-dihydroxy-8-methoxy-3-(3',4'-methylenedioxybenzyl)-chroman-4-one(4)、芹菜素(5)、山柰酚(6)、香草酸(7)、反式对羟基桂皮酸(8)、反式对羟基桂皮酸甲酯(9)、水杨酸(10)、(+)-丁香脂酸(11)、balanophonin B(12)、咖啡酸(13)、苯丙氨酸(14)和松柏醛(15)。结论化合物1、2、7、11、14和15为首次从多花黄精中分离得到,化合物3、4和12为首次从黄精属植物中分离得到。     

基于DNA条形码的多花黄精系统发育和变异位点分析研究

目的对来自不同地域的多花黄精野生资源的核糖体内转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)和psbA-trnH基因间隔区序列进行系统发育分析,探索不同地理来源的多花黄精资源的遗传多样性和亲缘关系。方法用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法扩增获得多花黄精ITS和psbA-trnH的核酸序列,与美国国家技术信息中心(NCBI)相对应的核酸序列比对获得多花黄精ITS2和psbA-trnH核酸序列。用邻接法(Neighbor joining)构建系统发育树,用Kimura two-parameter(K2-P)模型分析遗传距离,用Mega和DNAman软件进行多重比对分析。结果安徽青阳样品的ITS2序列为224bp,其余24份样品的ITS2序列均为225bp,福建泰宁的1份样品为620bp,其余24份多花黄精样品的psbA-trnH序列均为621 bp,2个序列分别存在7个和4个变异位点。采用ITS2序列构建的系统发育树将25份资源分为2个大的类群,湖南和贵州的5份资源种群聚为一类,其他20份资源聚为一类,遗传距离显示来自贵州花溪、剑河的样品和来自福建建阳的遗传距离最大;采用psbA-trnH序列构建的系统发育树则无法将不同地域多花黄精资源区分开。结论系统发育和变异位点分析为多花黄精资源的进化研究、道地性评价奠定了理论基础,变异位点的分析可用于相关资源的鉴定。     

多花黄精转录组SSR位点分析及分子标记开发

目的基于转录组测序数据鉴别和分析多花黄精EST-SSR位点,开发可用于多花黄精种质资源评价与利用的SSR标记。方法利用MISA工具从多花黄精转录组126 544条Unigenes中鉴定SSR位点并进行分析;利用Primer 3.0设计SSR引物,随机选择50对SSR引物进行有效性验证。结果从9 982条Unigenes中鉴定出12 317个包含2～6个核苷酸重复类型的SSR位点,SSR的分布频率为9.73%,发生频率为1/5.91 kb;SSR位点中的主导类型是二核苷酸重复,占总SSR的53.14%,其次是三核苷酸重复,占33.31%。SSR引物的有效性筛选显示,50个SSR引物对中有29个(58%)可从多花黄精中扩增出预期大小的SSR条带。SSR荧光标记的毛细管电泳检测显示在多花黄精的7个SSR位点共鉴定出了9种基因型,进一步验证了SSR引物的有效性。结论多花黄精转录组SSR位点出现频率高,重复类型丰富,多态性较高,这将为多花黄精遗传多样性分析和遗传图谱构建提供大量有价值的候选标记,也可为黄精属内种间物种的分子鉴别、多花黄精优良品种的分子辅助育种提供技术手段。